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Nod 样受体蛋白-3炎性小体在慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重塑中的作用 被引量：2
1
作者 陈忠仁 欧宗兴 +4 位作者 王蕾 沈彬 梁海梅 杨绪莉 黄实仁 《安徽医药》 CAS 2021年第3期494-496,I0002,共4页
目的探讨Nod样受体蛋白-3(NLRP3)炎性小体在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)大鼠气道重塑中的作用。方法用随机数字表法将24只Wistar大鼠均分为慢阻肺组及空白组(各12只),模型制造成功后测定两组大鼠外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA、肺泡灌洗液炎... 目的探讨Nod样受体蛋白-3(NLRP3)炎性小体在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)大鼠气道重塑中的作用。方法用随机数字表法将24只Wistar大鼠均分为慢阻肺组及空白组(各12只),模型制造成功后测定两组大鼠外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA、肺泡灌洗液炎性因子、气管平滑肌厚度水平。结果慢阻肺组外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA水平高于空白组(P<0.05)。慢阻肺组气管平滑肌厚度为(14.25±0.63)μm^(2)/μm,空白组为(10.44±0.61)μm^(2)/μm,慢阻肺组高于空白组(P<0.05)。与空白组相比,慢阻肺组肺泡灌洗液的IL-18[(62.98±1.69)比(36.24±3.45)ng/L]、慢阻肺组肺泡灌洗液的IL-1β[(54.51±1.91)比(38.06±0.90)ng/L]水平升高(均P<0.05)。气管平滑肌厚度与外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA相对表达量的r值为0.799;与肺泡灌洗液IL-18的r值为0.938;与肺泡灌洗液IL-1β水平的r值为0.970(均P<0.05)。结论慢阻肺大鼠外周血淋巴细胞NLRP3炎性小体表达水平升高,在其气道重塑中发挥关键作用,为治疗慢阻肺提供了新的靶点。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 nod信号接头蛋白质类 白细胞介素-18 白细胞介素-1 大鼠 Wistar 气管平滑肌
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小肠结肠炎综合征小鼠肠黏膜中NLRP3表达与炎症分子关系的研究 被引量：2
2
作者 李娟 袁向飞 赵煜 《天津医药》 CAS 北大核心 2021年第8期829-832,共4页
目的探讨食物蛋白诱导的小肠结肠炎综合征(FPIES)小鼠肠黏膜细胞中炎症小体NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达水平,明确NLRP3异常与炎症分子及细胞焦亡的关联性。方法利用卵清蛋白灌胃建立食物蛋白诱导FPIES小鼠模型;实时荧光... 目的探讨食物蛋白诱导的小肠结肠炎综合征(FPIES)小鼠肠黏膜细胞中炎症小体NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)表达水平,明确NLRP3异常与炎症分子及细胞焦亡的关联性。方法利用卵清蛋白灌胃建立食物蛋白诱导FPIES小鼠模型;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blot方法检测肠黏膜细胞NLRP3、炎症分子及细胞焦亡通路分子的表达水平;采用药物干预黏膜细胞,分别抑制和激活NLRP3,Western blot方法检测肠黏膜细胞炎症分子及细胞焦亡通路分子表达的改变情况。结果FPIES小鼠肠黏膜细胞中NLRP3、炎症分子及细胞焦亡通路分子表达水平显著上调(P<0.05);激活NLRP3表达,可以诱导炎症分子及细胞焦亡通路分子表达显著上调,抑制NLRP3表达,可以显著上调炎症分子转化生长因子(TGF)-β和肿瘤坏死因子(TNF)-α表达(P<0.05)。结论FPIES小鼠肠黏膜细胞NLRP3表达与炎症反应及细胞焦亡密切相关,是调控FPIES肠道病理表型的上游靶标分子。 展开更多
