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日本血吸虫 26 kDa 谷胱甘肽S-转移酶DNA疫苗的研究及其保护性免疫效果观察 被引量：37
1
作者 李传明 石佑恩 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1998年第3期207-211,共5页
本文对大陆株日本血吸虫２６ｋＤａ谷胱甘肽Ｓ－转移酶（Ｓｊ２６ＧＳＴ）的ＤＮＡ疫苗进行研究，并观察了其免疫保护效果。分别构建含Ｓｊ２６ＧＳＴ基因的重组质粒ｐＣＤ－Ｓｊ２６和ｐＢＫ－Ｓｊ２６，采用脂质体介导的基因转移将ｐ... 本文对大陆株日本血吸虫２６ｋＤａ谷胱甘肽Ｓ－转移酶（Ｓｊ２６ＧＳＴ）的ＤＮＡ疫苗进行研究，并观察了其免疫保护效果。分别构建含Ｓｊ２６ＧＳＴ基因的重组质粒ｐＣＤ－Ｓｊ２６和ｐＢＫ－Ｓｊ２６，采用脂质体介导的基因转移将ｐＣＤ－Ｓｊ２６和ｐＢＫ－Ｓｊ２６分别导入ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞，用免疫荧光法（ＩＦＡ）证实Ｓｊ２６ＧＳＴ在真核细胞中的表达。分别将ｐＣＤ－Ｓｊ２６和ｐＢＫ－Ｓｊ２６及ｐＢＫ－ＣＭＶ肌注ＢＡＬＢ／ｃ小鼠。免疫３次后，免疫鼠产生一定水平的抗血吸虫抗体。用日本血吸虫尾蚴攻击感染免疫小鼠，结果ｐＣＤ－Ｓｊ２６和ｐＢＫ－Ｓｊ２６免疫鼠减虫率分别为３７．１９％和４４．４４％，肝组织减卵率为７３．８０％和４７．２０％，每对成虫产卵减少５６．８８％和１５．６７％。实验结果表明，日本血吸虫Ｓｊ２６ＤＮＡ疫苗免疫小鼠后能诱生一定水平的抗血吸虫抗体，免疫鼠可形成一定水平的保护性免疫力，预防血吸虫尾蚴感染。 展开更多
关键词 日本血吸虫 DNA疫苗 保护性免疫 Sj26GST
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流感病毒感染介导的免疫病理损伤研究进展 被引量：45
2
作者 吕进 王希良 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期961-967,共7页
流感病毒感染(如暴发性流行或高致病性禽流感H5N1感染)可以造成广泛的病理损伤及严重的并发症,其肺部病理损伤以肺水肿及广泛的炎性渗出为特点,并伴有大量的中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞浸润及促炎因子和趋化因子的产生.组织学及病... 流感病毒感染(如暴发性流行或高致病性禽流感H5N1感染)可以造成广泛的病理损伤及严重的并发症,其肺部病理损伤以肺水肿及广泛的炎性渗出为特点,并伴有大量的中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞浸润及促炎因子和趋化因子的产生.组织学及病理学研究表明,过度的宿主应答反应是介导病理损伤的主要原因之一,而这些在流感病毒感染过程中介导组织损伤的免疫分子与细胞,在病毒的有效清除过程中同样至关重要.主要对甲型流感病毒感染过程中免疫系统的多种效应成分如何引发及加重病理性损伤等有害方面加以综述.为深入了解流感病毒感染防御机制及寻找并设计出既无害又能有效地治疗流感病毒感染的策略提供理论指导. 展开更多
关键词 流感病毒 免疫病理损伤 免疫防御
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日本血吸虫SjCTPI和SjC23DNA疫苗联合免疫保护作用的研究 被引量：27
3
作者 朱荫昌 任建功 +6 位作者 司进 D.A.Harn 余传信 梁幼生 殷旭仁 徐明 许永良 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第2期84-87,共4页
目的　探索 Sj CTPI和 Sj C2 3DNA疫苗联合应用保护性免疫的协同作用。方法　大量制备 pc DNA3.1- Sj CTPI和 pc DNA3.1- Sj C2 3的质粒 DNA。 4 8只 BAL B/ c小鼠分为 4个组 (A、B、C、D组 )每组 12只。 A组每鼠经双侧股四头肌注射 10... 目的　探索 Sj CTPI和 Sj C2 3DNA疫苗联合应用保护性免疫的协同作用。方法　大量制备 pc DNA3.1- Sj CTPI和 pc DNA3.1- Sj C2 3的质粒 DNA。 4 8只 BAL B/ c小鼠分为 4个组 (A、B、C、D组 )每组 12只。 A组每鼠经双侧股四头肌注射 10 0 μg pc DNA3.1的质粒 DNA,为对照组 ;B组为Sj C2 3组 ,每鼠肌注 10 0μg pc DNA3.1- Sj CTPI的质粒 DNA;C组为 Sj CTPI组 ,每鼠肌注 10 0μgpc DNA3.1- Sj CTPI的质粒 DNA;D组为联合免疫组 ,每组肌注 10 0μg pc DNA3.1- Sj C2 3和 10 0μgpc DNA3.1- Sj CTPI质粒 DNA的混和物。分别于 0、14、2 8d免疫 3次。末次免疫后 30 d,每鼠经腹部皮肤攻击感染 (45± 2 )条日本血吸虫尾蚴。攻击后 4 5 d,剖杀所有小鼠 ,灌冲 ,收集成虫并计数。每鼠肝脏称重后剪碎 ,置 5 % KOH中消化 ,并计数虫卵数。比较各组间的减虫率和减卵率。结果　与对照组相比 ,Sj C2 3组、Sj CTPI及联合组的减虫率分别为 2 8.1%、2 9.1%和 4 1.5 % ,均非常显著地高于对照组 (P分别为 <0 .0 1,<0 .0 1,<0 .0 0 1) ,而联合组则又显著地高于单独 Sj C2 3组及单独 Sj CTPI组 (P均 <0 .0 5 )。三组的减卵率分别为 37.9%、4 4 .2 %和 6 1.4 % ,均非常显著地高于对照组 (P分别为 <0 .0 1,<0 .0 1,<0 .0 0 1) ,但? 展开更多
