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营养盐对三角褐指藻脂肪酸含量与百分组成的影响 被引量:22
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作者 廖启斌 李文权 +1 位作者 陈清花 郑爱榕 《海洋环境科学》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期6-9,共4页
通过对三角褐指藻分别在硅不足、维生素不足、氮不足、磷不足等不同营养盐条件下培养的对比试验 ,发现随氮营养盐不足加剧 ,TPUFA含量大幅度下降 ,由对照组 42 1 3%降至 2 9 86%( 50 %N )和 2 0 1 7%( 5%N) ,EPA含量则由对照组 2 1... 通过对三角褐指藻分别在硅不足、维生素不足、氮不足、磷不足等不同营养盐条件下培养的对比试验 ,发现随氮营养盐不足加剧 ,TPUFA含量大幅度下降 ,由对照组 42 1 3%降至 2 9 86%( 50 %N )和 2 0 1 7%( 5%N) ,EPA含量则由对照组 2 1 4 1 %降至 1 2 94%( 50 %N)和 1 0 54%( 5%N)。磷不足能导致TFA的增加和积累 ,但TPUFA(包括EPA)占总脂肪酸的百分比却呈现下降趋势。硅不足和维生素不足条件下 ,三角褐指藻体内的TPUFA均有提高 ,分别由 42 1 3%升至 43 4 8%和 45 86%。 展开更多
关键词 营养盐 三角褐指藻 脂肪酸 生物监测
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葡萄糖对三角褐指藻生长、岩藻黄素含量及相关基因表达的影响 被引量:10
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作者 刘浩 杭雨晴 +2 位作者 朱帅旗 王何瑜 龚一富 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第14期1230-1234,共5页
目的 研究葡萄糖对三角褐指藻细胞生长、岩藻黄素含量和岩藻黄素生物合成相关基因表达的影响。方法 本实验以分光光度法研究葡萄糖对三角褐指藻生长影响,HPLC研究藻细胞岩藻黄素含量,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)研究岩藻黄素生物合... 目的 研究葡萄糖对三角褐指藻细胞生长、岩藻黄素含量和岩藻黄素生物合成相关基因表达的影响。方法 本实验以分光光度法研究葡萄糖对三角褐指藻生长影响,HPLC研究藻细胞岩藻黄素含量,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)研究岩藻黄素生物合成相关基因表达。结果 在平台期末,葡萄糖处理组藻细胞密度均比对照组高,说明葡萄糖促进三角褐指藻细胞生长。HPLC结果表明,随着葡萄糖浓度的升高,三角褐指藻细胞中岩藻黄素含量呈逐渐下降的趋势。其中,葡萄糖为50mg·L-1时,岩藻黄素含量最低,为0.26 mg·g-1干重,比对照组降低了67.5%,说明葡萄糖抑制了三角褐指藻岩藻黄素的生物合成。荧光定量PCR结果表明,10-50 mg·L-1葡萄糖处理三角褐指藻时,岩藻黄素生物合成相关基因zep、pys、zds、lcyb、crtiso和pds的表达量均比对照组低。该结果与岩藻黄素含量变化一致。结论 葡萄糖抑制三角褐指藻岩藻黄素的生物合成是通过下调岩藻黄素生物合成相关基因表达来实现的。 展开更多
关键词 葡萄糖 三角褐指藻 生长 岩藻黄素 基因表达
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氮限制有利于三角褐指藻脂质积累 被引量:8
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作者 赵佩佩 顾文辉 +6 位作者 伍松翠 解修俊 赵宇鹏 黄爱优 郇丽 潘光华 王广策 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第23期2196-2208,共13页
三角褐指藻是一种重要的海洋硅藻,其全基因组已完成测序.三角褐指藻富含脂肪酸,是一种潜在的生物柴油原料.因此,三角褐指藻是一种极具应用前景的模式海藻.本文分别在蛋白质组、转录组和生理水平上比较分析三角褐指藻在正常培养和缺氮培... 三角褐指藻是一种重要的海洋硅藻,其全基因组已完成测序.三角褐指藻富含脂肪酸,是一种潜在的生物柴油原料.因此,三角褐指藻是一种极具应用前景的模式海藻.本文分别在蛋白质组、转录组和生理水平上比较分析三角褐指藻在正常培养和缺氮培养下的变化.研究结果表明,细胞骨架、染色体组分及参与信号转导的多个蛋白的含量在缺氮条件下变化明显,蛋白质降解加速以利于氨基酸的重新利用;涉及光合作用和卡尔文循环的多个酶显著下调,叶绿素生物合成相关蛋白含量降低,光合效率明显下降;糖酵解和三羧酸循环相关蛋白的转录和表达水平大幅上调,脂肪酸合成过程中多个关键酶也表现为上调趋势.同时,尼罗红(Nile red)和氟硼荧(BODIPY)染色实验结果显示,三角褐指藻细胞在缺氮条件下脂滴增大.基于以上结果,本文认为,氮限制促进了三角褐指藻中脂质的积累,糖酵解和三羧酸循环的强化为脂质合成提供了充足的底物和能量. 展开更多
关键词 硅藻 脂质合成 代谢路径 蛋白质组学 三角褐指藻
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Studies of biouptake and transformation of mercury by a typical unicellular diatom Phaeodactylum tricornutum 被引量:7
