血府逐瘀汤影响退变椎间盘髓核组织内蛋白水解酶和微血管生成的机制 被引量：9

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作者 郭义 林俊 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第22期4841-4846,共6页

目的研究血府逐瘀汤影响退变椎间盘髓核组织内蛋白水解酶和微血管生成的机制。方法将72只雄性大鼠分为对照组(无针刺或治疗)、椎间盘退变组(仅针刺);血府逐瘀汤组〔每周注射含50μmol/L血府逐瘀汤的磷酸盐缓冲液(PBS)进行针刺〕各24只;... 目的研究血府逐瘀汤影响退变椎间盘髓核组织内蛋白水解酶和微血管生成的机制。方法将72只雄性大鼠分为对照组(无针刺或治疗)、椎间盘退变组(仅针刺);血府逐瘀汤组〔每周注射含50μmol/L血府逐瘀汤的磷酸盐缓冲液(PBS)进行针刺〕各24只;通过RT-qPCR和酶联免疫吸附试验检测蛋白水解酶相关基因基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3和MMP-9 mRNA的表达水平;通过蛋白质免疫印迹检测微血管生成相关因子〔血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)和转化生长因子(TGF)〕蛋白表达水平;通过CCK-8评估不同处理组细胞活力;通过RT-qPCR检测炎症相关因子〔肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-10〕mRNA表达量;通过磁共振成像评估骶椎椎间盘。结果与对照组相比,椎间盘退变组MMP-1、MMP-3和MMP-9 mRNA的表达水平和蛋白含量明显增加,而血府逐瘀汤组较椎间盘退变组MMP-1、MMP-3和MMP-9 mRNA的表达水平和蛋白含量降低(P<0.05);与对照组相比,椎间盘退变组VEGF、FGF和TGF蛋白质表达量明显降低,而血府逐瘀汤组较椎间盘退变组VEGF、FGF和TGF蛋白质表达量明显增加(P<0.05);与对照组相比,椎间盘退变组细胞存活率明显降低,而血府逐瘀汤组较椎间盘退变组细胞存活率明显增加(P<0.05);与对照组相比,椎间盘退变组TNF-α、IL-6和IL-10 mRNA表达量明显增加,而血府逐瘀汤组较椎间盘退变组TNF-α、IL-6和IL-10 mRNA表达量明显降低(P<0.05);磁共振成像结果表明,与对照组相比,椎间盘退变组的磁共振成像信号强度降低。然而,与椎间盘退变组相比,血府逐瘀汤组显示出更高的磁共振成像信号强度。结论血府逐瘀汤可通过抑制炎症因子(TNF-α、IL-6和IL-10)和蛋白水解酶(MMP-1,MMP-3和MMP-9)表达,通过调节VEGF、FGF和TGF蛋白表达,增加微血管生成,改善由IL-1β诱导的髓核细胞中的炎症。 展开更多

关键词 血府逐瘀汤 退变椎间盘 髓核组织 蛋白水解酶 微血管生成

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椎间盘退变程度与髓核中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3及白细胞介素1β的相关性 被引量：4

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作者 周树良 徐良 +2 位作者 钱学峰 曾金才 朱立帆 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第2期165-171,共7页

