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An Overview of the Use of Medicinal Plants in Regenerative Dentistry
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作者 Sara Dhoum Samir Ibenmoussa Mustapha Sidqui 《Open Journal of Stomatology》 2023年第1期50-88,共39页
Aim: The oral cavity has the particularity to host multiple hard and soft tissues, in this paper, we will discuss the current therapies that lead to cell differentiation by regenerative therapies and the future altern... Aim: The oral cavity has the particularity to host multiple hard and soft tissues, in this paper, we will discuss the current therapies that lead to cell differentiation by regenerative therapies and the future alternatives proposed by medicinal plants and all the regenerative potential of these different tissues. Material and Methods: A detailed review of the literature through the various search engines: Scopus, PubMed, google scholar, Cochrane, etc., uses the selected keywords to explore the effect of the regenerative potential of several medicinal plants. Results: Through our research, we have proceeded to sort different medicinal plants, according to their repairing and regenerative potential on the different tissues of the oral cavity. Conclusion: Future studies are conceivable to explore the opportunities and potential provided by medicinal plants in the field of regenerative dentistry. 展开更多
关键词 Medicinal Plants Medicinal Herbs Tissue Regeneration Enamel Remineralization Dental Pulp Periodontal Regeneration Bone Regeneration Wound Healing Stem Cells differentiation odontoblastic differentiation Oral Cavity Herbal Extract Oral Tissues
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氯化锂通过PI3K/Akt信号通路调控牙髓干细胞成牙本质向分化的研究
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作者 李鹏 刘会琴 +4 位作者 李东雨 朱小苗 王胜朝 何文喜 王志华 《重庆医学》 CAS 2024年第6期805-810,818,共7页
目的 探讨Wnt/β-连环素(β-catenin)通路激活剂氯化锂对牙髓干细胞(DPSCs)分化能力的影响及其相关分子机制。方法 体外培养DPSCs,通过茜素红染色评估不同浓度氯化锂(1和10 mmol/L)刺激DPSCs 1、2周后矿化结节的形成情况;采用实时荧光... 目的 探讨Wnt/β-连环素(β-catenin)通路激活剂氯化锂对牙髓干细胞(DPSCs)分化能力的影响及其相关分子机制。方法 体外培养DPSCs,通过茜素红染色评估不同浓度氯化锂(1和10 mmol/L)刺激DPSCs 1、2周后矿化结节的形成情况;采用实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测1 mmol/L氯化锂对DPSCs成牙本质标志基因[牙本质涎磷蛋白(DSPP)、牙本质基质蛋白1(DMP1)、碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)的mRNA]表达的影响;采用LY294002抑制磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路,通过茜素红染色和RT-qPCR验证其对DPSCs矿化结节形成及成牙本质标志基因表达的影响。