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内皮素受体反义寡聚核苷酸对内皮素受体基因表达及血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量:5
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作者 胡静 温进坤 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第2期157-160,共4页
关键词 心脏血管疾病 血管平滑肌细胞 内皮素受体
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NF-κB靶向性哑铃形“圈套”ODNs抑制大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧后TNF-α的表达 被引量:3
2
作者 何兰英 罗勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期318-321,共4页
目的设计合成靶向哑铃形寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)圈套,检测其对大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后TNF-α表达的抑制效应。方法原代大脑皮质神经元体外培养,建立氧糖剥夺/复氧模型,以正常组、OGD4h/R6h组、NF-κB d... 目的设计合成靶向哑铃形寡核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODNs)圈套,检测其对大鼠大脑皮质神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)后TNF-α表达的抑制效应。方法原代大脑皮质神经元体外培养,建立氧糖剥夺/复氧模型,以正常组、OGD4h/R6h组、NF-κB decoy ODNs组、无关decoy ODNs组、脂质体组为实验组,采用Western blot检测NF-κB p65蛋白表达,分别采用免疫细胞化学和逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测TNF-α蛋白和mRNA表达。结果Westernblot检测显示NF-κB decoy ODNs组NF-κB P65蛋白表达明显低于OGD4h/R6h组、脂质体组、无关decoy ODNs组(P<0.05),与OGD4h/R6h组、脂质体组、无关decoy组相比NF-κB decoy ODNs组TNF-α蛋白和mRNA表达明显降低(P<0.05);而脂质体组、无关decoy ODNs组对NF-κB P65蛋白、TNF-α蛋白和mRNA表达未见抑制(P>0.05)。结论靶向性NF-κB的哑铃形圈套ODNs可有效抑制大脑皮质神经元OGD/R后炎症因子TNF-αmRNA及蛋白的表达。 展开更多
关键词 NF-ΚB DECOY odns 大脑皮质神经元 氧糖剥夺/复氧 肿瘤坏死因子-Α
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CpG寡脱氧核苷酸触发中华绒螯蟹酚氧化酶原系统信号传导途径的研究
3
作者 李红霞 俞菊华 +1 位作者 李义 徐跑 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期122-131,共10页
为探讨CpG寡脱氧核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotides,CpG-ODN)激活中华绒螯蟹血细胞酚氧化酶原系统(prophenoloxidase system,proPO系统)的信号传导途径,使用一定剂量的CpGODN-1670、ODN-R以及几种细胞信号传导的激活剂或抑制剂体外处理... 为探讨CpG寡脱氧核苷酸(CpG-oligodeoxynucleotides,CpG-ODN)激活中华绒螯蟹血细胞酚氧化酶原系统(prophenoloxidase system,proPO系统)的信号传导途径,使用一定剂量的CpGODN-1670、ODN-R以及几种细胞信号传导的激活剂或抑制剂体外处理中华绒螯蟹血细胞,通过检测胞内外酚氧化酶(PO)活性的变化,对CpG ODN触发proPO激活系统的信号传导途径进行评价。结果显示,ODN-1670与ODN-R均可触发蟹血细胞proPO激活系统,试验剂量的ODN-1670可促进血细胞内外已有的proPO转化为PO,而对proPO颗粒的释放具有一定的抑制作用;ODN-R则不仅可使proPO转化为PO,还可促进血细胞脱颗粒。两者的信号传导途径相似,可能都包含了G-蛋白介导的蛋白激酶C(PKC)途径,酪氨酸蛋白激酶(RTK)途径对ODN-1670的触发proPO激活系统的活化过程进行负调控。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 CPG odns 酚氧化酶原激活系统 信号传导