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作者 DENG GuiFu ZHANG TianWen +1 位作者 YANG LiMin WANG QiuQuan 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2013年第2期256-265,共10页
Mercury(Hg) is a toxic heavy metal with its biogeochemical cycling in the ocean depending on the type and behavior of the oceanic microalgae.The present work aimed to evaluate bioaccumulation and transformation of Hg ... Mercury(Hg) is a toxic heavy metal with its biogeochemical cycling in the ocean depending on the type and behavior of the oceanic microalgae.The present work aimed to evaluate bioaccumulation and transformation of Hg by Phaeodactylum tricornutum,a typical unicellular diatom,when exposed to the extremely high level of Hg in order to understand the possible mechanisms of acute stress response.P.tricornutum can accumulate Hg(its bioaccumulation factor is at 104 level),and the 96 h EC 50 was estimated to be 145μg L-1.The amounts of surface-bound Hg being about 1.2 to 4.8 times higher than those of intracellular Hg under exposure to HgCl 2(from 20 to 120μg L-1 concentrations) suggested that the cell wall of P.tricornutum is an important "fence" towards Hg.After entering the P.tricornutum cell,Hg underwent transformation in its chemical form via interactions with high molecular weight sulfur-containing proteins(accounting for 68% of the intracellular Hg),and glutathione as well as the induced phytochelatins(PCs)(24% Hg) which alleviated the toxicity of HgCl2.In addition,the existence of organic ligands greatly influenced the uptake and transformation behavior of P.tricornutum towards HgCl2,especially in the case of cysteine(Cys),which increased the uptake of Hg,but alleviated the toxicity of Hg towards P.tricornutum due to the fact that Cys is an important precursor for the synthesis of PCs inside the cell.The uptake process of Hg by P.tricornutum was in agreement with the Freundlich isotherm,suggesting a typical heterogeneous sorption process.More importantly,we observed the conversion of HgCl2 into methylmercury inside the P.tricornutum cells and its release into the culture solution using HPLC/CVG-AFS and GC-MS,although the mechanism needs to be further investigated. 展开更多
关键词 三角褐指藻 氯化汞 单细胞 改造 硅藻 生物地球化学循环 HgCl2 吸收过程
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过表达三角褐指藻苹果酸酶基因提高E.coli脂肪酸合成能力研究 被引量:2
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作者 吕娜娜 朱葆华 +2 位作者 鹿琳 杨官品 潘克厚 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期65-69,共5页
