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p75神经营养蛋白受体基因敲除对小鼠面神经损伤后神经再生的影响 被引量：4
1
作者 张风河 黄萍 +1 位作者 杨丕山 张雪 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期95-98,共4页
目的探讨p75神经营养蛋白受体(p75NTR)在面神经损伤后神经再生中的作用。方法对p75NTR基因敲除小鼠和野生型129sv小鼠的一侧面神经总干在神经出颅2mm处进行损伤,损伤后第2天,一部分小鼠在神经干损伤的近中侧注射霍乱毒素B(CTB)进行顺行... 目的探讨p75神经营养蛋白受体(p75NTR)在面神经损伤后神经再生中的作用。方法对p75NTR基因敲除小鼠和野生型129sv小鼠的一侧面神经总干在神经出颅2mm处进行损伤,损伤后第2天,一部分小鼠在神经干损伤的近中侧注射霍乱毒素B(CTB)进行顺行示踪标记,损伤后3、7d,应用免疫组织化学方法对神经纤维再生轴突进行长度测定及记数分析。另一部分小鼠在面神经总干损伤后第4天切断神经,将切断的面神经断端置入含有FastBlue的聚氯乙烯单端小管中进行逆行示踪标记,荧光显微镜下对面神经核运动神经元进行计数分析。结果p75NTR基因敲除小鼠与野生型129sv小鼠相比较,再生的神经纤维轴突长度明显不足,二者间面神经核再生运动神经元数量差异有统计学意义(P<0.05)。再生轴突的免疫组织化学染色表明,p75NTR基因敲除小鼠再生的神经纤维轴突数量也明显降低(P<0.01)。结论p75NTR基因可以增强面神经的再生。 展开更多
关键词 p75神经营养蛋白受体 霍乱毒素B 再生 基因敲除
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p75神经营养蛋白受体阳性舌鳞状细胞癌细胞的生物学特性研究 被引量：3
2
作者 佟冬冬 张风河 +4 位作者 姚瑶 张兆弢 王进兵 李青 张新莲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期18-22,共5页
目的对流式细胞仪分选获得的p75神经营养蛋白受体(p75NTR)阳性舌鳞状细胞癌细胞进行生物学特性研究。方法通过流式细胞术检测舌鳞状细胞癌细胞系Tca-8113和Cal-27中p75NTR阳性细胞的表达。对流式细胞仪分选获取的p75NTR阳性细胞进行单... 目的对流式细胞仪分选获得的p75神经营养蛋白受体(p75NTR)阳性舌鳞状细胞癌细胞进行生物学特性研究。方法通过流式细胞术检测舌鳞状细胞癌细胞系Tca-8113和Cal-27中p75NTR阳性细胞的表达。对流式细胞仪分选获取的p75NTR阳性细胞进行单克隆培养、四甲基偶氮唑盐比色法及划痕实验检测,以未分选细胞为对照,分析p75NTR阳性细胞的生物学特性。结果舌鳞状细胞癌细胞株Tca-8113、Cal-27中,p75NTR阳性细胞的比例分别为3.1%和1.9%。与未分选的细胞相比,p75NTR阳性细胞的单克隆形成能力更高(Tca-8113细胞,P=0.024;Cal-27细胞,P=0.009);单克隆p75NTR阳性细胞再培养2周后,p75NTR阳性细胞率分别降为14.5%(Tca-8113)和5.8%(Cal-27);p75NTR阳性细胞体外增殖能力显著增强,且具有明显的侵袭迁移能力。结论 p75NTR阳性舌鳞状细胞癌细胞具有肿瘤干细胞的特性。 展开更多
关键词 舌鳞状细胞癌 肿瘤干细胞 p75神经营养蛋白受体
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p75NTR对小鼠面神经损伤轴突再生影响的实验研究 被引量：1
3
作者 张风河 杨丕山 +1 位作者 魏奉才 张学广 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2007年第1期29-31,共3页
目的:探讨p75神经营养蛋白受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)在面神经损伤再生修复中的作用。方法:p75NTR基因敲除小鼠和野生型小鼠的面神经总干损伤后第4天,在损伤的近中侧注射霍乱毒素B(choleratoxin B,CTB)进行示踪,对再生神... 目的:探讨p75神经营养蛋白受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)在面神经损伤再生修复中的作用。方法:p75NTR基因敲除小鼠和野生型小鼠的面神经总干损伤后第4天,在损伤的近中侧注射霍乱毒素B(choleratoxin B,CTB)进行示踪,对再生神经纤维进行免疫组化染色,然后计数进行统计分析。结果:p75NTR基因敲除小鼠再生的神经纤维,明显较野生型小鼠的短,差异有显著性(P<0.01)。结论:p75NTR可以增强面神经的再生。 展开更多
关键词 p75神经营养蛋白受体 霍乱毒素B 再生 小鼠 基因敲除
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p75NTR对小鼠面神经损伤后脑内神经元再生的影响 被引量：2
4
作者 张风河 魏奉才 +1 位作者 杨丕山 孙善珍 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2007年第2期139-142,共4页