关键词 日本血吸虫 SjCTPI SjC23 DNA疫苗 联合免疫 免疫保护
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日本血吸虫中国大陆株23 kDa膜蛋白DNA疫苗诱导小鼠保护性免疫的研究 被引量：29
4
作者 任建功 朱荫昌 +7 位作者 D.A.Harn 余传信 殷旭仁 司进 何伟 徐明 华万全 许永良 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期336-339,F003,共5页
目的　研究日本血吸虫中国大陆株 2 3kDa膜蛋白 (SjC2 3)DNA疫苗诱导C5 7BL/6小鼠免疫保护作用。方法　将全长的SjC2 3基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,构建DNA疫苗 pcDNA3.1 SjC2 3。制备SjC2 3及IL 12的两个亚单位 p35、p4 0的DNA疫... 目的　研究日本血吸虫中国大陆株 2 3kDa膜蛋白 (SjC2 3)DNA疫苗诱导C5 7BL/6小鼠免疫保护作用。方法　将全长的SjC2 3基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1,构建DNA疫苗 pcDNA3.1 SjC2 3。制备SjC2 3及IL 12的两个亚单位 p35、p4 0的DNA疫苗和对照 pcDNA3.1。 4 8只C5 7BL/6小鼠随机分为A、B、C 3组。A组小鼠肌注 10 0 μgpcDNA3.1;B组注射 10 0 μg pcDNA3.1 SjC2 3;C组肌注 pcDNA3.1 SjC2 3、pcDNA3.1 p35及pcDNA3.1 p4 0各 10 0 μg的混合物。每隔 2周各免疫 1次 ,共 3次。第 8周每鼠感染 4 5± 2条 /只尾蚴 ,4 5d后剖杀 ,计数成虫及肝内虫卵。采用免疫组化法检测SjC2 3及 p35、p4 0在小鼠局部组织内的表达 ;用脾细胞培养法检测经rSjC2 3 HD刺激后 ,攻击前、后小鼠脾细胞IL 2、IL 4、IL 10和IFN γ的水平。用Westernblotting检测血清中抗SjC2 3抗体。结果　SjC2 3以及p35、p4 0在免疫小鼠股四头肌细胞膜和细胞浆均获得表达。IL 2和IFN γ的水平攻击前、后在B组和C组均明显升高。Westernblotting检测抗SjC2 3抗体结果表明 ,免疫后两周 ,B组 8/10份血清为阳性 ,C组 9/10份血清阳性。B组和C组分别获得 2 6 .9%和 35 .4 %的减虫率 ,C组显著高于B组 (P <0 .0 5 ) ;减卵率分别为 2 2 .2 %和 2 8.4 %。 展开更多
关键词 日本血吸虫 23kDa膜蛋白 DNA疫苗 保护性免疫
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安徽部分地区猪丹毒杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 被引量：39
5
作者 陆萍 黄晓慧 +4 位作者 李春芬 魏文涛 孙裴 魏建忠 李郁 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1822-1828,共7页
【目的】对安徽省8个不同地区猪场临床疑似猪丹毒病/死猪进行细菌分离鉴定,并研究其生物学特性。【方法】通过形态学及培养特性观察、生化试验、PCR方法对菌株进行鉴定,并进行药物感受性实验及免疫保护实验。【结果】共分离到29株猪丹... 【目的】对安徽省8个不同地区猪场临床疑似猪丹毒病/死猪进行细菌分离鉴定,并研究其生物学特性。【方法】通过形态学及培养特性观察、生化试验、PCR方法对菌株进行鉴定,并进行药物感受性实验及免疫保护实验。【结果】共分离到29株猪丹毒杆菌,源自8个地区的猪丹毒杆菌分离菌具有较一致的形态特征和相似的生化特性。对29株猪丹毒杆菌进行18种常用抗菌药物的药敏试验,结果显示分离菌对氨苄西林、头孢曲松敏感率均达100%,其次是青霉素93%、红霉素89.7%和头孢噻肟75.9%,对其他13种药物则表现不同程度的耐药性。8株不同地区猪丹毒杆菌分离菌的LD50在(14.30?2.36)×102 CFU/mL之间,显示分离菌对小鼠均具有较强的致病力。商品化猪丹毒G4T10株弱毒疫苗2次颈部皮下免疫小鼠后,分别用剂量为100 LD50的8株猪丹毒杆菌分离菌腹腔攻毒小鼠,免疫保护率为100%。【结论】安徽地区猪丹毒发生有上升趋势,不同地区的猪丹毒杆菌分离菌具有较为一致的生物学特性,青霉素类和头孢类抗菌药物有显著疗效,使用猪丹毒G4T10株弱毒疫苗可产生有效的免疫保护力。 展开更多
