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鲜切果蔬中常见致病菌及其PCR快速检测方法 被引量：6
1
作者 刘易伟 胡文忠 +2 位作者 刘程惠 何煜波 白露露 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第17期360-364,共5页
鲜切果蔬由于失去外部表皮组织的保护而容易受到微生物污染,致腐微生物引起鲜切产品变质腐烂,致病微生物危害人类健康。目前由食源性病原微生物引起食源性疾病越来越受到人们的关注,本文就鲜切果蔬中常见的致病微生物种类及其PCR检测方... 鲜切果蔬由于失去外部表皮组织的保护而容易受到微生物污染,致腐微生物引起鲜切产品变质腐烂,致病微生物危害人类健康。目前由食源性病原微生物引起食源性疾病越来越受到人们的关注,本文就鲜切果蔬中常见的致病微生物种类及其PCR检测方法的研究现状进行综述。 展开更多
关键词 鲜切果蔬 致病菌 pcr快速检测方法
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TaqMan探针-荧光定量PCR筛查奶牛乳房炎主要致病菌的研究 被引量：2
2
作者 夏振海 谢本华 +6 位作者 何生平 陈芳慧 徐晨杰 徐俊杰 邹彦 盛乐 蔡亚非 《中国奶牛》 2021年第7期42-48,共7页
为研究奶牛场生鲜乳中的相关致病菌,以江苏省奶牛生产性能测定中心为平台对江苏南通、盐城和宿迁3个地区的3家奶牛场2019年5-10月份DHI数据进行分析,将奶牛SCC作为参考预警值。依托奶牛疾病检测联合创新实验室,通过牛奶致病菌快速检测... 为研究奶牛场生鲜乳中的相关致病菌,以江苏省奶牛生产性能测定中心为平台对江苏南通、盐城和宿迁3个地区的3家奶牛场2019年5-10月份DHI数据进行分析,将奶牛SCC作为参考预警值。依托奶牛疾病检测联合创新实验室,通过牛奶致病菌快速检测荧光定量PCR法,初步了解其中主要致病菌种,再分离、培养、鉴定奶样中主要的致病菌,结合药敏试验给出具体治疗建议。结果表明从试验奶样分离出的主要致病菌为大肠杆菌、黏质沙雷氏菌、金黄色葡萄球菌、克雷伯氏菌、乳房链球菌、无乳链球菌等,通过药敏试验可知喹诺酮类和头孢菌素类抗菌药物对检测出的几种主要致病菌引起的奶牛乳房炎具有较好抑制作用,便于牧场及时治疗患病奶牛。该结果说明体细胞数(SCC)作为DHI检测的一项重要指标,对奶牛乳房炎起到第一预警作用;快速检测荧光定量PCR法可快速了解生鲜乳中含有的主要致病菌,从而推测导致奶牛乳房炎的致病菌,便于分离、培养、鉴定主要致病菌;TaqMan探针-荧光定量PCR可简化测定流程、缩短时间、明确主要致病菌,可提高牧场生产效率,为牧场的生产管理提供便捷。 展开更多
关键词 生鲜乳致病菌 奶牛乳房炎 pcr快速检测 体细胞数 药物敏感性
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应用反转录 - 聚合酶链技术快速检测猪瘟病毒RNA的研究 被引量：4
3
作者 傅烈振 朱燕 +2 位作者 王宁 潘滋书 张楚瑜 《中国兽医科技》 CSCD 1998年第6期3-5,共3页
依据猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）５′端非编码区保守序列设计一对ＰＣＲ引物，建立了检测ＣＳＦＶ的反转录聚合酶链（ＲＴＰＣＲ）技术。应用该技术从猪瘟兔化弱毒感染兔的脾、淋巴结、肾与肌肉等以及石门株强毒感染猪的脾与肌肉和湖北分离... 依据猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）５′端非编码区保守序列设计一对ＰＣＲ引物，建立了检测ＣＳＦＶ的反转录聚合酶链（ＲＴＰＣＲ）技术。应用该技术从猪瘟兔化弱毒感染兔的脾、淋巴结、肾与肌肉等以及石门株强毒感染猪的脾与肌肉和湖北分离毒株感染猪组织匀浆液中均特异扩增出了１条预期大小为１９４ｂｐ的片段，从实验感染兔和猪的血液中也特异扩增出了该片段，但对牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）和健康兔脾总ＲＮＡ以及健康猪的血液ＲＮＡ扩增均为阴性。采用这种方法，对实验感染兔脾总ＲＮＡ的检测灵敏度可达１０－８ｇ，表明其灵敏度足以达到临床检验的要求。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 RNA 快速检测 PT-pcr技术
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多重PCR快速检测技术在食品致病微生物检测中的应用 被引量：5
