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磷酸锰铁锂通过Keap1/Nrf 2信号通路影响雄性小鼠生殖系统
1
作者 潘林玮 齐志鹏 +5 位作者 杨海波 邹程 严济宽 宋唯一 李伟 杨欣欣 《中国工业医学杂志》 CAS 2024年第3期225-228,240,I0001,共6页
目的探讨磷酸锰铁锂(LiMnFePO_(4))可否通过Keap1/Nrf 2信号通路影响雄性小鼠的生殖系统。方法将18只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组和低、高剂量(5、50 mg/kg)LiMnFePO_(4)组,每组6只,灌胃染毒6周处死。取出睾丸,称取小鼠体质量并计... 目的探讨磷酸锰铁锂(LiMnFePO_(4))可否通过Keap1/Nrf 2信号通路影响雄性小鼠的生殖系统。方法将18只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为对照组和低、高剂量(5、50 mg/kg)LiMnFePO_(4)组,每组6只,灌胃染毒6周处死。取出睾丸,称取小鼠体质量并计算睾丸和附睾脏器系数、精子计数和精子畸形率,检测小鼠睾丸组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性水平,观察睾丸组织形态,测定小鼠睾丸组织Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)和核因子红细胞2相关因子2(Nrf 2)、血红素氧合酶1(HO-1)的蛋白和mRNA表达水平。结果LiMnFePO_(4)暴露对小鼠体质量、睾丸和附睾脏器系数影响差异无统计学意义;LiMnFePO_(4)染毒小鼠睾丸组织SOD活性水平降低,MDA水平升高;小鼠睾丸组织Keap1的蛋白和mRNA表达水平升高,HO-1的蛋白和mRNA表达水平降低,Nrf 2的蛋白表达水平降低、mRNA表达水平升高;高剂量LiMnFePO_(4)染毒小鼠睾丸组织精子计数减少,精子畸形率上升,睾丸曲细精管皱缩,管内精细胞减少、排列混乱,睾丸间质细胞增生。结论LiMnFePO_(4)可能通过Keap1/Nrf 2信号通路影响小鼠睾丸组织氧化应激状况,导致雄性小鼠生殖毒性。 展开更多
关键词 磷酸锰铁锂(LiMnFePO_(4)) 生殖毒性 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1) 核因子红细胞2相关因子2(nrf 2)
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核因子红细胞2相关因子2在毒死蜱毒性机制中的作用
2
作者 路依林 高恒波 +5 位作者 姚冬奇 孟娜 孙艺青 苑霖 郑拓康 田英平 《中国工业医学杂志》 CAS 2024年第3期267-270,共4页
毒死蜱(chlorpyrifos,CPF)是一种广泛使用的有机磷农药,其对人类健康和生态系统的潜在风险已引起广泛关注。CPF主要通过抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)发挥杀虫作用,但越来越多的研究表明,CPF的毒性作用远不止于此,也与氧化应激、炎症反应、细... 毒死蜱(chlorpyrifos,CPF)是一种广泛使用的有机磷农药,其对人类健康和生态系统的潜在风险已引起广泛关注。CPF主要通过抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)发挥杀虫作用,但越来越多的研究表明,CPF的毒性作用远不止于此,也与氧化应激、炎症反应、细胞死亡等多种生物学过程密切相关,因而可能导致神经退行性疾病、生殖发育障碍以及其他慢性健康问题。核因子红细胞2相关因子2(Nrf 2)作为一种关键的抗氧化应激调节因子,具有显著的保护作用。本文旨在综述Nrf 2在调节CPF诱导的氧化应激、神经毒性、细胞死亡和炎症反应中的作用机制,探讨其作为潜在治疗靶点的前景,以为开发新的CPF中毒治疗策略提供理论基础。 展开更多
关键词 有机磷中毒 毒死蜱(CPF) 核因子红细胞2相关因子2(nrf 2) 氧化应激
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全反式维甲酸抑制核因子E2相关因子2和血红素加氧酶1加重大鼠肾脏缺血再灌注损伤表达
3
作者 董毅玲 张文文 +1 位作者 闫琰 覃志成 《安徽医药》 CAS 2024年第4期741-745,I0003,共6页
目的 观察用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)抑制核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)是否会加重大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)表达。方法 2020年10月至2022年2月选取24只健康成年雄性SD大鼠切除右肾,并按随机数... 目的 观察用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)抑制核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)是否会加重大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)表达。方法 2020年10月至2022年2月选取24只健康成年雄性SD大鼠切除右肾,并按随机数字表法分为3组(n=8),即假手术组(Sham)、肾脏缺血再灌注(I/R)组、全反式维甲酸(I/R+ATRA)组。其中Sham组和I/R组给予腹腔注射玉米油(1 m L·kg^(-1)·d^(-1))1周,ATRA组则给予腹腔注射溶于玉米油的ATRA(10 mg·kg^(-1)·d^(-1))1周后,3组大鼠用10%的水合氯醛(0.3 m L/100 g)进行麻醉后固定四肢,将其在37℃条件下沿腹中线打开腹腔并分离出左肾动脉。其中Sham组切除右肾,不予以夹闭左肾动脉;I/R组和ATRA组采用右肾切除联合左肾动脉夹闭45 min后再灌注24 h的方法建立大鼠肾脏I/R模型。实验结束后收集3组大鼠血清及肾组织标本,用比色法检测血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)浓度;HE染色法观察肾组织病理改变;TUNEL法进行肾组织细胞凋亡的检测;二氢乙啶(DHE)荧光染色评估肾组织活性氧的表达情况;通过比色法检测肾组织丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性;用蛋白质印迹法分别对Nrf2、HO-1的表达进行检测。结果 与Sham组相比,I/R组大鼠肾组织Nrf2、HO-1蛋白表达量均增加(P<0.01),活性氧表达量增加,SOD活性下降,MDA含量、血清Scr、BUN浓度升高(P<0.01),肾小管损伤评分及凋亡细胞表达较高(P<0.05),其中Nrf2蛋白和HO-1蛋白分别为0.52±0.09和0.37±0.79,高于Sham组的0.06±0.01和0.02±0.01。与I/R组相比,I/R+ATRA组大鼠肾组织Nrf2、HO-1蛋白显著减少(P<0.01),活性氧表达量明显增加,SOD活性严重下降,MDA含量、血清Scr、BUN浓度明显升高(P<0.01),肾小管损伤评分显著增加,肾脏凋亡细胞表达亦增高(P<0.05),其中I/R+ATRA组Nrf2蛋白和HO-1蛋白分别为0.29±0.04和0.15±0.03,显著低于I/R组。结论 Nrf2/HO-1通路参与肾脏缺血再灌 展开更多