关键词 猪丹毒杆菌 分离鉴定 生物学特性 小鼠 免疫保护
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日本血吸虫成虫31/32 kDa蛋白的纯化及保护性免疫力的研究 被引量：32
6
作者 沈定文 李雍龙 +1 位作者 韩家俊 石佑恩 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期241-243,共3页
本文采用制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电渗析方法分离纯化日本血吸虫成虫 31/32 kDa 蛋白(Sj 31/32蛋白)。SDS-PAGE、免疫印迹试验(EITB)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果表明采用该方法分离纯化的 Sj 31/32 蛋白纯度高,且... 本文采用制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电渗析方法分离纯化日本血吸虫成虫 31/32 kDa 蛋白(Sj 31/32蛋白)。SDS-PAGE、免疫印迹试验(EITB)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果表明采用该方法分离纯化的 Sj 31/32 蛋白纯度高,且具有较高的活性。用纯化的 Sj 31/32 蛋白加福氏佐剂免疫的小鼠,不仅可减少虫负荷(减虫率 28.1％),还可降低血吸虫成虫的产卵量(减卵率 71.4％),抑制虫卵肉芽肿的形成。结果提示:Sj 31/32 蛋白具有较高的减卵率,可望作为混合多价疫苗候选组分。 展开更多
关键词 血吸虫 分离 纯化 保护性免疫
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日本血吸虫23kDa膜蛋白DNA疫苗和蛋白质疫苗联合应用免疫保护性作用的研究 被引量：25
7
作者 任建功 朱荫昌 +8 位作者 D.A.Harn 余传信 司进 殷旭仁 何伟 梁幼生 徐明 华万全 许永良 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第2期98-101,共4页
目的　研究 Sj C2 3DNA疫苗和 Sj C2 3蛋白疫苗联合免疫对 C5 7BL/ 6感染小鼠的免疫保护作用。方法　分别构建和制备 Sj C2 3DNA疫苗 (pc DNA3.1- Sj C2 3)和蛋白疫苗 (Sj C2 3大亲水片段融合蛋白 GST- HD)。 4 8只 C5 7BL / 6小鼠随机... 目的　研究 Sj C2 3DNA疫苗和 Sj C2 3蛋白疫苗联合免疫对 C5 7BL/ 6感染小鼠的免疫保护作用。方法　分别构建和制备 Sj C2 3DNA疫苗 (pc DNA3.1- Sj C2 3)和蛋白疫苗 (Sj C2 3大亲水片段融合蛋白 GST- HD)。 4 8只 C5 7BL / 6小鼠随机分为 A、B、C、D 4组 ,每组 12只。 A组 (Sj C2 3DNA+GST- HD联合应用组 )每只小鼠分别在第 0、2周经股四头肌注射 10 0μg Sj C2 3质粒 DNA,在第 4周经背部皮下多点注射 5 0 μg GST- HD+5 0 μg CFA;B组 (Sj C2 3DNA组 )每只小鼠分别在第 0、2、4周经股四头肌注射 10 0 μg Sj C2 3质粒 DNA;C组 (蛋白疫苗组 )于第 4周每鼠经背部皮下多点注射5 0μg GST- HD+5 0μg CFA 1次 ;D组 (对照组 )每鼠分别在第 0、2、4周肌注 10 0μg pc DNA 3.1。各组在末次免疫后 30 d每鼠以 4 5± 2条 /只日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,攻击后 4 5 d剖杀小鼠 ,计数成虫及肝内虫卵数。在免疫前、末次免疫后和攻击后从小鼠尾静脉采血 ,分离血清 ,用 Western- blot法检测抗体反应。结果　联合组与质粒对照组相比 ,获得了 36 .9%的减虫率和 30 .7%减卵率 ;而单独Sj C2 3DNA疫苗组的减虫率为 2 6 .9% ,显著低于联合组 (P<0 .0 5 )和 2 2 .2 %的减卵率 ,单独蛋白疫苗组 (GST- HD)为 15 .2 %和 12 .2 % 展开更多
关键词 日本血吸虫 SiC23 DNA疫苗 蛋白疫苗 联合免疫 保护性免疫 动物实验
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日本血吸虫中国大陆株23kDa膜蛋白核酸疫苗对猪免疫保护作用的研究 被引量：25
8
作者 朱荫昌 任建功 +9 位作者 D.A.Harn 徐明 余传信 司进 叶萍 殷旭仁 何伟 许永良 曹国群 华万全1 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第1期3-7,共5页