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IL-6相关转录因子在急性髓系白血病细胞中的激活水平及生物学意义
4
作者 张纪岩 沈倍奋 +2 位作者 黎燕 任蕴芳 孙英勋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期449-452,共4页
目的 :探讨IL 6对急性髓系白血病 (AML)细胞产生生物学效应的信号转导基础。方法 :测定IL 6对M1,R2 ,K5 6 2 ,TF1细胞生长的影响 ,并采用凝胶阻滞电泳 (Electrophoresismobilityshiftassay ,EMSA)的方法分析IL 6对这些AML细胞信号转导... 目的 :探讨IL 6对急性髓系白血病 (AML)细胞产生生物学效应的信号转导基础。方法 :测定IL 6对M1,R2 ,K5 6 2 ,TF1细胞生长的影响 ,并采用凝胶阻滞电泳 (Electrophoresismobilityshiftassay ,EMSA)的方法分析IL 6对这些AML细胞信号转导子与转录激活子 3(Signaltransducerandactivatoroftranscription 3 ,STAT3)与核因子介素 6 (nuclearfactor IL6 ,NF IL6 )的激活情况。在此基础上 ,运用STAT3、NF IL6反义寡核苷酸 (ASODNs)阻断或减弱IL 6在M1细胞中对STAT3与NF IL6的激活 ,检测ASODNs对IL 6诱导的M1细胞生长停止效应的影响。结果 :NF IL6在所有AML细胞中均有组成型激活 ,而STAT3仅在R2、K5 6 2细胞中有弱的组成型激活。STAT3ASODN可部分拮抗IL 6对M1细胞的抑制 ,而NF IL6ASODN可加强IL 6对M1细胞的抑制。结论 :STAT3在AML细胞中可能负调控细胞生长 ,而NF IL6很可能与细胞生存。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 IL-6 STAT3 NF-IL6 AS odns
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c-myc反义寡核苷酸对缺氧内皮细胞条件培养液刺激的肺血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量:1
5
作者 陶清国 张珍祥 《中华结核和呼吸杂志》 CSCD 北大核心 1998年第3期157-159,共3页
目的探讨c-myc反义寡核苷酸(ODNs)对缺氧内皮细胞条件培养液(HECCM)刺激的肺血管平滑肌细胞(SMC)增殖的影响。方法制备HECCM,用其刺激肺动脉SMC后,Northern杂交分析c-myc基因表达,3H... 目的探讨c-myc反义寡核苷酸(ODNs)对缺氧内皮细胞条件培养液(HECCM)刺激的肺血管平滑肌细胞(SMC)增殖的影响。方法制备HECCM,用其刺激肺动脉SMC后,Northern杂交分析c-myc基因表达,3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入试验及细胞生长计数分析SMC增殖情况。结果HECCM显著刺激SMC增殖及c-myc基因表达增强,反义ODNs显著下调HECCM刺激的c-myc表达,显著抑制HECCM刺激的SMC增殖。同义ODNs无上述作用。结论HECCM可能通过刺激SMC之c-myc表达而使SMC增殖,反义ODNs通过下调c-mycmRNA表达而抑制HEC-CM刺激的SMC增殖。 展开更多
关键词 肺血管 平滑肌细胞增殖 c-myc odns 肺动脉高压
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CpG ODNs抗感染免疫作用研究进展 被引量:2
6
作者 申玉芹 孙新华 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1439-1440,共2页
关键词 CPG odns Toll样受体(TLRs) 免疫 感染
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脂质体-C-erbB2反义脱氧寡核苷酸对人卵巢癌裸鼠网膜移植瘤生长及化疗药物敏感性的影响
7
作者 沈梅 丰有吉 +1 位作者 周先荣 姚明 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期110-112,I005,共3页
