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钉螺一氧化氮合酶分布的酶组织化学研究 被引量:18
1
作者 梁幼生 戴建荣 +5 位作者 朱荫昌 周晓农 张艳 熊希凯 黄轶昕 杭盘宇 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第4期196-197,255,共3页
目的 定位研究一氧化氮合酶 (NOS)在日本血吸虫中间宿主—钉螺体内分布及活性。方法 用还原型尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸硫辛酰胺脱氢酶 (NADPH- d)酶组织化学技术 ,对钉螺软体的整体连续切片作系统观察。结果 头足部肌纤维间含丰富... 目的 定位研究一氧化氮合酶 (NOS)在日本血吸虫中间宿主—钉螺体内分布及活性。方法 用还原型尼可酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸硫辛酰胺脱氢酶 (NADPH- d)酶组织化学技术 ,对钉螺软体的整体连续切片作系统观察。结果 头足部肌纤维间含丰富 NOS阳性神经元 ;中枢神经节纤维区、心脏壁、雌雄生殖细胞、咽管等呈 NOS强阳性 ;腮管壁呈 NOS阳性。结论  NO作为重要生物信使 ,直接参与钉螺神经肌肉运动。 展开更多
关键词 钉螺 一氧化氮合酶 nadph-D 酶组织化学 灭钉螺 日本血吸虫
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鸭肝脂肪酸合成酶的NADPH底物抑制及作用动力学 被引量:14
2
作者 田维熙 蒋若帆 +2 位作者 吴海斌 史艳红 王一煌 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第4期413-419,共7页
己知动物脂肪酸合成酶的底物乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A具有竞争性双底物抑制的乒乓机制。实验发现鸭肝脂肪酸合成酶的第三个底物NADPH也具有底物抑制,并研究了它的规律及与NADPH有关的稳态动力学。发现对于该酶的全反应,增... 己知动物脂肪酸合成酶的底物乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A具有竞争性双底物抑制的乒乓机制。实验发现鸭肝脂肪酸合成酶的第三个底物NADPH也具有底物抑制,并研究了它的规律及与NADPH有关的稳态动力学。发现对于该酶的全反应,增加丙二酰辅酶A浓度,降低环境盐浓度,均使NADPH底物抑制减少。但以NADPH作底物的酮酰还原和烯酰还原二步单独反应以及包含四步单独反应的乙酰乙酰辅酶A还原反应都无NADPH底物抑制现象。NADPH底物抑制对丙二酰辅酶A为竞争性,丙二酰辅酶A底物抑制对NADPH为非竞争性。在全反应中NADPH和丙二酰辅酶A之间发现为乒乓机制,在乙酰乙酰辅酶A还原反应中,两个底物NADPH和乙酰乙酰辅酶A之间则表现为序列反应机制。降低环境盐浓度使NADPH和丙二酰辅酶A之间的乒乓机制向序列机制转化。在全反应中,NADP产物抑制相对NADP为竞争性,对丙二酰辅酶A为非竞争性。 展开更多
关键词 酶动力学 脂肪酸合成酶 nadph
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谷氨酸生产菌S^(9114)中的谷氨酸脱氢酶的研究 被引量:6
3
作者 王燕 宋香 +2 位作者 杨平平 段作营 毛忠贵 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期725-729,共5页
谷氨酸脱氢酶 (GDH)是谷氨酸生物合成的关键酶 ,谷氨酸棒杆菌S91 1 4是目前我国味精工业应用最广泛的生产菌种 ,其谷氨酸脱氢酶的研究尚未见报道。分离纯化该菌中的谷氨酸脱氢酶 ,研究其辅酶组成 ,对揭示谷氨酸脱氢酶的分子结构和性质 ... 谷氨酸脱氢酶 (GDH)是谷氨酸生物合成的关键酶 ,谷氨酸棒杆菌S91 1 4是目前我国味精工业应用最广泛的生产菌种 ,其谷氨酸脱氢酶的研究尚未见报道。分离纯化该菌中的谷氨酸脱氢酶 ,研究其辅酶组成 ,对揭示谷氨酸脱氢酶的分子结构和性质 ,提高谷氨酸产率很有必要。将培养至对数期中期的细胞离心收集并用含适量DTT、ED TA的Tris_HCl缓冲液 (pH 7 5 )洗涤 ,用Frenchpressurecellpress破碎 ,离心去除菌体碎片得无细胞抽提液。然后使用 KTA_10 0快速纯化系统经DEAE_纤维素柱、疏水柱 (HIC)、G_2 0 0凝胶过滤柱层析得到纯化大约 70倍的以NAD PH为辅酶的GDH和部分纯化的以NADH辅酶的GDH。这两个酶分别对NADPH、NADH高度专一 ,不能相互代替。经HPLC和SDS_PAGE测得前一种酶的分子量和亚基分子量分别为 188kD和 32kD ,表明该酶为具有相同亚基的六聚体。酶活性测定使用HITACHIU_30 0 0分光光度计利用NAD(P)H在 340nm氧化的初速度进行。蛋白质含量测定利用Bradford方法进行 ,并以牛血清白蛋白为标准蛋白。纯化结果表明S91 1 4中确实存在两种GDH ,其中以NADH为辅酶的GDH尚未见报道。和某些具有两种GDH的微生物一样 ,S91 1 4可能也是以NADPH为辅酶的GDH参与谷氨酸的合成代谢 ,以NADH为辅酶的GDH参与谷氨酸的分解代谢。 展开更多
