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长江中游水系鲢和草鱼群体mtDNA遗传变异的研究 被引量:59
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作者 张四明 汪登强 +1 位作者 邓怀 余来宁 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期142-147,共6页
采用 PCR技术进行了长江中游鲢和草鱼四个地理群体的线粒体 DNA(mt DNA)限制性片段长度多态性 (RFL P)的研究。四个地理群体包括长江中游的湖北嘉鱼和江西瑞昌两个地理群体 ,长江中游的两大支流汉江和湘江群体。 PCR技术扩增出 mt DNA N... 采用 PCR技术进行了长江中游鲢和草鱼四个地理群体的线粒体 DNA(mt DNA)限制性片段长度多态性 (RFL P)的研究。四个地理群体包括长江中游的湖北嘉鱼和江西瑞昌两个地理群体 ,长江中游的两大支流汉江和湘江群体。 PCR技术扩增出 mt DNA ND5 - ND6基因 ,选用 1 0种限制性内切酶对 PCR产物进行酶切。从鲢中共检出 1 8种单倍型 ,在草鱼中没有发现多态现象 ,只有一种单倍型存在。进一步地证实了长江鲢的遗传多样性比草鱼的要丰富得多 ,与这两种鱼类在长江现有生物量成反比的反常现象。 展开更多
关键词 鲢鱼 草鱼 线粒体DNA 变异 pcr-rflp 遗传多样性 长江中游水系
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小梅山、中梅山及大约克猪的SLA-DQB基因外显子2 PCR-RFLP多态性分析 被引量:46
2
作者 方美英 胡晓湘 +1 位作者 李宁 吴常信 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第8期685-687,共3页
采用限制性内切核酸酶RsaⅠ对中国地方猪种小梅山、中梅山及国外猪种大约克SLA DQB基因外显子 2的2 73bp扩增产物进行多态性分析。小梅山猪酶切后出现两种基因型 :2 4 6bp 2 7bp(AA)、132bp 84bp 30bp 2 7bp(BB) ;中梅山猪中出现 4种基... 采用限制性内切核酸酶RsaⅠ对中国地方猪种小梅山、中梅山及国外猪种大约克SLA DQB基因外显子 2的2 73bp扩增产物进行多态性分析。小梅山猪酶切后出现两种基因型 :2 4 6bp 2 7bp(AA)、132bp 84bp 30bp 2 7bp(BB) ;中梅山猪中出现 4种基因型 :2 4 6bp 2 7bp(AA)、132bp 84bp 30bp 2 7bp(BB)、132bp 114bp 2 7bp(CC)、2 4 6bp 132bp 84bp 30bp 2 7bp(AB) ;大约克猪中出现 5种基因型 :2 4 6bp 2 7bp(AA)、132bp 84bp 30bp 2 7bp(BB)、132bp 114bp 2 7bp(CC)、2 4 6bp 132bp 84bp 30bp 2 7bp(AB)、2 73bp 2 4 6bp 2 7bp(AD)。分析发现 ,SLA DQB基因外显子 2的 11、94和 12 4位碱基表现出多态性并在 3个猪种中检测到A、B、C和D 4个等位基因 ;χ2 适合性检验结果表明 ,小梅山、中梅山及大约克SLA DQB基因外显子 2在RsaⅠ酶切位点已经达到了Hardy 展开更多
关键词 小梅山 中梅山 大约克猪 SLA-DQB基因 外显子2 pcr-rflp多态性分析 中国地方猪种
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真菌核糖体基因间隔区研究概况 被引量:29
3
作者 余仲东 张星耀 曹支敏 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2000年第2期107-112,共6页
真菌基因组核糖体基因间隔区是分子生物技术研究的重要片段。本文综述了PCR:RFLP技术。
关键词 真菌 核糖体基因间隔区 pcr-rflp 测序技术