目的探讨脂质体CerbB2反义脱氧寡核苷酸(CerbB2SODNs)对人卵巢癌裸鼠网膜移植瘤生长及顺铂(DDP)敏感性的影响。方法对20只裸鼠建立人卵巢癌裸鼠网膜移植瘤模型,分为对照组(腹腔注射无菌水)、观察... 目的探讨脂质体CerbB2反义脱氧寡核苷酸(CerbB2SODNs)对人卵巢癌裸鼠网膜移植瘤生长及顺铂(DDP)敏感性的影响。方法对20只裸鼠建立人卵巢癌裸鼠网膜移植瘤模型,分为对照组(腹腔注射无菌水)、观察组(腹腔注射脂质体CerbB2SODNs)、化疗组(腹腔注射无菌水及DDP)、观察+化疗组(腹腔注射脂质体CerbB2SODNs及DDP)。治疗期间观测裸鼠体重变化,治疗结束后取瘤体称重进行电镜观察。结果观察组抑瘤率为37%,电镜下可见细胞异染色质增多,线粒体退化。观察+化疗组抑瘤率可达50%。观察组裸鼠体重无明显改变。结论CerbB2反义基因治疗在卵巢癌基因治疗中有一定作用,与化疗联合应用可以取得更好的治疗效果。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 C-ERBB2 S-odns 动物模型 药敏试验
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Livin mRNA的反义核酸诱导MCF-7乳癌细胞凋亡作用(英文) 被引量:14
8
作者 张华东 袁守军 +2 位作者 陈惠鹏 田增月 韩昌明 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2004年第12期1353-1356,共4页
目的 :以livinmRNA为靶点设计反义硫代脱氧寡核苷酸 (PS ODNs) ,探讨其体外抗肿瘤效应及其机制。方法 :设计以livinmRNA为靶点的反义核酸并作用于MCF 7乳癌细胞 ,用MTT、RT PCR和流式细胞仪检测等方法对其进行评价研究。结果 :在设计的... 目的 :以livinmRNA为靶点设计反义硫代脱氧寡核苷酸 (PS ODNs) ,探讨其体外抗肿瘤效应及其机制。方法 :设计以livinmRNA为靶点的反义核酸并作用于MCF 7乳癌细胞 ,用MTT、RT PCR和流式细胞仪检测等方法对其进行评价研究。结果 :在设计的一些反义核酸中 ,YMZ0 5能够有效地抑制livin基因的表达 ,增加caspase 3的活性 ,诱导MCF 7细胞凋亡 ,明显抑制其生长 ,结论 :通过抑制livin基因的表达能够抑制MCF 7乳癌细胞生长、诱导其凋亡 ,livin可能会成为抗肿瘤的新靶点。 展开更多
关键词 反义 磷酰硫代脱氧寡核苷酸 LIVIN MRNA MCF-7细胞 细胞凋亡
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CpG-ODNs对慢性哮喘小鼠气道重塑的影响及机制 被引量:5
9
作者 方萍 吴晓明 +5 位作者 周筠 李满祥 史红阳 张永红 卢家美 张明 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期58-63,共6页
目的探讨疫苗佐剂CpG-ODNs对慢性哮喘气道重塑的影响及机制。方法采用卵蛋白(OVA)致敏并激发制备哮喘小鼠气道重塑动物模型,给予CpG-ODNs、GpC-ODNs干预,与生理盐水对照组、哮喘气道重塑模型组比较,观察其对哮喘气道重塑病理、肺泡灌洗... 目的探讨疫苗佐剂CpG-ODNs对慢性哮喘气道重塑的影响及机制。方法采用卵蛋白(OVA)致敏并激发制备哮喘小鼠气道重塑动物模型,给予CpG-ODNs、GpC-ODNs干预,与生理盐水对照组、哮喘气道重塑模型组比较,观察其对哮喘气道重塑病理、肺泡灌洗液白细胞分类计数、细胞因子以及外周血免疫球蛋白的影响。结果模型组小鼠可见气道壁炎症细胞浸润、上皮下胶原沉着、平滑肌增殖和杯状细胞增生等慢性哮喘气道重塑的病理改变,血清OVA特异性IgE上升明显(P<0.01),支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸粒细胞及IL-4升高(P<0.01),CpG-ODNs部分抑制了上述病理过程(P<0.05),同时轻度升高IFN-γ及IL-10。GpC-ODNs对上述过程无明显影响。结论 CpG-ODNs能够通过上调Th1/Th2比例以及诱导调节性T细胞(Treg细胞)介导的免疫耐受,发挥对慢性哮喘气道重塑的防治作用。 展开更多
关键词 CpG-odns 哮喘 气道重塑 免疫耐受 TH1/TH2
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CpG-ODNs疫苗佐剂的研究进展 被引量:3
10
作者 许洪林 杨春亭 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期36-43,51,共9页
CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODNs)是一种新型免疫增强剂,大量动物实验和临床研究表明其在感染、肿瘤和过敏等疾病的预防和治疗等领域具有良好的应用前景。到目前为止,数10种含有CpGODNs的药物和疫苗进入人体临床研究,至少有1种药物和4种疫... CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODNs)是一种新型免疫增强剂,大量动物实验和临床研究表明其在感染、肿瘤和过敏等疾病的预防和治疗等领域具有良好的应用前景。到目前为止,数10种含有CpGODNs的药物和疫苗进入人体临床研究,至少有1种药物和4种疫苗已进入或完成III期临床研究。本文主要从CpG-ODNs免疫刺激活性的研究历程、CpG-ODNs免疫刺激活性的复杂性、CpG-ODNs疫苗佐剂的临床前以及临床研究等方面介绍CpG-ODNs作为人用疫苗佐剂的研究进展。 展开更多
关键词 CPG基序 CpG—odns 疫苗佐剂
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CpG ODNs的免疫活性作用与肿瘤治疗的研究进展 被引量:3
11
作者 颜伟 孙梯业 周红 《西南国防医药》 CAS 2006年第4期458-461,共4页
关键词 CPG基序 CPG odns免疫活性 免疫治疗 肿瘤治疗
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低pH毛细管区带电泳法分离寡核苷酸和硫代反义寡核苷酸 被引量:2
12
作者 李茜 陈蓉 +1 位作者 孙毓庆 胡育筑 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期101-106,共6页
在低pH条件下采用毛细管区带电泳法对寡核苷酸(PO-ODNs)及具有药用价值的硫代反义寡核苷酸(PS-ODNs)药物“癌泰得”系列样品(18~20mers)进行分离,并系统考察优化了缓冲溶液的pH、缓冲溶液的种类及浓度、添加剂的种类及浓度、电... 在低pH条件下采用毛细管区带电泳法对寡核苷酸(PO-ODNs)及具有药用价值的硫代反义寡核苷酸(PS-ODNs)药物“癌泰得”系列样品(18~20mers)进行分离,并系统考察优化了缓冲溶液的pH、缓冲溶液的种类及浓度、添加剂的种类及浓度、电压、温度等因素对样品单碱基分离的影响。其中缓冲溶液的pH对分离起决定性的作用,而添加剂尿素的加入显著提高了PS-ODNs样品的分离度。结果表明,采用末涂层弹性石英毛细管(50μm,总长49.0cm,有效长度40.7cm),以50mmol/L磷酸二氢钠-磷酸(pH2.24)-7 mol/L尿素为缓冲溶液,压力进样(2kPa×10s),负极进样,正极检测,在分离电压-20kV、柱温25℃、检测波长260nm条件下,可实现寡核岢酸及硫代反义寡核苷酸混合样品的单碱基分离。PO—ODNs的18~19mers及19~20mers样品的平均分离度分别为4.68,3.20;PS—ODNs的18~19mers及19~20mers样品的平均分离度分别为1.23及0.81.该法操作简单,重现性好,可为反义寡核苷酸药物的分析提供借鉴. 展开更多
关键词 低PH 毛细管区带电泳法 寡核苷酸 硫代反义寡核苷酸
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靶向转录因子STAT3的Decoy核苷酸对膀胱癌细胞体外增殖的抑制作用 被引量:2
13
作者 王淑芬 包建玲 +1 位作者 张须龙 张建 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第2期88-92,共5页
目的:研究核转录因子STAT3的诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)对人膀胱癌细胞系增殖的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:采用阳离子聚合物Sofast为转染试剂将STAT3 decoy ODNs转染入膀胱癌T24及5637细胞;用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞... 目的:研究核转录因子STAT3的诱骗寡核苷酸(decoy ODNs)对人膀胱癌细胞系增殖的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:采用阳离子聚合物Sofast为转染试剂将STAT3 decoy ODNs转染入膀胱癌T24及5637细胞;用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测ODNs的转染效率;荧光显微镜检测ODNs入核情况;RT-PCR及Western blot检测转染ODNs前后bcl-xl、cyclinD1和c-myc表达水平的变化。