关键词 谷氨酸脱氢酶 提纯 谷氨酸棒杆菌 NADH nadph 谷氨酸 生产菌
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黄芪总皂苷对缺氧性肺动脉高压作用探讨 被引量:7
4
作者 李旭东 马勇 +4 位作者 邓润鹏 苍雪玉 吴飞燕 李永涛 金海峰 《天津医药》 CAS 北大核心 2021年第3期264-268,I0001,共6页
目的探讨黄芪总皂苷(AST)对缺氧性肺动脉高压(HPH)病理进展的抑制作用及相关机制。方法28只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、HPH组、HPH+AST15[15 mg/(kg·d)]组、HPH+AST45[45 mg/(kg·d)]组,每组7只。采用间断式常压低氧建立... 目的探讨黄芪总皂苷(AST)对缺氧性肺动脉高压(HPH)病理进展的抑制作用及相关机制。方法28只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、HPH组、HPH+AST15[15 mg/(kg·d)]组、HPH+AST45[45 mg/(kg·d)]组,每组7只。采用间断式常压低氧建立大鼠HPH模型。实验28 d后,检测大鼠右心室收缩压力(RVSP);计算右心室(RV)和左心室+室间隔(LV+S)的比值RV/(LV+S);HE染色及免疫荧光染色观察大鼠肺动脉结构重建,计算肺动脉厚度百分比(WT)、面积百分比(WA),并测量肺动脉α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的光密度(OD)值;分光光度法检测大鼠肺组织及血清中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)水平;Western blot法检测大鼠肺组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶Nox2和Nox4蛋白表达情况。结果与对照组比较,HPH组大鼠RVSP、RV/(LV+S)、WT、WA、α-SMA均增高(P<0.05),肺组织及血清中的SOD、CAT水平明显降低,而MDA水平增高(P<0.05),肺组织中Nox2和Nox4蛋白表达水平升高(P<0.05)。与HPH组比较,HPH+AST15组和HPH+AST45组大鼠RVSP、RV/(LV+S)、WT、WA、α-SMA均降低(P<0.05),肺组织及血清中的SOD、CAT水平升高,MDA水平降低(P<0.05),肺组织中Nox2和Nox4蛋白表达水平均降低(P<0.05),其中HPH+AST45组WT、WA、α-SMA及肺组织MDA水平、Nox2和Nox4蛋白表达水平均较HPH+AST15组更低(P<0.05)。结论黄芪总皂苷可抑制大鼠HPH的病理进展,其机制可能与提高大鼠体内SOD和CAT水平并抑制Nox2和Nox4表达有关。 展开更多
关键词 高血压 肺性 低氧 活性氧 疾病模型 动物 nadph氧化酶 黄芪总皂苷 氧化性应激 抗氧化酶
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甘蓝型油菜种质资源创新与抗寒机理研究进展 被引量:3
5
作者 祁伟亮 孙万仓 +14 位作者 马骊 乔岩 武军艳 乔义林 陈红 刘丽君 蒲媛媛 赖守孝 李学才 方彦 王旺田 李金玲 袁兰兰 姚来来 王静 《中国野生植物资源》 CSCD 2023年第4期70-77,85,共9页
冷胁迫是甘蓝型油菜种植推广的主要限制性因素之一,通过近缘种间杂交和轮回选择可丰富甘蓝型油菜的遗传背景与种质资源创新,近几年创制的强抗寒甘蓝型油菜已实现从北纬35°20'的适宜种植区域北移扩展至陕西洛川(北纬35°46&... 冷胁迫是甘蓝型油菜种植推广的主要限制性因素之一,通过近缘种间杂交和轮回选择可丰富甘蓝型油菜的遗传背景与种质资源创新,近几年创制的强抗寒甘蓝型油菜已实现从北纬35°20'的适宜种植区域北移扩展至陕西洛川(北纬35°46')、甘肃兰州上川(北纬36°03')、山西临汾(北纬36°20')和河北石家庄(北纬38°00')等区域的种植。甘蓝型油菜抗寒理论研究表明:强抗寒甘蓝型油菜形态特征表现为半直立或匍匐生长、叶色较深或呈紫红色、根系较为发达等,这主要与强抗寒甘蓝型油菜的渗透物质和抗氧化酶活性积累有关,进而达到保护细胞和减少ROS信号积累的作用。研究证明甘蓝型油菜组织细胞中NADPH酶介导产生的ROS在调控甘蓝型油菜生长发育及冷胁迫应激响应过程中扮演着重要的角色。为此甘蓝型油菜种质资源创新和抗寒机理研究是甘蓝型冬油菜“北移西扩”的重要技术保障,也是中国西北冬油菜产业发展的关键。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 nadph 活性氧 冷胁迫