目的　研究日本血吸虫中国大陆株 2 3k Da膜蛋白 (Sj C2 3) DNA疫苗诱导猪的保护性免疫作用。方法　构建并大量制备 pc DNA3.1- Sj C2 3质粒 DNA和 pc DNA3.1- p35 ,pc DNA3.1- p40(小鼠 IL - 12的 2个亚单位 )的 DNA疫苗。 30头 2 .5... 目的　研究日本血吸虫中国大陆株 2 3k Da膜蛋白 (Sj C2 3) DNA疫苗诱导猪的保护性免疫作用。方法　构建并大量制备 pc DNA3.1- Sj C2 3质粒 DNA和 pc DNA3.1- p35 ,pc DNA3.1- p40(小鼠 IL - 12的 2个亚单位 )的 DNA疫苗。 30头 2 .5月龄的上海松江本地猪 (阉猪 )分为 A、B、C3组 ,每组 10头。 A组 (Sj C2 3组 )于每头猪两侧臀部肌肉注射 5 0 0 μg pc DNA3.1- Sj C2 3质粒 DNA,B组 (Sj C2 3+IL- 12组 ) ,于每头猪肌肉注射 5 0 0 μg pc DNA3.1- Sj C2 3DNA及 5 0 0 μg pc DNA3.1- p35和 5 0 0μg pc DNA 3.1- p40的混和质粒 DNA ;C组 (对照组 )每头猪肌肉注射 5 0 0μg pc DNA3.1质粒DNA。共免疫 3次 ,每次间隔 3周。末次免疫后 30 d,每猪经背部皮肤攻击感染日本血吸虫尾蚴 6 0 0条。攻击后 45 d剖杀 ,经胸主动脉灌冲 ,并从门静脉收集计算成虫。从肝脏的同一部位切下小块肝组织 ,置 5 % KOH内消化后 ,计算每克肝组织虫卵数 (EPG)。比较各组间减虫率、减雌率和减卵率。在免疫前 ,末次免疫后和攻击后从猪耳静脉采血 ,分离血清 ,用 EL ISA检测抗 Sj C2 3抗体。结果　Sj C2 3组与 Sj C2 3+IL - 12组与质粒对照组相比 ,分别获得 2 9.2 %和 5 8.6 %的减虫率、5 0 .8%和5 8.8%的减雌率以及 48.2 %和 5 6 .4% 展开更多
关键词 日本血吸虫 中国大陆株 23kDa膜蛋白 核酸疫苗 猪 保护性免疫
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日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30诱导保护性免疫 被引量：25
9
作者 冯振卿 仇镇宁 +4 位作者 李玉华 朱昌亮 薛婉芬 管晓虹 吴观陵 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1997年第5期276-278,共3页
作者应用正交设计观察了单克隆抗独特型抗体NP30主动免疫诱导的保护性免疫力。对照组接种SP2/0 腹水。实验结果表明,根据不同的免疫方案,NP30主动免疫可产生22.36％～50.46％的减虫率,并确定了最优化免疫方案。本文提示NP30主动免疫对... 作者应用正交设计观察了单克隆抗独特型抗体NP30主动免疫诱导的保护性免疫力。对照组接种SP2/0 腹水。实验结果表明,根据不同的免疫方案,NP30主动免疫可产生22.36％～50.46％的减虫率,并确定了最优化免疫方案。本文提示NP30主动免疫对尾蚴攻击可产生一定的保护力,具有血吸虫疫苗候选分子的潜能。 展开更多
关键词 日本血吸虫 保护性免疫 单克隆抗体
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日本血吸虫中国大陆株TPI DNA疫苗诱导BALB/c小鼠保护性免疫力的研究 被引量：20
10
作者 司进 朱荫昌 +5 位作者 Harn DA 殷旭仁 余传信 何伟 任建功 华万全 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2001年第3期207-209,共3页
目的　研究日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶 (Sj CTPI) DNA疫苗诱导 BAL B/ c小鼠的保护性免疫作用。方法　将 39只 BAL B/ c小鼠随机分成 3组 :A组 (对照组 ) ,肌注 pc DNA3.1质粒 DNA10 0 μg/鼠 ;B组 (实验组 ) ,每鼠肌注 pc DNA... 目的　研究日本血吸虫中国大陆株磷酸丙糖异构酶 (Sj CTPI) DNA疫苗诱导 BAL B/ c小鼠的保护性免疫作用。方法　将 39只 BAL B/ c小鼠随机分成 3组 :A组 (对照组 ) ,肌注 pc DNA3.1质粒 DNA10 0 μg/鼠 ;B组 (实验组 ) ,每鼠肌注 pc DNA3.1- Sj CTPI10 0 μg;C组 (加强组 ) ,每鼠肌注 pc DNA3.1- Sj CTPI10 0 μg及 pc DNA3.1- P35和 pc DNA3.1-P40的混合物 10 0 μg。每两周免疫 1次 ,共计 3次。