背景:研究表明,miRNA水平与椎间盘细胞的凋亡和增殖、细胞外基质代谢和炎症反应密切相关,而miR-142-3p在椎间盘退变中的具体作用尚不清楚。目的:探讨人腰椎间盘髓核组织中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β表达与椎间盘退变... 背景:研究表明,miRNA水平与椎间盘细胞的凋亡和增殖、细胞外基质代谢和炎症反应密切相关,而miR-142-3p在椎间盘退变中的具体作用尚不清楚。目的:探讨人腰椎间盘髓核组织中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β表达与椎间盘退变程度的相关性。方法:选择2020年1月至2022年3月在苏州市第九人民医院因腰椎间盘退行性疾病而行手术的患者82例,术前均行MRI检查,根据Videman分级标准将患者分为轻度退变组(n=36)、中度退变组(n=26)和重度退变组(n=20),获取82份髓核组织标本,检测各组髓核组织中miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的基因表达,以及混合谱系激酶3、白细胞介素1β、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的蛋白表达,采用Spearman相关系数法评估miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素β表达与腰椎间盘退变程度的相关性。采用随机数字表法将30只成年SD大鼠分为假手术组(仅穿刺皮肤与肌肉后处死)、轻度退变组(穿刺Co7/8椎间盘1周后处死)与重度退变组(穿刺Co7/8椎间盘2周后处死),每组10只,检测各组髓核组织中混合谱系激酶3、白细胞介素1β的蛋白表达,以及miRNA-142-3p、混合谱系激酶3、白细胞介素1β的基因表达。结果与结论:①人髓核组织:miRNA-142-3p的表达由高到低的顺序为轻度退变组>中度退变组>重度退变组(P<0.05),混合谱系激酶3、白细胞介素1β基因与蛋白表达由低到高的顺序为:轻度退变组<中度退变组<重度退变组(P<0.05),Ⅰ型胶原基因与蛋白表达由低到高的顺序为:轻度退变组<中度退变组<重度退变组(P<0.05),Ⅱ型胶原基因与蛋白表达由高到低的顺序为:轻度退变组>中度退变组>重度退变组的趋势(P<0.05);Spearman相关分析显示,椎间盘退变程度与miRNA-142-3p表达呈负相关(P<0.05),与混合谱系激酶3、白细胞介素1β表达呈正相关(P<0.05);②大鼠髓核组织:� 展开更多

关键词 腰椎间盘 髓核组织 miRNA-142-3p 混合谱系激酶3 白细胞介素1Β 相关性

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成人退变腰椎间盘髓核组织中端粒酶表达及意义 被引量：6

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作者 刘川 王杰 +1 位作者 张旭 李燕 《中华实用诊断与治疗杂志》 2020年第1期37-39,共3页

目的探讨端粒酶在成人退变腰椎间盘髓核组织中的表达及与腰椎间盘髓核组织退变的关系。方法 8例腰椎间盘退行性病变患者(观察组),取手术摘除退变椎间盘髓核组织,8例腰椎骨折患者(对照组),取手术摘除非明显退变腰椎间盘髓核组织,采用免... 目的探讨端粒酶在成人退变腰椎间盘髓核组织中的表达及与腰椎间盘髓核组织退变的关系。方法 8例腰椎间盘退行性病变患者(观察组),取手术摘除退变椎间盘髓核组织,8例腰椎骨折患者(对照组),取手术摘除非明显退变腰椎间盘髓核组织,采用免疫组织化学法检测2组端粒酶阳性表达情况,ELISA法检测端粒酶、Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素相对表达量,Spearman相关法分析观察组端粒酶与Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素的相关性。结果观察组髓核组织端粒酶阳性表达率(2.1%)低于对照组(4.3%)(P<0.05),髓核组织端粒酶、Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素相对表达量吸光度值(7.62±0.98、59.45±6.32、3.31±0.38)低于对照组(15.52±0.94、69.33±5.86、4.64±0.29)(P<0.05);Spearman相关分析结果显示,观察组端粒酶与Ⅱ型胶原纤维(r=0.488,P<0.001)、硫酸软骨素(r=0.673,P<0.001)表达均呈正相关。结论端粒酶参与了腰椎间盘髓核组织的退变过程,且端粒酶表达下调,Ⅱ型胶原纤维、硫酸软骨素表达降低。 展开更多

关键词 腰椎间盘退行性病变 髓核组织 端粒酶 Ⅱ型胶原纤维 硫酸软骨素

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高渗培养基对椎间盘内髓核细胞活力及代谢的影响 被引量：2

4

作者 白亦光 陈巧玲 +3 位作者 刘康 杨泽龙 罗栩伟 冯刚 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第6期531-535,共5页

