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甘蓝型油菜和紫菜苔花粉原生质体的大量分离 被引量:24
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作者 李仕琼 杨弘远 周嫦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第5期339-345,共7页
第一次由两种芸苔属作物甘蓝型油菜(Brassica napus L.)和紫菜苔(B.campestris var-purpurea)的成熟花粉中成功地分离出大量原生质体。分离率最高分别达66.7%与70.4%。绝大多数花粉原生质体是生活的。在分离技术上,改进了原来在几种单... 第一次由两种芸苔属作物甘蓝型油菜(Brassica napus L.)和紫菜苔(B.campestris var-purpurea)的成熟花粉中成功地分离出大量原生质体。分离率最高分别达66.7%与70.4%。绝大多数花粉原生质体是生活的。在分离技术上,改进了原来在几种单子叶植物中所用的水合与酶解同时进行的“一步法”,建立了适于油菜和紫菜苔的“二步法”,即:首先将花粉经长时间水合吸胀,脱去外壁获得仅有内壁的花粉;然后通过酶解除去内壁获得花粉原生质体。研究了影响水合与酶解两个过程的各种因素。 展开更多
关键词 甘蓝型 油菜 紫菜苔 花粉 原生质体
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两种药用黄芪比较生物学研究 被引量:21
2
作者 王尔彤 刘鸣远 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期85-91,共7页
通过栽培实验,本文对两种药用黄芪的个体发育节律,根,茎,叶,花及种子的生物学特性进行了较系统的比较研究,为确定蒙古黄芪(AstragalusmongholicusBunge)为独立的种,提供了更为全面的依据。
关键词 药用植物 黄芪 膜荚黄芪 蒙古黄芪 比较生物学
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紫菜苔花粉超低温保存及其原生质体分离 被引量:18
3
作者 梁立 徐秉芳 +1 位作者 郑从义 周嫦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1993年第10期733-738,共6页
研究了紫菜苔花粉超低温保存的影响因素:花粉发育时期,冰冻保护剂与隆温程序。建立了较适宜的保存流程。保存60、90天期间,成熟花粉与近成熟花粉生活力保持不变,幼嫩花粉生活力稍有下降。前二者与后者相对存活率分别达91%与... 研究了紫菜苔花粉超低温保存的影响因素:花粉发育时期,冰冻保护剂与隆温程序。建立了较适宜的保存流程。保存60、90天期间,成熟花粉与近成熟花粉生活力保持不变,幼嫩花粉生活力稍有下降。前二者与后者相对存活率分别达91%与84%左右。保存的和新鲜的幼嫩花粉经培养均能诱导脱分化,发生细胞分裂。改进和简化了紫菜苔成熟花粉原生质体分离技术,并在其幼嫩花粉原生质体分离上取得成功。保存的成熟花粉化冻后直接酶解。 展开更多
关键词 花粉 原生质体 油菜 超低温 保藏
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芸苔属花粉-下胚轴原生质体融合再生杂种小植株 被引量:5
4
作者 李昌功 周嫦 杨弘远 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1994年第12期905-910,共6页
从青菜(Brassica chinensisL.)单胞中后期至二胞早期花粉分离出原生质体,用聚乙二醇法诱导其与甘蓝型油菜(B.napusL.)下胚轴原生质体融合。通过控制双亲原生质体的数量与比率,提高了异源融合率。融... 从青菜(Brassica chinensisL.)单胞中后期至二胞早期花粉分离出原生质体,用聚乙二醇法诱导其与甘蓝型油菜(B.napusL.)下胚轴原生质体融合。通过控制双亲原生质体的数量与比率,提高了异源融合率。融合体在离体条件下发生细胞分裂,形成愈伤组织,再生了小植株。染色体计数与酯酶同工酶酶谱分析初步证明获得了1 株异源三倍体,2 株异源四倍体。这是以游离花粉时期的原生质体与体细胞原生质体融合,取得“配子-体细胞杂交” 展开更多
关键词 花粉 原生质体 融合 下胚轴 芸苔属 再生植株
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中国水仙花粉原生质体的分离与培养 被引量:7
5
作者 陈振光 林庆良 +1 位作者 刘群 林顺权 《福建农学院学报》 CSCD 1993年第2期159-163,共5页