结果:ODNs可有效地转染至细胞内,部分可进入核内,转染效率呈剂量依赖关系;STAT3 decoy ODNs可抑制膀胱癌细胞的增殖,100 nmol/L组抑制率最明显,达40%~48%;100 nmol/L decoy ODNs明显抑制bcl-xl、cyclinD1和c-myc mRNA及蛋白的表达水平。结论:STAT3 decoy ODNs可显著抑制膀胱癌细胞的增殖。其作用机制可能是通过下调癌基因c-myc、细胞周期基因cyclinD1及凋亡相关基因bcl-xl的基因转录及蛋白表达而实现的。 展开更多
关键词 STAT3 诱骗寡核苷酸 BCL-XL CYCLINDL c-myc 膀胱癌
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计算机辅助设计抗肿瘤凋亡基因livin的反义核酸 被引量:4
14
作者 张华东 袁守军 陈惠鹏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第7期750-754,共5页
目的:研究利用计算机辅助设计抗肿瘤细胞凋亡基因livinmRNA的反义核酸。方法:利用RNAdraw和Sfold两种软件进行livinmRNA反义核酸的二级结构预测,并转染肿瘤细胞HeLa,诱导细胞凋亡。结果:用这种方法设计出5个反义核酸,它们能够有效地抑... 目的:研究利用计算机辅助设计抗肿瘤细胞凋亡基因livinmRNA的反义核酸。方法:利用RNAdraw和Sfold两种软件进行livinmRNA反义核酸的二级结构预测,并转染肿瘤细胞HeLa,诱导细胞凋亡。结果:用这种方法设计出5个反义核酸,它们能够有效地抑制肿瘤细胞HeLa的生长,促进其凋亡。结论:利用这两种计算机软件设计livinmRNA反义核酸是可行的,能够有效的促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 MRNA二级结构 RNAdraw Sfold LIVIN 反义核酸
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核酸治疗的靶向性传递 被引量:1
15
作者 张涛 王承宇 +4 位作者 张伟 杨松涛 高玉伟 王铁成 夏咸柱 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第3期62-66,共5页
寡核苷酸包括反义核酸和干扰RNA等,它们能够为多种疾病提供快速、特异性的治疗,具有很高的应用潜力。然而这些分子能否有效地传递到特定的细胞和组织对于最终的临床应用非常关键。靶向性的传递能够提高寡核苷酸药物的特异性和使用效率,... 寡核苷酸包括反义核酸和干扰RNA等,它们能够为多种疾病提供快速、特异性的治疗,具有很高的应用潜力。然而这些分子能否有效地传递到特定的细胞和组织对于最终的临床应用非常关键。靶向性的传递能够提高寡核苷酸药物的特异性和使用效率,使药物分子能有效到达作用位点,进而发挥它们的治疗效果。一些基于不同平台的靶向性配体传递策略已经形成,并能够很好的发挥其生物学活性。本文针对当前该研究领域的进展提供一个概述。 展开更多
关键词 AS-odns SIRNA 靶向性传递
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圈套ODNs影响IL-10表达的实验研究
16
作者 国华 孙磊 胡宏伟 《泰山医学院学报》 CAS 2006年第7期610-613,共4页
目的本实验设计合成靶向核因子κB(NF-κB)的哑铃形圈套寡核苷酸(ODNs),并验证其对白介素10(IL-10)的作用。方法以阳离子脂质体为载体,将圈套ODNs转染大鼠pMф细胞6h后用LPS(10μg/m l)刺激,用ELISA法及RT-PCR法测圈套ODNs对IL-10在蛋白... 目的本实验设计合成靶向核因子κB(NF-κB)的哑铃形圈套寡核苷酸(ODNs),并验证其对白介素10(IL-10)的作用。方法以阳离子脂质体为载体,将圈套ODNs转染大鼠pMф细胞6h后用LPS(10μg/m l)刺激,用ELISA法及RT-PCR法测圈套ODNs对IL-10在蛋白及mRNA水平的影响。结果哑铃形圈套ODNs可降低在IL-10mRNA及蛋白水平的表达。结论靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs具有抗IL-10的作用。 展开更多
关键词 NF-KB 圈套odns IL-10
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反义寡聚核苷酸抗柯萨奇病毒感染的研究 被引量:4