关键词 急性肾损伤 再灌注损伤 核因子E2相关因子2 血红素加氧酶1 全反式维甲酸
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葡萄籽原花青素提取物对砷诱导人肝细胞HL-7702损伤的保护作用及其机制 被引量：5
4
作者 徐孟川 李述刚 +4 位作者 丁玉松 牛强 冯刚玲 申卉 郭方明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第3期176-181,共6页
目的:研究葡萄籽原花青素提取物(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对砷诱导的人肝细胞HL-7702损伤的保护作用及其机制,为砷中毒的防治和GSPE的抗氧化研究提供理论依据。方法:将人肝细胞HL-7702分为对照组、砷染毒组(25μmol/L... 目的:研究葡萄籽原花青素提取物(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)对砷诱导的人肝细胞HL-7702损伤的保护作用及其机制,为砷中毒的防治和GSPE的抗氧化研究提供理论依据。方法:将人肝细胞HL-7702分为对照组、砷染毒组(25μmol/L)、GSPE干预组(5、10、25、50 mg/L)以及GSPE单独干预组(50 mg/L),分别处理24 h和48 h后,分别测定天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平以及总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)变化。噻唑蓝(3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-yl)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT)法分析细胞生存率,利用实时定量聚合酶链式反应以及Western blot法检测HL-7702细胞中核因子E2相关因子(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)、血红素氧合酶1(heme oxygenase 1,HO-1)、醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)和谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)的m RNA以及蛋白表达。结果:MTT实验发现,与对照组比较,高浓度砷(≥25μmol/L)染毒组细胞存活率显著降低(P<0.05)。GSPE干预组(>10 mg/L)细胞中的ALT和AST活力、MDA水平显著低于砷染毒组(P<0.05),SOD活力、GSH含量以及T-AOC水平显著高于砷染毒组(P<0.05),GSPE干预组HL-7702细胞中Nrf2、HO-1、NQO1、GST的m RNA及蛋白表达增高(P<0.05)。结论:GSPE对砷诱导的人肝细胞HL-7702氧化损伤具有拮抗作用,且具有一定的剂量效应关系,其机制可能是通过激活Nrf2介导的抗氧化信号通路,提高细胞抗氧化能力,从而改善砷引起的肝损伤。 展开更多
关键词 葡萄籽原花青素提取物 砷 抗氧化活性 核因子E2相关因子
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慢性锰暴露对大鼠肾脏氧化损伤和Nrf2信号通路的影响 被引量：2
5
作者 田应宽 王霞 +1 位作者 周远忠 申旭波 《环境卫生学杂志》 2022年第3期170-176,共7页
目的探讨慢性锰(Mn)暴露对SD大鼠肾脏氧化损伤和核转录相关因子2(Nrf2)信号通路的影响。方法将48只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为高剂量组(50 mg/kg)、低剂量组(10 mg/kg)和对照组(灭菌蒸馏水),每组16只,灌胃染毒12个月。观察肾脏组织病... 目的探讨慢性锰(Mn)暴露对SD大鼠肾脏氧化损伤和核转录相关因子2(Nrf2)信号通路的影响。方法将48只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为高剂量组(50 mg/kg)、低剂量组(10 mg/kg)和对照组(灭菌蒸馏水),每组16只,灌胃染毒12个月。观察肾脏组织病理学变化,检测肾脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量和大鼠血清肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)含量,检测核转录相关因子2(Nrf2)、血红素氧化酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达水平。结果高剂量组大鼠肾脏脏器系数高于低剂量组和对照组(P<0.05);高剂量组肾小球毛细血管扩张,肾小球、肾小管、肾小体内红细胞均增多。与低剂量组和对照组相比,高剂量大鼠血清中Cre、BUN和肾脏MDA水平明显升高,肾脏GSH-Px活性降低(P<0.05)。与对照组相比,低剂量和高剂量组的Nrf2、HO-1、NQO1的蛋白表达均降低(P<0.05)。结论慢性50 mg/kg Mn染毒暴露可导致肾实质通透性增加,肾脏水肿,肾功异常,其原因可能与Mn所导致的氧化损伤有关;Nrf2信号通路的抑制可能是慢性Mn暴露导致SD大鼠肾脏氧化损伤机制之一。 展开更多
关键词 锰(Mn) 肾 氧化损伤 谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px) 核转录相关因子2(nrf2)
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去甲斑蝥素通过Nrf2通路保护新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的机制 被引量：1
6
作者 余恒 宋光捷 《西北药学杂志》 CAS 2022年第4期82-86,共5页