末次免疫 4周后 ,每鼠用 45条尾蚴进行攻击 ,45 d后剖杀小鼠 ,计数成虫以及每鼠肝组织内虫卵数 ;于攻击前每组各取两只小鼠采用 51 Cr释放法测定 Sj CTPI介导的特异性细胞毒作用 ;EL ISA检测攻击前后的抗 TPI的抗体水平。　结果　用 EL ISA检测抗 TPI抗体的结果表明 ,攻击前 A组的 10份血清均为阴性 ,B组 5 / 10份血清出现弱阳性 ,C组也有 6 / 10份血清出现弱阳性反应。51 Cr释放法测定细胞毒活性结果表明 ,A、B、C组细胞毒活性分别为 9.1%、2 7.6 %和 5 4.4%。与对照组相比 ,实验组的减虫率、减卵率分别为 30 .2 %、5 2 .9% ;加强组的减虫率、减卵率分别为 32 .7%、47.0 %。　结论　进一步证实了 Sj CTPI DNA疫苗作为抗血吸虫病核酸疫苗的潜力。 展开更多
关键词 日本血吸虫 磷酸丙糖异构酶 核酸疫苗 保护性免疫 BALB/C小鼠
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日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3DNA免疫保护作用的观察 被引量：21
11
作者 刘庆中 沈继龙 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第3期230-232,共3页
目的　研究日本血吸虫 (中国大陆株 )重组信号蛋白 14 - 3- 3(rSj14 - 3- 3)DNA作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能。方法　碱裂解法大量制备rSj14 - 3- 3和rSjGSTDNA ,将两种DNA分别免疫BALB/c小鼠进行攻击感染实验。 结果　在尾蚴攻击感... 目的　研究日本血吸虫 (中国大陆株 )重组信号蛋白 14 - 3- 3(rSj14 - 3- 3)DNA作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能。方法　碱裂解法大量制备rSj14 - 3- 3和rSjGSTDNA ,将两种DNA分别免疫BALB/c小鼠进行攻击感染实验。 结果　在尾蚴攻击感染 6w后 ,剖杀小鼠计算各组的减虫率 ,rSj14 - 3- 3DNA组为 34 2 0 % ,rSj14 - 3- 3+rSjGSTDNA组为32 4 0 % ;减卵率为 (按以上组序 ) 5 0 74 %和 5 5 2 3%。结论　重组Sj14 - 3- 3DNA具有一定的抗血吸虫病潜能 ,有可能作为日本血吸虫病的候选疫苗 ,但未见Sj14 - 3- 3、SjGST两种重组DNA的协同作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组信号蛋白 14—3—3 DNA 免疫保护作用
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日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(SjC FABP)核酸疫苗诱导小鼠免疫保护作用研究 被引量：19
12
作者 余传信 朱荫昌 +5 位作者 殷旭仁 任建功 司进 许永良 沈林南 何伟 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第3期163-167,共5页
目的　研究日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白分子 (Sj C FABP)核酸疫苗对 BALB/c小鼠的免疫保护性作用。方法　根据 Sj C2 1.7分子基因序列合成 1对特异性引物 P1和 P2 ,并使其5’端分别带有 Bam H1、Xho1的酶切位点序列 ,采用 PCR... 目的　研究日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白分子 (Sj C FABP)核酸疫苗对 BALB/c小鼠的免疫保护性作用。方法　根据 Sj C2 1.7分子基因序列合成 1对特异性引物 P1和 P2 ,并使其5’端分别带有 Bam H1、Xho1的酶切位点序列 ,采用 PCR方法从重组质粒 Sj C FABP-p UC19中扩增出特异性目的基因的开放阅读框序列 ,并在其翻译起始密码子处引入 Kozark序列。限制性酶切后的基因片段被亚克隆到真核表达质粒 pc DNA3 .1中 ,构建成重组真核表达质粒 Sj C FABP-pc D-NA3 .1,大量制备纯化的重组真核表达质粒。 48只 BAL B/c小鼠分为对照组、实验组、加强组。对照组每只小鼠的股四头肌注射接种 10 0μg质粒 pc DNA3 .1DNA,实验组以同样的方式注射 10 0μg重组质粒 Sj C FABP-pc DNA3 .1DNA,加强组除注射 10 0μg重组质粒 Sj C FABP-PCDNA3 .1DNA外 ,同时注射 P3 5 -pc DNA3 .1,P40 -pc DNA重组质粒各 10 0μg。每隔 2周免疫 1次 ,共免疫3次。第 3次免疫后的第 3 0天每只小鼠经腹部皮肤感染 (4 5± 1)条尾蚴 ,45 d后剖杀 ,计数各组小鼠肝虫卵数及成虫数。于免疫前及末次免疫后 2周分别经尾静脉采血 ,测定抗体水平。在第 2次免疫后第 10天各组取 2只小鼠处死 ,取股四头肌进行免疫组化分析。结果　免疫组化分析显示实? 展开更多
