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层理鞭枝藻藻红蓝蛋白E基因片段的克隆与表达 被引量:7
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作者 盛树斌 张富铁 +3 位作者 邓明刚 秦艺旻 周明 赵开弘 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期427-430,共4页
关键词 藻红蓝蛋白 pecE基因 基因克隆 基因表达
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藻红蓝蛋白连接/异构酶重组体系 被引量:3
2
作者 周明 王鲁 +1 位作者 郑雷 赵开弘 《华中科技大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第8期114-116,共3页
把层理鞭枝藻藻红蓝蛋白操纵子A ,E和F基因分别克隆在表达载体pET30中 ,转入大肠杆菌表达了相应蛋白质 .利用 pET30载体表达的蛋白质具有 6个连续组氨酸亲和标记 ,用Ni2 + 螯合亲和层析柱提纯了表达的蛋白质 .用这些纯化的蛋白质建立了... 把层理鞭枝藻藻红蓝蛋白操纵子A ,E和F基因分别克隆在表达载体pET30中 ,转入大肠杆菌表达了相应蛋白质 .利用 pET30载体表达的蛋白质具有 6个连续组氨酸亲和标记 ,用Ni2 + 螯合亲和层析柱提纯了表达的蛋白质 .用这些纯化的蛋白质建立了藻红蓝蛋白α亚基体外重组系统 ,从而证明藻红蓝蛋白操纵子E和F基因编码层理鞭枝藻藻红蓝蛋白为连接 展开更多
关键词 藻红蓝蛋白 连接/异构酶 层理鞭枝藻 表达 重组
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Computer simulation on kinetics of primary process in photosynthesis of algae (V) --Excitation energy transfer in phycoerythrocyanins 被引量:2
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作者 赵井泉 朱晋昌 蒋丽金 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1996年第5期519-526,共8页
Excitation energy transfer in phycoerythrocyanins (PEC) was studied by use of computer simulation. The results observed from the simulation are as follows: (i) The α84 is a more efficient sensitizing chromophore than... Excitation energy transfer in phycoerythrocyanins (PEC) was studied by use of computer simulation. The results observed from the simulation are as follows: (i) The α84 is a more efficient sensitizing chromophore than β155 and donates the excitation energy into β84 and β155 while it scarcely emits fluorescence itself, (ii) Only the 1α84 →2β84 is the sub-picosecond process in a PEC trimer, therefore it is readily to obtain the time constant from fs-level time-resolved spectral measurement. (iii) The β84 and β155 chromophores in PEC behave quite differently from those in C-PC because of the changes in α84. It is observed that 1β156→6β155 is the dominant pathway linking two trimers and both of the chromophores possess much higher fluorescence fractions, and about 80% of the total fluorescence is emitted from the β84 chromophore. (iv) A far less mean number of transfer times is observed through the fast-transfer pairs in PEC compared with that in C-PC because of slow transfer rate for the path from 2β84→1α84. (v) Relatively, PEC could absorb and transfer excitation energy more efficiently than C-PC. 展开更多
关键词 EXCITATION energy transfer phycoerythrocyanin computer simulation PRIMARY PROCESS in photosynthesis.
