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杜仲绿原酸通过PI3K/AKT/Nrf-2通路增强视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb44放射敏感性 被引量：4
1
作者 刘铭 王俊 +1 位作者 李丽 成仲夏 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第6期644-649,655,共7页
目的探究杜仲绿原酸(CGA)通过调控PI3K/AKT/Nrf-2通路,对视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb44放射敏感性的增强作用。方法通过不同浓度的CGA处理HXO-Rb44细胞,检测IC10,作为后续实验中CGA浓度。将细胞分为Ctrl、Radio、CGA、Radio+CGA组,Radi... 目的探究杜仲绿原酸(CGA)通过调控PI3K/AKT/Nrf-2通路,对视网膜母细胞瘤细胞系HXO-Rb44放射敏感性的增强作用。方法通过不同浓度的CGA处理HXO-Rb44细胞,检测IC10,作为后续实验中CGA浓度。将细胞分为Ctrl、Radio、CGA、Radio+CGA组,Radio组给予4 MV X射线照射24 h,CGA组使用CGA处理24 h,Radio+CGA组在CGA处理24 h后再给予4 MV X射线照射24 h,流式细胞术检测细胞周期与细胞凋亡,蛋白质印迹检测Ki67、依赖还原型辅酶I/II醌氧化还原酶I(NQO1)、活化型半胱天冬酶(cl-caspase-3)、硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)、活化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达。进一步通过PI3K激活剂740Y-P处理细胞,检测细胞周期、凋亡、增殖和相关蛋白表达、PI3K/AKT/Nrf2通路蛋白表达。结果随着CGA浓度的增高,细胞的相对存活率降低,药物毒性呈浓度依赖性,IC10为81.59μmol/L。与Ctrl组相比,Radio和CGA组G2/M期细胞比例显著升高,细胞凋亡比率显著升高(P<0.01);与Radio组相比,Radio+CGA组G2/M期细胞比例和细胞凋亡比率进一步显著升高(P<0.01)。同时在蛋白水平上,与Ctrl组相比,Radio和CGA组Ki67、NQO1、TrxR1、p-PI3K、Nrf2蛋白表达及p-AKT/AKT比率显著降低(P<0.01);放射和CGA联合作用进一步降低以上各指标(P<0.01)。此外,PI3K激活剂可逆转放射对细胞周期、增殖、凋亡以及PI3K/AKT/Nrf2通路的作用,CGA可恢复放射引起的上述各指标的变化(P<0.01)。结论CGA可增强HXO-Rb44细胞的放射敏感性,其作用机制与抑制PI3K/AKT/Nrf2通路相关。 展开更多
关键词 杜仲绿原酸 放射敏感性 视网膜母细胞瘤 pi3k/akt/nrf2通路
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大蒜素调控PI3K/Akt/Nrf2通路对大鼠子宫内膜异位症的影响 被引量：3
2
作者 董秀娟 曹若愚 +1 位作者 于洪基 窦素棉 《河北医学》 CAS 2022年第4期572-577,共6页
目的:研究大蒜素对大鼠子宫内膜异位症(EMs)的影响及其机制。方法:采用自体内膜移植的方法制备大鼠EMs模型,取30只模型大鼠随机分为模型组、大蒜素(10mg/kg)组和大蒜素(10mg/kg)+LY294002[磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂,40mg/kg]组... 目的:研究大蒜素对大鼠子宫内膜异位症(EMs)的影响及其机制。方法:采用自体内膜移植的方法制备大鼠EMs模型,取30只模型大鼠随机分为模型组、大蒜素(10mg/kg)组和大蒜素(10mg/kg)+LY294002[磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂,40mg/kg]组,每组10只;另取10只大鼠设为假手术组。各组分别1次/d腹腔注射给药(假手术组和模型组给予生理盐水),疗程4周。