关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 SjC FABP 核酸疫苗 小鼠 免疫保护 白细胞介素-12
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日本血吸虫23kDa膜蛋白DNA疫苗保护性免疫及IL-12免疫佐剂作用的研究 被引量：19
13
作者 任建功 朱荫昌 +8 位作者 D.A.Harn 余传信 司进 殷旭仁 何伟 徐明 梁幼生 许永良 华万全 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第6期328-332,共5页
目的　研究日本血吸虫中国大陆株 2 3k Da膜蛋白 (Sj C2 3) DNA疫苗诱导 BAL B/ c小鼠免疫保护作用以及 IL- 12的免疫增强效果。方法　 5 6只 BAL B/ c雌性小鼠随机分为 A、B、C、D4组 ,每组 14只。 A组 (对照组 ) ,于每鼠两腿股四头肌... 目的　研究日本血吸虫中国大陆株 2 3k Da膜蛋白 (Sj C2 3) DNA疫苗诱导 BAL B/ c小鼠免疫保护作用以及 IL- 12的免疫增强效果。方法　 5 6只 BAL B/ c雌性小鼠随机分为 A、B、C、D4组 ,每组 14只。 A组 (对照组 ) ,于每鼠两腿股四头肌注射 10 0 μg pc DNA3.1质粒 DNA;B组 (Sj C2 3组 ) ,注射 10 0μg pc DNA 3.1- Sj C 2 3质粒 DNA;C组 (Sj C 2 3+IL - 12 DNA组 ) ,注射 10 0μg pc D-NA3.1- Sj C 2 3、10 0μg pc DNA 3.1- p35、10 0μg pc DNA3.1- p40质粒 DNA的混合液 ;D组 (Sj C2 3+r IL- 12蛋白组 ) ,免疫剂量同 Sj C2 3组。共免疫 3次 ,每次免疫间隔 2周 ,剂量和方法同第 1次。于末次免疫后 1个月 ,每鼠攻击感染 (4 5± 2 )条日本血吸虫中国大陆株尾蚴。但 D组的小鼠在攻击感染当天 ,及感染后第 2、4、6天经腹腔注射 0 .2 μg/鼠 r IL- 12蛋白。攻击后 45 d剖杀小鼠 ,计数成虫及肝内虫卵数。于末次免疫后 2周对照组及 Sj C2 3组用 51 Cr释放法测定 Sj C 2 3介导的特异性细胞毒作用 ;用脾细胞培养法检测经重组日本血吸虫 2 3k Da膜蛋白亲水区大片段融合蛋白 (GST- HD)刺激后 ,在免疫后及攻击后小鼠脾细胞 IL - 2、IL - 4、IL - 10和 IFN -γ的水平。分别于攻击前后 2周经小鼠尾静脉采血 ,用 EL 展开更多
关键词 日本血吸虫 23kDa膜蛋白 DNA疫苗 保护性免疫 白细胞介素12
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日本血吸虫二价DNA疫苗的免疫保护效果研究 被引量：16
14
作者 张冉 易新元 +4 位作者 曾宪芳 张顺科 蔡春 黄跃龙 Larry McReynolds 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2004年第1期27-31,共5页
目的　观察本课题组所构建日本血吸虫大陆株二价 DNA疫苗 VR10 12 - Sj GST- Sj31和VR10 12 - Sj GST- Sj32的免疫保护效果。方法　用纯化质粒免疫昆明鼠 :6 0只小鼠分为 5组 ,2个对照组的小鼠分别于股四头肌注射生理盐水 10 0μl或空质... 目的　观察本课题组所构建日本血吸虫大陆株二价 DNA疫苗 VR10 12 - Sj GST- Sj31和VR10 12 - Sj GST- Sj32的免疫保护效果。方法　用纯化质粒免疫昆明鼠 :6 0只小鼠分为 5组 ,2个对照组的小鼠分别于股四头肌注射生理盐水 10 0μl或空质粒 VR10 12 10 0μg,3个实验组的小鼠则同法分别注射 VR10 12 - Sj GST、VR10 12 - Sj GST- Sj31和 VR10 12 - Sj GST- Sj32各 10 0 μg,每隔 3周免疫1次 ,共免疫 3次 ,以间接免疫荧光法观察 VR10 12 - Sj GST- Sj31、VR10 12 - Sj GST- Sj32在肌肉组织中的表达后 ,每只鼠经腹部感染 10条尾蚴 ,4 5 d后剖杀计数各小鼠成虫数及肝卵数 ,并用 EL ISA分析小鼠血清中的抗体。结果　 EL ISA分析表明 ,第 3次免疫后小鼠出现特异性 Ig G抗体。与生理盐水组比较 ,3个实验组的减虫率分别为 33.90 %、33.90 %及 2 7.14 % (P <0 .0 1) ,减卵率分别为6 1.86 %、74 .88%及 6 8.87% (均为 P<0 .0 1) ,每雌肝减卵率分别为 4 4 .6 7%、5 9.4 0 %、5 4 .32 % (P<0 .0 1)。与 VR10 12 - Sj GST组相比 ,VR10 12 - Sj GST- Sj31和 VR10 12 - Sj GST- Sj32组的减卵率分别为34.19% (P<0 .0 1)、18.5 1% (P<0 .0 1) ,每雌肝减卵率为 2 6 .6 2 %、17.4 6 % (P<0 .0 1)。结论　 DNA疫苗 VR10 12 - 展开更多