目的探讨高渗培养基对椎间盘内髓核组织及髓核细胞活力的影响。方法 6-7周龄SD大鼠10只,无菌取每只大鼠胸腰段椎间盘9个,置于高渗(410 mOsm/kg)培养基中整体培养,培养前及培养第7,14,21,28天,利用Mitotracker Green荧光探针、免疫组织... 目的探讨高渗培养基对椎间盘内髓核组织及髓核细胞活力的影响。方法 6-7周龄SD大鼠10只,无菌取每只大鼠胸腰段椎间盘9个,置于高渗(410 mOsm/kg)培养基中整体培养,培养前及培养第7,14,21,28天,利用Mitotracker Green荧光探针、免疫组织化学和生物化学方法检测细胞的活力、椎间盘结构的变化以及髓核组织细胞外基质成分的变化。结果椎间盘组织形态、细胞存活率及髓核细胞外基质成分与新鲜离体椎间盘无统计学差异。髓核细胞存活率荧光强度检测提示培养后第21天与培养前比较荧光强度明显降低(7 782±367 vs 10 435±376,P<0.05)。髓核组织内蛋白多糖含量(mg/100mg)检测提示培养第21天与培养前相比明显降低(3.72±0.45 vs 6.35±0.76,P<0.05)。结论在高渗培养基中(410mOsm/kg),髓核细胞可以良好存活至少14 d,大鼠髓核组织内蛋白多糖可以有效保持14 d。 展开更多

关键词 高渗培养基 椎间盘 髓核组织 髓核细胞

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腰椎间盘突出症患者髓核组织TIMP-1、IL-27水平对术后复发的预测价值 被引量：1

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作者 杨好 陈程程 +1 位作者 宣以道 索玉萍 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第7期826-830,共5页

目的探讨腰椎间盘突出症患者髓核组织基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、白细胞介素27(IL-27)表达水平对术后复发的预测价值。方法96例腰椎间盘突出症患者为观察组,根据术后1年内是否复发分为未复发组84例和复发组12例,纳入同期行... 目的探讨腰椎间盘突出症患者髓核组织基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、白细胞介素27(IL-27)表达水平对术后复发的预测价值。方法96例腰椎间盘突出症患者为观察组,根据术后1年内是否复发分为未复发组84例和复发组12例,纳入同期行手术治疗的腰椎骨折患者94例作为对照组;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测患者的髓核组织TIMP-1、IL-27及炎症因子C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6及降钙素原(PCT)水平;Pearson相关性分析腰椎间盘突出症患者髓核组织TIMP-1、IL-27水平与炎症因子水平的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析髓核组织TIMP-1、IL-27水平对腰椎间盘突出症患者预后的预测价值,logistic回归分析腰椎间盘突出症患者复发的影响因素。结果观察组髓核组织IL-27、CRP、TNF-α、IL-6、PCT水平高于对照组,TIMP-1显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);腰椎间盘突出症患者髓核组织TIMP-1水平与CRP、TNF-α、IL-6、PCT水平均呈负相关,IL-27水平与CRP、TNF-α、IL-6、PCT水平均呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);复发组髓核组织IL-27、CRP、TNF-α、IL-6、PCT水平显著高于未复发组,TIMP-1水平显著低于未复发组(P<0.05);髓核组织TIMP-1、IL-27联合检测预测腰椎间盘突出症患者复发的AUC分别为0.732、0.805、0.856;IL-27是腰椎间盘突出症复发的独立危险因素(P<0.05),TIMP-1是腰椎间盘突出症复发的保护因素(P<0.05)。结论腰椎间盘突出症患者髓核组织TIMP-1表达降低、IL-27表达升高,两项指标联合检测可有效预测腰椎间盘突出症的复发。 展开更多

关键词 腰椎间盘突出症 髓核组织 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 白细胞介素27 复发

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突出型和脱垂游离型腰椎间盘突出症髓核组织CD68表达分析 被引量：2

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作者 刘恩 栗新华 +2 位作者 张俊芬 韩清清 安晓辉 《颈腰痛杂志》 2021年第3期353-355,共3页