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Cloning and Overexpressing Apo-phycoerythrocyanin α-subunit Gene of Mastigocladus laminosus in E.coli 被引量:1
4
作者 Sheng, Shubin Ma, Xiaojun +1 位作者 Huo, Hairong Zhao, Kaihong 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 EI CAS 1999年第1期113-116,共4页
By PCR method, apo phycoerythrocyanin α subunit gene (pecA) of Mastigocladus laminosus (M. laminosus) was amplified from its genomic DNA, and then cloned in pBluescript. The pecA gene was subcloned into the exp... By PCR method, apo phycoerythrocyanin α subunit gene (pecA) of Mastigocladus laminosus (M. laminosus) was amplified from its genomic DNA, and then cloned in pBluescript. The pecA gene was subcloned into the expression vector pGEMD, and then transformed into E.coli BL21 (DE3). After induction, a new protein of molecular weight 19×10 3 existing in inclusion body was overexpressed. The expressed product was confirmed to be apo phycoerythrocyanin α subunit by Dot ELISA. 展开更多
关键词 Apo phycoerythrocyanin α subunit gene gene clone gene overexpression
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层理鞭枝藻pecF基因的N端缺失及其表达 被引量:3
5
作者 周明 马聪 赵开弘 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期80-84,共5页
采用PCR技术 ,以层理鞭枝藻DNA为模板 ,扩增藻红蓝蛋白重组酶F基因 (pecF)部分DNA片段 ,从而获得pecF的N端缺失突变 ,该片段 (pecFn)的大小为 4 86bp .把pecFn插入pBluscript的多克隆位点得重组质粒pBlu pecFn ,经DNA序列测定 ,与文献... 采用PCR技术 ,以层理鞭枝藻DNA为模板 ,扩增藻红蓝蛋白重组酶F基因 (pecF)部分DNA片段 ,从而获得pecF的N端缺失突变 ,该片段 (pecFn)的大小为 4 86bp .把pecFn插入pBluscript的多克隆位点得重组质粒pBlu pecFn ,经DNA序列测定 ,与文献报道的pecF基因该部分序列一致 .表达载体pGEMD经PvuⅡ、XhoⅠ双酶切消化 ,与pecFn连接 ,酶切鉴定pecFn已正确插入到该表达载体中 .将表达质粒pGEMD pecFn转化E .coliBL2 1(DE3) ,细胞经IPTG诱导 ,获得了高效表达 ,表达蛋白质的分子量为 18kDa。 展开更多
关键词 藻红蓝蛋白 基因克隆 基因表达 层理鞭枝藻 pecF基因 N端缺失 原核蓝绿藻
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Energy transfer kinetics of phycoerythrocyanin trimer from cyanobacterium Anabaena variabilis (II)
6
作者 张景民 赵井泉 +3 位作者 蒋丽金 陈建新 叶彤 张启元 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1998年第2期133-138,共6页
The excitation energy transfer processes in trimeric PEC have been studied by using steady state and time resolved fluorescence spectra techniques in detail. The results indicate that the energy transfer processes sho... The excitation energy transfer processes in trimeric PEC have been studied by using steady state and time resolved fluorescence spectra techniques in detail. The results indicate that the energy transfer processes should take place between α 84 PVB and β 84 or β 155 PCB chromophores with the time constants 34.7 ps and 175-200 ps individually; in contrast with monomeric PEC, from time resolved fluorescence anisotropic spectrum technique, the decay constant of 45 ps which was assigned to the energy transfer time among three β 84 PCB chromophores was observed and the energy levels of β 84 and/or β 155 PCB chromophores were confirmed to turn over in trimeric PEC. 展开更多
关键词 PHYCOBILISOME phycoerythrocyanin DECONVOLUTION spectrum time resolved fluorescence energy transfer.