目的探究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)预处理介导核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的保护作用。方法60只新生幼鼠分为假... 目的探究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)预处理介导核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2)通路对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的保护作用。方法60只新生幼鼠分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组12只。用不同剂量NCTD预处理低、中、高剂量组幼鼠,假手术组和模型组给予等体积的生理盐水灌胃。除假手术组外,其余各组均构建缺氧缺血性脑损伤模型,造模成功后,分别检测各组大鼠神经功能评分、脑积水量、神经细胞凋亡率、氧化应激指标[丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-P_(x))]、炎症因子指标[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]、Nrf2、血红素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)和醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1,NQO1]蛋白的表达水平。结果与假手术组比较,各组缺氧缺血幼鼠神经功能评分均显著下降(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,幼鼠神经功能评分显著改善(P<0.05)。与假手术组相比,各组缺氧缺血幼鼠脑积水量和神经细胞凋亡率显著增加(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,幼鼠脑积水量和神经细胞凋亡率随之降低(P<0.05)。与假手术组相比,各组缺氧缺血幼鼠氧化应激指标MAD含量显著上升,SOD和GSH-P_(x)含量显著下降(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,MDA含量随之下降,SOD和GSH-P_(x)含量随之上升(P<0.05)。与假手术组相比,各组缺氧缺血幼鼠炎症因子指标IL-6和TNF-α水平显著上升,IL-10水平显著降低(P<0.05),与模型组相比,低、中和高剂量组随着NCTD剂量增加,IL-6和TNF-α水平随之降低,IL-10水平随之� 展开更多
关键词 去甲斑螯素 核因子E2相关因子2(nrf2) 缺氧缺血性脑损伤
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Hsa_circ_0087354通过hsa-miR-199-3p/SLC7A11调节MG-63细胞增殖及氧化还原状态 被引量：1
7
作者 郑宝莲 何嘉轩 +3 位作者 梁珮琪 李丹 刘小川 张静莹 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期308-319,共12页
环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类新型非编码RNA。已有研究表明,其在细胞氧化还原反应中发挥重要作用。在本文前期研究中,发现通过real-time PCR检测,hsa_circ_0087354与细胞的氧化还原状态密切相关。过表达hsa_circ_0087354后,... 环状RNA(circular RNAs,circRNAs)是一类新型非编码RNA。已有研究表明,其在细胞氧化还原反应中发挥重要作用。在本文前期研究中,发现通过real-time PCR检测,hsa_circ_0087354与细胞的氧化还原状态密切相关。过表达hsa_circ_0087354后,活性氧1(reactive oxygen species1,ROS1)基因表达显著下降(P<0.01),超氧化物歧化酶1(surperoxide dismutase1,SOD1)表达显著升高(P<0.05);细胞内SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)活性以及谷胱甘肽(glutathione,GSH)浓度显著升高(P<0.01),细胞增殖能力增强(P<0.05)。生物信息学分析预测,hsa-miR-199-3p与hsa_circ_0087354和溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)存在结合位点,可能存在靶向调控关系。双荧光素酶报告基因结果证实了hsa-miR-199-3p与hsa_circ_0087354和SLC7A11之间的靶向调控关系。构建过表达hsa_circ_0087354质粒和ctrl质粒,合成hsa-miR-199a-3p、hsa-miR-199b-3p和hsa-miR-NC mimics。通过Real-time PCR分析发现,转染hsa_circ_0087354后,hsa-miR-199-3p表达显著降低(P<0.01),SLC7A11表达显著升高(P<0.05)。转染hsa-miR-199-3p后,SLC7A11基因表达显著下降(P<0.001),细胞内SOD和GPx活性以及GSH浓度显著降低(P<0.01),细胞增殖能力下降(P<0.05)。研究结果表明,hsa_circ_0087354通过吸附hsa-miR-199-3p,增强SLC7A11表达,促进氧化应激MG-63细胞增殖,降低氧化应激水平。 展开更多
关键词 氧化应激 hsa_circ_0087354 hsa-miR-199-3p 核因子E2相关因子2 溶质载体家族7成员11(SLC7A11)
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猪Nrf2基因克隆、表达及序列特征分析 被引量：1
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作者 徐秋良 周康康 +3 位作者 李君 刘永祥 朱宽佑 肖锦红 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期4409-4416,共8页
Nrf2是细胞抗氧化体系Keap1-Nrf2/ARE中的关键转录因子。本研究以杜长大仔猪肝脏总RNA为材料,根据GenBank公布的人、牛和大鼠Nrf2序列设计引物,利用RT-PCR法克隆猪Nrf2基因的全编码序列,并通过生物信息学分析预测该基因的结构和系统发育... Nrf2是细胞抗氧化体系Keap1-Nrf2/ARE中的关键转录因子。本研究以杜长大仔猪肝脏总RNA为材料,根据GenBank公布的人、牛和大鼠Nrf2序列设计引物,利用RT-PCR法克隆猪Nrf2基因的全编码序列,并通过生物信息学分析预测该基因的结构和系统发育;采用qRT-PCR技术检测Nrf2基因在仔猪不同生理阶段和不同组织中的表达情况。结果表明:猪Nrf2基因包含1个1776 bp的开放阅读框,编码591个氨基酸。生物信息学分析显示,猪Nrf2蛋白含3个特征结构域,与牛Nrf2的氨基酸序列相似性最高,为88.45%,而与褶纹冠蚌相似度最低,为30.64%。qRT-PCR结果显示,Nrf2在本实验所检测的组织中均有表达,其中以背最长肌表达量最高,显著高于其他组织(p<0.05);心脏和肾脏次之,小肠和肝脏表达较少;肺脏和脾脏表达丰度最低;Nrf2在初生、断奶、35日龄、70日龄和100日龄猪的背最长肌中均有表达,以断奶阶段表达量最高(p<0.05),100日龄表达量最低(p<0.05)。本研究为进一步探讨猪Nrf2基因的生物学功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪 核因子E2 相关因子2 基因(nrf2) 生物信息学分析 组织表达