4
作者 吴海华 《现代食品》 2015年第17期43-45,共3页
近年来,随着我国科学技术不断进步,微生物检测技术也得到了快速发展,在人们生活水平不断提升的形势下,加强微生物检测是十分重要的,在微生物检测过程中,需要用到多种检测技术,其中多重PCR快速检测技术应用范围比较广泛,多重PCR快速检测... 近年来,随着我国科学技术不断进步,微生物检测技术也得到了快速发展,在人们生活水平不断提升的形势下,加强微生物检测是十分重要的,在微生物检测过程中,需要用到多种检测技术,其中多重PCR快速检测技术应用范围比较广泛,多重PCR快速检测技术即聚合酶链式反应技术。 展开更多
关键词 多重pcr快速检测技术 食品致病微生物 应用效果
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一步法实时荧光RT-PCR在快速检测甲型流感病毒中的应用 被引量：4
5
作者 胡晓武 周红艳 +1 位作者 沈佐君 孙余婕 《临床输血与检验》 CAS 2010年第4期296-299,共4页
目的建立一种能快速检测甲型流感病毒的一步法实时荧光PCR方法,对样本进行准确检测。方法以甲型流感病毒特异M基因的保守区为靶区域设计特异引物和TaqMan荧光探针,建立一步法实时荧光RT-PCR方法,并对乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒Long... 目的建立一种能快速检测甲型流感病毒的一步法实时荧光PCR方法,对样本进行准确检测。方法以甲型流感病毒特异M基因的保守区为靶区域设计特异引物和TaqMan荧光探针,建立一步法实时荧光RT-PCR方法,并对乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒Long株、冠状病毒OC43及229E、副流感病毒1、2、3型以及季节性流感病毒H1、H3进行检测,验证该方法的特异性和灵敏度,并对临床样本进行检测应用。结果所建立的一步法实时荧光RT-PCR可对甲型流感病毒进行特异扩增,操作方便快速,对H1和H3亚型的最低检出限可达0.01TCID50/ml;对384例临床咽拭子样本的检测准确度达99.5%。结论本研究建立的一步法实时荧光RT-PCR方法可实现对甲型流感病毒快速准确的检测,有助于对临床流感病例的快速诊断。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 一步法实时荧光RT-pcr 快速检测
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用改良的RT-PCR技术快速检测传染性法氏囊病病毒 被引量：1
6
作者 陈茹 罗琼 +1 位作者 吴时清 李树根 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1998年第1期3-7,共5页
本研究将最新的病毒核酸纯化技术和单管ＲＴ－ＰＣＲ技术相结合，应用于ＩＢＤＶ的诊断研究，对４０余个病毒样品进行扩增反应，均取得令人满意的效果。该技术灵敏快速，从核酸纯化到电脉检测ＰＣＲ产物只需５～６ｈ，反应灵敏度比传统... 本研究将最新的病毒核酸纯化技术和单管ＲＴ－ＰＣＲ技术相结合，应用于ＩＢＤＶ的诊断研究，对４０余个病毒样品进行扩增反应，均取得令人满意的效果。该技术灵敏快速，从核酸纯化到电脉检测ＰＣＲ产物只需５～６ｈ，反应灵敏度比传统方法至少提高１００倍。所设计的引物对毒株的适用范围较广。 展开更多
关键词 IBDV pcr 快速检测 鸡病
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落叶松八齿小蠹伴生致病菌的特异性快速检测
7
作者 刘学伟 王正 +4 位作者 吕全 张雪萍 王秀芹 孔祥波 张星耀 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期128-134,共7页