进一步通过Western blot分析1 mmol/L氯化锂加或不加LY294002 (25μmol/L)刺激DPSCs对其下游Akt磷酸化表达的影响。结果 与0 mmol/L氯化锂相比,1 mmol/L氯化锂可明显促进DPSCs矿化结节形成和DSPP、DMP1、BSP、ALP mRNA的表达(P<0.05),而10 mmol/L氯化锂则抑制矿化结节形成(P<0.05)。加入LY294002 (25μmol/L)培养DPSCs 2周后,抑制了氯化锂(1 mmol/L)刺激导致的矿化结节形成增加和DSPP、DMP1、ALP mRNA的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,氯化锂(1 mmol/L)能够明显促进Akt的磷酸化(P<0.05),并具有时间依赖性,而LY294002可明显抑制Akt的磷酸化(P<0.05)。结论 氯化锂可通过调控PI3K/Akt信号通路调控DPSCs的成牙本质向分化过程。 展开更多
关键词 氯化锂 牙髓干细胞 成牙本质向分化 磷脂酰肌醇-3-激酶 蛋白激酶B
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Notch信号通路参与BMP-6对人牙髓细胞增殖分化作用的研究 被引量:4
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作者 郑琼丹 邢泉 +2 位作者 廖维立 李玫璘 蔡华雄 《中华老年口腔医学杂志》 2015年第2期65-69,共5页
目的:本研究通过观察骨形成蛋白-6(BMP-6,bone morphogenetic protein-6)对人牙髓细胞(hDPCs,humandentalpulp cells)增殖和成牙本质向分化的影响,以及Notch信号在其中可能的作用,初步探讨骨形成蛋白-6在牙髓损伤修复中的作用与机制。方... 目的:本研究通过观察骨形成蛋白-6(BMP-6,bone morphogenetic protein-6)对人牙髓细胞(hDPCs,humandentalpulp cells)增殖和成牙本质向分化的影响,以及Notch信号在其中可能的作用,初步探讨骨形成蛋白-6在牙髓损伤修复中的作用与机制。方法:采用组织块酶消化法体外培养hDPCs,分别应用BMP-6和γ-分泌酶抑制剂DAPT单独或共处理第3-5代hDPCs,采用CCK8法检测细胞增殖情况,碱性磷酸酶(ALP,alkalinephosphatase)试剂盒检测ALP活性,茜素红染色法检测矿化结节形成情况,观察牙髓细胞的增殖及成牙本质向分化能力。结果:CCK8结果显示,BMP-6促进hDPCs增殖,DAPT抑制hDPCs增殖,而经DAPT预处理的hDPCs,BMP-6对其促增殖作用减弱,与对照组相比均具有统计学差异(P<0.05);ALP结果显示,BMP-6可促进hDPCs的ALP活性,DAPT则明显抑制其ALP活性,与对照组相比均具有统计学差异(P<0.05),且DAPT可减弱BMP-6对细胞ALP活性的增强作用,与BMP-6组比较具有统计学差异(P<0.05);茜素红染色结果显示,BMP-6处理组矿化结节数量最多,BMP-6和DAPT共处理组次之,DAP7处理组最少。结论:BMP-6可促进hDPCs增殖和成牙本质向分化能力,而阻断Notch信号,可抑制BMP-6对hDPCs的促增殖及促成牙本质向分化作用。 展开更多
关键词 NOTCH信号通路 BMP-6 牙髓细胞 增殖 成牙本质向分化
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乳牙牙髓干细胞分化前后的外泌体miRNA筛选研究
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作者 黄燕华 刘澍 李言凤 《医学研究杂志》 2023年第4期83-88,97,共7页
目的 分析乳牙牙髓干细胞分化前后的外泌体中miRNA差异表达谱。方法 原代提取乳牙牙髓干细胞,在矿化诱导培养基中进行分化。超速离心法提纯外泌体并进行鉴定;利用miRNA基因芯片检测分化前后的外泌体中miRNA的表达谱,验证差异表达的miRNA... 目的 分析乳牙牙髓干细胞分化前后的外泌体中miRNA差异表达谱。方法 原代提取乳牙牙髓干细胞,在矿化诱导培养基中进行分化。超速离心法提纯外泌体并进行鉴定;利用miRNA基因芯片检测分化前后的外泌体中miRNA的表达谱,验证差异表达的miRNA,预测其靶基因,进行GO分析和KEGG通路的功能分析。结果 在未分化和分化的乳牙牙髓干细胞的外泌体中共发现215个差异表达的miRNA,最相关的KEGG通路为FoxO、Ras和MAPK等信号通路。GO分析包括多细胞生物的发育和结构形态发生的调控。结论 乳牙牙髓干细胞分化前后的外泌体miRNA可能会参加调控成牙本质向分化过程,为牙髓修复提供了理论依据。 展开更多
关键词 乳牙牙髓干细胞 成牙本质向分化 外泌体 微RNA
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iPSC-derived cranial neural crest-like cells can replicate dental pulp tissue with the aid of angiogenic hydrogel 被引量:2
5
作者 Yoshifumi Kobayashi Julie Nouet +5 位作者 Erdenechimeg Baljinnyam Zain Siddiqui Daniel HFine Diego Fraidenraich Vivek A.Kumar Emi Shimizu 《Bioactive Materials》 SCIE 2022年第8期290-301,共12页