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猪资源家系MC4R基因扫描及其与脂肪性状的相关分析 被引量:41
4
作者 刘桂兰 蒋思文 +2 位作者 熊远著 郑嵘 屈彦纯 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第6期497-501,共5页
黑素皮质激素受体 4 (Melanocortin 4Receptor,MC4R)是在人类肥胖研究中发现的重要调节因子 ,它可以与瘦蛋白 (Leptin)、神经肽Y(NeuropeptideY ,NPY)、α 黑素细胞刺激激素 (Alpha melanocyte stimulatinghormone ,α MSH)等一起调节... 黑素皮质激素受体 4 (Melanocortin 4Receptor,MC4R)是在人类肥胖研究中发现的重要调节因子 ,它可以与瘦蛋白 (Leptin)、神经肽Y(NeuropeptideY ,NPY)、α 黑素细胞刺激激素 (Alpha melanocyte stimulatinghormone ,α MSH)等一起调节动物体重和采食量。采用PCR RFLP技术 ,分析了MC4R基因部分片段在猪资源家系群体中的TaqⅠ酶切片段多态性分布。MC4R基因多态性与生长肥育性状、肉质性状、胴体性状的相关性分析的结果表明 ,MC4R基因型频率在不同品种群体中的分布不同 ;MC4R基因与猪胸腰椎间膘厚、臀部膘厚、平均背膘、眼肌宽度、眼肌面积、皮率呈显著性相关。MC4R基因主要以显性作用方式发挥作用 。 展开更多
关键词 猪资源家系MC4R 基因扫描 脂肪性状 相关分析 背膘厚
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生长激素基因(GH2)多态性与猪部分生产性能的关系 被引量:29
5
作者 王文君 陈克飞 +5 位作者 任军 丁能水 林万华 高军 艾华水 黄路生 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期111-114,共4页
采用PCR -RFLP对南昌白猪 (117头 )和大约克夏猪 (36 1头 )的GH 2基因 - 119~ +486bp的片段进行了扩增 ,并用ApaⅠ酶切 ,产生了 2个等位基因A(44 9+10 1+5 5bp)和B(316 +133+10 1+5 5bp)。分析了不同基因型对个体初生重、2月龄重、4月... 采用PCR -RFLP对南昌白猪 (117头 )和大约克夏猪 (36 1头 )的GH 2基因 - 119~ +486bp的片段进行了扩增 ,并用ApaⅠ酶切 ,产生了 2个等位基因A(44 9+10 1+5 5bp)和B(316 +133+10 1+5 5bp)。分析了不同基因型对个体初生重、2月龄重、4月龄重、6月龄重、校正背膘厚、平均背膘厚、瘦肉率和料重比等生产性能的影响。结果表明 ,在南昌白猪中 ,不同GH 2基因型间在所测的生产性能上差异不显著 (P >0 0 5 ) ;在大约克夏猪中 ,AA型猪的瘦肉率最低、与BB型猪相比 ,差异显著 (P <0 0 5 )。 展开更多
关键词 生长激素基因 pcr-rflp 生产性能 GH2 多态性
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采用通用引物PCR配合SSCP和RFLP技术检测鱼病病原菌 被引量:18
6
作者 彭宣宪 高华 +1 位作者 王三英 郑文竹 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期345-348,共4页
采用通用引物PCR(UPPCR)、PCR RFLP、PCR SSCP技术 ,研究快速鉴别鱼病病原菌的分子生物学诊断技术。结果发现 ,采用细菌 16SrRNA基因保守区特异性引物 ,以嗜水气单胞菌、鲁克氏耶尔森菌、鳗弧菌、柱状曲挠杆菌、乙型链球菌、荧光假单胞... 采用通用引物PCR(UPPCR)、PCR RFLP、PCR SSCP技术 ,研究快速鉴别鱼病病原菌的分子生物学诊断技术。结果发现 ,采用细菌 16SrRNA基因保守区特异性引物 ,以嗜水气单胞菌、鲁克氏耶尔森菌、鳗弧菌、柱状曲挠杆菌、乙型链球菌、荧光假单胞菌等部分常见鱼病病原菌为对象 ,可以建立一种UPPCR技术。该技术能在保证实验条件不变的基础上 ,检出上述所有细菌 ,并还可检出大肠杆菌和双歧杆菌等非鱼病病原菌。并且认为 ,该法与SSCP配合即采用UPPCR SSCP技术能较好地鉴别被检菌而用于鱼病病原菌的快速诊断。 展开更多
