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左归丸含药血清通过ERK/Smads信号通路干预MC3T3-E1细胞的功能基因表达 被引量：19
1
作者 蒿长英 任艳玲 赵金茹 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期872-876,共5页
目的研究ERK1/2信号通路在左归丸含药血清调控MC3T3-E1细胞基因表达中的作用。方法以倍美力为阳性对照药,对SD♀大鼠灌服高、中、低剂量的左归丸混悬液,d7腹主动脉取血分离含药血清。采用MTT法检测左归丸含药血清和PD98059对MC3T3-E1细... 目的研究ERK1/2信号通路在左归丸含药血清调控MC3T3-E1细胞基因表达中的作用。方法以倍美力为阳性对照药,对SD♀大鼠灌服高、中、低剂量的左归丸混悬液,d7腹主动脉取血分离含药血清。采用MTT法检测左归丸含药血清和PD98059对MC3T3-E1细胞增殖作用的影响,采用Western blot法检测ERK1/2蛋白的磷酸化水平及TGF-β1、Smad4蛋白表达,采用Real Time RT-PCR法检测Cbfα1、COLⅠmRNA表达。结果左归丸含药血清和倍美力能促进MC3T3-E1细胞增殖,诱导ERK1/2蛋白的磷酸化,促进TGF-β1、Smad4蛋白分泌,上调其Cbfα1、COLⅠmRNA表达;加入PD98059后MC3T3-E1细胞增殖下降、ERK1/2蛋白的磷酸化水平降低、TGF-β1蛋白表达进一步升高、Smad4蛋白表达降低、Cbfα1、COLⅠmRNA表达下调。结论左归丸能有效促进成骨细胞增殖和分化;左归丸可能是通过发挥雌激素样作用调控了ERK/Smads信号通路,从而达到防治骨质疏松的目的。 展开更多
关键词 左归丸 成骨前体细胞系 血清药理学 ERK/Smads信号通路 核结合因子α1 Ⅰ型胶原 倍美力
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不同细胞来源外泌体在骨质疏松小鼠体内的骨靶向性比较 被引量：8
2
作者 顾亚 李毅 +3 位作者 陈铭 尹鹏滨 张里程 唐佩福 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2021年第3期310-314,共5页
背景外泌体广泛参与细胞间交流和信息通讯,不同来源外泌体的靶向性和功能可能有所不同。不同细胞来源外泌体对骨质疏松骨组织的靶向性目前研究较少。目前已有研究发现某些细胞来源的外泌体对损伤的骨组织具有靶向性和修复作用。目的探... 背景外泌体广泛参与细胞间交流和信息通讯,不同来源外泌体的靶向性和功能可能有所不同。不同细胞来源外泌体对骨质疏松骨组织的靶向性目前研究较少。目前已有研究发现某些细胞来源的外泌体对损伤的骨组织具有靶向性和修复作用。目的探索不同细胞来源外泌体在骨质疏松小鼠体内的骨靶向性。方法体外培养间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)、成骨前体细胞(MC-3T3-E1)、乳腺癌细胞(4T1)、肾上皮细胞(293T),提取上清液中的外泌体。利用DiR荧光染料进行外泌体染色,静脉注射至骨质疏松小鼠体内并进行活体、离体外泌体分布的观察,比较不同细胞来源外泌体在小鼠股骨的聚集情况。结果活体荧光动态观察显示MSC、MC-3T3-E1来源外泌体在小鼠股骨显著聚集,且在第3天达到聚集高峰。4T1和293T来源外泌体则未观察到聚集。第3天处死小鼠,离体解剖下肢骨做活体成像和股骨病理切片染色,结果证明MSC来源外泌体在股骨聚集最多,MC-3T3-E1次之,而4T1和293T为阴性。结论MSC、MC-3T3-E1来源外泌体具有骨靶向性,4T1、293T来源外泌体则无骨靶向性。 展开更多
关键词 间充质干细胞 成骨前体细胞 外泌体 骨靶向 骨质疏松小鼠
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牙源性间充质干细胞对成骨前体细胞成骨分化的影响
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作者 李慧 马博 +2 位作者 余日月 郑明珠 宋慧妍 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第2期205-209,共5页
目的:探讨牙源性间充质干细胞对成骨前体细胞成骨分化的影响。方法:将小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1分为两组,观察组为牙源性间充质干细胞与MC3T3-E1细胞共培养,对照组为单一MC3T3-E1细胞培养。采用CCK-8法检测细胞增殖水平,采用酶联免疫法... 目的:探讨牙源性间充质干细胞对成骨前体细胞成骨分化的影响。方法:将小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1分为两组,观察组为牙源性间充质干细胞与MC3T3-E1细胞共培养,对照组为单一MC3T3-E1细胞培养。采用CCK-8法检测细胞增殖水平,采用酶联免疫法检测碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性并进行茜素红染色,采用qRT-PCR、Western blot检测ALP与骨桥素(osteopontin,OPN) m RNA与蛋白表达水平。结果:细胞共培养1 d与3 d后,观察组的细胞增殖指数、ALP活性显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,观察组的矿化结节显著增加,经茜素红染色呈红褐色。细胞共培养1 d与3 d后,观察组的ALP、OPN m RNA与蛋白相对表达水平显著高于对照组(P<0.05)。结论:牙源性间充质干细胞能促进成骨前体细胞的ALP、OPN表达,提高ALP活性,增加细胞增殖能力,诱发矿化,从而促进成骨分化。 展开更多