目的探讨突出型和脱垂游离型腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)髓核组织CD68表达差异及临床意义。方法本研究选择2019年1月~2020年1月于本院治疗的78例LDH患者,其中突出型48例,脱垂游离型30例。记录两组患者术前ODI指数以及... 目的探讨突出型和脱垂游离型腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)髓核组织CD68表达差异及临床意义。方法本研究选择2019年1月~2020年1月于本院治疗的78例LDH患者,其中突出型48例,脱垂游离型30例。记录两组患者术前ODI指数以及腰腿疼痛VAS评分,术中摘除的髓核组织采用免疫组化染色检测CD68阳性表达率,采用ELISA检测TNF-α、IL-1表达情况,并分析CD68阳性表达率与ODI指数、VAS评分、TNF-α水平、IL-1水平的相关性。结果脱垂游离组腰痛VAS评分、腿痛VAS评分、ODI指数均显著高于突出组(P<0.05);脱垂游离组髓核组织CD68阳性表达率、TNF-α水平、IL-1水平显著高于突出组(P<0.05);LDH患者髓核组织CD68阳性表达率与TNF-α水平、IL-1水平、腰痛VAS评分、腿痛VAS评分、ODI指数均呈正相关关系(P<0.05)。结论脱垂游离型LDH的CD68阳性表达率显著高于突出型LDH,且CD68阳性表达率与功能障碍、疼痛症状呈正相关,与炎性因子表达呈正相关。 展开更多

关键词 突出型腰椎间盘突出症 脱垂游离型腰椎间盘突出症 髓核组织 CD68

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显微内窥镜椎间盘切除术(MED)治疗腰椎间盘突出症的特点及易出现的并发症研究 被引量：6

7

作者 李智勇 余伟民 +2 位作者 王国文 胡万华 赵建利 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第9期1652-1655,1695,共5页

目的:探讨与研究显微内窥镜椎间盘切除术(microendoscopic discectomy,MED)治疗腰椎间盘突出症的特点及易出现的并发症情况.方法:2017年1月到2020年2月选择在空军第九八六医院诊治的椎间盘突出症患者72例,根据治疗方法把患者分为MED组... 目的:探讨与研究显微内窥镜椎间盘切除术(microendoscopic discectomy,MED)治疗腰椎间盘突出症的特点及易出现的并发症情况.方法:2017年1月到2020年2月选择在空军第九八六医院诊治的椎间盘突出症患者72例,根据治疗方法把患者分为MED组与对照组,各36例,MED组给予MED手术治疗,对照组给予开放手术治疗,记录两组术后并发症发生情况.结果:MED组术后6个月的优良率为97.2%,显著高于对照组的77.8%(P<0.05).两组术后1个月、术后6个月的日本骨科协会(Japanese orthopaedic association,JOA)评分高于术前,MED组高于对照组(P<0.05).两组术后1个月、术后6个月的视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)评分低于术前,MED组低于对照组(P<0.05).MED组术后6个月的髓核组织残留、神经根损伤、硬脊膜破裂、脑脊液漏等并发症发生率为5.6%,显著低于对照组的33.3%(P<0.05).结论:MED治疗腰椎间盘突出症能改善患者的腰椎功能,缓解患者疼痛,提高总体治疗优良率,减少术后并发症的发生. 展开更多

关键词 显微内窥镜椎间盘切除术 腰椎间盘突出症 并发症 髓核组织残留 神经根损伤

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不同胶原支架对髓核间充质干细胞分化的影响 被引量：5

8

作者 王瑾 陈其昕 +1 位作者 陶轶卿 李方财 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期541-548,共8页