关键词 鱼病 病原菌 通用引物 pcr SSCP rflp检测
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4个绵羊品种褪黑激素受体1a基因第二外显子PCRR-FLP分析 被引量:18
7
作者 季从亮 储明星 +2 位作者 陈国宏 周国利 朱颜 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期105-109,共5页
采用 2种限制性内切核酸酶MnlⅠ和RsaⅠ ,对常年发情的小尾寒羊和湖羊以及季节性发情的多赛特羊和萨福克羊共 14 6只绵羊褪黑激素受体 1a(MTNR1A)基因外显子 2的 82 4bp扩增产物进行PCR RFLP分析。结果表明 :1)MTNR1A基因外显子 2的 6 ... 采用 2种限制性内切核酸酶MnlⅠ和RsaⅠ ,对常年发情的小尾寒羊和湖羊以及季节性发情的多赛特羊和萨福克羊共 14 6只绵羊褪黑激素受体 1a(MTNR1A)基因外显子 2的 82 4bp扩增产物进行PCR RFLP分析。结果表明 :1)MTNR1A基因外显子 2的 6 0 5位碱基处表现出MnlⅠ酶切多态性。小尾寒羊、萨福克羊和湖羊只出现 2种基因型 :AB(30 3bp ,2 36bp/ 6 7bp)、BB(2 36bp/ 6 7bp ,2 36bp/ 6 7bp) ;多赛特羊出现 3种基因型 :AA(30 3bp ,30 3bp)、AB(30 3bp ,2 36bp/ 6 7bp)、BB(2 36bp/ 6 7bp ,2 36bp/ 6 7bp)。 2 )MTNR1A基因外显子 2的 6 0 4位碱基处表现出RsaⅠ酶切多态性。 4个绵羊品种都出现 3种基因型 :AA(2 90bp ,2 90bp)、AB(2 90bp ,2 6 7bp/ 2 3bp)、BB(2 6 7bp/ 2 3bp ,2 6 7bp/ 2 3bp)。 χ2 适合性检验结果表明 ,小尾寒羊和多赛特羊MTNR1A基因第二外显子在MnlⅠ酶切位点没有达到Hardy Weinberg平衡状态 (0 .0 1<P <0 .0 5 ) ,萨福克羊和湖羊MT NR1A基因第二外显子在MnlⅠ酶切位点已经达到Hardy Weinberg平衡状态 (P >0 .0 5 ) ;4个绵羊品种MT NR1A基因第二外显子在RsaⅠ酶切位点都已经达到Hardy Weinberg平衡状态 (P >0 .0 5 )。 展开更多
关键词 绵羊 褪黑激素受体 1a基因 外显子 pcr-rflp 基因型 品种 繁殖性能 季节性
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6个猪种胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因座位遗传多态性检测 被引量:16
8
作者 方美英 刘红林 +3 位作者 姜志华 李齐贤 陈杰 吴彦宁 《畜牧与兽医》 北大核心 1999年第1期12-13,共2页
本文采用PCR-RFLP分析方法对我国地方猪种民猪、香猪、桃源猪、内江猪、姜曲海猪以及用作对照的国外猪种杜洛克猪的IGF-1基因座位进行研究。结果发现:IGF-1基因PCR扩增片段存在2个限制性内切酶HhaI酶切位点... 本文采用PCR-RFLP分析方法对我国地方猪种民猪、香猪、桃源猪、内江猪、姜曲海猪以及用作对照的国外猪种杜洛克猪的IGF-1基因座位进行研究。结果发现:IGF-1基因PCR扩增片段存在2个限制性内切酶HhaI酶切位点,其中1个酶切位点产生遗传多态。此片段上共产生2个等位基因。在IGF-1基因位点上,香猪除与桃源猪基因频率差异不显著之外,与其它猪种之间基因频率差异极显著(P<0.01)。 展开更多
关键词 中国 地方猪种 pcr-rflp IGF-1基因
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中国胭脂鱼种群的遗传分析 被引量:17