通过卡尺测量子宫内膜异位病灶体积并行盆腔粘连评分;HE染色法行子宫内膜病理学检查;ELISA法检测异位病灶组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素γ(IFN-γ)含量,生化分析法检测丙二醛(MDA)含量和髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力;Western blot法检测异位病灶组织蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠子宫内膜异位病灶间质致密、血管明显增生、炎性细胞浸润等改变,异位病灶组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ、MDA含量升高且MPO、SOD、CAT活力降低(P<0.01),p-Akt、Nrf2、HO-1蛋白表达下调且p-Akt/Akt降低(P<0.01),NF-κB表达上调(P<0.01)。与模型组相比,大蒜素组和大蒜素+LY294002组子宫内膜异位病灶体积和粘连评分降低(P<0.05或P<0.01),异位病灶上皮细胞脱落、间质疏松、新生血管明显减少;TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ、MDA含量降低且MPO、SOD、CAT活力升高(P<0.05或P<0.01);p-Akt、Nrf2、HO-1蛋白表达上调且p-Akt/Akt升高(P<0.01),NF-κB表达下调(P<0.01)。与大蒜素组相比,大蒜素+LY294002组异位病灶体积和粘连评分升高(P<0.01),异位病灶新生血管增多;TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ、MDA含量升高而MPO、SOD、CAT活力降低(P<0.01);p-Akt、Nrf2、HO-1蛋白表达下调且p-Akt/Akt降低(P<0.01),NF-κB表达上调(P<0.01)。结论:大� 展开更多
关键词 大蒜素 子宫内膜异位症 pi3k/akt/nrf2通路 炎症 氧化应激
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基于PTEN与JAK对PI3K/Akt信号通路的影响探讨加味小蓟饮子治疗急性放射性膀胱炎的作用机制
3
作者 张伟平 吴晓静 +3 位作者 黄章铖 陈慧军 郑伟杰 翁剑飞 《深圳中西医结合杂志》 2024年第6期9-14,I0002,共7页
目的:探讨加味小蓟饮子治疗急性放射性膀胱炎的作用机制。方法:50只ICR小鼠随机分为空白组12只和造模组38只。采用X射线辐照仪造模,造模后随机取2只小鼠处死鉴定模型是否成功。将剩余造模组小鼠随机分为模型组、小蓟饮子组和加味小蓟饮... 目的:探讨加味小蓟饮子治疗急性放射性膀胱炎的作用机制。方法:50只ICR小鼠随机分为空白组12只和造模组38只。采用X射线辐照仪造模,造模后随机取2只小鼠处死鉴定模型是否成功。将剩余造模组小鼠随机分为模型组、小蓟饮子组和加味小蓟饮子组各12只。空白组、模型组、小蓟饮子组、加味小蓟饮子组分别予0.9%氯化钠、0.9%氯化钠、小蓟饮子药液,加味小蓟饮子药液灌胃处理,每日1次,连续7 d。末次灌胃后24 h处死取材,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)含量。Western Blot法检测小鼠膀胱丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)、E钙粘着蛋白(E-Cadherin)、内皮素-1(ET-1)、JAK激酶(JAK)、核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)、Smad蛋白2(Smad2)、Smad蛋白3(Smad3)、转化生长因子β1(TGF-β1)、尿斑蛋白3(Upk3)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白相对表达水平;实时荧光免疫定量-聚合酶链式反应法(RT-PCR)法检测小鼠膀胱微RNA-21(MicroRNA-21,miR-21)、PTEN、JAK、PI3K、AKT、Nrf2信使核糖核酸(mRNA)相对表达水平。结果:相较模型组,加味小蓟饮子组小鼠体内SOD、GSH-Px、T-AOC、AKT、E-Cadherin、JAK、Nrf2、PI3K、Upk3含量升高(P<0.05),MDA、ET-1、PTEN、Smad2、Smad3、TGF-β1、VEGF含量下降(P<0.05);与模型组和小蓟饮子组比较,加味小蓟饮子miR-21 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:加味小蓟饮子组可能通过上调miR-21表达,同调PTEN、JAK蛋白以激活下游PI3K/AKT/Nrf2信号通路治疗急性放射性膀胱炎。 展开更多
关键词 放射性膀胱炎 加味小蓟饮子 PTEN JAk激酶 pi3k/akt/nrf2信号通路