取水仙花花葶中上部即将开放的花蕾,按常规方法消毒后,把花粉粒挤在含纤素酶0.5%、果胶酶1.5%、甘露醇12%的酶混合液中.保育5h 后离心、纯化,可获得2±0.04×10~5(个/朵)原生质体.花粉原生质体在附加 BA,2,4-D 分别为0.5mg/L,... 取水仙花花葶中上部即将开放的花蕾,按常规方法消毒后,把花粉粒挤在含纤素酶0.5%、果胶酶1.5%、甘露醇12%的酶混合液中.保育5h 后离心、纯化,可获得2±0.04×10~5(个/朵)原生质体.花粉原生质体在附加 BA,2,4-D 分别为0.5mg/L,甘露醇5%,蔗糖10%的1/2 MS 或 KM8p 的液体培养基中,培养3d,原生质体开始分裂.每隔10d 换培养液一次,使培养基的渗透压逐渐降低至普通培养浓度.1个月后,形成肉眼可见的愈伤组织,转入以琼脂糖作固化剂的相同培养基中培养2个月后,细胞分裂减弱.愈伤组织的增殖和分化,目前正在进一步探索之中. 展开更多
关键词 水仙 花粉 原生质体 培养
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烟草幼嫩花粉原生质体分离与早期离体发育 被引量:8
6
作者 夏惠君 周嫦 杨弘远 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第2期113-117,共5页
建立了两种分离烟草(Nicotiana tabacum )幼嫩花粉原生质体的方法:一为通过花药漂浮培养释放出外壁裂开的花粉,后者转入酶液彻底脱去外壁,内壁降解而分离出原生质体(简称“花药预培养法”);二为花粉经饥饿处理... 建立了两种分离烟草(Nicotiana tabacum )幼嫩花粉原生质体的方法:一为通过花药漂浮培养释放出外壁裂开的花粉,后者转入酶液彻底脱去外壁,内壁降解而分离出原生质体(简称“花药预培养法”);二为花粉经饥饿处理后,转入酶液释放原生质体(简称“花粉饥饿预处理法”)。对影响分离效果的主要因素作了研究。用花药预培养法分离的幼嫩花粉原生质体,在K3 培养基中可再生细胞壁,启动1 次细胞分裂,或萌发花粉管。表明具有孢子体发育与配子体发育的潜能。观察到花粉原生质体分裂成二细胞后,其中1 个子细胞又长出花粉管的稀有现象。 展开更多
关键词 烟草 花粉 原生质体 分离 发育
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洋水仙花粉和花粉原生质体中肌动蛋白微丝分布变化的共焦显微镜观察 被引量:5
7
作者 徐是雄 李春贵 朱澂 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1993年第1期12-19,共8页
用荧光标记的鬼笔环肽作为肌动蛋白微丝的探针,结合共焦显微镜技术,观察了洋水仙(Narcissus cyclamineus)花粉及花粉原生质体中微丝骨架的分布变化情形。在水合而未萌发的花粉粒中,存在于周质的微丝束多数与花粉粒的长轴呈直角排列。但... 用荧光标记的鬼笔环肽作为肌动蛋白微丝的探针,结合共焦显微镜技术,观察了洋水仙(Narcissus cyclamineus)花粉及花粉原生质体中微丝骨架的分布变化情形。在水合而未萌发的花粉粒中,存在于周质的微丝束多数与花粉粒的长轴呈直角排列。但在萌发沟部位,微丝束的排列则呈网状。在花粉粒的周质至中央部位,微丝束形成另一种形式的网络,在结构上比在萌发沟部位的网络疏松。当花粉开始萌发时,存在于花粉粒内的微丝束逐步转变为平行排列状,并向花粉管伸长的方向延伸和聚集。在脱壁后的花粉原生质体内,微丝束经过重组形成一个结构复杂和排列紧密的网络。原生质体经低渗爆破处理或Triton X-100等过程抽提离析,在遗留下来的膜层上仍然可以见到微丝束残迹,显示微丝与膜层关系密切。用双染法同时显示微管和微丝,表明两者的分布有重叠现象,说明微管和微丝骨架的分布并不是随机的,而可能是由同一种结构或机制控制着。 展开更多
关键词 洋水仙 花粉 原生质体 肌动蛋白
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烟草属花粉-叶肉原生质体的融合及杂种植株再生 被引量:3
8
作者 卢萍 周嫦 杨弘远 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第5期342-346,共5页
用饥饿预处理分离烟草(Nicotiana tabacum L.)品系N364 Km + 二核早中期的花粉原生质体,用PEG-高钙高pH 法诱导其与黄花烟草(N.rustica L.)叶肉原生质体融合。通过抗性筛选再生的4 株... 用饥饿预处理分离烟草(Nicotiana tabacum L.)品系N364 Km + 二核早中期的花粉原生质体,用PEG-高钙高pH 法诱导其与黄花烟草(N.rustica L.)叶肉原生质体融合。通过抗性筛选再生的4 株小植株,经过氧化物酶同工酶、根尖染色体计数鉴定均为配子-体细胞三倍体杂种。未经筛选处理再生的21株小植株,经鉴定有6 株为配子-体细胞杂种。 展开更多
关键词 烟草 花粉 原生质体 原生质体融合 叶肉
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花粉原生质体、精子与生殖细胞的实验操作 被引量:10
9
作者 周嫦 杨弘远 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1989年第9期726-734,共9页