The dental pulp has irreplaceable roles in maintaining healthy teeth and its regeneration is a primary aim of regenerative endodontics.This study aimed to replicate the characteristics of dental pulp tissue by using c... The dental pulp has irreplaceable roles in maintaining healthy teeth and its regeneration is a primary aim of regenerative endodontics.This study aimed to replicate the characteristics of dental pulp tissue by using cranial neural crest(CNC)-like cells(CNCLCs);these cells were generated by modifying several steps of a previously established method for deriving NC-like cells from induced pluripotent stem cells(iPSCs).CNC is the anterior region of the neural crest in vertebrate embryos,which contains the primordium of dental pulp cells or odontoblasts.The produced CNCLCs showed approximately 2.5-12,000-fold upregulations of major CNC marker genes.Furthermore,the CNCLCs exhibited remarkable odontoblastic differentiation ability,especially when treated with a combination of the fibroblast growth factors(FGFs)FGF4 and FGF9.The FGFs induced odontoblast marker genes by 1.7-5.0-fold,as compared to bone morphogenetic protein 4(BMP4)treatment.In a mouse subcutaneous implant model,the CNCLCs briefly fated with FGF4+FGF9 replicated dental pulp tissue characteristics,such as harboring odontoblast-like cells,a dentin-like layer,and vast neovascularization,induced by the angiogenic self-assembling peptide hydrogel(SAPH),SLan.SLan acts as a versatile biocompatible scaffold in the canal space.This study demonstrated a successful collaboration between regenerative medicine and SAPH technology. 展开更多
关键词 Regenerative endodontics IPSC Cranial neural crest Fibroblast growth factor odontoblastic differentiation Angiogenic self-assembling peptide hydrogel
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脂多糖改变牙髓干细胞的生物学特性 被引量:3
6
作者 刘影 高杰 吴补领 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第13期2028-2033,共6页
背景:龋病发生时,包括细菌在内的各种刺激沿牙本质小管传导至牙髓,牙髓组织中的牙髓干细胞受到刺激后增殖迁移至受损的牙本质下方,形成修复性牙本质以补充和修复受损组织。在此过程中,脂多糖作为细菌的主要毒力因子,是否可以影响牙髓干... 背景:龋病发生时,包括细菌在内的各种刺激沿牙本质小管传导至牙髓,牙髓组织中的牙髓干细胞受到刺激后增殖迁移至受损的牙本质下方,形成修复性牙本质以补充和修复受损组织。在此过程中,脂多糖作为细菌的主要毒力因子,是否可以影响牙髓干细胞增殖、迁移及成牙本质向分化等生物学行为,还有待研究。目的:观察脂多糖对牙髓干细胞增殖能力、迁移能力和成牙本质向分化能力的影响。方法:组织块酶消化法培养牙髓干细胞,给予0,0.1,1,10 mg/L脂多糖刺激后,采用MTT法检测牙髓干细胞增殖情况,划痕实验和Transwell实验检测牙髓干细胞的迁移能力;给予1 mg/L脂多糖和矿化诱导液刺激21 d后,茜素红染色检测细胞矿化结节形成能力,RT-PCR检测成牙本质相关基因的表达。结果与结论:①0.1,1,10 mg/L脂多糖组的吸光度值在第1,3,5,7天4个时间点均低于0 mg/L脂多糖组(P<0.01),迁移能力均高于0 mg/L脂多糖组;②牙髓干细胞矿化诱导21 d后,1 mg/L脂多糖刺激组所形成的矿化结节数量和面积明显小于0 mg/L脂多糖组(P<0.01),成牙本质相关基因OCN、BSP、ALP表达量显著低于0 mg/L脂多糖组(P<0.01);③结果表明,脂多糖刺激牙髓干细胞后其增殖能力和成牙本质向分化能力降低,迁移能力明显增强。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 脂多糖 细胞增殖 细胞迁移 成牙本质向分化