9
作者 孙玉华 刘思阳 +2 位作者 彭智 余来宁 吴清江 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期248-252,共5页
采用RAPD和PCR RFLP技术 ,分析了长江中游两个中国胭脂鱼群体的遗传结构。 50个随机引物进行RAPD分析 ,有 3个引物显示了多态 ,宜昌、金口群体内个体之间的遗传相似度分别为 0 .92 74、0 .931 3 ,群体之间遗传相似度为 0 .90 0 0。 1 2... 采用RAPD和PCR RFLP技术 ,分析了长江中游两个中国胭脂鱼群体的遗传结构。 50个随机引物进行RAPD分析 ,有 3个引物显示了多态 ,宜昌、金口群体内个体之间的遗传相似度分别为 0 .92 74、0 .931 3 ,群体之间遗传相似度为 0 .90 0 0。 1 2个限制性内切酶分析了两群体线粒体DNAND - 5/ 6基因的限制性片段长度多态性 ,仅内切酶Ncil的酶切图谱显示了多态 ,基因型间的核苷酸序列歧化距离为 0 .2 35 % ,核苷酸多样性为 0 .0 0 4。分析表明 ,长江中游两个中国胭脂鱼群体遗传结构较为单一 ,群体之间表现了较为明显的遗传分化。 展开更多
关键词 中国胭脂鱼 遗传多样性 亚口鱼科 种群
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西藏牦牛和黑白花奶牛生长激素基因AluⅠ多态性的比较研究 被引量:13
10
作者 陈桂芳 李齐发 +2 位作者 强巴央宗 土登 谢庄 《畜牧与兽医》 北大核心 2002年第11期15-16,共2页
利用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,测定了西藏牦牛和黑白花奶牛生长激素基因的AluⅠ RFLP (限制性内切酶片段长度多态性 ) ,并比较了2牛群的基因频率。在西藏牦牛和黑白花奶牛中 ,等位基因A的频率分别为 0 935和 0 90 5 ,等位基因B的... 利用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,测定了西藏牦牛和黑白花奶牛生长激素基因的AluⅠ RFLP (限制性内切酶片段长度多态性 ) ,并比较了2牛群的基因频率。在西藏牦牛和黑白花奶牛中 ,等位基因A的频率分别为 0 935和 0 90 5 ,等位基因B的频率分别为 0 0 65和 0 0 65 ,卡方检验差异不显著 (P >0 0 5)。 展开更多
关键词 西藏牦牛 黑白花奶牛 生长激素基因 ALU I多态性
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载脂蛋白E基因多态性与阿尔茨海默病 被引量:13
11
作者 陈等 张俊武 +4 位作者 张振馨 赵华路 李晓青 吴亚宁 屈秋明 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1167-1170,共4页
利用PCR RFLP方法分析了中国汉族人群中 16 0例散发性阿尔茨海默病 (Alzheimerdisease,AD)患者和 195例正常对照老年人中载脂蛋白E(APOE)基因多态性分布的差异。结果表明 ,APOE 3种等位基因ε2、ε3和ε4的频率在AD组和对照组分别为 0 ... 利用PCR RFLP方法分析了中国汉族人群中 16 0例散发性阿尔茨海默病 (Alzheimerdisease,AD)患者和 195例正常对照老年人中载脂蛋白E(APOE)基因多态性分布的差异。结果表明 ,APOE 3种等位基因ε2、ε3和ε4的频率在AD组和对照组分别为 0 0 5 6、0 713、0 2 31和 0 0 82、0 84 4、0 0 74。APOEε4等位基因携带个体患AD的危险为非携带个体的 3 82倍 (χ2 =2 8 7,P <0 0 0 1)。 6 5岁以上APOEε4携带个体患AD的危险为非携带个体的 5 38倍(χ2 =2 9 8,P <0 0 0 1) ,说明年龄因素可能影响ε4与AD间的相互作用。APOE等位基因和基因型频率在轻、中和重度痴呆病人间的分布无明显差异 (P >0 0 5 ) ,提示APOE基因多态性可能与AD患者的痴呆程度无关联。APOEε4基因型频率在女性AD病人中的分布略高于男性AD病人 (4 3 0 %对 36 5 % ) ,女性ε4携带个体患AD的危险也高于男性ε4携带个体 (4 3倍对 3 3倍 ) ,但统计学分析未检测到这些差异的显著性 (P >0 0 5 )。ε2等位基因频率在AD患者男性亚组明显低于女性亚组 ,也低于对照人群的男性亚组 (P <0 0 5 ) 。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 载脂蛋白E pcr-rflp