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PI3K/Akt/Nrf2通路对糖尿病肾病的保护作用
4
作者 陈蕾 沈洲姬 郭菲 《生命的化学》 CAS 2024年第10期1823-1830,共8页
氧化应激以及炎症反应是糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的重要发病机制,而PI3K/Akt/Nrf2信号通路是一条与抗氧化应激、抗炎症反应、调节代谢相关的通路,对DKD具有保护作用。DKD患者体内过高的血糖环境会使线粒体功能失调,从... 氧化应激以及炎症反应是糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)的重要发病机制,而PI3K/Akt/Nrf2信号通路是一条与抗氧化应激、抗炎症反应、调节代谢相关的通路,对DKD具有保护作用。DKD患者体内过高的血糖环境会使线粒体功能失调,从而导致线粒体产生更多的氧自由基(reactive oxygen species,ROS)加剧氧化应激。ROS的增加可进一步促进核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)的转录,使慢性炎症反应加剧,形成恶性循环。本文将介绍PI3K/Akt/Nrf2信号通路在DKD发生发展中的保护作用,为DKD的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 pi3k/akt/nrf2信号通路 氧化应激 炎症反应
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肺复方通过PI3K/Akt/Nrf2信号通路对A549/DDP细胞耐药性的影响
5
作者 谭小宁 梁子成 +1 位作者 柳卓 邱云 《中国中医急症》 2024年第6期963-967,共5页
目的观察肺复方对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的作用及对PI3K/Akt/Nrf2信号通路的影响。方法选用A549/DDP细胞设立不含药血清的空白对照组、肺复方组、顺铂组、联合组,流式细胞术检测各组细胞周期分布和细胞中活性氧(ROS)的变化... 目的观察肺复方对人肺癌顺铂耐药株A549/DDP细胞耐药性的作用及对PI3K/Akt/Nrf2信号通路的影响。方法选用A549/DDP细胞设立不含药血清的空白对照组、肺复方组、顺铂组、联合组,流式细胞术检测各组细胞周期分布和细胞中活性氧(ROS)的变化,Western blotting和RT-PCR检测PI3K/Akt/Nrf2信号通路及下游血红素氧合酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)的表达变化。结果与空白对照组、顺铂组相比,联合组引起细胞G1期阻滞,增加细胞内活性氧的累积,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与空白对照组比,肺复方组和联合组能减少Nrf2核转位,下调p-Akt、HO-1、NQO1、MRP1蛋白表达和mRNA表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论肺复方能够通过调控PI3K/Akt/Nrf2信号通路增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 肺癌 肺复方 A549/DDP细胞 pi3k/akt/nrf2信号通路 耐药性
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红景天苷通过调控PI3K/AKT/Nrf2通路对高糖诱导的心肌细胞的保护作用及机制研究 被引量：3
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作者 翁菲菲 冯文化 +2 位作者 郭青榜 李如男 李强 《中国循证心血管医学杂志》 2022年第7期828-832,共5页