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牙髓干细胞分化的研究进展 被引量:2
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作者 苟文亭 叶玲 谭红 《国际口腔医学杂志》 CAS 2012年第3期380-383,共4页
牙髓干细胞(DPSC)是一种具有高度增生、自我更新能力和多相分化潜能的成体干细胞,在一定条件下可向特定的细胞类型分化,在牙髓修复和牙齿再生中发挥着重要的作用。本文主要就DPSC成骨向分化、成牙本质向分化的研究进展作一综述。
关键词 牙髓干细胞 成牙本质向分化 成骨向分化
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Cx43通过Erk1/2促进BMP-2诱导的人牙髓细胞成牙本质分化 被引量:1
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作者 丁灿灿 朱浩 +3 位作者 张安妮 何圆培 聂敏海 李适廷 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期659-664,共6页
目的:探讨骨形态发生蛋白(BMP)-2和连接蛋白(Cx) 43在促进人牙髓细胞(hDPCs)成牙本质分化过程中的联系。方法:在hDPCs中过表达Cx43并施以300 ng/m L BMP-2刺激1 h,qRT-PCR、Western blot和免疫荧光(IF)检测成牙本质分化标记物的表达变化... 目的:探讨骨形态发生蛋白(BMP)-2和连接蛋白(Cx) 43在促进人牙髓细胞(hDPCs)成牙本质分化过程中的联系。方法:在hDPCs中过表达Cx43并施以300 ng/m L BMP-2刺激1 h,qRT-PCR、Western blot和免疫荧光(IF)检测成牙本质分化标记物的表达变化;检测BMP-2介导的Smad1/5/9和Erk1/2通路活性,并施加PD98059(Erk1/2抑制剂)刺激1 h,检测抑制Erk1/2后过表达Cx43对BMP-2诱导的DSPP等的表达变化影响。结果:BMP-2上调hDPCs内osterix、DSPP、DMP-1、ALP和OCN RNA水平以及osterix蛋白表达,增强hDPCs中DSPP的荧光强度。过表达Cx43明显促进BMP-2诱导的hDPCs成牙本质分化。BMP-2激活hDPCs中的Smad1/5/9通路,过表达Cx43上调hDPCs中Erk1/2磷酸化水平。抑制Erk1/2明显减弱过表达Cx43对BMP-2诱导的osterix、DSPP、DMP-1、ALP、OCN mRNA表达以及osterix蛋白水平和DSPP染色强度的增强作用。结论:Cx43通过Erk1/2促进BMP-2诱导的osterix和DSPP等表达以及hDPCs成牙本质分化。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白-2 连接蛋白43 人牙髓细胞 成牙本质分化 ERK1/2
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MACF1参与小鼠牙乳头细胞成牙本质细胞向分化的研究 被引量:1
9
作者 佘雅维 肖紫秋 杨国斌 《临床口腔医学杂志》 2022年第2期67-70,共4页
目的:探究MACF1在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化中的作用。方法:免疫组化检测MACF1在不同发育时期小鼠磨牙胚中的表达情况。建立小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的模型,使用RT-qPCR和Western Blot检测MACF1在此过程的表达。使... 目的:探究MACF1在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化中的作用。方法:免疫组化检测MACF1在不同发育时期小鼠磨牙胚中的表达情况。建立小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的模型,使用RT-qPCR和Western Blot检测MACF1在此过程的表达。使用MACF siRNA抑制MACF1的表达,检测其对小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的影响。结果:MACF1在胚胎期16.5 d(E16.5)和出生后1 d(PN1)的小鼠磨牙胚中的牙乳头间充质细胞中有微弱表达,在成牙本质细胞层中大量表达。体外实验显示在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中,MACF1的表达上升。抑制细胞内MACF1的表达后,细胞内成牙本质细胞向分化的相关基因表达减少。结论:MACF1促进小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化。 展开更多