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谷氨酸生产菌S_(9114)中依赖于NADPH谷氨酸脱氢酶的纯化及性质 被引量:3
6
作者 王燕 宋香 +2 位作者 杨平平 段作营 毛忠贵 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期5-9,共5页
利用DEAE 纤维素离交柱层析、疏水柱层析和凝胶过滤层析等从谷氨酸棒杆菌S9114 中分离纯化出依赖于NADPH的谷氨酸脱氢酶 (GOH NADPH )。经HPLC测定 ,该酶的分子量为 188ku ;经SDS -PAGE电泳测得该酶的亚基分子量为 3 2ku。提示该谷氨酸... 利用DEAE 纤维素离交柱层析、疏水柱层析和凝胶过滤层析等从谷氨酸棒杆菌S9114 中分离纯化出依赖于NADPH的谷氨酸脱氢酶 (GOH NADPH )。经HPLC测定 ,该酶的分子量为 188ku ;经SDS -PAGE电泳测得该酶的亚基分子量为 3 2ku。提示该谷氨酸脱氢酶由 6个亚基组成。该酶对NADPH具有高度专一性 ,在pH 7 5、3 7℃下 ,以α 酮戊二酸、NH4Cl和NADPH为底物时的米氏常数Km 分别为 9 2 2mmol/L、5 2 7mmol/L和 2 3 1× 10 -3mmol/L。最适反应pH为 7 5 ,最适反应温度为 42℃ ,并对热比较稳定。此外 ,KCl对GDH NADPH的活性具有激活作用。 展开更多
关键词 谷氨酸生产菌 谷氨酸脱氢酶 nadph 谷氨酸棒杆菌 分离纯化 发酵生产
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氧化应激在高脂高盐饮食伴高糖饮水诱导的代谢综合征肾病大鼠中的作用 被引量:2
7
作者 孔祥 张道友 +2 位作者 张妍 吴海兵 李芳霞 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2160-2164,共5页
目的:构建饮食诱导的代谢综合征(MS)肾病大鼠模型,并探讨氧化应激在肾脏损伤中的作用。方法:7周龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)和MS模型组(n=10)。MS大鼠喂饲高脂高盐(HFS)饲料和20%蔗糖饮水20周。测定尾动脉收缩压(SBP);测空腹... 目的:构建饮食诱导的代谢综合征(MS)肾病大鼠模型,并探讨氧化应激在肾脏损伤中的作用。方法:7周龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)和MS模型组(n=10)。MS大鼠喂饲高脂高盐(HFS)饲料和20%蔗糖饮水20周。测定尾动脉收缩压(SBP);测空腹血糖(FBG)、血脂和胰岛素(FIns)水平,计算稳态胰岛素评价指数(HOMA-IR);测肌酐、尿蛋白、尿白蛋白和尿钠含量,并计算肌酐清除率(Ccr)、蛋白排泄率(UPE)、白蛋白排泄率(UAE)和钠排泄率(USE);测肾脏组织总抗氧化能力(T-AOC)、抑制超氧阴离子能力(ISAC)、丙二醛(MDA)含量以及抗氧化酶活性;Western blotting检测肾脏铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和NADPH氧化酶亚单位p47phox、p22phox蛋白表达;PAS和Masson染色观察肾脏病理变化并进行评分。结果:与正常组相比,MS大鼠SBP、血脂、FIns、HOMA-IR、USE和UAE增高;肾脏T-AOC、ISAC和SOD活性降低,MDA含量增加;p47phox蛋白表达增高,Cu/Zn-SOD蛋白表达降低;肾小球硬化评分升高。结论:喂饲大鼠HFS饮食和高糖饮水可建立模拟大部分临床特征的MS肾病模型。NADPH氧化酶表达增高和SOD表达减少而引起的氧化应激是导致MS大鼠肾脏损伤的机制之一。 展开更多
关键词 代谢综合征 肾病 氧化性应激 nadph氧化酶 抗氧化酶
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深黄被孢霉苹果酸酶基因的克隆和表达 被引量:1
8