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藻红蓝蛋白α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素的重组 被引量:2
7
作者 王鲁 周明 +3 位作者 邓明刚 赵开弘 STORF Max SCHEER Hugo 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 2002年第1期38-42,共5页
利用在大肠杆菌中表达的藻红蓝蛋白 α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素 PCB重组 ,吸收光谱、荧光光谱和高效可逆光化学性质分析表明 ,藻红蓝蛋白 α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素直接重组 ,生成的胆素蛋白中辅基色素仍为藻蓝胆素 ;而藻红蓝蛋白 ... 利用在大肠杆菌中表达的藻红蓝蛋白 α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素 PCB重组 ,吸收光谱、荧光光谱和高效可逆光化学性质分析表明 ,藻红蓝蛋白 α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素直接重组 ,生成的胆素蛋白中辅基色素仍为藻蓝胆素 ;而藻红蓝蛋白 α-亚基脱辅基蛋白与藻蓝胆素在藻红蓝蛋白 α-亚基重组酶 (pec E和 pec F基因的表达产物 )催化下重组 ,生成的胆素蛋白中辅基色素转变为藻紫胆素 ,并具有高效可逆光化学特性。 展开更多
关键词 藻红蓝蛋白α-亚基 重组 高效可逆光化学特性 脱辅基蛋白 藻蓝胆素
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藻红蓝蛋白α-亚基体外重组体系的优化 被引量:2
8
作者 周明 武栋 赵开弘 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期494-497,共4页
对我们建立的藻红蓝蛋白α-亚基体外重组体系进行了优化.实验表明:让表达的不具有组氨酸亲和标记的藻红蓝蛋白α-亚基连接/异构酶E亚基(简称PecE)与具有组氨酸亲和标记的藻红蓝蛋白α-亚基连接/异构酶F亚基(简称Histag-PecF)共同变性再... 对我们建立的藻红蓝蛋白α-亚基体外重组体系进行了优化.实验表明:让表达的不具有组氨酸亲和标记的藻红蓝蛋白α-亚基连接/异构酶E亚基(简称PecE)与具有组氨酸亲和标记的藻红蓝蛋白α-亚基连接/异构酶F亚基(简称Histag-PecF)共同变性再复性,然后通过Ni2+金属鳌合亲和层析提纯PecE/Histag-PecF复合物,该PecE/Histag-PecF具有更好的催化活性. 展开更多
关键词 α-亚基 体外重组体系 藻红蓝蛋白 连接/异构酶 基因重组 藻类植物 色素蛋白
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层理鞭枝藻藻红蓝蛋白α亚基的固定化与光化学稳定性研究 被引量:1
9
作者 王宇飞 周明 +1 位作者 赵开弘 冉勇 《功能高分子学报》 CAS CSCD 2004年第3期411-416,共6页
 研究了层理鞭枝藻藻红蓝蛋白α亚基(α PEC)的可逆光致变色活性的pH稳定性、热稳定性及耐疲劳性等光化学性质。将α PEC固定于琼脂糖、明胶、海藻酸钠和聚乙烯醇-海藻酸钠等不同载体上,检测了固定化α PEC在不同时间、不同可逆光致变...  研究了层理鞭枝藻藻红蓝蛋白α亚基(α PEC)的可逆光致变色活性的pH稳定性、热稳定性及耐疲劳性等光化学性质。将α PEC固定于琼脂糖、明胶、海藻酸钠和聚乙烯醇-海藻酸钠等不同载体上,检测了固定化α PEC在不同时间、不同可逆光致变色循环次数后的剩余光化学活性,经过对凝胶的机械强度,稳定性及制作工艺等的比较,发现琼脂糖是α PEC的一种较好的固定化载体。 展开更多
关键词 层理鞭枝藻 藻红蓝蛋白 Α亚基 固定化 稳定性 可逆光致变色 藻胆蛋白 包埋剂
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鱼腥藻PCC7120藻红蓝蛋白α亚基体内重组研究 被引量:2
10
作者 滕吟 周明 +1 位作者 陈芳 赵开弘 《武汉植物学研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期493-497,共5页
为了研究藻红蓝蛋白α亚基的生物合成途径,通过构建相容的4种重组质粒pETDuetp-ecA、pCOLADuet-pecE、pCDFDuetp-ecF和pACYCDuet-ho1-pcyA,将裂合酶基因pecE和pecF、血红素氧化酶基因ho1、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和脱辅基藻红蓝蛋白α... 为了研究藻红蓝蛋白α亚基的生物合成途径,通过构建相容的4种重组质粒pETDuetp-ecA、pCOLADuet-pecE、pCDFDuetp-ecF和pACYCDuet-ho1-pcyA,将裂合酶基因pecE和pecF、血红素氧化酶基因ho1、藻蓝胆素合成酶基因pcyA和脱辅基藻红蓝蛋白α亚基基因pecA共同转入大肠杆菌BL21(DE3),通过色素蛋白锌电泳和光谱检测表明产生了生物活性的PecA-PCB。结果表明生成的色素藻胆蛋白具有藻红蓝蛋白α-亚基所特有的光谱性质和可逆光致变色性质。而在裂合酶基因pecE和pecF不转入大肠杆菌的情况下,大肠杆菌内只有0.1%的PecA-PCB产生。以上研究对藻胆蛋白生物构建具有重要意义。 展开更多
