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题名沪地龙3个基原的多重位点特异性PCR鉴别
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作者
李雷
李奇璋
张汉明
张磊
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机构
海军军医大学药学院
淮北师范大学生命科学学院创新药物研发中心
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出处
《中草药》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第16期5619-5626,共8页
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基金
国家自然科学基金资助项目(82225047)
科技部“中医药现代化”重点研发计划(2022YFC3501703)。
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文摘
目的沪地龙3个基原药材(通俗环毛蚓Pheretima vulgaris、威廉环毛蚓P.guillelmi、栉盲环毛蚓P.pectinifera)在外观性状方面相似度高,传统鉴定方法难以有效区分,通过建立多重位点特异性PCR方法同时鉴别沪地龙3个基原。方法通过比对沪地龙和其他7个蚯蚓品种线粒体全基因序列的多态性位点差异,分别设计通俗环毛蚓、威廉环毛蚓及栉盲环毛蚓的特异性鉴别引物,建立单基原反应体系,并对耐受性和适用性进行考察和验证;而后优化特异性引物组合,构建多重位点特异性PCR鉴别体系;反应体系为25μL:2×Rapid Taq Master Mix 12.5μL,引物1.5μL(通俗环毛蚓∶威廉环毛蚓∶栉盲环毛蚓=1∶1.2∶0.8),DNA模板0.5μL(50 ng/μL),灭菌水补足至25μL。PCR扩增条件:95℃预变性4min;95℃变性15 s,60℃退火15 s,72℃延伸20 s,循环33次;产物末端72℃延伸7 min。结果通俗环毛蚓可得到535 bp条带,威廉环毛蚓可得到219 bp条带,栉盲环毛蚓可得到435 bp条带,其他品种蚯蚓样品均无条带。结论多重位点特异性PCR鉴别体系可根据条带位置同时鉴别沪地龙3个基原。该方法可用于沪地龙基原和真伪鉴别,并为地龙的质量控制和研究提供参考。
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关键词
沪地龙
通俗环毛蚓
威廉环毛蚓
栉盲环毛蚓
多重位点特异性聚合酶链式反应
分子鉴定
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Keywords
Shanghai pheretima
pheretima vulgaris chen
pheretima guillemi Michaelsen
pheretima pectenifera Michaelsen
multiplex site-specific polymerase chain reaction
molecular identification
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分类号
R286.2
[医药卫生—中药学]
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题名通俗环毛蚓的化学成分研究
被引量：7
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作者
肖继先
陈敬炳
王先忠
陈洪莲
王崇云
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机构
湖北省中医药研究院中药研究所
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出处
《时珍国医国药》
CAS
CSCD
2002年第10期586-587,共2页
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文摘
目的 :对中药通俗环毛蚓的化学成分进行分离鉴定。方法 :乙醇、乙醚等溶剂提取物 ,用红外光谱仪和气相色谱—质谱联用方法以及氨基酸分析仪等技术鉴定化合物。结果 :在通俗环毛蚓中测定有琥珀酸、1 8种脂肪酸和 2 0种游离氨基酸。结论 :通俗环毛蚓中的脂肪酸可能是其活性成分之一 ;另外其总游离氨基酸含量较高 (含量为 8.62 9% )。
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关键词
化学成分
通俗环毛蚓
氨基酸
红外光谱仪
气相色谱-质谱联用
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Keywords
pheretima vulgaris chen
Hudilong
Amber acid
Fatty acid
Amino acid
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分类号
R282.71
[医药卫生—中药学]
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题名通俗环毛蚓的化学成分研究
被引量：15
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作者
陈敬炳
王光忠
陈洪莲
王崇云
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机构
湖北省中医药研究院中药研究所
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出处
《中成药》
CAS
CSCD
1997年第5期35-36,共2页
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文摘
从通俗环毛蚓[Pheretimavulgaris（chen）]（沪地龙），中提取分离得到一白色结晶，经红外光谱鉴定为玻珀酸（Amberacid）；用气相色谱一质谱联用方法，分析鉴定了其中18种脂肪酸，且油酸，花生烯酸和花生四烯酸的含量较高；用氨基酸分析仪鉴定了其中的20种游离氨基酸，总游离氨基酸含量为8．629％。
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关键词
通俗环毛蚓
琥珀
脂肪酸
氨基酸
化学成分
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Keywords
pheretima vulgaris (chen),succinic acid, fat acid, amino acid
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分类号
R284.1
[医药卫生—中药学]
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