作者 崔锦锦 李凌彦 +3 位作者 季秀玲 林连兵 魏云林 张琦 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期129-133,共5页
为了克隆与表达深黄被孢霉(Mortierella isabellina)M6-22苹果酸酶基因,根据深黄被孢霉M6-22转录组测序结果,以其c DNA为模板PCR扩增苹果酸酶基因编码序列,经测序验证分析后将扩增片段连接到表达载体pET-32a(+)中构建重组表达质粒pET32a... 为了克隆与表达深黄被孢霉(Mortierella isabellina)M6-22苹果酸酶基因,根据深黄被孢霉M6-22转录组测序结果,以其c DNA为模板PCR扩增苹果酸酶基因编码序列,经测序验证分析后将扩增片段连接到表达载体pET-32a(+)中构建重组表达质粒pET32a MIME2并进一步转化入大肠杆菌BL21中进行诱导表达,经镍柱亲和纯化目的蛋白和酶活分析确定其为苹果酸酶.PCR扩增得到全长为1 815 bp的cDNA序列,序列分析表明该序列具有一个编码604个氨基酸的开放阅读框,预测编码蛋白分子量(Mr)为66.4×10~3.预测的氨基酸序列与已报道的苹果酸酶同样具有保守的2个二核苷酸结合结构域和1个二价金属离子结合结构域,因此是一个新的苹果酸酶基因序列,命名为MIME2,Gen Bank序列号为KU097323.将该序列转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE电泳检测到1条约67×10~3的蛋白条带表达,经镍柱纯化和酶活分析表明所纯化蛋白能催化苹果酸脱氢生成丙酮酸,同时生成NADPH,具有苹果酸酶的特性,其酶活大小为177.46 U/mg.以上结果证明所克隆的cDNA序列MIME2为1个新的苹果酸酶基因,基因编码蛋白具有苹果酸酶活性,可为深入研究苹果酸酶的结构和功能关系以及进一步应用奠定基础. 展开更多
关键词 深黄被孢霉 苹果酸酶 基因克隆与表达 nadph
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一种新型醛酮还原酶的克隆表达、性质研究以及在不对称合成(R)-CHBE中的应用
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作者 张瑾成 魏淼 +1 位作者 许琳 严明 《生物加工过程》 CAS 2016年第2期33-40,共8页
为开发催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)制备(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((R)-CHBE)的新型催化剂,挖掘到了来自白色念珠菌SC5314中的一种NADPH辅酶依赖型醛酮还原酶CAK基因(cak),并将该基因在大肠杆菌中表达。将重组酶进行纯化后,测定其酶学性质... 为开发催化4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)制备(R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯((R)-CHBE)的新型催化剂,挖掘到了来自白色念珠菌SC5314中的一种NADPH辅酶依赖型醛酮还原酶CAK基因(cak),并将该基因在大肠杆菌中表达。将重组酶进行纯化后,测定其酶学性质,并构建了以葡萄糖为辅底物的双酶偶联辅酶再生系统,考察其不对称转化制备(R)-CHBE的能力。结果表明:CAK对多种醛酮类化合物有催化活性,其催化COBE的最适反应温度为40℃,最适p H为5。CAK在40℃下以及酸性条件中能保持较好的稳定性。Mg2+、Na+、K+对酶活有一定的激活作用,而Cu2+存在条件下酶会彻底失活。乙酸乙酯、邻苯二甲酸二丁酯对酶活的抑制作用较小。利用双酶偶联辅酶再生系统不对称转化制备(R)-CHBE。在合适的条件下,转化600 mmol/L的底物,产率达80.6%,产物对映体过量值(e.e.值)>99%。 展开更多
关键词 醛酮还原酶 nadph再生 蛋白纯化 酶学性质 (R)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯
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通络方剂对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响 被引量:11
10
作者 张春阳 邹俊杰 +3 位作者 石勇铨 曲卫 孙亮亮 刘志民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期940-943,共4页