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翻译后修饰对转录因子NF-E2相关因子2功能的调控
9
作者 张艺瀚 衣雨娇 顾玉超 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期45-52,共8页
抗氧化反应组件(AREs)普遍存在于编码抗氧化和/或解毒酶基因的启动子区域,为这些基因的转录启动所必需;而这些基因的表达对维持细胞内氧化还原稳态,抵抗活性氧类(ROS)引起的细胞损伤发挥重要作用。转录因子NF-E2相关因子2(nuclear facto... 抗氧化反应组件(AREs)普遍存在于编码抗氧化和/或解毒酶基因的启动子区域,为这些基因的转录启动所必需;而这些基因的表达对维持细胞内氧化还原稳态,抵抗活性氧类(ROS)引起的细胞损伤发挥重要作用。转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2 related factor 2,NRF2)作为抗氧化反应中的关键转录因子,可以与ARE结合,启动其下游靶基因,在氧化应激及亲电子剂应激中发挥重要的调控作用,广泛参与炎症、增殖、凋亡、细胞分化、组织再生和代谢等过程;因此,激活NRF2有望成为治疗肿瘤及其他与氧化、炎症相关疾病的新策略。蛋白质的翻译后修饰,对蛋白质空间构象、稳定性及其与其他蛋白质间相互作用具有重要作用。因此,探究NRF2的翻译后修饰如磷酸化、乙酰化和泛素化的修饰过程等,对深入了解NRF2的功能及调控机制至关重要,并与某些疾病的发生发展密切相关。本文对近年来翻译后修饰对NRF2的活性及功能的调控进行综述。 展开更多
关键词 转录因子NF-E2相关因子2(nrf2) 翻译后修饰 功能调控
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补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及Nrf2/HO-1信号途径的影响 被引量：30
10
作者 佘颜 王宇红 +3 位作者 邵乐 夏相宜 刘芳 蔡光先 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期123-128,共6页
目的观察补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号途径的影响。方法 120只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤精简方组。采用大脑中动脉线栓法建立局灶... 目的观察补阳还五汤精简方对大鼠脑缺血后血管新生及核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号途径的影响。方法 120只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤组、补阳还五汤精简方组。采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血模型,各组给予相应处理。在d 1、3、7三个时间点取脑组织进行检测,免疫组织化学法检测血浆Ⅷ因子相关抗原(v WF),测定微血管密度(MVD)。采用Real-time PCR和Western blot法检测大鼠脑组织中Nrf2、HO-1基因及蛋白表达。结果 1与假手术组比,模型组v WF阳性表达微血管在d 3时表达明显升高(P<0.05),给药组d 7与模型组比较差异有显著性(P<0.05);2假手术组Nrf2、HO-1mRNA及蛋白呈少量表达,模型组Nrf2蛋白表达水平d 3与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01),各给药组能上调Nrf2mRNA及蛋白表达,其中Nrf2mRNA在d 7,Nrf2蛋白表达在d 1及d 7上调最明显,与同时间点模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。模型组HO-1mRNA及蛋白在d 7与同时间点假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),各给药组HO-1mRNA在d 3,HO-1蛋白在d 3及d 7上调最明显,与同时段模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论补阳还五汤精简方促进脑缺血后血管新生,这一作用可能与调控Nrf2/HO-1信号途径的表达有关。 展开更多
关键词 补阳还五汤精简方 血管新生 核转录因子E2相关因子2 血红素加氧酶1-血浆Ⅷ因子相关抗原 微血管密度
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益母草碱激活p62/Nrf2/HO-1信号通路抑制肾小管上皮细胞铁死亡的作用机制 被引量：12
11
作者 吴爱君 陈乃清 +7 位作者 黄丽华 程冉 王晓婉 黎创 毛炜 黄清明 徐鹏 田瑞敏 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2176-2183,共8页
为探讨益母草碱(leonurine,Leo)对erastin诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)铁死亡的保护作用及其潜在机制,在体外构建erastin诱导的HK-2细胞铁死亡模型,检测Leo对铁死亡细胞活力、细胞状态、铁死亡相关指标及相关信号通路蛋白的影响。... 为探讨益母草碱(leonurine,Leo)对erastin诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)铁死亡的保护作用及其潜在机制,在体外构建erastin诱导的HK-2细胞铁死亡模型,检测Leo对铁死亡细胞活力、细胞状态、铁死亡相关指标及相关信号通路蛋白的影响。首先,体外培养HK-2细胞,CCK-8法检测10、20、40、60、80、100μmol·L^(-1)的Leo对正常HK-2细胞活性的影响,以此确定Leo的安全给药剂量范围;用铁死亡经典诱导剂erastin诱导铁死亡细胞模型并筛选出合适的造模浓度;CCK-8法检测Leo(20、40、80μmol·L^(-1))及阳性药铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1,1、2μmol·L^(-1))对铁死亡模型细胞活性的影响,同时在相差显微镜下观察细胞形态学的变化。