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山羊β酪蛋白基因克隆及序列分析 被引量:9
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作者 王强 陈美珏 +2 位作者 任兆瑞 黄淑帧 曾溢滔 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期17-23,共7页
用LongPCR技术克隆山羊 β酪蛋白 (CSN2 )全基因 13.7kb的序列 (GenBank登录号 :AF4 0 90 96 ) .利用PCR RFLP方法鉴定第 14和 192位氨基酸残基相应的核苷酸序列中出现的 2个多态性位点 ,其中第 192位氨基酸残基处的TspRⅠ位点是Saanen... 用LongPCR技术克隆山羊 β酪蛋白 (CSN2 )全基因 13.7kb的序列 (GenBank登录号 :AF4 0 90 96 ) .利用PCR RFLP方法鉴定第 14和 192位氨基酸残基相应的核苷酸序列中出现的 2个多态性位点 ,其中第 192位氨基酸残基处的TspRⅠ位点是Saanen奶山羊CSN2基因中新发现的 1个多态性位点 .生物信息学方法分析山羊CSN2基因可见 ,非编码区中的SINE和LINE序列内含多种乳蛋白基因表达调控元件 。 展开更多
关键词 山羊 β酪蛋白 基因克隆 pcr-rflp 序列分析
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利用PCR-RFLP技术测定种猪的氟烷基因型 被引量:6
13
作者 何志平 吕学斌 陈晓晖 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第2期48-50,共3页
采用 PCR- RFL P方法对 6 1头长白猪、5 6头大约克猪和 30头杜洛克猪进行了氟烷基因型检测。结果表明 :3个品种猪群所含的氟烷应激基因分别为 5 .73% ,0 .89%和 3.33%。建议在四川省种猪选育过程中 ,应将氟烷基因型的检测作为种猪性能... 采用 PCR- RFL P方法对 6 1头长白猪、5 6头大约克猪和 30头杜洛克猪进行了氟烷基因型检测。结果表明 :3个品种猪群所含的氟烷应激基因分别为 5 .73% ,0 .89%和 3.33%。建议在四川省种猪选育过程中 ,应将氟烷基因型的检测作为种猪性能测定的内容之一 ,及时淘汰携带氟烷基因的个体 。 展开更多
关键词 pcr-rflp技术 测定种猪 氟烷基因型
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用PCR-RFLP技术鉴别嗜人按蚊和中华按蚊的研究 被引量:15
14
作者 高琪 R D Cooper +8 位作者 周华云 潘波 杨文 郭传坤 黄光全 李凤华 李菊林 沈宝祥 Qin Cheng 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期39-42,共4页