目的:研究两种剂型通络方剂(超微粉和微粉)对糖尿病SD大鼠肾脏氧化应激的影响。方法:链脲佐菌素(60 mg/kg)腹腔注射诱导糖尿病大鼠。1周后测血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病,将大鼠随机分为糖尿病对照组(DMC,n=7)、通络方剂超微粉组(DM+UT,n... 目的:研究两种剂型通络方剂(超微粉和微粉)对糖尿病SD大鼠肾脏氧化应激的影响。方法:链脲佐菌素(60 mg/kg)腹腔注射诱导糖尿病大鼠。1周后测血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病,将大鼠随机分为糖尿病对照组(DMC,n=7)、通络方剂超微粉组(DM+UT,n=8)和通络方剂微粉组(DM+FT,n=8)3组,同时取8只大鼠作为正常对照组(NC)。DM+UT组和DM+FT组按每天1 g/kg UT或FT灌胃,NC和DMC组给予等量的生理盐水溶液。干预4周后,测肾质量/体质量(KW/BW)和24 h尿蛋白(24 h UP),比色法检测肾皮质抗氧化酶和丙二醛(MDA),实时PCR法检测NADPH氧化酶亚基p47phox和p22phox mRNA表达的改变。结果:与正常大鼠相比,糖尿病大鼠肾皮质MDA含量、24 h UP和KW/BW升高,总超氧化物歧化酶(TSOD)活性降低,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性升高,均有统计学意义;正常大鼠与糖尿病大鼠间过氧化氢酶(CAT)活性差异无统计学意义。与DMC组相比,两个通络方剂干预组糖尿病大鼠肾皮质MDA、24 h UP和KW/BW明显降低;TSOD和GSH-Px活性增强,差异均有统计学意义。DMC组和两个通络方剂组间CAT活性差异无统计学意义。其中DM+UT组对24 h UP、KW/BW、MDA、TSOD和GSH-Px的作用较DM+FT组更明显,差异有统计学意义。与正常大鼠相比,糖尿病大鼠肾皮质NADPH氧化酶亚基p47phox mRNA表达增强,差异有统计学意义。与DMC组相比,两个通络方剂干预组p47phox mRNA表达降低,差异有统计学意义,但两干预组间差异无统计学意义。在各实验组间NADPH氧化酶亚基p22phox mRNA表达的差异无统计学意义。结论:通络方剂能增强糖尿病大鼠肾脏TSOD和GSH-Px活性,降低NADPH氧化酶p47phox mRNA的表达,可能因此抑制肾脏氧化应激水平,减轻糖尿病大鼠早期的肾脏损伤。 展开更多
关键词 通络方剂 糖尿病 抗氧化酶 nadph氧化酶
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ACE2基因过表达减轻血管紧张素Ⅱ诱导的神经细胞氧化应激 被引量:10
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作者 彭雯雯 刘国英 +1 位作者 潘燕霞 赵晓霖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1081-1088,共8页
目的:探讨过表达血管紧张素转换酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)基因对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)诱导的小鼠神经母细胞瘤Neuro-2A细胞氧化应激和NADPH氧化酶(NADPH oxidase, NOX)表达的影响。方法:构建ACE2重组... 目的:探讨过表达血管紧张素转换酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)基因对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)诱导的小鼠神经母细胞瘤Neuro-2A细胞氧化应激和NADPH氧化酶(NADPH oxidase, NOX)表达的影响。方法:构建ACE2重组慢病毒载体,以感染复数(multiplicity of infection,MOI)=10转染Neuro-2A细胞72 h,测定ACE2基因转染效率和ACE2蛋白表达,并检测神经细胞标志物以鉴定Neuro-2A细胞。Neuro-2A细胞分为7组:空白对照(control)组、慢病毒载体(eGFP)组、重组ACE2(ACE2-eGFP)组、AngⅡ刺激(Ang Ⅱ)组、 Ang Ⅱ+慢病毒载体(Ang Ⅱ-eGFP)组、Ang Ⅱ+ACE2(Ang Ⅱ-ACE2-eGFP)组和Ang Ⅱ+重组ACE2+A779(Ang Ⅱ-ACE2-eGFP-A779)组。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)测定Ang(1-7)水平,DHE染色法检测活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平,Western blot检测MAS受体及NOX亚基(NOX2、NOX4、p47^phox和p67^phox)蛋白表达。