其次,通过Western blot法检测核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的入核激活情况,并筛选后续机制研究的最佳浓度;进一步用透射电镜观察铁死亡发生的特征性显微形态学改变,应用流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)变化,使用还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)测定试剂盒检测GSH含量。最后,采用Western blot法定量检测各组谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、通路蛋白p62及Nrf2下游蛋白血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)的表达,探讨Leo对HK-2铁死亡调控作用的具体机制。结果显示,Leo在浓度为10~100μmol·L^(-1)时对正常HK-2细胞活性无影响,表明该浓度范围的药物对细胞无明显毒副作用;HK-2细胞活性随着铁死亡诱导剂erastin浓度的增高而降低,5μmol·L^(-1) erastin能够显著诱导HK-2细胞发生铁死亡;与模型组相比,20、40、80μmol·L^(-1)的Leo呈剂量依赖性提高HK-2细胞活性,并且能有效改善细胞形态;80μmol·L^(-1) Leo能显著上调HK-2细胞核中Nrf2的表达。进一步研究表明,Leo可以显著改善erastin造成的铁死亡特征性显微结构损伤,抑制细胞内ROS的释放,升高GSH含� 展开更多
关键词 益母草碱 肾小管上皮细胞 铁死亡 P62 核转录因子E2相关因子2(nrf2) 血红素加氧酶1(HO-1)
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基于Nrf2/ARE信号通路探讨清热化瘀方对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激反应的影响 被引量：16
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作者 胡跃强 秦红玲 +3 位作者 唐农 李媛媛 王启芝 廖泰荣 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第14期128-133,共6页
目的：从核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路探讨清热化瘀方对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的影响及可能的作用机制。方法：采用Longa线栓法制备局灶性脑缺血再灌注大鼠（MCAO）模型,将160只SD大鼠随机分为4组... 目的：从核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路探讨清热化瘀方对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的影响及可能的作用机制。方法：采用Longa线栓法制备局灶性脑缺血再灌注大鼠（MCAO）模型,将160只SD大鼠随机分为4组,分别为假手术组（SO）,模型组（MCAO）,清开灵组（QKL）,清热化瘀方组（QRHY）。每组大鼠40只,根据取材时间点12 h,1 d,2 d,3 d可以分为每组分为4个亚组,每个亚组10只大鼠。分别采用氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法测量脑梗死体积,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和免疫组化检测Nrf2/ARE信号通路蛋白Nrf2和血红素加氧酶1（HO-1）mRNA及其蛋白表达变化。结果：与SO组比较,大鼠脑缺血再灌注后1 d,MCAO组梗死体积显著升高（P〈0.01）,QKL组较MCAO组梗死体积明显减小（P〈0.05）;QRHY组脑梗死体积较QKL组进一步缩小（P〈0.05）;MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达均于缺血再灌注后12 h开始明显上升,24 h达高峰（P〈0.05,P〈0.01）,随再灌注时间延长其表达逐渐下降,但仍保持较高表达水平（P〈0.05）;QKL组较MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达明显升高（P〈0.05）,QRHY组较QKL组进一步升高Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达（P〈0.05,P〈0.01）。结论：清热化瘀方治疗脑缺血再灌注损伤可能通过激活Nrf2/ARE信号通路而降低细胞氧化损伤的程度,从而达到保护神经元的作用。 展开更多
关键词 清热化瘀方 脑缺血再灌注损伤 核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应元件
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核因子E2相关因子2调控机体抗氧化途径特性及其与畜禽的健康和肉品质的关系 被引量：13
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作者 林谦 邱磊 +3 位作者 云龙 曹蓉 贺喜 侯德兴 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1421-1429,共9页
核因子E2相关因子2(Nrf2)是一种调控氧化应激基本表达的关键转录因子,以Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)在氧化环境下的构象改变或者其本身直接被磷酸化而激活并进入细胞核与抗氧化反应元件(ARE)结合,启动ARE下游的一系列抗氧化基... 核因子E2相关因子2(Nrf2)是一种调控氧化应激基本表达的关键转录因子,以Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)在氧化环境下的构象改变或者其本身直接被磷酸化而激活并进入细胞核与抗氧化反应元件(ARE)结合,启动ARE下游的一系列抗氧化基因的转录、表达以抵抗机体内外界的有害刺激。本文主要总结了Nrf2信号途径的特点及其在动物机体抗氧化过程中的重要作用,并结合它在畜禽抗应激、肉品质、新型饲料添加剂和保健品等开发方面的应用,阐述了其在维持畜禽健康和肉品质中的重要作用。 展开更多
关键词 nrf2 抗氧化反应元件 肉品质 抗氧化