目的 依据嗜人按蚊和中华按蚊rDNA的ITS2区段基因特征 ,建立一种新的嗜人按蚊和中华按蚊基因鉴别技术。方法 对不同地区的嗜人按蚊、可疑嗜人按蚊和中华按蚊样本通过采用特异性ITS2 引物PCR扩增 ,限制性内切酶RsaI和HinfI消化 ,以及... 目的 依据嗜人按蚊和中华按蚊rDNA的ITS2区段基因特征 ,建立一种新的嗜人按蚊和中华按蚊基因鉴别技术。方法 对不同地区的嗜人按蚊、可疑嗜人按蚊和中华按蚊样本通过采用特异性ITS2 引物PCR扩增 ,限制性内切酶RsaI和HinfI消化 ,以及琼脂糖凝胶电泳分析进行PCR -RFLP基因鉴别。 结果 不同地区嗜人按蚊rDNA的ITS2 基因PCR扩增产物能被限制性内切酶HinfI酶切 ,并显示一条 4 5 0bp的酶切DNA条带 ;中华按蚊的ITS2 基因PCR扩增产物则能被限制性内切酶RsaI酶切 ,并显示 4 0 0bp和 2 0 0bp两条酶切DNA条带 ;辽宁可疑嗜人按蚊的PCR -RFLP结果与嗜人按蚊相同而广东珠海可疑嗜人按蚊的PCR -RFLP结果与中华按蚊相同。结论 依据rDNA的ITS2 区段基因特征建立的PCR -RFLP技术可用于嗜人按蚊和中华按蚊的基因鉴别。采用该PCR -RFLP基因鉴别技术发现辽宁可疑嗜人按蚊的基因与中国大陆的嗜人按蚊属同种 ,而广东可疑嗜人按蚊的基因与中华按蚊属同种。 展开更多
关键词 嗜人按蚊 中华按蚊 RDNA ITS2 pcr-rflp 基因鉴别
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新疆维吾尔族人群HIV协同受体CCR5基因突变的检测 被引量:15
15
作者 刘明旭 王福生 +5 位作者 金磊 洪卫国 施红 雷周云 刘发军 张战平 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期113-114,共2页
采集新疆维吾尔族血样 316份 ,提取基因组DNA。PCR扩增包含CCR5Δ32和CCR5m30 3突变位点的DNA片段 ,前者直接电泳 ,后者用HinCII酶切后电泳 ,进行基因分型。从中发现CCR5Δ32杂合子 2 2例 ,无突变纯合子 ,无CCR5m30 3突变。CCR5Δ32群... 采集新疆维吾尔族血样 316份 ,提取基因组DNA。PCR扩增包含CCR5Δ32和CCR5m30 3突变位点的DNA片段 ,前者直接电泳 ,后者用HinCII酶切后电泳 ,进行基因分型。从中发现CCR5Δ32杂合子 2 2例 ,无突变纯合子 ,无CCR5m30 3突变。CCR5Δ32群体分布符合Hardy Weinberg平衡 ,性别之间无差异。新疆维吾尔族人CCR5Δ32频率为 3.48% ,高于中国汉族人但低于欧洲高加索人 ,与印度和巴基斯坦少数民族接近 ,在地域分布上具有连续性。由于CCR5Δ32突变杂合体可延缓AIDS发病进程 ,这一发现对于维吾尔族人的AIDS防治具有积极意义。 展开更多
关键词 HIV协同受体 CCR5△32 基因多态性 聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性 艾滋病
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四川花生根瘤菌的遗传多样性 被引量:3
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作者 李琼芳 张小平 +2 位作者 李登煜 陈强 KristinaLindstrom 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 1999年第S1期32-38,共7页
用IAR、RAPDs和16S-23SPCR-RFLP3种方法对采集自四川省4个不同地点的22株慢生型花生根瘤菌的遗传多样性进行了研究。供试菌株对8种抗生素的抗药性测定表明, 22个菌株中存在7 个抗药性类群。来自同一采集地的菌株天然抗药性存在着差异。... 用IAR、RAPDs和16S-23SPCR-RFLP3种方法对采集自四川省4个不同地点的22株慢生型花生根瘤菌的遗传多样性进行了研究。供试菌株对8种抗生素的抗药性测定表明, 22个菌株中存在7 个抗药性类群。来自同一采集地的菌株天然抗药性存在着差异。IAR的结果证明了四川花生根瘤菌表型性状的多样性。4个随机引物的扩增图谱有明显的多态性。聚类分析的结果表明菌株内部存在不同水平的遗传多样性。全部菌株在58% 的相似性水平上被分为6群,采集地相同的菌株聚为一类,表明环境对根瘤菌的系统发育和遗传分化有影响。用PHR和P23SR01这一对引物对供试菌株16S-23SrDNA基因间隔区进行了扩增, 得到2.0kb 和2.1kb 两种大小不同的片段。用3种内切酶酶切后的图谱分为6种类型。根据各菌株带型相似性进行的聚类分析结果表明, 供试菌株的16S-23SrDNA PCR-RFLP相似性很高, 说明16S-23SrDNA基因保守, 在进化过程中受环境的影响比其它基因组序列相对要小。 展开更多