关键词 日本血吸虫 二价DNA疫苗 VR1012-SjGST VR1012-SjGST-Sj31 VR1012-SjGST-Si32 ELISA 免疫保护
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创伤弧菌外膜蛋白免疫刺激复合物对欧洲鳗鲡的免疫保护性分析 被引量：16
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作者 田丁 许斌福 +2 位作者 林能峰 龚晖 林天龙 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期431-435,共5页
创伤弧菌（Vibrio vulnificus）是一种革兰氏染色阴性、多形性、运动性、有荚膜的嗜盐性细菌,属于弧菌属第5群,主要生长于海水中、鱼类及贝母类等体内[1]。根据寄主范围和生化反应类型的不同,将创伤弧菌分为3个生物型：生物Ⅰ型（产吲哚... 创伤弧菌（Vibrio vulnificus）是一种革兰氏染色阴性、多形性、运动性、有荚膜的嗜盐性细菌,属于弧菌属第5群,主要生长于海水中、鱼类及贝母类等体内[1]。根据寄主范围和生化反应类型的不同,将创伤弧菌分为3个生物型：生物Ⅰ型（产吲哚）[2]、生物Ⅱ型（不产吲哚）[3]以及1999年以色列的研究人员报道的创伤弧菌生物III型。 展开更多
关键词 创伤弧菌 外膜蛋白 欧洲鳗鲡 免疫刺激复合物 免疫保护性
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日本血吸虫DNA疫苗pCDSj32不同免疫次数及末次免疫后不同攻击时间对小鼠保护性免疫力的观察 被引量：10
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作者 谢来平 石佑恩 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期6-8,共3页
目的　观察日本血吸虫 DNA疫苗 p CDSj32不同免疫次数及末次免疫后不同攻击时间对小鼠保护性免疫力的影响。方法　分别以 10 0 μg/ 10 0 μl的 p CDSj32经股四头肌注射免疫 BAL B/ c小鼠 ,并分为一次免疫组合三次免疫组。各组于末次免... 目的　观察日本血吸虫 DNA疫苗 p CDSj32不同免疫次数及末次免疫后不同攻击时间对小鼠保护性免疫力的影响。方法　分别以 10 0 μg/ 10 0 μl的 p CDSj32经股四头肌注射免疫 BAL B/ c小鼠 ,并分为一次免疫组合三次免疫组。各组于末次免疫后 4wk或 8wk,每只小鼠用 40条日本血吸虫尾蚴攻击感染。 6 wk后剖杀小鼠 ,观察各组小鼠的减成虫率和肝组织减卵率。结果　各免疫组与对照组相比均产生较好的保护免疫效果 ,减成虫率为 35 .6 1%～ 44 .44 % ,肝组织减卵率为 39.6 4%～6 9.0 6 %。结论　 DNA疫苗不同免疫次数及末次免疫后不同攻击时间对小鼠抗血吸虫尾蚴攻击感染效果有一定的影响。该疫苗免疫一次及免疫后 展开更多
关键词 日本血吸虫病 DNA疫苗 保护性免疫 小鼠
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狂犬病毒糖蛋白DNA疫苗的研制及其免疫效果的观察 被引量：13
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作者 李萍 严家新 朱家鸿 《中国病毒学》 CSCD 1997年第2期142-148,共7页
构建了含有狂犬病毒（RV）CVS株糖蛋白（GP）基因的重组质粒pCMVCVSRG，将其转染至鼠NIH3T3细胞中，用间接免疫荧光法和APAAP法均证实RVGP能在真核细胞中表达。分别将合RV不同毒株的GP基因的质粒（DNA疫苗）及空白载体质粒（对照组）免... 构建了含有狂犬病毒（RV）CVS株糖蛋白（GP）基因的重组质粒pCMVCVSRG，将其转染至鼠NIH3T3细胞中，用间接免疫荧光法和APAAP法均证实RVGP能在真核细胞中表达。分别将合RV不同毒株的GP基因的质粒（DNA疫苗）及空白载体质粒（对照组）免疫小鼠，仅DNA疫苗免疫的小鼠产生了中和抗体。以RV攻击后，DNA疫苗免疫组小鼠的存活率与对照组相比，差异有极显著性意义（P＜0．01）；不同的启动子（CMV或SV40）与不同GP基因（来源于CVS株或ERA株）对DNA疫苗的免疫效果无明显影响。在注射120d后．用PCR方法仍可检测出RVGP基因。结果表明：狂犬病DNA疫苗能够诱生低水平的中和抗体和记忆性B淋巴细胞，并能保护小鼠抵抗RV的攻击。该疫苗能在体内稳定存在。狂犬病DNA疫苗的研制为狂犬病免疫开辟了一条新途径，并可为防治其他疾病的DNA疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 狂犬病毒 DNA疫苗 研制 免疫效果