目的探究红景天苷(SAL)对高糖诱导的心肌细胞的保护作用并进一步研究其可能的机制。方法体外培养H9c2细胞,分为空白组、高糖组、高糖+SAL组、高糖+SAL+LY294002(特异性PI3K抑制剂)组。空白组细胞用含有5.5 mmoL/L葡萄糖的培养液常规培养... 目的探究红景天苷(SAL)对高糖诱导的心肌细胞的保护作用并进一步研究其可能的机制。方法体外培养H9c2细胞,分为空白组、高糖组、高糖+SAL组、高糖+SAL+LY294002(特异性PI3K抑制剂)组。空白组细胞用含有5.5 mmoL/L葡萄糖的培养液常规培养;其余三组细胞用含有33.3 mmoL/L葡萄糖的培养液培养;另外高糖+SAL组在更换为高糖培养液前2 h加入29.6 mmol/L SAL预处理,而高糖+SAL+LY294002组则在加入SAL前加入10μmol/L LY294002预处理2 h。CCK-8实验和TUNEL实验检测细胞增殖和凋亡情况。细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量用相应的酶联免疫试剂盒检测,活性氧簇(ROS)水平通过荧光法检测。蛋白免疫印迹法(western blot)检测细胞中蛋白激酶b(AKT)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、核因子促红细胞生成素2相关因子2(Nrf2)蛋白表达和磷酸化水平。结果与空白组相比,高糖组H9c2细胞的存活率降低,而细胞凋亡率、细胞内ROS合成量和MDA含量增加,细胞内SOD和GSH-Px含量减少,同时p-AKT/AKT、p-GSK-3β/GSK-3β和Nrf2蛋白表达上调(P均<0.05)。与高糖组相比,高糖+SAL组H9c2细胞的存活率提高,而细胞凋亡率、细胞内ROS合成量和MDA含量减少,细胞内SOD和GSH-Px含量增多,且p-AKT/AKT、p-GSK-3β/GSK-3β和Nrf2蛋白表达上调(P<0.05)。与高糖+SAL组相比,高糖+SAL+LY294002组上述指标均被部分或完全逆转(P<0.05)。结论SAL对高糖诱导的H9c2细胞凋亡具有一定的保护作用,可降低细胞内ROS的生成,抑制细胞凋亡,提高细胞存活能力,其作用机制之一可能与激活PI3K/AKT/Nrf2信号通路有关。 展开更多
关键词 红景天苷(SAL) pi3k/akt/nrf2信号通路 高糖 心肌细胞 凋亡
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秀丽莓原花青素对糖尿病小鼠胰腺组织的保护作用 被引量：2
7
作者 方健 朱桂行 +6 位作者 童金枝 杨宇凡 张建辉 朱甜甜 尚娇娇 童丽 孙敏 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2021年第9期1219-1224,共6页
目的研究秀丽莓原花青素(proanthocyanidins,RPC)对糖尿病小鼠胰腺组织的保护作用及其机制。方法造模成功的C57BL/6雄性糖尿病小鼠,随机分成模型组(Mod)、双胍组(Met)、RPCL组和RPCH组,给药7周。每周检测体重和每2周检测FBG 1次,小鼠处... 目的研究秀丽莓原花青素(proanthocyanidins,RPC)对糖尿病小鼠胰腺组织的保护作用及其机制。方法造模成功的C57BL/6雄性糖尿病小鼠,随机分成模型组(Mod)、双胍组(Met)、RPCL组和RPCH组,给药7周。每周检测体重和每2周检测FBG 1次,小鼠处死前1周检测OGTT;7周后眼球取血,检测血浆中血脂、SOD活力和MDA含量;保留红细胞检测GHb水平;摘取小鼠胰腺组织,进行HE染色,观察其病理改变;Western blot检测胰腺组织中p-AKT/AKT、Nrf2和HO-1蛋白的表达。结果RPC能明显降低小鼠FBG、GHb、OGTT、血脂和氧化应激水平,增加p-AKT/AKT、Nrf2和HO-1表达并改善胰腺组织病理学形态。结论RPC对糖尿病小鼠胰腺组织具有保护作用,其机制可能与激活PI3K/AKT/Nrf2信号通路有关。 展开更多
关键词 原花青素 糖尿病 胰腺组织 pi3k/akt/nrf2信号通路 氧化应激 秀丽莓
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基于PI3K/Akt/Nrf2信号通路探讨小蓟饮子治疗小鼠放射性膀胱炎作用机制 被引量：1
8
作者 翁剑飞 陈慧军 +4 位作者 黄章铖 陈丽玄 王婷 陈舒婷 陈雅婷 《福建中医药》 2023年第2期31-33,共3页