关键词 小肠结肠炎 nod信号接头蛋白质类 细胞焦亡 小鼠 近交BALB C 肠黏膜细胞
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NOG通过Wnt/β-catenin信号通路抑制Ⅱ型肺泡上皮细胞衰老在肺纤维化中的机制研究 被引量：1
3
作者 钟洋丽 黄媛媛 何杰 《国际呼吸杂志》 2022年第21期1617-1626,共10页
目的结合生物信息学分析结果研究头蛋白基因(NOG)在博来霉素诱导的A549细胞衰老模型中的作用及分子机制。方法从GEO数据库下载IPF数据集GSE28042和GSE135893。在GSE28042中,运用R软件进行衰老相关基因的差异表达分析,通过单因素Cox回归... 目的结合生物信息学分析结果研究头蛋白基因(NOG)在博来霉素诱导的A549细胞衰老模型中的作用及分子机制。方法从GEO数据库下载IPF数据集GSE28042和GSE135893。在GSE28042中,运用R软件进行衰老相关基因的差异表达分析,通过单因素Cox回归初步筛选出与预后相关的基因,利用随机森林和LASSO回归2种算法,筛选出关键基因。采用Kaplan-Meier法绘制NOG高、低表达组患者的生存曲线。应用统一流形逼近与投影算法对GSE135893数据集中的单细胞测序数据降维,分析NOG在Ⅱ型肺泡上皮细胞的差异表达。采用随机数字表法将12只6~8周龄的C57BL/6小鼠随机分为对照组和实验组,每组6只,实验组小鼠气管内滴注博来霉素构建肺纤维化模型,取小鼠肺组织进行免疫组织化学染色和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测NOG的蛋白和mRNA表达水平。将A549细胞分为空白对照组、博来霉素组(5 mg/L)、阴性对照组(博来霉素5 mg/L+空载体慢病毒)以及NOG过表达组(博来霉素5 mg/L+NOG过表达慢病毒),应用蛋白质印迹法检测各组衰老相关蛋白P16、P21,Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白以及Ⅰα型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的表达,并应用SA-β-Gal染色检测各组细胞衰老细胞所占的比例。结果GSE28042数据集中筛选出95个差异表达的衰老相关基因,其中35个上调,60个下调。结合单因素Cox回归、LASSO回归和随机森林算法,筛选出关键衰老相关基因NOG。高表达NOG的IPF患者总体生存时间较低表达NOG的IPF患者更长(P<0.05)。单细胞测序显示NOG在IPF患者Ⅱ型肺泡上皮细胞的表达量低于正常肺组织(P<0.05)。RT-qPCR及免疫组织化学染色结果提示NOG在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化组织中为低表达(P值均<0.05)。博来霉素组A549细胞中的NOG蛋白表达低于空白对照组和NOG过表达组(P值均<0.05)。博来霉素组A549细胞的衰老相关蛋白、Wnt/β-catenin信� 展开更多
关键词 肺纤维化 衰老 nod信号接头蛋白质类 头蛋白 计算生物学
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NOD1和NOD2基因多态性与胃癌遗传易感性的研究 被引量：9
4
作者 路滟 徐耀初 沈洪兵 《中华疾病控制杂志》 CAS 2011年第9期735-739,共5页
目的探索NOD1和NOD2功能性单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）位点与胃癌易感性的关系。方法采用病例对照研究设计,比较病例组与对照组先天免疫反应信号通路相关基因NOD1和NOD2功能SNPs的频率差异。结果携带NOD1 r... 目的探索NOD1和NOD2功能性单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）位点与胃癌易感性的关系。方法采用病例对照研究设计,比较病例组与对照组先天免疫反应信号通路相关基因NOD1和NOD2功能SNPs的频率差异。结果携带NOD1 rs2906766 C等位基因,可显著增加60岁及以上的个体（调整OR=1.30,95%CI=1.02-1.65）、吸烟者（调整OR=1.38,95%CI=1.05-1.82）和H.pylori阴性者（调整OR=1.36,95%CI=1.03-1.79）发生胃癌的风险,但没有发现NOD2 rs3135500位点A〉G的改变与中国人群胃癌的发生有关联。结论 NOD1基因rs2906766位点C〉T的改变与中国人群胃癌的遗传易感性有关联,但需要在更大样本中验证这一结果,并开展功能学研究以揭示其潜在的生物学机制。 展开更多