当前,一个可以称为“植物实验生殖生物学”的分支学科正在形成之中。其主要特点是:由以往实验胚胎学的器官、组织水平的操作发展为细胞、原生质体水平的操作;由传统的比较单一的研究发展为多学科的综合性研究;因而无论在研究的手段与内... 当前,一个可以称为“植物实验生殖生物学”的分支学科正在形成之中。其主要特点是:由以往实验胚胎学的器官、组织水平的操作发展为细胞、原生质体水平的操作;由传统的比较单一的研究发展为多学科的综合性研究;因而无论在研究的手段与内容方面均进入更高的层次。例如,就雄性系统而言,已由花药培养发展到花粉粒培养,最近又向花粉原生质体、精子和生殖细胞的操作深化。就雌性系统而言,亦由子房。 展开更多
关键词 花粉原生质体 精子 生殖细胞
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马铃薯花粉原生质体分离的研究 被引量:7
10
作者 王蒂 司怀军 王清 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期323-326,共4页
以马铃薯减数分裂二分体和四分体时期的小孢子为材料, 对原生质体分离的主要影响因素进行了研究。结果表明, 1 % 蜗牛酶和0 .5 % 崩溃酶的混合酶液游离效果最好, 原生质体的最高得率达65.4 % 。渗透压调解剂以蔗糖最好,... 以马铃薯减数分裂二分体和四分体时期的小孢子为材料, 对原生质体分离的主要影响因素进行了研究。结果表明, 1 % 蜗牛酶和0 .5 % 崩溃酶的混合酶液游离效果最好, 原生质体的最高得率达65.4 % 。渗透压调解剂以蔗糖最好, 甘露醇次之, 最适浓度分别为16%和18% 。0 .1 % 荧光增白剂检测表明脱壁完全, FDA 荧光检测表明花粉原生质体具有生活力。 展开更多
关键词 马铃薯 花粉原生质体 分离
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萱草幼嫩花粉原生质体培养启动细胞分裂的超微结构研究 被引量:4
11
作者 吴燕 周嫦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第1期20-25,共6页
萱草(Hemerocallis fulva L.)幼嫩花粉,即后期小孢子原生质体在培养8天时进入有丝分裂或已形成二个细胞。此外,还观察到游离核分裂、无丝分裂、微核形成等现象。这显示了花粉原生质体分裂方式的多样性。在启动分裂时发生一系列变化:如... 萱草(Hemerocallis fulva L.)幼嫩花粉,即后期小孢子原生质体在培养8天时进入有丝分裂或已形成二个细胞。此外,还观察到游离核分裂、无丝分裂、微核形成等现象。这显示了花粉原生质体分裂方式的多样性。在启动分裂时发生一系列变化:如细胞核移位、大液泡消失、细胞质电子密度增加、细胞器增多、质体不含淀粉等。再生的细胞壁含许多小泡,很少纤丝,表现出现有培养条件下壁的形成能力薄弱。这是今后改进培养技术需要特别注意的问题。 展开更多
关键词 萱草 花粉 原生质体 细胞分裂 结构
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Transient transformation of pollen protoplasts via electroporation and temporal expression of Zml3-260-GUS-NOS chimeric gene in Brasska campestris var.purpurea 被引量:3
12
作者 施华中 徐秉芳 +1 位作者 杨弘远 周嫦 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1996年第4期339-342,共4页
Using pollen as a vector of foreign genes for plant transformation is an active research area. An important link in this transformation system is the delivery of foreign genes into pollen. However, DNA transfer into p... Using pollen as a vector of foreign genes for plant transformation is an active research area. An important link in this transformation system is the delivery of foreign genes into pollen. However, DNA transfer into pollen is difficult because of the existence of a thick pollen wall, whereas pollen protoplast deprived of pollen wall should be advantageous 展开更多
关键词 Brassica campestns VAR. PURPUREA pollen protoplast ELECTROPORATION pollen-specific promoter GUS gene.