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基于Nrf2信号通路探究参苓白术散调节铁死亡对酒精性肝损伤大鼠的影响 被引量：8
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作者 周相宇 周素芳 +3 位作者 李玉茹 蔡世揿 廖佳佳 叶佐玉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期104-113,共10页
目的:观察参苓白术散通过调节核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的干预调节铁死亡对酒精性肝损伤大鼠的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为模型组、多烯磷脂酰胆碱组、参苓白术散高、中、低剂量组,每组8只,另取8只SD大鼠作为正常组。模型... 目的:观察参苓白术散通过调节核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的干预调节铁死亡对酒精性肝损伤大鼠的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为模型组、多烯磷脂酰胆碱组、参苓白术散高、中、低剂量组,每组8只,另取8只SD大鼠作为正常组。模型组、多烯磷脂酰胆碱组、参苓白术散高、中、低剂量组予以10 mL·kg^(-1)灌胃造模,正常组予以等体积蒸馏水灌胃;每日灌酒4 h后,予以多烯磷脂酰胆碱组143.64 mg·kg^(-1)药物灌胃、参苓白术散高、中、低剂量组分别予以15、7.5、3.75 mg·kg^(-1)的药物,正常组与模型组予以等体积蒸馏水灌胃,灌胃连续6周。全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,生化检测法检测脂多糖(LPS)、丙二醇(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、铁离子(Fe^(+))水平,苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察肝脏病理变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)、核转录因子-κB(NF-κB) mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1、p65、磷酸化(p)-p65蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组肝功能(ALT、AST、GGT)、血脂(TC、TG)水平明显升高(P<0.05),肝脏出现明显脂肪变性,有大量脂肪沉积,氧化应激水平及炎症因子明显升高(P<0.05),Fe^(+)水平明显增高(P<0.05),Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1蛋白表达明显下调(P<0.05),p65、p-p65蛋白表达明显上调(P<0.05),Nrf2、HO-1、GPX4、FTH1 mRNA表达明显下调(P<0.05),NF-κB mRNA表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,参苓白术散高、中剂量组肝功能(ALT、AST、GGT)、血脂(TC、TG)水平明显下调(P<0.05),肝脏脂肪变性明显改 展开更多
关键词 参苓白术散 酒精性肝损伤 核因子E2相关因子2(nrf2) 氧化应激 铁死亡
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褪黑素通过Nrf2/HO-1信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤 被引量：12
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作者 巩敏杰 安佳琪 +4 位作者 吴锋 唐永兰 祁艺 袁惠婕 罗国刚 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期857-863,876,共8页
目的研究褪黑素对脑缺血再灌注后Nrf2/HO-1信号通路的调控作用。方法SPF级雄性SD大鼠99只随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、褪黑素处理组,对脑缺血再灌注组和褪黑素处理组采用线栓法制作脑缺血再灌注模型,缺血90min后拔出线栓进行再灌... 目的研究褪黑素对脑缺血再灌注后Nrf2/HO-1信号通路的调控作用。方法SPF级雄性SD大鼠99只随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、褪黑素处理组,对脑缺血再灌注组和褪黑素处理组采用线栓法制作脑缺血再灌注模型,缺血90min后拔出线栓进行再灌注,褪黑素处理组在再灌注即刻和12h后按5mg/kg体质量腹腔注射褪黑素,脑缺血再灌注组腹腔注射3.43mol/L无水乙醇生理盐水溶液;改良GarciaJH评分评估3组动物神经缺损的严重程度,Nissle染色观察24h后梗死面积,HE染色观察3组大鼠脑组织梗死灶神经元的改变,免疫组化观察3组大鼠组间HO-1、GFAP和NF200的表达情况,Western blot检测3组大鼠组间Nrf2和HO-1的表达。结果褪黑素处理能提高脑缺血再灌注后1、3、7d神经功能评分(P<0.05);褪黑素处理后可以增加脑缺血急性期Nrf2和HO-1的表达(P<0.05);褪黑素处理能减少GFAP的表达(P<0.05),增加NF200的表达。结论褪黑素对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能为褪黑素激活了Nrf2/HO-1信号途径,促进抗氧化蛋白HO-1的表达;同时,褪黑素可能抑制神经胶质细胞生成胶质瘢痕,有利于神经轴突再生。 展开更多
关键词 褪黑素 脑缺血再灌注 核因子E2相关因子2 血红素加氧酶1
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甲基汞对原代大鼠星形胶质细胞的毒性作用 被引量：9
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作者 陈茹 蔡激扬 《中国康复理论与实践》 CSCD 2008年第5期437-439,共3页
目的初步研究甲基汞对原代SD大鼠星形胶质细胞产生毒性的机制。方法用甲基汞作用于原代SD大鼠星形胶质细胞,用高效液相色谱检测细胞氧化还原水平,用Western-blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平。结果随着甲基汞浓度的增加,星... 目的初步研究甲基汞对原代SD大鼠星形胶质细胞产生毒性的机制。方法用甲基汞作用于原代SD大鼠星形胶质细胞,用高效液相色谱检测细胞氧化还原水平,用Western-blot检测核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达水平。结果随着甲基汞浓度的增加,星形胶质细胞的还原水平明显下降。在甲基汞浓度较小时,随着甲基汞浓度的增加,星形胶质细胞Nrf2表达水平呈增长趋势;在甲基汞浓度较大时,随着甲基汞浓度的增加,星形胶质细胞Nrf2表达水平呈减少趋势。结论甲基汞对原代SD大鼠星形胶质细胞的毒性作用可能通过改变还原型谷胱甘肽(GSH)和Nrf2的功能而实现。 展开更多