关键词 nod1信号接头蛋白质 nod2信号接头蛋白质 胃肿瘤 多态现象 遗传
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硫化氢通过Nod2信号通路在肾脏缺血再灌注中保护作用的研究 被引量：4
5
作者 穆丽娜 刘文丽 +5 位作者 王佳丽 李光远 王军霞 马芳 沈佳 覃志成 《中国药物与临床》 CAS 2017年第11期1576-1579,共4页
目的探讨硫化氢(H_2S)在Nod2信号通路中对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法健康雄性Wistar大鼠40只,体质量180~220 g,随机分为4组:假手术组(sham组)、肾脏缺血再灌注组(IRI组)、IRI+胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)抑制剂炔丙基甘氨酸PAG组(IR... 目的探讨硫化氢(H_2S)在Nod2信号通路中对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法健康雄性Wistar大鼠40只,体质量180~220 g,随机分为4组:假手术组(sham组)、肾脏缺血再灌注组(IRI组)、IRI+胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)抑制剂炔丙基甘氨酸PAG组(IRI+PAG组)、IRI+胱硫醚-β-合成酶(CBS)抑制剂羟胺HA组(IRI+HA组)。大鼠右肾切除后,Sham组:分离左肾动脉,24 h后提取肾组织标本;IRI组:夹闭左侧肾蒂45 min后再灌注24 h后留取肾组织标本;IRI+PAG组:从左肾动脉插管,将CSE抑制剂PAG以2μmol/min的速度注入左肾动脉,给药20 min,停药5 min;IRI+HA组:从左肾动脉插管,将CBS抑制剂HA以300μmol/min的速度注入左肾动脉,给药20 min,停药5 min,以上2组同IRI组方法制作缺血性AKI模型,留取肾组织标本。蛋白印迹法检测肾组织核苷酸结合寡聚物结构域Nod2及细胞核因子KB蛋白的表达,实时定量PCR法检测Nod2mRNA的表达。免疫组织化学法检测肾组织白细胞介素-1(IL-1β)的表达;HE染色观察肾组织学改变。结果与Sham组比较,IRI组大鼠肾组织Nod2蛋白、NF-κB(p65)、(IL-1β)等蛋白增加(P<0.05),Nod2mRNA表达显著增加(P<0.05),HE染色表现为急性肾小管坏死;IRI+PAG、IRI+HA组组大鼠肾组织Nod2蛋白、NF-κB、IL-Iβ等与IR组比较明显增加(P<0.05),HE染色病理损伤加重。结论 H_2S可以抑制Nod2信号通路的激活减轻炎症反应从而减轻肾损伤。 展开更多
关键词 硫化氢 急性肾损伤 再灌注损伤 nod2信号接头蛋白质
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胞壁酰二肽对人牙髓细胞分化影响的研究 被引量：1
6
作者 罗传霞 张莉 +2 位作者 宋智 秦伟 林正梅 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期412-416,共5页