落叶松八齿小蠹Ips subelongatus严重危害落叶松Larix spp.林,造成了巨大的经济和生态损失,被列为中国林业危险性有害生物。长喙壳类真菌(ophiostomatoid fungi)是小蠹虫伴生菌中的最主要类群,在小蠹虫危害寄主甚至导致寄主死亡的过程... 落叶松八齿小蠹Ips subelongatus严重危害落叶松Larix spp.林,造成了巨大的经济和生态损失,被列为中国林业危险性有害生物。长喙壳类真菌(ophiostomatoid fungi)是小蠹虫伴生菌中的最主要类群,在小蠹虫危害寄主甚至导致寄主死亡的过程中起到了重要作用。一些长喙壳类真菌是重要的植物病原物,具有强致病力。实现病原菌的特异性和快速检测是明确病害分布和评估其危害的前提条件。为克服传统组织分离受多种因素制约的缺陷,对2种病原菌进行快速特异性聚合酶链式反应(PCR)检测,以内源转录间隔区(ITS)为目标序列,对比Endoconidiophora属和Ophiostoma属的14个近缘种,分别筛选出可以从目标真菌类群以及寄主组织中扩增出特异性片段的种特异性(SS-)PCR引物对OK1/OK2和CFU1/CFU2。引物对OK1/OK2可以从O.olgensis中特异性扩增出1条248 bp的清晰明亮条带,引物对CFU1/CFU2可以从E.fujiensis中特异性扩增出1条251 bp的清晰明亮条带。使用特异性引物能够直接从感病韧皮部组织中检测出O.olgensis和E.fujiensis。 展开更多
关键词 森林保护学 落叶松八齿小蠹 OPHIOSTOMA olgensis Endoconidiophora fujiensis SS-pcr快速检测
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分子信标荧光定量PCR快速检测结核分枝杆菌方法的初步研究 被引量：11
8
作者 徐亚军 周子人 +2 位作者 林琳 刘渠 刘衡川 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期661-663,共3页
目的建立分子信标荧光定量PCR快速检测结核杆菌方法,为临床结核病的诊断提供特异性强、灵敏度高、可标准化、自动化的检测方法。方法根据GenBank数据库公布的结核分枝杆菌IS6110基因的保守序列,设计引物与分子信标探针,建立结核分枝杆... 目的建立分子信标荧光定量PCR快速检测结核杆菌方法,为临床结核病的诊断提供特异性强、灵敏度高、可标准化、自动化的检测方法。方法根据GenBank数据库公布的结核分枝杆菌IS6110基因的保守序列,设计引物与分子信标探针,建立结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法;以10种细菌作对照分析该方法的特异性与灵敏度;应用已建立的方法检测结核分枝杆菌,评价其应用价值。结果所建立的分子信标荧光定量PCR检测10种细菌,只有结核分枝杆菌有荧光信号,与其他细菌无交叉反应,4拷贝/PCR反应体系的结核分枝杆菌都能有效检出。对100株结核分枝杆菌的检测结果为阳性,单一检测时间仅需2h。结论分子信标荧光定量PCR检测方法快速、灵敏度高、特异性强,可用于快速诊断结核病,为结核病的诊断与治疗提供新的检测手段。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 分子信标 荧光定量pcr IS6110 快速检测
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Taq Man探针实时荧光PCR方法检测黑蜂王台病毒的方法建立和应用 被引量：3
9
作者 杨倩 宋战昀 +7 位作者 石建平 张健 王振国 孟庆峰 崔焕忠 王全凯 李敏思 郑言 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第4期39-42,247,共5页
为了建立实时荧光PCR方法以检测蜜蜂黑蜂王台病毒,试验依据Taq Man荧光标记探针技术原理,针对蜜蜂黑蜂王台病毒编码衣壳蛋白的保守序列区域,设计出1对特异性引物和1条探针,建立了一种快速检测黑蜂王台病毒(BQCV)的荧光PCR方法,对2005年... 为了建立实时荧光PCR方法以检测蜜蜂黑蜂王台病毒,试验依据Taq Man荧光标记探针技术原理,针对蜜蜂黑蜂王台病毒编码衣壳蛋白的保守序列区域,设计出1对特异性引物和1条探针,建立了一种快速检测黑蜂王台病毒(BQCV)的荧光PCR方法,对2005年从12省收集到的18种蜜蜂病料进行检测,确定各地区感染BQCV情况。结果表明:该方法对蜜蜂黑蜂王台病毒有较好的特异性,与其他蜜蜂病毒之间均无交叉反应;检测灵敏度可达1.0×102拷贝/μL阳性质粒,可对低病毒含量的样品进行准确检测;变异系数为1.3%;应用该方法对2005年从12省收集到的18种蜜蜂病料进行检测,4 h内即可报告检测结果。说明该方法具有快速、灵敏、特异及重复性好等优点,适用于蜜蜂中黑蜂王台病毒的快速检疫。 展开更多
关键词 蜜蜂 黑蜂王台病毒(BQCV) TAQ Man探针 荧光pcr检测 快速检测
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