关键词 牙源性间充质干细胞 成骨前体细胞 碱性磷酸酶 骨桥素 成骨分化
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载槲皮素明胶微球对MC3T3-E1增殖和分化的影响
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作者 董伟杰 苏庭舒 忻贤贞 《口腔医学》 CAS 2024年第7期494-499,共6页
目的研究负载槲皮素的明胶三维多孔(G-quercetin)微球作为骨组织材料的可行性。方法利用乳化法制备负载槲皮素的多孔明胶微球,扫描电镜观察微球形态,通过免疫荧光染色、活死细胞染色和CCK-8、碱性磷酸酶(ALP)染色及茜素红染色检测微球... 目的研究负载槲皮素的明胶三维多孔(G-quercetin)微球作为骨组织材料的可行性。方法利用乳化法制备负载槲皮素的多孔明胶微球,扫描电镜观察微球形态,通过免疫荧光染色、活死细胞染色和CCK-8、碱性磷酸酶(ALP)染色及茜素红染色检测微球的细胞毒性及其对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)黏附、增殖及分化的影响,RT-PCR检测成骨相关基因Runx-2、ALP、OPN、OCN表达。结果扫描电镜结果显示制备的载槲皮素明胶三维微孔材料具有多孔结构。细胞黏附检测显示细胞能够在微球表面铺展良好。与对照组相比,活死细胞染色、CCK-8结果显示该微球无明显细胞毒性(P>0.05);与G-quercetin微球共培养的MC3T3-E1 ALP表达和体外矿化增加;PCR结果显示Runx-2、ALP、OCN、OPN表达明显增高(P<0.05)。结论载槲皮素明胶微球具有良好的生物相容性,能够促进MC3T3-E1体外成骨分化,有望作为新型骨组织工程生物材料应用于临床。 展开更多
关键词 明胶 槲皮素 微球 成骨分化 骨组织工程 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞
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可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)重组铁蛋白富集Pb^(2+)等重金属特性和功能研究 被引量：5
5
作者 初双双 张云云 +6 位作者 苏倡 王颖 陈丽萍 周君 张迪骏 司开学 苏秀榕 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1358-1364,共7页
利用可口革囊星虫重组铁蛋白富集Pb^(2+)、Fe^(3+)、Cd^(2+)、Cr^(3+)、Cu^(2+)、Mn^(2+)、Sn^(2+)和Zn^(2+)等8种重金属离子后,通过透射显微镜和傅里叶红外光谱测定蛋白的超微结构变化和内部基团特性。以天然的马脾铁蛋白为对照,观察... 利用可口革囊星虫重组铁蛋白富集Pb^(2+)、Fe^(3+)、Cd^(2+)、Cr^(3+)、Cu^(2+)、Mn^(2+)、Sn^(2+)和Zn^(2+)等8种重金属离子后,通过透射显微镜和傅里叶红外光谱测定蛋白的超微结构变化和内部基团特性。以天然的马脾铁蛋白为对照,观察重组铁蛋白与天然铁蛋白的差别。结果显示,重组铁蛋白富集Pb2+和其它7种重金属离子后蛋白体积大小与重金属离子种类直接相关。重组铁蛋白相对天然铁蛋白来说在富集不同种类重金属离子后,除了非特异性酰胺特征峰和蛋白特征峰外,还出现一些专门富集某些重金属离子的特异基团,如:-CH_3、-CH_2-、-CH-、-NH-、-SO_3-、-COOH、-S=S-和-C-S-C等。通过细胞实验进一步验证了铁结合蛋白能够通过富集重金属离子Pb2+来保护小鼠成骨前体细胞MRC3T3-E1,使细胞的死亡率明显降低(P<0.05)。 展开更多
关键词 可口革囊星虫 重组铁蛋白 富集铅离子 超微结构 小鼠成骨前体细胞
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成骨分化促进小鼠胚胎成骨前体细胞中压电型机械敏感离子通道组件1的表达
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作者 宋继东 刘暾 +3 位作者 赵家鑫 胡书刚 党晓谦 王伟 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期1792-1794,共3页