目的基于PI3K/Akt/Nrf2信号通路探讨小蓟饮子治疗小鼠放射性膀胱炎(RC)的作用机制。方法将30只健康雌性SPF级ICR小鼠采用随机数字表法分为11只空白组和19只造模组。空白组不予造模,造模组腹腔麻醉后暴露膀胱部位于X射线辐照仪下以6-MV ... 目的基于PI3K/Akt/Nrf2信号通路探讨小蓟饮子治疗小鼠放射性膀胱炎(RC)的作用机制。方法将30只健康雌性SPF级ICR小鼠采用随机数字表法分为11只空白组和19只造模组。空白组不予造模,造模组腹腔麻醉后暴露膀胱部位于X射线辐照仪下以6-MV X射线、2 Gy/min照射10 min建立RC小鼠模型,空白组和造模组各随机取3只处死后,在光镜下观察膀胱组织形态学改变以确定造模成功。造模成功后将造模组按随机数字表法分为模型组和中药组各8只,中药组按10 mL/(kg·d)灌胃1.68 g/mL小蓟饮子浓缩液,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水,连续灌胃7 d。灌胃结束后使用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定小鼠眼球血氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC);实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测膀胱组织中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)mRNA相对表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠眼球血中SOD、T-AOC、GSH-Px含量均降低(P均<0.05),MDA含量升高(P<0.05),膀胱组织中PI3K、Akt、Nrf2、HO-1 mRNA相对表达水平均升高(P均<0.05);与模型组比较,中药组小鼠眼球血中SOD、T-AOC、GSH-Px含量均升高(P<0.01或P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),膀胱组织中PI3K、Akt、Nrf2、HO-1 mRNA相对表达水平均升高(P均<0.01)。结论小蓟饮子可有效改善RC小鼠模型的损伤,其作用机制可能与PI3K/Akt/Nrf2信号通路调控氧化应激有关。 展开更多
关键词 放射性膀胱炎 氧化应激 pi3k/akt/nrf2信号通路 小蓟饮子
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基于PI3K/Akt/Nrf2信号通路探讨地龙蛋白对自发性高血压大鼠的血管内皮功能保护机制 被引量：4
9
作者 赵会林 李晓静 +4 位作者 王丽蓉 霍耀辉 李赟 丁天龙 刘凯 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期118-126,共9页
目的:观察地龙蛋白对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子E2相关因子2(PI3K/Akt/Nrf2)通路相关因子表达的影响,探讨其治疗高血压血管内皮功能障碍(VED)的作用机制。方法:选取10只10周龄Wistar Kyoto(WKY)大鼠... 目的:观察地龙蛋白对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子E2相关因子2(PI3K/Akt/Nrf2)通路相关因子表达的影响,探讨其治疗高血压血管内皮功能障碍(VED)的作用机制。方法:选取10只10周龄Wistar Kyoto(WKY)大鼠及50只SHR适应性喂养1周,WKY大鼠作为正常组,50只SHR按体质量随机分为模型组、缬沙坦组(8×10^(-3) g·kg^(-1)·d^(-1))、地龙蛋白高剂量组(0.2g·kg^(-1)·d^(-1))、地龙蛋白中剂量组(0.1g·kg^(-1)·d^(-1))、地龙蛋白低剂量组(0.05 g·kg^(-1)·d^(-1)),正常组和模型组大鼠用等体积双蒸水灌胃。药物干预期间观察各组大鼠一般情况并分别于给药前及给药后每隔1周特定时间监测大鼠血压。药物干预8周后酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清中血管紧张素-Ⅱ(Ang-Ⅱ)、内皮素-1(ET-1)活性水平;生化试剂盒法检测一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)水平,超氧化物歧化酶(SOD)活性、亚铁离子(Fe2+)浓度;苏木素-伊红(HE)染色观察主动脉内膜变化情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测主动脉组织PI3K、Akt、Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胸主动脉中p-PI3K(Tyr467/199)、PI3K、p-Akt(Ser473)、Akt、Nrf2、HO-1、GPX4蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量偏低,大鼠较烦躁易激惹,内皮损伤程度较重;模型组大鼠血压、血清Ang-Ⅱ、ET1、MDA、Fe2+均显著升高(P<0.01),NO显著下降(P<0.01),主动脉组织中p-PI3K(Tyr467/199)、PI3K、p-Akt(Ser473)、Akt、Nrf2、HO-1、GPX4蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠体质量变化不明显,大鼠相对安静,内皮损伤程度改善;各治疗组大鼠血压、血清Ang-Ⅱ、ET1、MDA、Fe2+均显著下降(P<0.01),NO明显升高(P<0.05),p-PI3K(Tyr467/199)、PI3K、p-Akt(Ser473)、Akt 展开更多