关键词 藻红蓝蛋白 PECA pecE pecF 体内重组
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Diverse Chromatic Acclimation Processes Regulating Phycoerythrocyanin and Rod-Shaped Phycobilisome in Cyanobacteria 被引量:1
11
作者 Yuu Hirose Song Chihong +4 位作者 Mai Watanabe Chinatsu Yonekawa Kazuyoshi Murata Masahiko Ikeuchi Toshihiko Eki 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2019年第8期1167-1169,共3页
In this article,we proposed that CpcC1 and CpcC2 connect distal and middle phycocyanin discs of phycobilisomes,respectively,in Leptolyngbya sp.PCC 6406.However,Ughy and Ajlani (2004) have concluded that CpcC2 and CpcC... In this article,we proposed that CpcC1 and CpcC2 connect distal and middle phycocyanin discs of phycobilisomes,respectively,in Leptolyngbya sp.PCC 6406.However,Ughy and Ajlani (2004) have concluded that CpcC2 and CpcC1 connect distal and middle discs,respectively,based on the mutagenesis results in Synechocystis sp.PCC 6803.Therefore,we replaced the original Figure 2 with a new one containing corrected Figure 2G and corrected one sentence on page 718,"In the hemi-discoidal PBS of Synechocystis sp.PCC6803,CpcC1,CpcC2,and CpcG connect the distal,middle,and basal discs of the PC rods,respectively (Ughy and Ajlani,2004;Arteni et al.,2009)",to "In the hemi-discoidal PBS of Synechocystis sp.PCC6803,CpcC2,CpcC1,and CpcG connect the distal,middle,and basal discs of the PC rods,respectively (Ughy and Ajlani,2004;Arteni et al.,2009) This correction does not affect the conclusions of this work. 展开更多
关键词 phycoerythrocyanin Rod-Shaped PHYCOBILISOME CYANOBACTERIA
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层理鞭枝藻的藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白α-亚基及其色素肽的光化学与光谱性质
12
作者 赵开弘 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1998年第6期757-760,共4页
用紫外可见吸收和圆二色光谱研究了层理鞭枝藻的藻蓝蛋白α-亚基色素肽和藻红蓝蛋白α-亚基色素肽的可逆光化学,这些研究表明藻蓝蛋白α-亚基色素肽和藻红蓝蛋白α-亚基色素肽分别相应于藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白的辅基色素结构域.藻... 用紫外可见吸收和圆二色光谱研究了层理鞭枝藻的藻蓝蛋白α-亚基色素肽和藻红蓝蛋白α-亚基色素肽的可逆光化学,这些研究表明藻蓝蛋白α-亚基色素肽和藻红蓝蛋白α-亚基色素肽分别相应于藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白的辅基色素结构域.藻蓝蛋白α-亚基色素肽的光谱性质和可逆光化学与藻蓝蛋白α-亚基的相应性质很相似,藻红蓝蛋白α-亚基色素肽的光谱性质和可逆光化学与藻红蓝蛋白α-亚基的相应性质相似,不过藻红蓝蛋白α-亚基色素肽还具有一种新的可逆光化学性质,本文中称为类型Ⅲ可逆光化学,藻红蓝蛋白α-亚基在1mol/L硫氰化钾和4mol/L尿素中也具有该类型Ⅲ可逆光化学. 展开更多