为验证三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)苹果酸酶基因的功能,本研究将PtME1插入pET-30a中得到重组质粒pET30a-PtME1。IPTG诱导后,携带pET30a-PtME1的大肠杆菌BL21(DE3)高效表达一分子量约为72kDa的可溶性重组蛋白。重组蛋白经Ni S... 为验证三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)苹果酸酶基因的功能,本研究将PtME1插入pET-30a中得到重组质粒pET30a-PtME1。IPTG诱导后,携带pET30a-PtME1的大肠杆菌BL21(DE3)高效表达一分子量约为72kDa的可溶性重组蛋白。重组蛋白经Ni SephroseTM6Fast Flow系统纯化,酶活力达75.18U/mg。GC-MS分析显示表达PtME1提高了大肠杆菌脂肪酸合成能力,其C14∶0、C16∶0、C18∶1及总脂肪酸含量较对照分别提高了34.8%、69.9%、54.2%和50.2%,C16∶1产量是对照的5.6倍。研究结果表明,NADP依赖型苹果酸酶能为大肠杆菌脂肪酸合成及脂肪酸去饱和提供充足的NADPH,为进一步研究该酶在藻体内的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 三角褐指藻 苹果酸酶 脂肪酸 原核表达
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RNA干扰UGP基因表达对三角褐指藻碳流分配的影响 被引量:2
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作者 朱葆华 常雅青 +3 位作者 何文栋 杨官品 李赟 潘克厚 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期42-49,共8页
为深入研究RNA干扰尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)基因的表达对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum Bohlin)碳流分配的影响,本研究以RNA干扰UGP表达的三角褐指藻为对象,测定了野生和转基因藻株的叶绿素荧光参数和生物量,分析了... 为深入研究RNA干扰尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)基因的表达对三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum Bohlin)碳流分配的影响,本研究以RNA干扰UGP表达的三角褐指藻为对象,测定了野生和转基因藻株的叶绿素荧光参数和生物量,分析了它们的脂肪酸组成和金藻昆布多糖、总脂及蛋白质的含量。研究显示,转基因藻株的最大光能转化效率(Fv/Fm)从指数生长后期开始显著低于野生型,但野生和转基因藻株的终生物量无明显差别。转基因藻株(AS、IR)的C16与C18之和分别占总脂肪酸含量的66.90%和68.89%,比野生藻株分别提高了19.40%和22.97%,说明抑制UGP表达改变了三角褐指藻的脂肪酸组成。转基因藻株的金藻昆布多糖、总脂及蛋白质含量与野生型藻株差别明显:藻株AS的金藻昆布多糖含量降低25.70%,蛋白质含量上升3.80%,总脂含量提高了13.2%;藻株IR的金藻昆布多糖含量降低40.70%,蛋白质含量上升8.30%,总脂含量增加了25.20%。研究结果表明,RNA干扰UGP的表达改变了三角褐指藻的脂肪酸组成,使得在最终生物量无明显减少的情况下,光合作用固定的碳更多转向油脂合成。本研究进一步明确了RNA干扰UGP的表达对三角褐指藻碳流分配的影响机制,为通过基因工程改造藻种提高微藻的生物柴油生产潜力提供了新思路。 展开更多
关键词 三角褐指藻 生物柴油 RNA干扰 UGpASE 脂肪酸 碳流分配
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同源重组敲除三角褐指藻基因的研究 被引量:2
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作者 郭婷 代易颖 +6 位作者 陈孔翔 高莉 张克亚 曹志远 王冠儒 兰利琼 卿人伟 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期173-177,共5页
为探索应用基因敲除技术研究三角褐指藻基因功能的研究体系,本文以三角褐指藻甘油激酶基因作为靶基因,构建了同源重组基因敲除载体,利用微弹轰击法将该载体成功转化至三角褐指藻中,经100μg/mL Zeocin筛选和PCR验证获得了34个阳性转基... 为探索应用基因敲除技术研究三角褐指藻基因功能的研究体系,本文以三角褐指藻甘油激酶基因作为靶基因,构建了同源重组基因敲除载体,利用微弹轰击法将该载体成功转化至三角褐指藻中,经100μg/mL Zeocin筛选和PCR验证获得了34个阳性转基因藻株;并进一步对三角褐指藻甘油激酶基因敲除转基因藻株的甘油激酶表达量和生长两方面进行分析,结果显示胞外甘油兼养不影响转基因藻细胞生长,甘油激酶不表达或表达量降低.本文通过构建敲除载体,完成了遗传转化,筛选获得阳性转基因藻,并进一步研究了转基因藻的性状,最终建立了应用同源重组基因敲除技术靶向研究三角褐指藻基因功能的研究体系. 展开更多
关键词 三角褐指藻 同源重组 基因敲除 甘油激酶
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不同碳氮组合对三角褐指藻兼养生长及脂质积累的影响
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作者 宋雅琪 周启霞 +3 位作者 吴琼 何凌峰 朱静静 王海英 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期57-60,共4页