17
作者 孙红妹 刘哲伟 张霆 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期295-297,共3页
目的 针对柯萨奇病毒 3型 (CVB3)基因组重要功能区设计系列反义寡聚核苷酸序列 ,通过实验观察特异性反义核酸对病毒感染细胞的抑制作用。方法 通过病毒空斑形成试验及致细胞病变作用 ,了解反义核酸抑制及阻断CVB3 病毒感染细胞的能... 目的 针对柯萨奇病毒 3型 (CVB3)基因组重要功能区设计系列反义寡聚核苷酸序列 ,通过实验观察特异性反义核酸对病毒感染细胞的抑制作用。方法 通过病毒空斑形成试验及致细胞病变作用 ,了解反义核酸抑制及阻断CVB3 病毒感染细胞的能力。结果 实验所设计的反义核酸中SCB1对感染HeLa细胞的CVB3 病毒活性抑制作用较强 ,当病毒感染量为 1MOI时 ,病毒活性抑制率高达 90 % ;SCB4 和SCB2 均为 75 % ;SCB6有 5 0 %抑制作用 ;而SCB3 和SCB5以及非特异性对照序列对CVB3病毒基因基本没有任何作用。结论 通过以上实验确定SCB1、SCB2 、SCB4 等较好的抗病毒反义核酸序列 。 展开更多
关键词 反义寡聚核苷酸 柯萨奇病毒 HELA细胞
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NF-κB靶向性哑铃形圈套寡核苷酸抑制肾小球系膜细胞TGF-β_1的表达 被引量:4
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作者 张建国 王惠民 +2 位作者 国华 郝天智 杨文军 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第14期1266-1269,共4页
目的 :设计合成靶向NF κB的哑铃形圈套ODNs,并检测其对NF κB转录活性和肾小球系膜细胞TGF β1 表达的抑制效应 .方法 :采用电泳迁移率改变实验 (EMSA)体外检测哑铃形圈套ODNs对NF κB转录活性的抑制效应 .提取大鼠肾小球系膜细胞 ,随... 目的 :设计合成靶向NF κB的哑铃形圈套ODNs,并检测其对NF κB转录活性和肾小球系膜细胞TGF β1 表达的抑制效应 .方法 :采用电泳迁移率改变实验 (EMSA)体外检测哑铃形圈套ODNs对NF κB转录活性的抑制效应 .提取大鼠肾小球系膜细胞 ,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组 .采用阳离子脂质体将 2 ,4 ,8mg/L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞 ,6h后用LPS刺激 ,收集转染后 8,1 2 ,1 8h上清和细胞 .用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法检测上清TGF β1 蛋白表达 ,逆转录PCR(RT PCR)法检测TGF β1 mR NA转录 .结果 :哑铃形圈套ODNs在体外能有效地抑制NF κB与其顺式元件的结合 ;4 ,8mg/L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TGF β1 转录和表达 .结论 :靶向NF κB的哑铃形圈套ODNs在体外可抑制NF κB的转录活性 ,从而对体外培养的肾小球系膜细胞炎性因子TGF β1 展开更多
关键词 NF-ΚB 哑铃形圈套odns 转化生长因子Β
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NF-κB靶向性哑铃形“圈套”寡核苷酸对体外肾小球系膜细胞细胞因子表达的影响
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作者 张建国 王惠民 +2 位作者 国华 郝天智 杨文军 《实用医学杂志》 CAS 2005年第12期1257-1260,共4页
目的:设计合成靶向NF-κB的哑铃形“圈套”ODNs,并检测其对NF-κB转录活性和肾小球系膜细胞细胞因子(TNF-α和IL-6)表达的抑制效应。方法:以NF-κB顺式作用元件κB序列为模板,设计包含两个拷贝的κB序列,长度为58个碱基的环状ODNS,合成... 目的:设计合成靶向NF-κB的哑铃形“圈套”ODNs,并检测其对NF-κB转录活性和肾小球系膜细胞细胞因子(TNF-α和IL-6)表达的抑制效应。方法:以NF-κB顺式作用元件κB序列为模板,设计包含两个拷贝的κB序列,长度为58个碱基的环状ODNS,合成后部分序列做FAM标记,行转集效率鉴定实验。采用电泳迁移率改变实验(EMSA)体外检测哑铃形圈套ODNs对NF-κB转录活性的抑制效应。