关键词 藻蓝蛋白 藻红蓝蛋白 色素肽 层理鞭枝藻 光化学
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多变鱼腥藻藻胆蛋白共价复合物的合成及其分子内能量传递
13
作者 赵继全 赵井泉 蒋丽金 《感光科学与光化学》 CSCD 1998年第3期217-223,共7页
利用双功能基偶联剂3-(2-吡啶联巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)合成了两个藻胆蛋白复合物,藻红蓝蛋白-变藻蓝蛋白复合物PEC-APC和藻红蓝蛋白-藻蓝蛋白复合物PEC-PC.利用吸收光谱和荧光光谱证明了藻... 利用双功能基偶联剂3-(2-吡啶联巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)合成了两个藻胆蛋白复合物,藻红蓝蛋白-变藻蓝蛋白复合物PEC-APC和藻红蓝蛋白-藻蓝蛋白复合物PEC-PC.利用吸收光谱和荧光光谱证明了藻胆蛋白构型与构象在反应后得到保持.通过荧光光谱观察到能量传递现象.计算出复合物PEC-APC的分子内能量传递效率约为90%.复合物PEC-PC中藻红蓝蛋白PEC的荧光寿命比PEC本身的寿命大大缩短,证明存在分子内能量传递.二硫苏糖醇(DTT)还原二硫桥键后能量传递被阻断.这进一步证明复合物合成成功及分子内能量传递. 展开更多
关键词 藻胆蛋白 复合物 PEC APC PC 光合作用 能量传递
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层理鞭枝藻藻红蓝蛋白裂合异构酶色氨酸环境的光谱探测
14
作者 周明 武栋 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2007年第2期254-258,共5页
应用N-溴化琥珀酰亚胺(N-bromosuccinimide)研究了层理鞭枝藻藻红蓝蛋白裂合异构酶(PecE、PecF)色氨酸的化学修饰,用紫外吸收光谱、圆二色光谱和荧光光谱探测了色氨酸化学修饰过程中蛋白质结构微观环境,发现PecE和PecF的色氨酸都处在疏... 应用N-溴化琥珀酰亚胺(N-bromosuccinimide)研究了层理鞭枝藻藻红蓝蛋白裂合异构酶(PecE、PecF)色氨酸的化学修饰,用紫外吸收光谱、圆二色光谱和荧光光谱探测了色氨酸化学修饰过程中蛋白质结构微观环境,发现PecE和PecF的色氨酸都处在疏水区域或带负电荷区域,PecE的色氨酸残基更靠近分子表面.由于色氨酸是藻红蓝蛋白裂合异构酶的必需氨基酸,这些分析加深了解了色氨酸在藻红蓝蛋白裂合异构酶催化过程中的作用. 展开更多
关键词 藻红蓝蛋白 裂合异构酶 色氨酸 光谱探测
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藻红蓝蛋白α亚基突变体的构建及体外重组
15
作者 朱菁萍 邓黎黎 +1 位作者 苏紫君 赵开弘 《武汉理工大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第13期45-48,共4页
为获得分子量较小的、具有光化学活性的藻胆蛋白,通过分子设计和基因工程手段得到藻红蓝蛋白α亚基(α-PEC)脱辅基蛋白N端缺失突变体PecA(N-44)和PecA(N-64)。将突变体分别与藻蓝胆素PCB进行体外直接重组和裂合异构酶PecE/PecF催化下的... 为获得分子量较小的、具有光化学活性的藻胆蛋白,通过分子设计和基因工程手段得到藻红蓝蛋白α亚基(α-PEC)脱辅基蛋白N端缺失突变体PecA(N-44)和PecA(N-64)。将突变体分别与藻蓝胆素PCB进行体外直接重组和裂合异构酶PecE/PecF催化下的重组实验,通过测定重组产物的吸收光谱确定其光化学活性。结果表明,PecA(N-44)与PCB在酶催化下偶联生成的PVB-PecA(N-44)(=α-PEC(N-44))分子量为13.4 kDa,具有与α-PEC相似的可逆光致变色性质,光化学活性为78%。 展开更多
关键词 藻红蓝蛋白 突变体 光化学活性 体外重组
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藻红蓝α亚基脱辅基蛋白基因的克隆和表达
16
作者 盛树斌 马晓军 +1 位作者 霍海蓉 赵开弘 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1999年第4期493-496,共4页