关键词 慢生花生根瘤菌 遗传多样性 IAR RAPDS pcr-rflp
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PCR-RFLP筛选DNA文库克隆Bt cry基因的研究 被引量:8
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作者 陈中义 吴限 +3 位作者 张杰 宋福平 管宇 黄大昉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期398-402,共5页
Bt菌株C0 0 2对水稻二化螟、甜菜夜蛾具有高毒力 ,PCR RFLP鉴定含有cry1Aa、cry2Ab、cry1Ca和未知杀虫蛋白基因cryX等 ,其中cry1Ca位于染色体DNA 6~ 9kb的EcoRI片段。染色体和质粒DNA分别经EcoRI完全酶切和Sau3AI部分酶切、电泳回收 6... Bt菌株C0 0 2对水稻二化螟、甜菜夜蛾具有高毒力 ,PCR RFLP鉴定含有cry1Aa、cry2Ab、cry1Ca和未知杀虫蛋白基因cryX等 ,其中cry1Ca位于染色体DNA 6~ 9kb的EcoRI片段。染色体和质粒DNA分别经EcoRI完全酶切和Sau3AI部分酶切、电泳回收 6~ 9kb片段。E .coli Bt穿梭载体pHT315分别与目的DNA连接、转化大肠杆菌感受态细胞后获得了相应的DNA文库。约 5 0个转化子合为一个转化子池 ,采用PCR RFLP方法快速检测 ,分别从约 2 0 0 0质粒DNA文库转化子和 4 0 0个染色体文库转化子中筛选获得了cry1Aa、cry2Ab、cry1Ca和未知基因cryX的阳性克隆 ,相应命名为pHT 1Aa、pHT 1Ca、pHT 2Ab和pHT X。限制酶切分析表明 ,含有cry1Aa、cry1Ca和cry2Ab基因的克隆片段均含有相应基因的保守物理图谱。进一步将这些质粒分别导入Bt无晶体突变株CryB-,SDS PAGE分析表明 ,只有cry1Ca表达了约 130ku杀虫晶体蛋白。初步杀虫生测结果显示 ,cry1Ca对甜菜夜蛾具有高毒力 ,7d校正死亡率为 10 0 %。 展开更多
关键词 甜菜夜蛾 苏云金芽孢杆菌 微生物杀虫剂 DNA文库 CRY基因 基因克隆 pcr-rflp 农业害虫 杀虫活性 基因分离
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我国不同森林立地带Bt分离株杀虫晶体蛋白及基因分析 被引量:10
18
作者 李长友 袁强 +2 位作者 张永安 戴莲韵 黄大昉 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第3期102-105,共4页
利用苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系和SDS PAGE方法分析了来自我国不同森林立地带土壤中的 72株苏云金芽孢杆菌的cry1、cry2、cry3、cry4、cry5、cry8、cry9、cry10、cry11、cry1I等 10类基因类型和表达蛋白 ,并进行了杀虫活... 利用苏云金芽孢杆菌cry基因的PCR RFLP鉴定体系和SDS PAGE方法分析了来自我国不同森林立地带土壤中的 72株苏云金芽孢杆菌的cry1、cry2、cry3、cry4、cry5、cry8、cry9、cry10、cry11、cry1I等 10类基因类型和表达蛋白 ,并进行了杀虫活性的生物测定。研究表明 :同时含有cry1,cry2 ,cry1I 3类基因的有 2 1株菌 ,6株菌含有cry1,cry2类基因 ,4株菌含有cry1和cry1I类基因 ,只含有cry1基因的有 1株 ,cry2类基因的 4株 ,36株菌不含所鉴定的 10类cry基因。同时证明 ,绝大多数含有cry1基因的菌株表达了 130kDa蛋白 ,含有cry2基因的菌株表达了 6 0kDa蛋白。生物活性测定表明 ,共同含有cry1Aa、cry1Ac和cry2基因的菌株对棉铃虫幼虫具有较强的杀虫活性 ,只含有单一基因和不含上述基因的菌株杀虫活性较弱。 展开更多