关键词 微管微丝交联因子1 成牙本质细胞向分化 牙乳头细胞
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硅酸钙类盖髓剂生物学性能的研究进展 被引量:2
10
作者 陈燕活 安少锋 高燕 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期459-464,共6页
随着牙髓生物学和生物材料学研究的进步,微创诊疗理念的普及,活髓保存治疗已成为牙髓病学的研究热点之一。盖髓剂的生物学性能是决定活髓保存治疗效果的关键因素,硅酸钙类水门汀是一类具有良好的理化性能和生物相容性的新型盖髓剂,能诱... 随着牙髓生物学和生物材料学研究的进步,微创诊疗理念的普及,活髓保存治疗已成为牙髓病学的研究热点之一。盖髓剂的生物学性能是决定活髓保存治疗效果的关键因素,硅酸钙类水门汀是一类具有良好的理化性能和生物相容性的新型盖髓剂,能诱导牙髓组织中具有分化潜能的细胞分化为成牙本质样细胞,促进修复性牙本质的形成,已广泛应用于活髓保存治疗,取得了良好的治疗效果。但其种类相对较多,且有大量相关基础和临床应用研究报道,因此本文将对目前常用的硅酸钙类盖髓剂的生物学性能进行综述,以期为临床合理应用提供参考。 展开更多
关键词 硅酸钙 盖髓剂 牙髓细胞 成牙本质向分化
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钙黏蛋白在地塞米松诱导的人牙髓细胞成牙本质向分化中的表达研究 被引量:2
11
作者 邓子龙 吴补领 +4 位作者 闫文娟 屈茜 陈明 吕晓琳 陈佳婧 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2016年第7期396-400,共5页
目的:探讨钙黏蛋白(cadherins)在地塞米松诱导的人牙髓细胞(HDPCs)成牙本质向分化过程中的作用。方法:酶消化法分离培养HDPCs,RT-PCR检测N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin在HDPCs中的表达;采用10-7mol/L地塞米松对第3代HDPCs进行处... 目的:探讨钙黏蛋白(cadherins)在地塞米松诱导的人牙髓细胞(HDPCs)成牙本质向分化过程中的作用。方法:酶消化法分离培养HDPCs,RT-PCR检测N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin在HDPCs中的表达;采用10-7mol/L地塞米松对第3代HDPCs进行处理,qRT-PCR检测成牙本质相关基因碱性磷酸酶(ALP)、牙本质基质蛋白-1(DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)和N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin表达水平的变化;茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果:N-cadherin、OB-cadherin、R-cadherin均表达于HDPCs。地塞米松显著上调ALP、DMP-1、DSPP、R-cadherin的表达水平,同时显著下调N-cadherin、OB-cadherin,矿化结节形成情况则无明显差异。结论:地塞米松可诱导HDPCs向成牙本质细胞分化,同时调节钙黏蛋白的表达,提示钙黏蛋白可能参与调控地塞米松对HDPCs成牙本质向分化的诱导过程。 展开更多
关键词 地塞米松 钙黏蛋白 人牙髓细胞(HDPCs) 成牙本质分化
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INI1在人牙髓细胞成牙本质细胞方向分化的调控作用研究 被引量:1
12
作者 韩娜娜 于飞 《临床口腔医学杂志》 2021年第7期387-390,共4页
目的:检测人牙髓细胞成牙本质细胞方向分化中INI1的表达规律,分析INI1对人牙髓细胞成牙本质细胞方向分化的调控作用。方法:利用分化诱导培养基诱导人牙髓细胞,构建牙髓细胞成牙本质细胞方向分化模型。通过Real-time PCR及Western Blot... 目的:检测人牙髓细胞成牙本质细胞方向分化中INI1的表达规律,分析INI1对人牙髓细胞成牙本质细胞方向分化的调控作用。方法:利用分化诱导培养基诱导人牙髓细胞,构建牙髓细胞成牙本质细胞方向分化模型。通过Real-time PCR及Western Blot检测该模型中INI1的表达规律。慢病毒介导的INI1-ShRNA载体感染人牙髓细胞敲减INI1表达后,通过茜素红染色,碱性磷酸酶活性染色,Real-time PCR检测分析敲减INI1对牙髓细胞成牙本质细胞方向分化的影响。结果:人牙髓细胞成牙本质细胞方向分化过程中,INI1升高表达;敲减INI1造成人牙髓细胞成牙本质细胞方向分化受到抑制。结论:INI1对人牙髓细胞成牙本质细胞方向分化有重要作用。 展开更多
关键词 INI1 人牙髓细胞 成牙本质细胞分化 RNA干扰
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PDGF-BB促进人牙髓间质细胞成牙本质分化的实验研究 被引量:1
13
作者 熊磊 唐祎 熊学鹏 《临床口腔医学杂志》 2015年第6期347-350,共4页