关键词 甲基汞 星形胶质细胞 毒性作用 核因子E2相关因子2(nrf2)
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基于Nrf2/HO-1通路抑制铁死亡探究甘草含药血清对LPS诱导的Caco2细胞炎症的影响 被引量：4
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作者 孔金融 施高翔 +5 位作者 侯静 冯烨 项庆镇 王运来 宣自华 许钒 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第16期144-153,共10页
目的:探讨甘草含药血清激活核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路抑制铁死亡对脂多糖(LPS)诱导的人结肠上皮腺癌细胞(Caco2)炎症的影响。方法:将Caco2细胞分为正常组、模型组(LPS,200μg·L^(-1))、甘草含药血清低、... 目的:探讨甘草含药血清激活核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)通路抑制铁死亡对脂多糖(LPS)诱导的人结肠上皮腺癌细胞(Caco2)炎症的影响。方法:将Caco2细胞分为正常组、模型组(LPS,200μg·L^(-1))、甘草含药血清低、中、高浓度组(5%、10%、20%)、铁死亡抑制剂组(3-氨基-4-环己基氨基苯甲酸乙酯,Fer-1,10μmol·L^(-1))。正常组细胞正常培养,其他组建立炎症模型,甘草含药血清低、中、高浓度组分别加入5%、10%、20%含药血清处理24 h,铁死亡抑制剂组给予Fer-1处理24 h。透射电镜观察各组线粒体形态;流式细胞术检测细胞内Fe^(2+)水平;微板法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Nrf2、HO-1、铁蛋白重链1(FTH1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GSH-Px4)蛋白的表达水平。运用小干扰核糖核酸(siRNA)的方式来观察Nrf2在铁死亡调控中的作用。将干扰后细胞分为空载体组(NC)、Si-Nrf2组、含药血清(20%)+Si-Nrf2组、含药血清(20%)+NC组。微板法检测MDA、SOD、GSH-Px水平;Western blot检测Nrf2、HO-1、FTH1、GSH-Px4蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组线粒体固缩,线粒体膜增厚,线粒体形态变小;模型组Fe2+含量显著增加(P<0.01);SOD活性显著降低(P<0.01),GSH-Px表达显著下降(P<0.01),MDA含量显著增高(P<0.01);Nrf2、HO-1表达降低(P<0.05),FTH1表达显著性下降(P<0.01),GSH-Px4表达显著降低(P<0.01)。甘草含药血清处理组,中、高浓度组Fe2+含量显著降低(P<0.01),SOD活性和GSH-Px活性显著升高(P<0.01),MDA水平显著降低(P<0.01);高浓度组Nrf2表达明显升高(P<0.05),中浓度组HO-1与GSH-Px4蛋白的表达有所增高(P<0.05),低、中、高浓度组FTH1水平皆显著增加(P<0.01)。机制研究发现,与NC组比较, 展开更多
关键词 甘草 溃疡性结肠炎 核因子E2相关因子2(nrf2) 血红素加氧酶-1(HO-1) 铁死亡
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人参皂苷F2对过氧化氢诱导细胞损伤的保护作用 被引量：8
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作者 刘迪 张聪 +3 位作者 孙宏宇 时文艳 孔繁利 冯宪敏 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期452-457,共6页
目的研究人参皂苷F2对人胚肾293(HEK-293)细胞氧化应激损伤的保护作用。方法以0.4 mmol/L过氧化氢(H_2O_2)诱导HEK-293细胞氧化应激,1.25、5和20μmol/L人参皂苷F2预处理,MTS法检测细胞活力;DCFH-DA荧光探针考察细胞活性氧(reactive oxy... 目的研究人参皂苷F2对人胚肾293(HEK-293)细胞氧化应激损伤的保护作用。方法以0.4 mmol/L过氧化氢(H_2O_2)诱导HEK-293细胞氧化应激,1.25、5和20μmol/L人参皂苷F2预处理,MTS法检测细胞活力;DCFH-DA荧光探针考察细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量;试剂盒检测丙二醛(malondialchehyche, MDA)水平和抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性;蛋白质印迹法(Western blot)和qRT-PCR检测核因子E2相关因子2 (nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)/抑制蛋白Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1 (kelch-like ECH-associated protein 1, Keap1)信号的蛋白和mRNA表达量。结果 1.25、5和20μmol/L人参皂苷F2处理正常HEK-293细胞后对细胞无毒性或促增殖作用;人参皂苷F2预处理氧化应激细胞后,细胞活力显著高于损伤组,各组间差异均有统计学意义(P<0.05);氧化损伤组的DCF荧光较对照组相比显著增强(P<0.05),人参皂苷F2预处理后细胞ROS相对量呈浓度依赖性降低,各组间差异均有统计学意义(P<0.05);人参皂苷F2预处理后细胞MDA水平呈浓度依赖性降低,各组间差异均有统计学意义(P<0.05),SOD和GSH-Px活性显著高于损伤组(P<0.05),5和20μmol/L人参皂苷F2能显著提高CAT活性(P<0.05);人参皂苷F2处理后,Nrf2的mRNA和蛋白表达量均显著升高(P<0.05),Keap1的mRNA和蛋白表达量显著低于损伤组(P<0.05)。结论人参皂苷F2具有细胞保护作用,可降低HEK-293细胞ROS和MDA水平,提高抗氧化酶活性,其作用机制可能是通过调节Nrf2/Keap1信号通路以抵抗过氧化氢导致的细胞氧化应激损伤。 展开更多