目的探讨天然免疫受体核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2（nucleotide—binding oligomerization domain-2，NOD-2）在深龋牙髓组织中的表达及NOD-2特异性配体胞壁酰二肽（muramyl dipeptide，MDP）对人牙髓细胞分化的影响。方法实时荧光定... 目的探讨天然免疫受体核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2（nucleotide—binding oligomerization domain-2，NOD-2）在深龋牙髓组织中的表达及NOD-2特异性配体胞壁酰二肽（muramyl dipeptide，MDP）对人牙髓细胞分化的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测深龋及健康人牙髓组织中NOD-2表达差异；1mg／LMDP刺激体外培养的人牙髓细胞0、2、6、12、24h，实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹法及免疫荧光检测NOD-2基因及蛋白表达；不同质量浓度MDP刺激人牙髓细胞24h，蛋白质免疫印迹法检测24h后牙本质涎蛋白（dentin sialoprotein，DSP）的表达；0．1mg／LMDP作用于人牙髓细胞0、2、6、12、24h，检测不同时间点牙本质涎磷蛋白（sialophosphoprotin，DSPP）、骨钙蛋白mRNA及骨桥蛋白的表达。结果深龋牙髓组织中NOD-2mRNA相对表达量为（0．2610±0．0824），较健康牙髓组织（0．0024±0．0002）显著增高（P〈0．05）。实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法结果显示NOD-2表达随时间上调，免疫荧光检测证实NOD-2蛋白表达于胞质。MDP质量浓度为0．1mg／L时DSP蛋白表达量最大（0．3782±0．0564），并随MDP质量浓度增加而下降；DSPP、骨钙蛋白mRNA表达呈时间依赖性，12h达最大值，24h后有所下降；骨桥蛋白表达量随时间上调。结论深龋牙髓组织中NOD-2表达升高，MDP与人牙髓细胞的分化相关。 展开更多
关键词 nod2信号接头蛋白质 乙酰胞壁酰-丙氨酸-异谷酰胺 细胞分化 牙髓细胞
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乙酰胆碱受体对胞壁酰二肽激活小鼠巨噬细胞NLR2/RIP2通路的调控作用
7
作者 胥阳 宋学敏 +2 位作者 王成夭 李建国 王焱林 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1468-1470,共3页
目的 评价乙酰胆碱受体对胞壁酰二肽（MDP）激活小鼠巨噬细胞Nod样受体2/受体相互作用蛋白2（NLR2/RIP2）通路的调控作用.方法 RAW264.7细胞长至对数生长期时,接种于12孔培养板（细胞密度1＆#215;106个/ml,2 ml/孔）,108个培养孔.采用... 目的 评价乙酰胆碱受体对胞壁酰二肽（MDP）激活小鼠巨噬细胞Nod样受体2/受体相互作用蛋白2（NLR2/RIP2）通路的调控作用.方法 RAW264.7细胞长至对数生长期时,接种于12孔培养板（细胞密度1＆#215;106个/ml,2 ml/孔）,108个培养孔.采用随机数字表法,将其分为3组（n=36）,正常对照组（C组）常规培养;M组加入MDP,终浓度为10 μg/ml;G组同时加入MDP和α7烟碱型乙酰胆碱受体特异性激动剂GTS-21,终浓度分别为10、50 μg/ml.分别于MDP孵育1、6、24h时取12个培养孔,取细胞悬液,采用实时荧光定量PCR法检测NLR2 mRNA表达,采用Western blot印迹法检测RIP2表达,采用ELISA法检测培养液TNF-α和高迁移率族蛋白-1（HMGB1）的浓度.结果 与C组比较,M组不同时点NLR2 mRNA、RIP2、TNF-α和HMGB1的水平升高（P＜0.05）;与M组比较,G组不同时点NLR2 mRNA、RIP2、TNF-α和HMGB1的水平降低（P＜0.05）.结论 乙酰胆碱受体可抑制MDP激活小鼠巨噬细胞NLR2/RIP2通路转导. 展开更多
关键词 胆碱能激动剂 巨噬细胞 乙酰胞壁酰-丙氨酰-异谷酰胺 nod2信号接头蛋白质 受体作用蛋白丝氨酸苏氨酸激酶2 Receptor-interacting protein serine-threonine kinase 2
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背根神经节NOD2在大鼠神经病理性痛形成中的作用
8
作者 句仁华 宋程程 +7 位作者 刘鹏 林桦 贾真 梁婧 张麟临 谢克亮 王国林 于泳浩 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期984-987,共4页