目的:检测PDGF-BB是否可促进人类牙髓细胞成牙本质分化过程。方法:体外原代培养牙髓细胞,将PDGF-BB作用于人类牙髓间质细胞,检测牙髓间质细胞在矿化诱导培养基的分化。利用实时定量PCR检测分化相关指标牙本质涎磷蛋白(DSPP)及牙本质基... 目的:检测PDGF-BB是否可促进人类牙髓细胞成牙本质分化过程。方法:体外原代培养牙髓细胞,将PDGF-BB作用于人类牙髓间质细胞,检测牙髓间质细胞在矿化诱导培养基的分化。利用实时定量PCR检测分化相关指标牙本质涎磷蛋白(DSPP)及牙本质基质蛋白1(DMP1)的表达水平。利用免疫印迹技术检测PDGF-BB处理后的人牙髓间质细胞胞内AKT信号分子的活化情况。结果:PDGF-BB可明显促进人类牙髓间质细胞矿化结节的形成。同时,利用实时定量PCR检测发现巨噬细胞上清处理的牙髓间质细胞的DSPP及DMP1表达明显上调。且牙髓间质细胞内的AKT磷酸化水平明显升高。结论:PDGF-BB可促进牙髓间质细胞的成牙本质分化,可能在牙本质形成过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 牙髓间质细胞 PDGF-BB 成牙本质分化 AKT
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微小RNA-1895参与小鼠牙乳头细胞成牙本质向分化的研究 被引量:1
14
作者 张皓 杨国斌 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期28-32,共5页
目的:研究微小RNA(miRNA,miR)-1895在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中的功能。方法:建立小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的模型,检测miR-1895在此过程中的表达。使用生物信息学分析miR-1895在Klf4 mRNA中的结合位点。向... 目的:研究微小RNA(miRNA,miR)-1895在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中的功能。方法:建立小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的模型,检测miR-1895在此过程中的表达。使用生物信息学分析miR-1895在Klf4 mRNA中的结合位点。向细胞内转染miR-1895 inhibitor,利用Western blot和Real-time PCR检测抑制miR-1895后,对小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的影响。结果:在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中miR-1895表达降低。Klf4 mRNA中存在miR-1895结合位点。抑制细胞内miR-1895表达后,细胞内成牙本质细胞相关基因表达增加。结论:在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化的过程中,miR-1895抑制细胞分化,可能参与分化调节过程。 展开更多
关键词 牙乳头细胞 成牙本质细胞向分化 微小RNA-1895
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MEPE基因沉默对人牙髓细胞增殖与成牙本质分化的作用研究 被引量:1
15
作者 王文静 《中华老年口腔医学杂志》 2013年第4期209-215,共7页
目的:研究细胞外基质磷酸化糖蛋白(Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein,MEPE)基因沉默对人牙髓细胞(Human Dental Pulp Cells,hDPCs)增殖和成牙本质分化能力的影响,探讨其在牙髓损伤修复中的功能。方法:酶消化组织块法分离培养hD... 目的:研究细胞外基质磷酸化糖蛋白(Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein,MEPE)基因沉默对人牙髓细胞(Human Dental Pulp Cells,hDPCs)增殖和成牙本质分化能力的影响,探讨其在牙髓损伤修复中的功能。方法:酶消化组织块法分离培养hDPCs,以lipo2000介导siRNA-hMEPE转染hDPCs,以阴性对照组和未转染组设为对照,1、3、5、7d后,CCK-8法检测细胞增殖情况;转染hDPCs后以矿化诱导液培养5、7、10d后,实时荧光定量RT-PCR检测骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、牙本质涎磷蛋白(Dentin Sialoph osph oprotein,DSPP)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、Collagen I mRNA表达水平。结果:CCK-8结果显示Si-h-MEPE转染h DPCs 1d后OD值下降,3d时到达最低值,且均低于未转染组与阴性对照组,3d时差异有统计学差异(P<0.05),未转染组与阴性对照组中,OD值持续升高,7d时到达峰值,与各自组内其他时间点比较有统计学差异(P<0.05);ALP活性检测结果显示,Si-h-MEPE转染hDPCs 3d细胞OD值最低,且明显低于未转染组与阴性对照组(P<0.05),未转染组与阴性对照组hDPCs OD值呈现逐渐升高趋势,在7d时达到最大值(P<0.05)。Si-h-MEPE转染h DPCs 3d时BSP、DSPP、OCN、Collagen I mRNA的表达量均较未转染组与阴性对照组下调(P<0.05)。在未转染组中,BSP、DSPP、OCN、Collagen I mRNA水平持续升高,在7d时达最高值,与3d比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MEPE基因瞬时沉默抑制h DPCs增殖、使BSP、DSPP、OCN、Collagen I基因表达下调,ALP活性降低,与未转染组与阴性对照组比较结果提示MEPE可能通过调控h DPCs的增殖和成牙本质分化能力,在牙髓损伤修复中发挥重要作用。 展开更多