目的研究小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1经成骨诱导后压电型机械敏感离子通道组件1(PIEZO1)的表达变化及意义。方法成骨诱导MC3T3-E1细胞后,于第0、14、21天分别进行茜素红染色观察钙结节和细胞形态,利用蛋白质印迹法(Western blot)、实... 目的研究小鼠胚胎成骨前体细胞MC3T3-E1经成骨诱导后压电型机械敏感离子通道组件1(PIEZO1)的表达变化及意义。方法成骨诱导MC3T3-E1细胞后,于第0、14、21天分别进行茜素红染色观察钙结节和细胞形态,利用蛋白质印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测成骨诱导对各时间点PIEZO1蛋白和PIEZO1 mRNA表达的影响,组间比较采用One-way ANOVA检验。结果MCET3-E1成骨诱导0 d时基本未见红色钙化结节,细胞呈梭形;诱导14 d时出现钙化结节,细胞呈聚集样和层叠样生长,且随着诱导时间延长钙化结节数量增多,形状逐渐增大,细胞层叠样生长加重;同时MC3T3-E1中PIEZO1蛋白及mRNA的表达量随着成骨诱导时间的延长而逐渐增高(PIEZO1蛋白0 d组0.26±0.04、14 d组0.42±0.16、21 d组0.81±0.04,F=24.05,P<0.001;PIEZO1 mRNA 0 d组1.00±0.03、14 d组1.45±0.11、21 d组4.51±0.44,F=161.90,P<0.001),差异有统计学意义。结论成骨分化可促进MC3T3-E1在矿化结节形成期PIEZO1蛋白的表达。 展开更多
关键词 成骨分化 胚胎成骨前体细胞 压电型机械敏感离子通道组件1 机械敏感离子通道
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黄瓜籽总黄酮对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响
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作者 孙银玲 陈丽艳 +4 位作者 张蕾 丁纯洁 郑宏宇 綦菲 王伟明 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2022年第4期362-369,共8页
目的探讨黄瓜籽总黄酮提取物(cucumber seed flavonoids,CSF)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(mouse embryo osteoblast precursor cells,MC3T3-E1)增殖、分化和矿化的影响,以及对富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and r... 目的探讨黄瓜籽总黄酮提取物(cucumber seed flavonoids,CSF)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(mouse embryo osteoblast precursor cells,MC3T3-E1)增殖、分化和矿化的影响,以及对富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine,SPARC)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)/核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor kappa B,RANK)信号通路的作用。方法通过噻唑蓝(MTT)实验、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测、茜素红染色,考察不同浓度CSF对MC3T3-E1细胞增殖、分化及矿化的影响;采用RT-PCR方法检测SPARC、OPG/RANKL mRNA表达水平;Western blot检测OPG/RANKL的蛋白表达量。结果CSF高、中剂量组能够明显提高细胞增殖率(P<0.05),分别为阳性对照组的1.92和1.77倍;CSF高、中剂量组ALP活性为(2.756±0.073)和(1.961±0.107)U/mL,明显高于阳性对照组(0.453±0.029)U/mL(P<0.05);CSF高、中剂量组钙化结节面积为(34.899±0.811)和(22.112±0.914)mm 2/10个视野,与阳性对照组(16.577±0.649)mm 2/10个视野相比明显增加(P<0.05);与空白组相比,CSF高、中剂量组在不同时间点均明显上调SPARC、OPG/RANKL mRNA表达量,并促进OPG/RANKL蛋白表达水平(P<0.05)。结论黄瓜籽总黄酮类成分能够促进成骨细胞MC3T3-E1的增殖、分化及矿化能力,并通过上调SPARC、OPG/RANKL的表达水平提高MC3T3-E1细胞的成骨能力。 展开更多
关键词 黄瓜籽总黄酮 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞 富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白 骨保护素/核因子κB受体活化因子配体
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