目的 :比较不同胶原支架中髓核间充质干细胞(NPMSCs)的细胞存活、增殖能力和分化相关基因及蛋白表达等方面的差异。方法:在体外构建Ⅰ型、Ⅰ/Ⅱ型混合和Ⅱ型胶原支架,观察其显微结构、孔隙率及降解特性。从健康雄性大鼠尾椎提取NPMSCs,... 目的 :比较不同胶原支架中髓核间充质干细胞(NPMSCs)的细胞存活、增殖能力和分化相关基因及蛋白表达等方面的差异。方法:在体外构建Ⅰ型、Ⅰ/Ⅱ型混合和Ⅱ型胶原支架,观察其显微结构、孔隙率及降解特性。从健康雄性大鼠尾椎提取NPMSCs,分别采用细胞微球、Ⅰ型胶原、Ⅰ/Ⅱ型混合胶原、Ⅱ型胶原支架培养,其中细胞微球作为对照。通过乳酸脱氢酶(LDH)检测材料生物毒性,CCK-8测定细胞增殖,实时定量PCR和Western Blot测定SOX9、聚集蛋白聚糖、Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原的基因和蛋白表达水平,阿尔新蓝组织学染色检测硫酸蛋白聚糖的表达。结果:Ⅰ型、Ⅰ/Ⅱ型混合和Ⅱ型胶原支架孔隙率均为90%以上,构建21d后的降解率分别为(10.30±0.66)%、(9.87±0.71)%和(10.40±0.53)%。培养后7d细胞LDH检测结果Ⅰ型、Ⅰ/Ⅱ型混合和Ⅱ型胶原支架组分别为12.24±0.65、12.13±1.03、12.67±1.15,与对照组12.50±1.32比较无显著性差异(P>0.05)。胶原支架中培养5d及7d的细胞CCK-8检测结果 (Ⅰ型胶原组为0.67±0.04、1.20±0.05,Ⅰ/Ⅱ型混合胶原组为0.62±0.05、1.20±0.07,Ⅱ型胶原组为0.69±0.02、1.34±0.04)明显高于对照组(0.53±0.03,1.02±0.02)(P<0.05)。培养21d后,三种胶原支架组与对照组比较,SOX9、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖的基因表达均显著上升(P<0.05),其中Ⅱ型胶原支架组上述基因表达量最高,与Ⅰ型及Ⅰ/Ⅱ型混合胶原支架组有显著性差异(P<0.05);与对照组比较,Ⅰ型胶原支架组中仅Ⅰ型胶原及聚集蛋白聚糖的蛋白表达上升(P<0.05);Ⅰ/Ⅱ型混合及Ⅱ型胶原支架组中SOX9、Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖的蛋白表达有显著上升(P<0.05),其中Ⅱ型胶原支架组上述蛋白表达量最高,且与Ⅰ型及Ⅰ/Ⅱ型混合胶原支架组有显著性差异(P<0.05)。阿尔新蓝组织学染色检测硫酸蛋白聚糖在Ⅱ型胶原支架组表达明显高于其余各组 展开更多

关键词 椎间盘 髓核组织工程学 Ⅱ型胶原 细胞分化

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NALP3炎性体、骨形态发生蛋白在退变腰椎间盘髓核组织中的表达及意义 被引量：5

9

作者 邓剑锋 李广章 +2 位作者 刘然 齐颖钊 刘志新 《中国实验诊断学》 2020年第5期747-751,共5页

目的探究退变腰椎间盘髓核组织中NALP3炎性体、骨形态发生蛋白(BMP)的表达及意义。方法在我院选取2017年6-2018年6月接受治疗的80例腰椎间盘突出症患者,患者手术切除标本中取出退变椎间盘髓核组织块,另外选取在我院行前路减压内固定切... 目的探究退变腰椎间盘髓核组织中NALP3炎性体、骨形态发生蛋白(BMP)的表达及意义。方法在我院选取2017年6-2018年6月接受治疗的80例腰椎间盘突出症患者,患者手术切除标本中取出退变椎间盘髓核组织块,另外选取在我院行前路减压内固定切除的脊柱骨折患者椎间盘的正常椎间盘髓核组织块制作标本待用。对待测标本进行免疫组化染色,使用Western Blot检测NALP3、BMP-2表达。分析NALP3、BMP-2与腰椎间盘突出症患者腰椎间盘退变等级、腰部负荷程度的关系,并分析NALP3、BMP-2之间相关性。结果腰椎间盘组患者中NALP3表达显著高于正常组(P<0.05),BMP-2表达低于正常组(P<0.05);Ⅴ级患者NALP3水平高于Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级(P<0.05),BMP-2水平低于Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级(P<0.05);重程度患者NALP3水平高于很轻、轻、中程度(P<0.05),BMP-2水平低于很轻、轻、中程(P<0.05);NALP3、BMP-2之间进行Pearson相关性分析,NALP3、BMP-2之间呈负相关(r=-0.269,P=0.016)。结论退变腰椎间盘髓核组织中NALP3升高,BMP-2降低,且与患者退变等级、病情严重程度密切相关,为临床上腰椎间盘突出症的诊治提供理论参考。 展开更多