目的:探讨p75NTR在面神经损伤后面神经核运动神经元再生中的作用。方法:对p75基因敲除小鼠和野生型小鼠的面神经总干进行损伤,损伤后第4天,在面神经总干损伤的远中侧神经分叉处切断,将切断的面神经断端置入含有FastBlue的聚乙烯单端小... 目的:探讨p75NTR在面神经损伤后面神经核运动神经元再生中的作用。方法:对p75基因敲除小鼠和野生型小鼠的面神经总干进行损伤,损伤后第4天,在面神经总干损伤的远中侧神经分叉处切断,将切断的面神经断端置入含有FastBlue的聚乙烯单端小管中进行后示踪标记,术后第7天冷冻切片后荧光显微镜下对面神经核运动神经元进行计数,然后进行统计分析。结果:两组之间再生的神经元数量有显著性差异(P<0.05)。结论:p75NTR可以促进面神经运动神经元的再生。 展开更多
关键词 p75神经营养蛋白受体 Fast BLUE 再生 小鼠 基因敲除
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脑源性神经营养因子对施万细胞行为的影响 被引量：1
5
作者 李慧 梁庆成 吴云 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期524-525,共2页
神经营养因子在神经系统的发育与维持中起着重要作用，脑源性神经营养因子（BDNF）就是其中重要的一员。BDNF与相应受体p75神经营养蛋白受体（p75NTR）／原肌球蛋白受体激酶（trkB）结合，通过丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）／胞外信号调... 神经营养因子在神经系统的发育与维持中起着重要作用，脑源性神经营养因子（BDNF）就是其中重要的一员。BDNF与相应受体p75神经营养蛋白受体（p75NTR）／原肌球蛋白受体激酶（trkB）结合，通过丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）／胞外信号调节激酶（ERK）、 展开更多
关键词 脑源性神经营养因子 细胞行为 p75神经营养蛋白受体 丝裂原活化蛋白激酶 胞外信号调节激酶 受体激酶 原肌球蛋白 神经系统
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慢病毒介导沉默P75神经营养蛋白受体联合NGF过表达转染BMSCs复合脱钙骨基质异位成骨的实验研究 被引量：1
6
作者 陈俊毅 王宁 +5 位作者 张衡 张贤平 赵利民 朱伦井 黎智君 贝朝涌 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1438-1445,共8页
目的探索沉默P75神经营养蛋白受体(p75 neurotrophin receptor,P75NTR)联合NGF过表达对大鼠BMSCs增殖活性和复合脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)构建组织工程骨异位成骨能力的影响。方法通过贴壁分离法培养SD大鼠BMSCs并传... 目的探索沉默P75神经营养蛋白受体(p75 neurotrophin receptor,P75NTR)联合NGF过表达对大鼠BMSCs增殖活性和复合脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)构建组织工程骨异位成骨能力的影响。方法通过贴壁分离法培养SD大鼠BMSCs并传代。取第3代BMSCs,分别用慢病毒介导沉默P75NTR基因(B组)、NGF过表达基因(C组)、沉默P75NTR和NGF过表达双基因(D组)转染,以未转染细胞作为对照(A组)。转染7 d后荧光显微镜观察目的基因荧光蛋白表达;细胞计数试剂盒8法检测转染后连续8 d细胞的活性;Western blot检测各组P75NTR和NGF蛋白表达。倒置相差显微镜和扫描电镜分别观察沉默P75NTR和NGF过表达双基因转染后BMSCs与DBM的黏附情况。将上述4组转染后BMSCs分别与DBM共培养制备组织工程骨后,埋植于8周龄SD大鼠背侧皮下构建皮下异位成骨模型(n=6),术后4、8周行HE染色,术后8周ALP染色观察钙结节形成,实时荧光定量PCR检测成骨相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、ALP和骨钙素(osteocalcin,OCN)表达。结果转染7 d A组未见荧光表达,B组呈红色荧光表达,C组呈绿色荧光表达,D组呈红绿色复合荧光表达;目的基因荧光表达率可达70%左右。Western blot检测示,A、C组P75NTR蛋白相对表达量显著高于B、D组,C、D组NGF蛋白相对表达量显著高于A、B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随时间推移,各组细胞增殖活性均上升,其中D组上升最明显,3~8 d细胞活性明显高于A组(P<0.05)。倒置相差显微镜和扫描电镜观察示,BMSCs能与DBM形成良好黏附。皮下异位成骨实验中,HE染色示术后4、8周,D组比其余3组有更多的骨组织形成。ALP染色示D组ALP活性最高,有更好的成骨表达。实时荧光定量PCR检测示,与A组比较,D组Runx2、ALP、OCN mRNA相对表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默P75NTR联合NGF过表达双基因共转染BMSCs复合DBM构� 展开更多
关键词 p75神经营养蛋白受体 NGF BMSCS 细胞活性 脱钙骨基质 异位成骨 大鼠
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