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稳定转染TDP-43导致NSC34细胞自噬异常
1
作者 杨静 刘亚玲 +5 位作者 李震中 李睿 张雷 杜风萍 白琳 王亚飞 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2024年第9期588-592,共5页
目的 探讨稳定转染TDP-43对NSC34细胞自噬的影响。方法 体外培养稳定转染空质粒的NSC34细胞系(E细胞)和转染TDP-43的NSC34细胞系(TDP-43细胞)。应用CCK-8试剂盒测定两组细胞活力,应用EdU试剂盒测定两组细胞增值能力,应用透射显微镜观察... 目的 探讨稳定转染TDP-43对NSC34细胞自噬的影响。方法 体外培养稳定转染空质粒的NSC34细胞系(E细胞)和转染TDP-43的NSC34细胞系(TDP-43细胞)。应用CCK-8试剂盒测定两组细胞活力,应用EdU试剂盒测定两组细胞增值能力,应用透射显微镜观察两组细胞线粒体形态,应用免疫荧光检测两组细胞自噬相关蛋白表达水平。结果 与E组细胞相比,TDP-43组细胞活力明显下降,增殖能力下降,差异有统计学意义(P<0.05);线粒体形态异常,自噬相关蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 稳定转染TDP-43可导致NSC34细胞自噬异常,线粒体形态改变,降低细胞活力和增殖能力。 展开更多
关键词 TDP-43 nsc34细胞 肌萎缩侧索硬化 自噬
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天麻素对肌萎缩侧索硬化症细胞模型的药理作用及机制研究 被引量：4
2
作者 姜懿纳 阳松威 +2 位作者 朱天碧 张钊 陈乃宏 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期729-733,共5页
目的探讨天麻素对肌萎缩侧索硬化症h SOD1^(G93A) NSC34细胞模型的影响及机制。方法给予正常培养的NSC34细胞天麻素后,观察细胞形态活力变化。通过转染h SOD1^(WT)和h SOD1^(G93A)质粒,建立h SOD1^(WT)和h SOD1^(G93A)NSC34稳定细胞系... 目的探讨天麻素对肌萎缩侧索硬化症h SOD1^(G93A) NSC34细胞模型的影响及机制。方法给予正常培养的NSC34细胞天麻素后,观察细胞形态活力变化。通过转染h SOD1^(WT)和h SOD1^(G93A)质粒,建立h SOD1^(WT)和h SOD1^(G93A)NSC34稳定细胞系后再给予天麻素干预以观察h SOD1^(WT)和h SOD1^(G93A) NSC34细胞形态和活力变化以及MDA水平。结果在正常培养的NSC34细胞内加入天麻素后,细胞的形态和活力均无明显影响(P>0.05);在成功转染h SOD1^(WT)和h SOD1^(G93A)质粒的NSC34细胞内加入天麻素后,细胞活力明显增加(P<0.05,P<0.01),MDA水平下降(P<0.01)。结论天麻素对正常培养的NSC34细胞无明显影响,但对转染h SOD1G93A质粒后的细胞,有明显促进细胞存活和降低MDA的作用。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 天麻素 nsc34细胞 SOD1 中药
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稳定转染hSOD1G93A增加NSC34细胞凋亡
3
作者 齐伟静 刘亚玲 +3 位作者 周晓萌 杨帅 耿丽颖 张欣 《脑与神经疾病杂志》 CAS 2021年第9期544-547,共4页
目的探讨稳定转染hSOD1G93A对NSC34细胞凋亡的影响。方法常规体外培养稳定转染空质粒、hSOD1WT或hSOD1G93A质粒的NSC34细胞系,分为3组:空转组、野生组和突变组。应用CCK-8试剂盒和LDH试剂盒来测定各组细胞活力,应用透射电镜观察细胞线... 目的探讨稳定转染hSOD1G93A对NSC34细胞凋亡的影响。方法常规体外培养稳定转染空质粒、hSOD1WT或hSOD1G93A质粒的NSC34细胞系,分为3组:空转组、野生组和突变组。应用CCK-8试剂盒和LDH试剂盒来测定各组细胞活力,应用透射电镜观察细胞线粒体形态,通过TUNEL染色来检测细胞凋亡情况,应用Western blotting检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达水平。结果与空转组和野生组细胞相比,突变组细胞线粒体形态异常,细胞活力明显下降,凋亡细胞数量增多,差异有统计学意义(P<0.05);且突变组细胞Bcl-2的蛋白表达水平显著下降,Bax的蛋白表达水平均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论稳定转染hSOD1G93A可导致NSC34细胞线粒体形态异常,降低抗凋亡蛋白的表达水平,增加促凋亡蛋白的表达水平,最终导致凋亡细胞增加。 展开更多
关键词 hSOD1G93A nsc34细胞 肌萎缩侧索硬化 凋亡
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转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响
4
作者 王寿刚 陆玉成 +6 位作者 黄丽梅 尤翠平 王龙 王富敏 苏全平 于继徐 车峰远 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期905-909,共5页
目的探讨转染hSODl．G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响。方法常规体外培养未转染、转染pcDNA3．1（-）、hSODl-pcDNA3．1（-）和hSODl-G93A—pcDNA3．1（-）质粒的NSC-34细胞系；分为正常组、空转组、野生组和突变组。利用... 目的探讨转染hSODl．G93A对NSC-34细胞内铁代谢相关蛋白表达的影响。方法常规体外培养未转染、转染pcDNA3．1（-）、hSODl-pcDNA3．1（-）和hSODl-G93A—pcDNA3．1（-）质粒的NSC-34细胞系；分为正常组、空转组、野生组和突变组。利用免疫组化染色法观察各组细胞的形态变化；通过检测丙二醛（MDA）含量观察各组细胞氧化应激水平；用逆转录聚合酶链式反应rRT．PCR）和Westernblotting分别检测各组细胞内铁代谢相关蛋白的基因和蛋白表达水平。结果突变组的细胞胞体变圆，突起减少、变短，细胞内MDA含量明显高于其他3组细胞，差异有统计学意义（P〈0．05）；各组细胞内的转铁蛋白受体（TfR）、二价金属离子转运体1（DMTI）、铁蛋白等基因在基因水平上表达差异无统计学意3L（P〈0．05）；各组细胞内的TfR、DMTl、铁蛋白等在蛋白水平上表达差异无统计学意义（胗O．05），但是突变组细胞铁蛋白表达较正常组细胞明显升高，差异有统计学意义（P，0．051。结论转染hSOD1-G93A对NSC-34细胞（突变组）内TfR、DMTl表达无明显影响．但可以使细胞内铁蛋白在蛋白表达水平明显升高。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化 nsc-34细胞 转铁蛋白受体 二价金属离子转运体1
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