关键词 NALP3炎性体 骨形态发生蛋白 退变腰椎间盘髓核组织

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基质金属蛋白酶8与Ⅱ型胶原在颈椎间盘退变髓核组织中的表达及意义 被引量：3

10

作者 洪泽亚 肖耀广 +1 位作者 李志钢 王永东 《中华骨与关节外科杂志》 2019年第7期538-542,共5页

背景:椎间盘髓核组织是人体易退变的组织,Ⅱ型胶原是髓核的主要成分,而基质金属蛋白酶8(MMP-8)可降解Ⅱ型胶原,引起组织退化。目的:探讨MMP-8、Ⅱ型胶原在成人颈椎间盘退变髓核组织与正常髓核组织中的表达有无差异,并初步评价其在颈椎... 背景:椎间盘髓核组织是人体易退变的组织,Ⅱ型胶原是髓核的主要成分,而基质金属蛋白酶8(MMP-8)可降解Ⅱ型胶原,引起组织退化。目的:探讨MMP-8、Ⅱ型胶原在成人颈椎间盘退变髓核组织与正常髓核组织中的表达有无差异,并初步评价其在颈椎间盘退变过程中的作用。方法:取退变的成人颈椎间盘髓核组织60例和正常的成人颈椎间盘髓核组织10例,HE染色观察颈椎间盘髓核组织结构;天狼猩红饱和苦味酸染色观察两者胶原类型及分布特点;免疫组化染色观察及定量分析两者MMP-8、Ⅱ型胶原表达并进行比较,同时采用Pearson相关分析法分析颈椎间盘退变髓核组织MMP-8与Ⅱ型胶原表达的相关性。结果:HE染色显示,颈椎间盘正常髓核组织中纤维网致密结构规整,无断裂及钙化;而退变髓核组织纤维排列紊乱或相互交叉融合,组织出现断裂及纤维软骨组织钙化。苦味酸天狼猩红染色显示,颈椎间盘正常髓核组织内胶原纤维排列致密,主要是Ⅱ型胶原;而退变髓核组织内各型胶原含量减少,仅有少量的Ⅰ型胶原和极少量Ⅱ型胶原。定量分析结果显示,与颈椎间盘正常髓核组织比较,退变髓核组织MMP-8表达较多[(0.130±0.019)vs(0.067±0.010)],而Ⅱ型胶原表达较少[(0.065±0.010)vs(0.130±0.014)],且差异均有统计学意义(t=17.369、-12.493,P均<0.01)。相关分析结果显示,颈椎间盘退变髓核组织MMP-8表达与Ⅱ型胶原表达呈负相关(r=-0.713,P<0.01)。结论:MMP-8在颈椎间盘退变髓核组织中的表达较正常髓核组织明显增高,是颈椎间盘髓核组织退变的重要调节因子,对降解椎间盘细胞外基质中的Ⅱ型胶原有着重要的作用,且两者的表达呈负相关。 展开更多

关键词 金属蛋白酶类 Ⅱ型胶原 颈椎间盘退变髓核组织

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腺病毒介导hTGF-β1基因体内转染兔椎间盘髓核细胞的表达

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作者 季爱玉 胡有谷 王守彪 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期63-66,共4页