关键词 森林立地带 Bt分离株 基因分析 苏云金芽孢杆菌 杀虫晶体蛋白 CRY基因 pcr-rflp 生物测定 中国
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苏云金杆菌新菌株WB9 cry1基因型的PCR-RFLP分析 被引量:2
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作者 黄志鹏 关雄 《福建农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期304-308,共5页
利用 PCR- RFLP技术对 Bt新菌株 WB9的 cry1基因型进行分析 ,结果表明该菌株含有 cry1Aa、cry1Ab、cry1Cb、cry1Fa和 cry1Ga 5种 cry1基因型 ,且 cry1Ab的酶切产物不同于正常的 cry1Ab.采用特异引物对 G1/ G2扩增 ,也证明 WB9含有 cry1A... 利用 PCR- RFLP技术对 Bt新菌株 WB9的 cry1基因型进行分析 ,结果表明该菌株含有 cry1Aa、cry1Ab、cry1Cb、cry1Fa和 cry1Ga 5种 cry1基因型 ,且 cry1Ab的酶切产物不同于正常的 cry1Ab.采用特异引物对 G1/ G2扩增 ,也证明 WB9含有 cry1Ab基因 .在此基础上 ,再利用引物对 G1/ K3un2进行扩增 ,其产物经回收纯化后用 Eco R / Xba 双酶切分析 ,结果也表明 WB9所含的 cry1Ab与众不同 ,无大片段出现且有一条 4 0 0 - 5 0 0 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 新菌株 WB9 CRY1 pcr-rflp
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猕猴桃属植物线粒体DNA片段PCR-RFLP研究初报 被引量:4
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作者 李林林 黄宏文 《武汉植物学研究》 CSCD 2002年第2期153-156,共4页
Thirty four taxa of Actinidia were investigated through PCR RFLP analysis of two mitochondrial DNA fragments, including nad1/B C gene and nad4/1 2 gene. Digestion of these two fragments by seven restriction endonuclea... Thirty four taxa of Actinidia were investigated through PCR RFLP analysis of two mitochondrial DNA fragments, including nad1/B C gene and nad4/1 2 gene. Digestion of these two fragments by seven restriction endonucleases yielded twenty polymorphic restriction fragments. We only found restriction fragment length variation caused by insertion or deletion. It suggests that mtDNA restriction length polymorphism could be an efficient indicator for conservation biology . 展开更多
关键词 猕猴桃属 线粒体DNA pcr-rflp 单元型
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