用 P C R技术从层理鞭枝藻总 D N A 中扩增藻红蓝蛋白 α亚基脱辅基蛋白的基因(pec A), 将pec A 克隆于p Bluescript,然后将pec A 基因插入表达载体p G E M D,形成的重组质粒在 B L21( D... 用 P C R技术从层理鞭枝藻总 D N A 中扩增藻红蓝蛋白 α亚基脱辅基蛋白的基因(pec A), 将pec A 克隆于p Bluescript,然后将pec A 基因插入表达载体p G E M D,形成的重组质粒在 B L21( D E3)中获得了高效表达,表达蛋白形成包涵体.高效表达的蛋白质的分子量为19×103 ,与藻红蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白的分子量一致,经 Dot E L I S A 展开更多
关键词 藻红蓝蛋白 基因克隆 基因表达 Α亚基
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Diverse Chromatic Acclimation Processes Regulating Phycoerythrocyanin and Rod-Shaped Phycobilisome in Cyanobacteria
17
作者 Yuu Hirose Song Ghihong +4 位作者 Mai Watanabe Chinatsu Yonekawa Kazuyoshi Murata Masahiko Ikeuchi Toshihiko Eki 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期715-725,共11页
Cyanobacteria have evolved various photoacclimation processes to perform oxygenic photosynthesis under different light environments.Chromatic acclimation(CA)is a widely recognized and ecologically important type of ph... Cyanobacteria have evolved various photoacclimation processes to perform oxygenic photosynthesis under different light environments.Chromatic acclimation(CA)is a widely recognized and ecologically important type of photoacclimation,whereby cyanobacteria alter the absorbing light colors of a supermolecular antenna complex called the phycobilisome.To date,several CA variants that regulate the green-absorbing phycoerythrin(PE)and/or the red-absorbing phycocyanin(PC)within the hemi-discoidal form of phycobilisome have been characterized.In this study,we identified a unique CA regulatory gene cluster encoding yellow-green-absorbing phycoerythrocyanin(PEC)and a rod-membrane linker protein(CpcL)for the rod-shaped form of phycobilisome.Using the cyanobacterium Leptolyngbya sp.PCC 6406,we revealed novel CA variants regulating PEC(CA7)and the rod-shaped phycobilisome(CAO),which maximize yellowgreen light-harvesting capacity and balance the excitation of photosystems,respective!y.Analysis of the distribution of CA gene clusters in 445 cyanobacteria genomes revealed eight CA variants responding to green and red light,which are classified based on the presence of PEC,PE,cpcL,and CA photosensor genes.Phylogenetic analysis further suggested that the emergence of CA7 was a single event and preceded that of heterocystous strains,whereas the acquisition of CAO occurred multiple times.Taken together,these results offer novel insights into the diversity and evolution of the complex cyanobacterial photoacclimation mechanisms. 展开更多