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玉米花粉与唐菖蒲花粉原生质体中肌动蛋白微丝的荧光显微观察 被引量:4
13
作者 周嫦 杨弘远 徐是雄 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1990年第9期657-662,共6页
用异硫氰酸荧光素-鬼笔碱(FITC-phalloidin)作为显示肌动蛋白的荧光显微探针,观察了玉米花粉和唐菖蒲花粉原生质体中微丝分布格局的变化。玉米花粉水合后微丝呈不规则网络状。萌发前转变为极性排列状态,由与萌发孔相对一极向萌发孔极辐... 用异硫氰酸荧光素-鬼笔碱(FITC-phalloidin)作为显示肌动蛋白的荧光显微探针,观察了玉米花粉和唐菖蒲花粉原生质体中微丝分布格局的变化。玉米花粉水合后微丝呈不规则网络状。萌发前转变为极性排列状态,由与萌发孔相对一极向萌发孔极辐射,并汇集于萌发孔处。在部分花粉中观察到与萌发孔相对一极有一个微丝聚集的中心。唐菖蒲花粉原生质体刚分离后有不规则的微丝细网。培养4—7小时,在部分原生质体中观察到微丝分布与再生新壁的位置吻合。培养17—18小时,部分原生质体萌发正常的花粉管,此时原生质体中微丝呈极性分布并向花粉管汇集;花粉管中微丝呈纵行排列,其格局与由花粉粒萌发的花粉管相似。当原生质体表现不正常时,微丝呈现各种异常的分布。 展开更多
关键词 花粉 原生质体 肌动蛋白微丝 玉米
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萱草花粉原生质体培养启动胚胎发生分裂 被引量:3
14
作者 周嫦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1989年第6期409-413,共5页
萱草(Hemerocallis fulva L.)单核后期花粉,经花蕾低温预处理后由酶法分离出原生质体。在含多种附加物的 K_3培养基上,部分花粉原生质体启动细胞分裂,形成了多细胞团与原胚。显微观察表明,第一次胚胎发生分裂有均等与非均等分裂二种方式... 萱草(Hemerocallis fulva L.)单核后期花粉,经花蕾低温预处理后由酶法分离出原生质体。在含多种附加物的 K_3培养基上,部分花粉原生质体启动细胞分裂,形成了多细胞团与原胚。显微观察表明,第一次胚胎发生分裂有均等与非均等分裂二种方式,以后进行有组织或无组织生长,导致了多细胞团与原胚并存以及结构上的多样性。本文是第一篇关于花粉原生质体培养启动胚胎发生的报道。 展开更多
关键词 萱草 花粉 原生质体培养
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唐菖蒲花粉原生质体及其萌发花粉管的超微结构研究 被引量:3
15
作者 吴燕 周嫦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1990年第7期493-498,共6页
用酶法从唐菖蒲(Gladiolus gandavensis)成熟花粉粒中分离出大量原生质体。在培养条件下,诱导了细胞壁再生和花粉管萌发,萌发率达47.7%。电镜观察表明:花粉原生质体呈圆球形,仅为质膜包围,内部超微结构完整无损。再生壁与原来的花粉壁... 用酶法从唐菖蒲(Gladiolus gandavensis)成熟花粉粒中分离出大量原生质体。在培养条件下,诱导了细胞壁再生和花粉管萌发,萌发率达47.7%。电镜观察表明:花粉原生质体呈圆球形,仅为质膜包围,内部超微结构完整无损。再生壁与原来的花粉壁不同,呈多层次的纤丝结构,有类似萌发沟处的局部增厚。许多小泡参与了壁的合成。线粒体更为丰富,质体中出现少量淀粉,游离核糖体与油滴增多。花粉原生质体由萌发沟处长出花粉管。培养18小时,营养核和生殖细胞移入花粉管,其周围质体丰富。高尔基体分布在花粉管边缘。有小泡溢出质膜外,参加花粉管壁的合成。 展开更多
关键词 唐菖蒲 花粉 花粉管 结构 原生质体
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青菜与芥菜花粉-体细胞原生质体融合的研究 被引量:3
16
作者 李昌功 周嫦 +2 位作者 杨弘远 李香花 张启发 《武汉植物学研究》 CSCD 1996年第4期289-293,共5页
以聚乙二醇(PEG)为诱导剂,试验用4种方法进行青菜(Brassicachinensis)幼嫩花粉原生质体与芥菜(B.Juncea)下胚轴原生质体的融合,结果以修改的Terada等的方法最好。融合后原生质体的培养形成... 以聚乙二醇(PEG)为诱导剂,试验用4种方法进行青菜(Brassicachinensis)幼嫩花粉原生质体与芥菜(B.Juncea)下胚轴原生质体的融合,结果以修改的Terada等的方法最好。融合后原生质体的培养形成了愈伤组织,但未分化出芽,个别愈伤组织分化了根。用RAPD技术对任选的5个细胞系进行鉴定,发现1个细胞系含双亲的DNA片段,可确认是青菜幼嫩花粉原生质体与芥菜下胚轴原生质体融合后产生的杂种细胞系。 展开更多