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日本血吸虫Sj32DNA疫苗免疫效果的观察 被引量：15
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作者 李传明 石佑恩 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期70-73,共4页
目的：探讨血吸虫Ｓｊ３２ＤＮＡ疫苗抗血吸虫感染的免疫效果。方法：采用ＰＣＲ技术，人工合成引物，以重组ＤＮＡｐＳｊ３２为模板，扩增出编码３２ｋＤａ天冬酰胺肽链酶，即Ｓｊ３２全长ｃＤＮＡ和引入了起始密码子终止密码子的部分... 目的：探讨血吸虫Ｓｊ３２ＤＮＡ疫苗抗血吸虫感染的免疫效果。方法：采用ＰＣＲ技术，人工合成引物，以重组ＤＮＡｐＳｊ３２为模板，扩增出编码３２ｋＤａ天冬酰胺肽链酶，即Ｓｊ３２全长ｃＤＮＡ和引入了起始密码子终止密码子的部分ｃＤＮＡ片段，将其分别克隆到ｐＫＢ－ＣＭＶ，构建真核表达载体ｐＢＫ－Ｓｊ３２－１和ｐＢＫ－Ｓｊ３２－２。采用脂质体介导的基因转移将两种重组ＤＮＡ导入ＮＩＨ３Ｔ３细胞，间接免疫荧光法证实Ｓｊ３２在真核细胞中表达。小批量制备纯化ＤＮＡ，进行动物免疫试验。将两种构建的真核表达载体分别直接ｉｍＢＡＬＢ／ｃ小鼠，共免疫３次，攻击感染后６ｗｋ剖杀小鼠。收集血清，ＥＬＩＳＡ法检测抗体水平，并计数成虫负荷及肝组织虫卵数。结果：ｐＢＫ－Ｓｊ３２－１组与ｐＢＫ－Ｓｊ３２－２组免疫小鼠后的减虫率分别为３８．６％和３０．９％，肝组织减卵率分别为５５．７％和５５．２％，与对照组比较，其间差别均具有极显著性意义（Ｐ＜０．０１）。各ＤＮＡ疫苗免疫组能诱导一定水平的抗血吸虫抗体。结论：Ｓｊ３２ＤＮＡ疫苗可诱导小鼠产生一定程度的保护性免疫力，有可能作为血吸虫疫苗候选抗原分子。 展开更多
关键词 日本血吸虫 天冬酰胺肽链酶 DNA疫苗
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日本血吸虫31kDa组织蛋白酶B DNA疫苗保护性免疫效果观察 被引量：10
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作者 田明礼 易新元 +2 位作者 曾宪芳 张顺科 曾庆仁 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第4期209-212,共4页
目的　观察日本血吸虫 31k Da组织蛋白酶 B DNA疫苗 (Sj31B1 N)在小鼠体内的保护性免疫效果。方法　用 Sj31B1 N和 Sj31B1 N +p UC DNA疫苗肌注免疫 BAL B/ C小鼠 ,用空白质粒载体VR10 12做对照 ,在 0、4、8周共免疫 3次 ,每次免疫前及... 目的　观察日本血吸虫 31k Da组织蛋白酶 B DNA疫苗 (Sj31B1 N)在小鼠体内的保护性免疫效果。方法　用 Sj31B1 N和 Sj31B1 N +p UC DNA疫苗肌注免疫 BAL B/ C小鼠 ,用空白质粒载体VR10 12做对照 ,在 0、4、8周共免疫 3次 ,每次免疫前及末次免疫后 4周从尾静脉采血收集血清 ,经EL ISA法检测小鼠血清抗体升高时 ,用日本血吸虫尾蚴攻击感染小鼠。结果　 Sj31B1 N和 Sj31B1 N+p U C减虫率分别为 2 4.2 %和 2 2 .0 % ;肝卵减少率分别为 34 .9%和 39.5 % ,每雌肝卵减少率分别为 30 .4%和 35 .3%。结论　小鼠接种 Sj31B1 N后对日本血吸虫感染有减虫、减卵作用及抗雌虫生殖的作用。加质粒佐剂 p 展开更多
关键词 日本血吸虫 组织蛋白酶B DNA疫苗 保护性免疫
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日本血吸虫保护性免疫机制研究——细胞免疫应答 被引量：16
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作者 武华 许绶泰 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期41-44,共4页
本文应用辐照致弱日本血吸虫童虫疫苗,冷冻辐照致弱童虫苗和速冻致死童虫苗免疫雌性C_(57)BL/6小鼠,免疫后对3种免疫模型进行保护力的动态测定及平行研究细胞免疫应答的动态变化。测定结果及相关分析表明,细胞免疫应答在日本血吸虫保护... 本文应用辐照致弱日本血吸虫童虫疫苗,冷冻辐照致弱童虫苗和速冻致死童虫苗免疫雌性C_(57)BL/6小鼠,免疫后对3种免疫模型进行保护力的动态测定及平行研究细胞免疫应答的动态变化。测定结果及相关分析表明,细胞免疫应答在日本血吸虫保护性免疫机制中起重要作用。 展开更多
关键词 血吸虫 疫苗 细胞免疫应答
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