关键词 人牙髓细胞 成牙本质分化 重组人细胞外基质磷酸化糖蛋白
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腺苷三磷酸诱导人牙髓细胞成牙本质向分化的实验研究
16
作者 易小松 李雨舟 +1 位作者 莫思怡 谢秋菲 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期394-394,395-401,共8页
目的通过筛选能成功诱导人牙髓细胞(human dental pulp cell,HDPC)向成牙本质细胞样细胞分化的腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)的有效浓度,探讨体内诱导HDPC进行牙本质再生的ATP适宜浓度。方法用0(对照组)、10、400、600、800μ... 目的通过筛选能成功诱导人牙髓细胞(human dental pulp cell,HDPC)向成牙本质细胞样细胞分化的腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)的有效浓度,探讨体内诱导HDPC进行牙本质再生的ATP适宜浓度。方法用0(对照组)、10、400、600、800μmol/L ATP处理HDPC后,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法分别检测HDPC增殖以及成牙本质分化相关基因和蛋白[牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)]的表达;用茜素红染色评估诱导21 d后矿化结节情况(各组样本量均为5),并溶解矿化结节后定量分析各组溶液吸光度值(A值)。筛选既能有效诱导HDPC成牙本质向分化,又能降低ATP对HDPC增殖抑制作用的浓度作为ATP的适宜浓度,并选用此浓度进行动物体内实验。HDPC经此浓度ATP预处理7 d后接种于明胶海绵上,并置入6~7 mm长、管径1.0~2.5 mm的人牙根管片段内(ATP处理组,样本量为8);非ATP处理组的明胶海绵接种未经ATP预处理的HDPC(样本量为8),空白对照组的明胶海绵未接种细胞(样本量为2)。各组根管片段移植于免疫缺陷鼠(9只)背部双侧皮下,3个月后取材进行HE染色和组织学观察。结果培养5 d时与对照组相比,10μmol/L ATP组HDPC增殖显著增加(P<0.05),而600和800μmol/L ATP组HDPC增殖显著减小(P<0.05),且800μmol/L ATP组HDPC增殖显著小于600μmol/L ATP组(P<0.05)。与对照组相比,600和800μmol/L ATP组DMP1、DSPP的基因和蛋白表达均显著上调(P<0.05),且两组间差异无统计学意义(P>0.05),而其他各组DMP1、DSPP的基因和蛋白表达均无显著上调(P>0.05)。诱导21 d后600和800μmol/L ATP组均可见明显的矿化结节,其他组均未见矿化结节;定量分析显示0、10、400、600、800μmol/L ATP组A值分别为1.05±0.15、1.11±0.23、1.15±0.17、3.65±0.30、3.40±0.43,600与800μmol/L ATP组A值 展开更多
关键词 腺苷三磷酸 牙髓 细胞分化 成牙本质向分化
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非编码RNA在牙源性干细胞成牙本质向分化中作用的研究进展
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作者 张凯莹 房付春 吴补领 《国际口腔医学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期540-545,共6页
牙源性干细胞是从口腔组织中分离出来的成体干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能。成牙本质向分化作为产生修复性牙本质的重要防御反应,其过程涉及一系列转录及转录后的基因表达调控。多项研究证实非编码RNA(ncRNA)在牙源性干细胞特别... 牙源性干细胞是从口腔组织中分离出来的成体干细胞,具有自我更新和多向分化的潜能。成牙本质向分化作为产生修复性牙本质的重要防御反应,其过程涉及一系列转录及转录后的基因表达调控。多项研究证实非编码RNA(ncRNA)在牙源性干细胞特别是牙髓干细胞成牙本质向分化过程中发挥了重要作用,是细胞分化的重要调控靶点,以维持细胞分化特性。新研究技术体系的建立使得ncRNA的调控机制得以进一步阐明。本文从功能、调控的靶基因及通路等方面,对目前ncRNA在牙源性干细胞成牙本质向分化过程中的相关研究进行综述。 展开更多
关键词 牙源性干细胞 成牙本质向分化 非编码RNA
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miR-135b和miR-335在不同年龄人牙髓细胞成牙本质向分化中的差异表达