提取大鼠肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套ODNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理组。采用阳离子脂质体将2、4、8mg/L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞,6h后用LPS刺激,收集转染后8、12、18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清细胞因子蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)法检测细胞因子mRNA转录。结果:阳离子脂质体可将哑铃形圈套ODNs高效转集入肾小球系膜细胞,哑铃形圈套ODNs在体外能有效地抑制NF-κB与其顺式元件的结合;4、8mg/L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TNF-α和IL-6转录与表达。结论:靶向NF-κB的哑铃形圈套ODNs在体外可抑制NF-κB的转录活性,从而对体外培养的肾小球系膜细胞细胞因子的表达具有抑制效应。 展开更多
关键词 肾小球系膜细胞 NF-kB 哑铃形 细胞因子表达 酶联免疫吸附试验(ELISA) 寡核苷酸 圈套odns 靶向性 阳离子脂质体 TNF-α 抑制效应 转录活性 顺式作用元件 MRNA转录 电泳迁移率 正常对照组 LPS诱导 设计合成 odns 体外检测
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Effect of decoy-oligodeoxynucleotides on expression of inflammation mediators in pMΦ cells from rats 被引量:3
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作者 国华 梁华平 +5 位作者 吕凤林 徐祥 安兵 郝天智 王付龙 杨文军 《Chinese Journal of Traumatology》 CAS 2003年第6期363-369,共7页
Objective: To study the effect of decoy-oligodeoxynucleotides (decoy-ODNs) in dumbbell shape with the oligodeoxynucleotide sequence similar to nuclear factor kappa B (NF-κB) cis-elements on expression of inflammation... Objective: To study the effect of decoy-oligodeoxynucleotides (decoy-ODNs) in dumbbell shape with the oligodeoxynucleotide sequence similar to nuclear factor kappa B (NF-κB) cis-elements on expression of inflammation mediators in pMΦ cells from rats. Methods: With carriers of cationic liposomes, decoy-ODNs were transfected into pMΦ cells of rats. Then the inhibiting effects of the decoy-ODNs on tumor necrosis factor α (TNFα), interleukin-6 (IL-6) and IL-10 were analyzed. Results: Decoy-ODNs could decrease the expression of TNFα and IL-6 in dose-dependent fashion but had weaker inhibiting effect on IL-10. Conclusions: Decoy-ODNs targeting NF-κB can decrease the expression of inflammatory mediators in pMΦ cells from rats. 展开更多
关键词 Tumor necrosis factor Inflammation mediators Nuclear factor kappa B Decoy-oligodeoxynucleotides
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