关键词 地龙蛋白 自发性高血压大鼠 内皮功能障碍 氧化应激 铁死亡 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子E2相关因子2(pi3k/akt/nrf2)信号通路
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基于PI3K/Akt/Nrf2信号通路探讨天王补心丹加减对睡眠剥夺小鼠皮肤影响的作用机制
10
作者 陈娟平 彭圆 +4 位作者 洪学敏 杨莉 徐波 张翀 郭雪林 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期120-128,共9页
目的:观察天王补心丹加减(MTBD)对睡眠剥夺(SD)小鼠皮肤的作用,并探讨其作用机制。方法:将60只2月龄雌性昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、维生素C(VC,0.08 g·kg^(-1))组和MTBD低、中、高剂量(6.5、12.5、25 g·kg^(-1))组... 目的:观察天王补心丹加减(MTBD)对睡眠剥夺(SD)小鼠皮肤的作用,并探讨其作用机制。方法:将60只2月龄雌性昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、维生素C(VC,0.08 g·kg^(-1))组和MTBD低、中、高剂量(6.5、12.5、25 g·kg^(-1))组。除空白组外,其余组均复制SD小鼠模型采用多平台水环境法行每日睡眠剥夺18 h(15:00至次日9:00),连续14 d,并从第2周起叠加腹腔注射咖啡因(CAF)7.5 mg·kg^(-1),连续7 d;造模同时,空白组、模型组灌胃生理盐水(0.01 mL·g^(-1)),其余各组均灌胃相应药物治疗。实验结束后当天进行一般表现的观察记录(如小鼠体质量、精神、毛发、皮肤等);取材后,采用苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色法,光学显微镜下观察皮肤组织病理形态变化;测量皮肤厚度、皮肤含水率;生化试剂盒检测皮肤羟脯氨酸(HYP)含量、皮肤及血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-1β含量;蛋白免疫印迹法检测皮肤组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化(p)-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶(HO)-1、核转录因子(NF)-κB蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组有不同程度的变化,在一般表现上,出现了诸如体质量减轻(P<0.01),精神萎靡、毛色晦暗、皮肤皱纹形成等衰老迹象;对组织标本检测,结果显示,光学显微镜下可见皮肤变薄,真表皮连接(DEJ)扁平化,胶原纤维减少;皮肤组织的厚度和含水率降低,皮肤组织HYP含量显著减少(P<0.01),皮肤和血清SOD活性显著下降(P<0.01)及MDA含量显著增加(P<0.01);血清IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著增加(P<0.01);皮肤ColⅠ、ColⅢ、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Nrf2及HO-1蛋白表达明显减少(P<0.05,P<0.01),NF-κB表达增加(P<0.01)。与模型组比较,VC组和MTBD低� 展开更多
关键词 睡眠剥夺 皮肤衰老 天王补心丹加减(MTBD) 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子E_(2)相关因子2(pi3k/akt/nrf2)信号通路
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