关键词 CYANOBACTERIA CHROMATIC ACCLIMATION cyanobacteriochrome PHYCOBILISOME phycoerythrocyanin
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藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白β亚基半胱氨酸的定点突变及体外重组研究 被引量:9
18
作者 宋波 朱菁萍 +1 位作者 周明 赵开弘 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期344-348,共5页
为研究藻蓝蛋白 (PC)和藻红蓝蛋白 (PEC) β亚基 (分别简称为 β PC、β PEC)生物合成、结构与功能的关系 ,用MegaprimerPCR定点突变技术设计 β PC、β PEC中与藻蓝胆素连接的第二个半胱氨酸的定点突变蛋白质 β PC(C15 5I)和 β PEC(C... 为研究藻蓝蛋白 (PC)和藻红蓝蛋白 (PEC) β亚基 (分别简称为 β PC、β PEC)生物合成、结构与功能的关系 ,用MegaprimerPCR定点突变技术设计 β PC、β PEC中与藻蓝胆素连接的第二个半胱氨酸的定点突变蛋白质 β PC(C15 5I)和 β PEC(C15 5I)。将相应的基因片段亚克隆于表达载体pET 30a,并转化大肠杆菌BL2l(DE3)。经IPTG诱导后 ,β PC(C15 5I)和 β PEC(C15 5I)在大肠杆菌中均得到了高效表达。β PC(C15 5I)和 β PEC(C15 5I)与藻蓝胆素的重组结果表明两个突变体的结构基本没发生改变 ,有利于对 β PC和 β PEC的生物合成进行进一步研究。 展开更多
关键词 藻胆蛋白 藻蓝蛋白 藻红蓝蛋白β亚基 半胱氨酸 定点突变 体外重组
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层理鞭枝藻藻红蓝蛋白操纵子F基因的克隆和表达 被引量:8
19
作者 郑敏 答亮 +3 位作者 邓明刚 秦艺旻 周明 赵开弘 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期168-174,共7页
以层理鞭枝藻总 DNA为模板 ,用 PCR技术扩增得到藻红蓝蛋白操纵子 F基因(pec F) ,然后克隆于质粒 p Bluescript sk(+)。将 pec F基因亚克隆于表达载体 p GEMD,所形成重组质粒 p GEMD- pec F在 E.coli BL2 1 (DE3 )中获得 1 0 %外源表达... 以层理鞭枝藻总 DNA为模板 ,用 PCR技术扩增得到藻红蓝蛋白操纵子 F基因(pec F) ,然后克隆于质粒 p Bluescript sk(+)。将 pec F基因亚克隆于表达载体 p GEMD,所形成重组质粒 p GEMD- pec F在 E.coli BL2 1 (DE3 )中获得 1 0 %外源表达蛋白并形成包涵体。这个表达产物的分子量为 2 2 .5 k Da,与按 DNA序列预测的蛋白分子量一致。经藻红蓝蛋白α-亚基的重组实验证明 ,该 pec F基因编码的表达产物 Pec F与藻红蓝蛋白操纵子 E基因(pec E)的表达产物 Pec E共同存在时 ,具有藻红蓝蛋白裂合酶活性。 展开更多
关键词 藻红蓝蛋白 操纵子F基因 基因克隆 基因表达 层理鞭枝藻
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鱼腥藻PCC7120藻红蓝蛋白操纵子A、E和F基因的克隆、表达和活性分析 被引量:3
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作者 孙亚楠 武栋 +1 位作者 周明 赵开弘 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期275-278,共4页
通过PCR技术从鱼腥藻PCC712 0总DNA中扩增藻红蓝蛋白A基因 (pecA)、E基因 (pecE)、F基因 (pecF) ,将pecA、pecE、pecF分别克隆于pBluescript,然后将pecA、pecE、pecF基因分别插入表达载体pET30a进行高效表达。pecA表达产物藻红蓝蛋白α... 通过PCR技术从鱼腥藻PCC712 0总DNA中扩增藻红蓝蛋白A基因 (pecA)、E基因 (pecE)、F基因 (pecF) ,将pecA、pecE、pecF分别克隆于pBluescript,然后将pecA、pecE、pecF基因分别插入表达载体pET30a进行高效表达。pecA表达产物藻红蓝蛋白α亚基脱辅基蛋白PecA与藻蓝胆素PCB在pecE/pecF表达产物裂合异构酶PecE/PecF催化下进行体外重组 ,产物经提纯后 ,用紫外可见吸收光谱和荧光光谱检测 ,结果表明生成的色素藻胆蛋白具有藻红蓝蛋白α 亚基所特有的光谱性质和可逆光致变色性质。 展开更多
关键词 鱼腥藻 PCC7120 藻红蓝蛋白 操纵子 基因 克隆 表达 体外重组 裂合异构酶
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