为了探讨兼养培养中不同碳氮组合对三角褐指藻(P.tricornutum)生长及脂质积累的影响,以葡萄糖为碳源,氯化铵为氮源,以不同的碳氮组合兼养培养P.tricornutum,用干重法测定P.tricornutum的生物量,三氯甲烷-甲醇法提取脂质,并采用GC分析脂... 为了探讨兼养培养中不同碳氮组合对三角褐指藻(P.tricornutum)生长及脂质积累的影响,以葡萄糖为碳源,氯化铵为氮源,以不同的碳氮组合兼养培养P.tricornutum,用干重法测定P.tricornutum的生物量,三氯甲烷-甲醇法提取脂质,并采用GC分析脂肪酸组成。结果表明,兼养生长中P.tricornutum基于氯化铵消耗的细胞得率系数随着葡萄糖质量浓度的增加而降低,降低了对氮源的需求;在碳氮组合为葡萄糖质量浓度0.5 g/L,氯化铵浓度1.0 mmol/L的条件下,P.tricornutum生物量达最高,为1.25 g/L,脂质含量可达44.6%,不同碳氮组合对P.tricornutum脂质多不饱和脂肪酸(PUFA)和二十碳五烯酸(EPA)含量的影响不显著。 展开更多
关键词 三角褐指藻 生物量 脂质积累 氯化铵 葡萄糖
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Effects of the heavy metal cadmium on photosynthetic activity and the xanthophyll cycle in Phaeodactylum tricornutum
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作者 JI Yan XIE Xiujun WANG Guangce 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2018年第6期2194-2201,共8页
A bstract Cadmium(Cd) is one of the most common and widespread heavy metals in the environment. Cd has adverse effects on photosynthesis that are countered by photosystem I(PSI) and photosystem II(PSII); however, the ... A bstract Cadmium(Cd) is one of the most common and widespread heavy metals in the environment. Cd has adverse effects on photosynthesis that are countered by photosystem I(PSI) and photosystem II(PSII); however, the protective responses of these photosystems to heavy metal stress remain unclear. Using the model diatom P haeodactylum tricornutum, a biological indicator that is widely used to assess the impact of environmental toxins, we simultaneously measured the effects of Cd on PSI and PSII and examined the levels of pigments in response to high light treatments before and after Cd exposure. Cd significantly reduced the quantum yield and electron transport rates of PSI and PSII. The quantum yield of non-photochemical energy dissipation in PSI due to donor side limitation increased faster than the quantum yield due to acceptor side limitation. The Cd treatment activated the P. tricornutum xanthophyll cycle under artificial light conditions, as indicated by an increased diatoxanthin content. Xanthophyll is important for photoprotection; therefore, the accumulation of diatoxanthin may down-regulate PSII activities to reduce oxidative damage. Together, our results suggest that the rapid reduction in PSII activities following Cd exposure is an adaptive response to heavy metal stress that reflects the variable exposure to external stressors in the native P. tricornutum environment. 展开更多
关键词 HEAVY metal CADMIUM photosystemⅠ photosystemⅡ pHAEODACTYLUM tricornutum
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