关键词 人参皂苷F2 氧化应激 核因子E2相关因子2 信号通路
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基于Nrf2/ARE信号通路探讨少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠血管内皮损伤的保护作用及机制 被引量：8
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作者 李凤金 牛雯颖 +2 位作者 刘欣欣 肖洪彬 王伟明 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期31-37,共7页
目的:通过制备寒凝血瘀证大鼠模型,观察少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血管组织核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤对血管内皮损伤的保护作用及机制。方法:将50只SPF级大鼠随机分为少... 目的:通过制备寒凝血瘀证大鼠模型,观察少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血管组织核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响,探讨少腹逐瘀汤对血管内皮损伤的保护作用及机制。方法:将50只SPF级大鼠随机分为少腹逐瘀汤高、中、低剂量组(4.8,2.4,1.2 g·kg^(-1)),模型组和空白组,每组10只。采用冰水浴联合皮下注射盐酸肾上腺素的方法建立寒凝血瘀证大鼠模型。造模的同时开始灌胃给药,连续给药28 d后,采用全自动血液流变仪检测血液流变学指标;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中一氧化氮(NO),内皮素-1(ET-1),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),血管细胞黏附分子-1(VCAM-1),血管性血友病因子(vWF)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察胸主动脉血管损伤情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胸主动脉血管组织Nrf2,血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠全血黏度及血浆黏度均明显升高(P<0.05,P<0.01),vWF,ICAM-1,VCAM-1含量显著升高(P<0.01),NO,SOD,GSH-Px含量显著降低(P<0.01),ET-1的含量显著升高(P<0.01),胸主动脉血管组织Nrf2,HO-1 mRNA表达显著升高(P<0.01),细胞核内的Nrf2蛋白表达明显升高(P<0.05),细胞浆中Nrf2的蛋白表达水平明显降低(P<0.05),HO-1的蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,少腹逐瘀汤高、中剂量组全血黏度(高、中切),血浆黏度均明显降低(P<0.05);vWF,ICAM-1,VCAM-1,ET-1含量明显降低(P<0.05,P<0.01);NO,SOD,GSH-Px含量明显升高(P<0.05,P<0.01);胸主动脉血管内皮细胞增生、肿胀、脱落,内弹力膜断裂、平滑肌排列紊乱等病理变化有所改善;Nrf2,HO-1蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。结论:少腹逐瘀汤对寒凝血瘀证大鼠胸主动脉血� 展开更多
关键词 少腹逐瘀汤 内皮细胞损伤 核转录因子E2相关因子2(nrf2)/抗氧化反应元件(ARE) 寒凝血瘀证
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慈姑多糖调节Nrf2/HO-1改善多种重金属所致肝损伤的体内外实验研究 被引量：6
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作者 刘红双 李亚兰 +6 位作者 孔靖玮 周漫钰 董瑞娟 葛东宇 刘佳静 彭桂英 廖艳 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1913-1920,共8页
从体内外2个方面探究慈姑多糖是否通过激活核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)信号通路对多种重金属联合诱导的肝损伤发挥保护作用。首先基于北京市售大米... 从体内外2个方面探究慈姑多糖是否通过激活核转录因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)信号通路对多种重金属联合诱导的肝损伤发挥保护作用。首先基于北京市售大米6种重金属膳食摄入比例,构建多种重金属混合染毒液所致小鼠及HepG2细胞肝损伤体内外模型。40只雄性昆明小鼠分为5组:对照组、模型组、谷胱甘肽阳性对照组以及慈姑多糖(Sagittaria sagittifolia polysaccharides)低、高剂量组,每组8只。灌胃干预30 d后,HE染色观察小鼠肝脏损伤情况;体外实验应用MTT法检测不同质量浓度慈姑多糖(0.25、0.5、1、2 mg·mL^(-1))在不同时间点下,对HepG2细胞存活率的影响;利用微板法检测48 h细胞培养液中谷丙转氨酶(alaninetransaminase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase, AST)的含量;流式细胞术检测细胞中活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量变化;RT-PCR法检测细胞中Nrf2、HO-1 mRNA表达;Western blot法检测细胞中Nrf2、HO-1蛋白表达情况。HE染色结果显示,与模型组比较,慈姑多糖给药组肝脏中炎细胞浸润显著减轻,脂肪浸润情况明显改善,其中高剂量组损伤改善更为明显。在体外MTT实验中,与模型组相比,4个浓度慈姑多糖给药组其细胞存活率增加、ALT和AST含量下降、ROS含量减少,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,慈姑多糖组Nrf2、HO-1 mRNA及蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。慈姑多糖能显著改善多种重金属所致小鼠肝组织炎症浸润,并纠正肝脏脂肪变性情况,可能与调节Nrf2/HO-1信号通路、降低ROS缓解氧化损伤有关。 展开更多
关键词 慈姑多糖 多种重金属损伤 预防作用 HEPG2 nrf2 HO-1
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