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作者 廖文灿 蒋宏伟 凌均棨 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2013年第2期4-7,共4页
目的探讨不同年龄阶段人牙髓细胞(HDPCs)在矿化诱导前后miR-135b和miR-335的表达变化,及其在HDPCs分化中的作用。方法提取青年(18~22岁)及中年(46~48岁)临床就诊患者第三磨牙的HDPCs,经体外培养至第3代后,用矿化诱导液诱导细胞向成牙... 目的探讨不同年龄阶段人牙髓细胞(HDPCs)在矿化诱导前后miR-135b和miR-335的表达变化,及其在HDPCs分化中的作用。方法提取青年(18~22岁)及中年(46~48岁)临床就诊患者第三磨牙的HDPCs,经体外培养至第3代后,用矿化诱导液诱导细胞向成牙本质细胞方向分化,对细胞结节形成情况进行观察并用VonKossa染色、碱性磷酸酶检测确定HDPCs分化情况,分别取培养0、7、14、21和28d的细胞用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-135b和miR-335的表达变化。结果青年组HDPCs中miR-135b和miR-335显著高于中年组(P<0.05);经矿化诱导后,青年组miR-135b和miR-335表达逐渐降低(P<0.05),而中年组miR-135b表达上升,miR-335表达则维持在低水平。结论 miR-135b和miR-335在不同年龄阶段HDPCs中差异表达,可能在HDPCs成牙本质向分化中具有重要作用。 展开更多
关键词 牙髓细胞 成牙本质向分化 微小RNA miR-135b miR-335
原文传递
小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中环状RNA的表达谱研究 被引量:4
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作者 占云燕 张皓 +1 位作者 杨国斌 樊明文 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第4期371-374,共4页
目的:探讨环状RNA(circle RNA,circRNA)在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化前后的表达差异,研究circRNA在成牙本质细胞发育过程中发挥的作用。方法:利用circRNA芯片技术检测矿化诱导组与未矿化组原代小鼠牙乳头细胞的circRNA表达谱,... 目的:探讨环状RNA(circle RNA,circRNA)在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化前后的表达差异,研究circRNA在成牙本质细胞发育过程中发挥的作用。方法:利用circRNA芯片技术检测矿化诱导组与未矿化组原代小鼠牙乳头细胞的circRNA表达谱,经过对原始数据进行预处理,均一化后,找出差异表达的circRNA。根据表达差异倍数较高和样本间一致性较好的原则筛选circRNA。结果:与未矿化组相比,矿化诱导组小鼠牙乳头细胞中2倍以上表达,并且差异具有统计学意义(P≤0.01)的circRNA定义为差异表达的circRNA。在经矿化诱导的牙乳头细胞中,差异表达circRNA共4064条,其中上调表达3255条,下调表达809条。结论:circRNA芯片可用于筛选牙乳头细胞向成牙本质细胞分化过程中差异表达的circRNA,在小鼠牙乳头细胞向成牙本质细胞向分化过程中,circRNA表达谱发生了显著变化,说明circRNA在成牙本质细胞发育过程中发挥着重要的调控作用。 展开更多
关键词 成牙本质细胞向分化 环状RNA 环状RNA芯片
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多能性转录因子Nanog在体外培养牙髓细胞中的表达 被引量:1
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作者 宁艳洋 徐琼 +1 位作者 王彤 张德茜 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第6期362-365,共4页
目的:研究多能性转录因子Nanog在人牙髓细胞连续培养时的表达规律及矿化诱导对其表达量的影响。方法:体外培养人牙髓细胞(DPCs),并对第3代DPCs进行矿化诱导;分别采用实时定量荧光PCR和Westernblot检测P1至P7代以及矿化诱导前后DPCs中Nan... 目的:研究多能性转录因子Nanog在人牙髓细胞连续培养时的表达规律及矿化诱导对其表达量的影响。方法:体外培养人牙髓细胞(DPCs),并对第3代DPCs进行矿化诱导;分别采用实时定量荧光PCR和Westernblot检测P1至P7代以及矿化诱导前后DPCs中Nanog mRNA及蛋白的表达变化情况。数据经统计学分析。结果:在DPCs的体外传代培养中,Nanog mRNA和蛋白表达量均呈下降趋势(P<0.05);矿化诱导后Nanog mRNA和蛋白表达量与对照组相比明显降低(P<0.05)。结论:在牙髓细胞体外连续培养环境下,随着代数增加,Nanog表达量呈下降趋势;矿化诱导可降低Nanog的表达。 展开更多
关键词 牙髓细胞 NANOG 体外培养 矿化诱导
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