关键词 青菜 芥菜 花粉 体细胞 原生质体融合
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油菜花粉超低温保存及花粉原生质体分离 被引量:2
17
作者 梁立 徐秉芳 +1 位作者 郑从义 周嫦 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1993年第6期133-136,共4页
花粉超低温保存有多方面的研究与应用价值,并已在多种植物的成熟花粉保存方面取得长足进展.幼嫩花粉保存方面开始有个别报道.近年在花粉原生质体的实验研究中,为了减少对开花季节的依赖。
关键词 油菜 花粉 原生质体 分离 低温保存
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洋水仙花粉原生质体中微管骨架的免疫荧光及共焦显微镜观察 被引量:3
18
作者 徐是雄 李春贵 朱澂 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1993年第7期513-518,共6页
用免疫荧光技术以及共焦显微镜观察了洋水仙(Narcissus cyclamineus,hybrid)花粉原生质体内微管骨架的分布格局。在原生质体的周侧(即皮层部位)有一层粗细不一、排列成旋涡形的微管网络。在原生质体的中央部位没有发现这类微管网络的存... 用免疫荧光技术以及共焦显微镜观察了洋水仙(Narcissus cyclamineus,hybrid)花粉原生质体内微管骨架的分布格局。在原生质体的周侧(即皮层部位)有一层粗细不一、排列成旋涡形的微管网络。在原生质体的中央部位没有发现这类微管网络的存在,代之以一个互相连接交叉着的、排列错踪复杂的网络,网络的密度也较皮层内的稀疏。在靠近营养核的部位,微管束的形式则是从核膜部位向外辐射。在生殖细胞内,微管束的排列与细胞的长轴平行或呈网状。在一些经渗透压爆破后的膜层上可以见到微管骨架的残迹,显示有些微管与膜层是紧密连接的。在经干裂(dry cleaving)技术处理的原生质体中,同样也可以看到一些微管粘附在膜层上。但经干裂技术处理后的膜层所显露出来的微管的数量并没有象用免疫荧光技术所显露出来的那么稠密,说明在干裂技术处理后,许多粘附在膜层上的微管大多已脱落。在经干裂技术处理的膜层上同时还可以看到许多包被小泡(coated vesicles)和蜂巢形的球体。对这些蜂巢体与微管及微丝的关系作了讨论。 展开更多
关键词 花粉 原生质体 微管骨架 洋水仙
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花粉原生质体培养技术研究进展 被引量:2
19
作者 王玉萍 张峰 王蒂 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期120-123,共4页
对不同发育时期的花粉原生质体分离效果和分离方法以及培养效果的研究进展进行了综述
关键词 花粉原生质体 培养 分离 小孢子四分体原生质体
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百合花粉原生质体中肌动蛋白微丝的荧光共焦镜观察 被引量:2
20
作者 徐是雄 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第12期907-911,共5页
用TRITC-鬼笔碱作为显示肌动蛋白的荧光显微探针,观察了百合Lilium hollandiumx L.tigrinum近成熟和刚成熟花粉原生质体中微丝的三维分布格局。原生质体的分离是在含有果胶酶和纤维素酶的B_(?)培养基中进行的。在近成熟的花粉原生质体... 用TRITC-鬼笔碱作为显示肌动蛋白的荧光显微探针,观察了百合Lilium hollandiumx L.tigrinum近成熟和刚成熟花粉原生质体中微丝的三维分布格局。原生质体的分离是在含有果胶酶和纤维素酶的B_(?)培养基中进行的。在近成熟的花粉原生质体中肌动蛋白的网络系统是由粗微丝束组成的。而在刚成熟的花粉原生质体中则是由较为幼细、稠密的微丝束组成。在近成熟和刚成熟的花粉原生质体中的生殖细胞内又另有一个微丝网络。一些原生质体网络内微丝束分支和交叉点清晰可见。如把这两种不同成熟期的花粉原生质体置放在适于花粉萌发的BK培养基内培养时,原生质体会逐渐液泡化,经数小时后,大液胞把原生质体内的胞质分隔开,形成许多胞质纤维束,在这些液胞化的原生质体的胞质内,微丝的分布除集中在生殖细胞和营养核周围形成一个紧密的网络外,还在胞质纤维束内形成许多粗微丝束,这些粗微丝束的其中一端常与膜层紧密相连接,显示微丝和膜层有着密切关系。 展开更多
关键词 花粉 原生质体 百合属 肌动蛋白
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