目的　观察以腺病毒为载体的外源性治疗基因Ad CMV hTGF β1转染兔椎间盘髓核细胞后的表达。　方法　采用本实验室构建的腺病毒载体基因Ad CMV hTGF β12 0 μl(6× 10 6 pfu)注射于纯种成年新西兰大白兔腰椎间盘髓核内 ;手术后不... 目的　观察以腺病毒为载体的外源性治疗基因Ad CMV hTGF β1转染兔椎间盘髓核细胞后的表达。　方法　采用本实验室构建的腺病毒载体基因Ad CMV hTGF β12 0 μl(6× 10 6 pfu)注射于纯种成年新西兰大白兔腰椎间盘髓核内 ;手术后不同时间分别取出椎间盘 ,用免疫组织化学方法对椎间盘髓核细胞进行基因表达产物测定 ;用VIDAS图像分析系统进行半定量观察。　结果　免疫组织化学染色显示注射Ad CMV hTGF β1椎间盘 ,4d组可见髓核细胞内呈现阳性染色颗粒 ;1周组即显示强阳性染色 ,阳性表达持续至 12周组。实验对照组及自身椎间盘对照组呈阴性或弱阳性反应。　结论　椎间盘髓核作为靶细胞能够被外源性基因转染 ;腺病毒载体基因Ad CMV hTGF β1转染兔椎间盘髓核细胞后能在相当长时间内表达TGF 展开更多

关键词 人转化生长因子β1基因 腺病毒载体 表达 转染 髓核细胞 兔

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新型一体化纤维环-髓核双相支架的制备与评估 被引量：10

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作者 许海委 徐宝山 +5 位作者 杨强 李秀兰 马信龙 夏群 张春秋 伍耀宏 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期475-480,共6页

目的用脱细胞脱钙骨基质和脱细胞髓核基质构建新型一体化纤维环-髓核双相支架,并进行理化检测,探讨其作为组织工程椎间盘支架的可行性。方法取猪股骨近端松质骨,塑形成外径10 mm、内径5 mm、厚3 mm的骨环,经脱脂、脱钙、脱细胞处理制备... 目的用脱细胞脱钙骨基质和脱细胞髓核基质构建新型一体化纤维环-髓核双相支架,并进行理化检测,探讨其作为组织工程椎间盘支架的可行性。方法取猪股骨近端松质骨,塑形成外径10 mm、内径5 mm、厚3 mm的骨环,经脱脂、脱钙、脱细胞处理制备成纤维环相支架;取猪尾髓核组织,Triton X-100和脱氧胆酸联合脱细胞后粉碎、离心,制备脱细胞髓核基质;将制备的脱细胞髓核基质注入纤维环相支架中央,冷冻干燥,联合应用紫外照射和碳化二亚胺进行交联,制备一体化纤维环-髓核双相支架。通过大体观察、HE染色、扫描电镜观察支架结构;测定支架的孔隙率、吸水率、压缩弹性模量;MTT法检测25%、50%、100%支架浸提液对新西兰大白兔脂肪来源干细胞(adipose-derived stemcells,ADSCs)增殖的影响;将ADSCs接种到支架上,活/死细胞染色观察细胞在支架上的活性。结果大体观察支架呈乳白色;HE染色可见支架均质红染,无细胞成分残留;扫描电镜可见外层纤维环相支架孔径大小均匀一致,孔隙相互贯通,中央脱细胞髓核基质微丝相互连接,形成均匀网状结构,交界处连接紧密。纤维环相支架孔径为(343.00±88.25)μm,一体化纤维环-髓核双相支架孔隙率为82.98%±7.02%、吸水率为621.53%±53.31%,压缩弹性模量为(89.07±8.73)kPa。经MTT测定支架浸提液对ADSCs增殖无影响;活/死细胞染色可见细胞在支架上生长良好,无死细胞。结论用脱细胞脱钙骨基质和脱细胞髓核基质构建的一体化纤维环-髓核双相支架具有合适的孔径和孔隙率且无毒,力学性能与人正常椎间盘接近,是构建组织工程椎间盘的理想支架载体。 展开更多

关键词 脱细胞脱钙骨基质 脱细胞髓核基质 组织工程椎间盘 双相支架 猪 兔

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