目的评价背根神经节核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(NOD2)在大鼠神经病理性痛形成中的作用。方法成年雄性SPF级SD大鼠32只,体重240~260 g,2~3月龄,采用随机数字表法分为4组(n=8):对照组(C组)、神经病理性痛组(NP组)、阴性对照siRNA组(N组)... 目的评价背根神经节核苷酸结合寡聚化结构域蛋白2(NOD2)在大鼠神经病理性痛形成中的作用。方法成年雄性SPF级SD大鼠32只,体重240~260 g,2~3月龄,采用随机数字表法分为4组(n=8):对照组(C组)、神经病理性痛组(NP组)、阴性对照siRNA组(N组)和NOD2-siRNA组(R组)。N组鞘内注射1×10^(8) IFU/ml阴性对照siRNA 10μl,R组鞘内注射1×10^(8) IFU/ml NOD2-siRNA 10μl,连续鞘内注射3 d,1次/d。于鞘内注射后2周,采用坐骨神经选择性损伤(SNI)法制备神经病理性痛模型。于SNI前1 d、SNI后1、3、7、10、14和28 d时测定机械缩足反应阈(MWT)。于末次行为学测定结束后,处死大鼠,取L4-6背根神经节组织,采用Western blot法测定NOD2的表达,实时定量PCR法测定TNF-α、IL-1β、IL-6、NOD2的mRNA表达。结果与C组比较,NP组SNI后各时点MWT降低,背根神经节NOD2及其mRNA、TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达上调(P<0.01);与NP组比较,R组SNI后各时点MWT升高,背根神经节NOD2及其mRNA、TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达下调(P<0.01),N组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠神经病理性痛形成的机制可能与背根神经节NOD2表达上调,进而上调促炎因子表达有关。 展开更多
关键词 神经痛 神经节 脊 nod2信号接头蛋白质
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烫伤后脓毒症大鼠肺组织炎症反应和自噬与NOD2信号通路的关系
9
作者 张颖 颜学滔 +8 位作者 梁辉 宋学敏 张宗泽 王焱林 王洪雨 杨旭明 李卉 李心怡 陈凯 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第12期1533-1536,共4页
目的评价烫伤后脓毒症大鼠肺组织炎症反应和自噬与Nod样受体2（NOD2）信号通路的关系。方法SPF级健康雄性SD大鼠20只，体重200～250 g，采用随机数字表法分为2组（n＝10）：对照组（C组）和烫伤后脓毒症组（SS组）。于20%总体表面积Ⅲ... 目的评价烫伤后脓毒症大鼠肺组织炎症反应和自噬与Nod样受体2（NOD2）信号通路的关系。方法SPF级健康雄性SD大鼠20只，体重200～250 g，采用随机数字表法分为2组（n＝10）：对照组（C组）和烫伤后脓毒症组（SS组）。于20%总体表面积Ⅲ度烫伤（背部皮肤浸入99～100 ℃热水中，持续12 s）后24 h静脉注射胞壁酰二肽5 mg/kg的方法制备烫伤后脓毒症模型。C组于20 ℃水中假烫伤后24 h静脉注射生理盐水1 ml。SS组于静脉注射胞壁酰二肽后6 h、C组于注射生理盐水后6 h时，取动脉血标本，采用ELISA法检测血清TNF-α和IL-6浓度，随后取肺组织，测定髓过氧化物酶（MPO）活性，采用RT-PCR法检测肺组织NOD 2 mRNA的表达，采用Western blot法检测受体相互作用蛋白-2（RICK）、NF-κBp65和微管相关蛋白1轻链3Ⅰ和Ⅱ（LC3Ⅰ、LC3Ⅱ）的表达。计算LC3Ⅰ与LC3Ⅱ的比值（LC3Ⅰ/Ⅱ）。结果与C组比较，SS组肺组织NOD2 mRNA、RICK、NF-κBp65表达上调，LC3Ⅰ/Ⅱ、血清TNF-α和IL-6浓度升高（P〈0.05）。结论大鼠烫伤后脓毒症时肺组织炎症反应和自噬水平增强的机制可能与NOD2信号通路激活有关。 展开更多
关键词 烧伤 脓毒症 nod2信号接头蛋白质 自噬 炎症 肺
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