结果:AngⅡ显著增加Neuro-2A细胞ROS水平(P<0.01),上调NOX2、NOX4、p47^phox和p67^phox蛋白表达(P<0.01),但下调MAS蛋白表达(P<0.01)。ACE2过表达抑制AngⅡ诱导的ROS增加(P<0.05),下调NOX2、NOX4、p47^phox和p67^phox蛋白表达(P<0.01),还可增加神经细胞Ang(1-7)含量(P<0.01)和MAS受体表达(P<0.01)。MAS受体拮抗剂A779能阻断ACE2下调NOX表达的作用(P<0.05)。结论:ACE2过表达通过MAS受体对抗AngⅡ诱导的神经细胞氧化应激。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2 Neuro-2A细胞 氧化应激 nadph氧化酶 MAS受体
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Cofactor engineering in cyanobacteria to overcome imbalance between NADPH and NADH: A mini review 被引量:4
12
作者 Jongmoon Park Yunnam Choi 《Frontiers of Chemical Science and Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第1期66-71,共6页
Cyanobacteria can produce useful renewable fuels and high-value chemicals using sunlight and atmo- spheric carbon dioxide by photosynthesis. Genetic manip- ulation has increased the variety of chemicals that cyanobact... Cyanobacteria can produce useful renewable fuels and high-value chemicals using sunlight and atmo- spheric carbon dioxide by photosynthesis. Genetic manip- ulation has increased the variety of chemicals that cyanobacteria can produce. However, their uniquely abundant NADPH-pool, in other words insufficient supply of NADH, tends to limit their production yields in case of utilizing NADH-dependent enzyme, which is quite common in heterotrophic microbes. To overcome this cofactor imbalance and enhance cyanobacterial fuel and chemical production, various approaches for cofactor engineering have been employed. In this review, we focus on three approaches: (1) utilization of NADPH- dependent enzymes, (2) increasing NADH production, and (3) changing cofactor specificity of NADH-dependent enzymes from NADH to NADPH. 展开更多
关键词 NADH-dependent enzyme nadph-depen-dent enzyme TRANSHYDROGENASE site-directed mutagenesis enzyme engineering
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猪不同组织中NADPH-生成酶活性规律的探讨 被引量:2
13
作者 季海峰 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 1994年第1期27-31,共5页
北京花猪Ⅱ系在35kg体重时,背膘脂肪中的NADPH-生成酶活性最高,此有随体重的增加而逐渐下降,75kg体重时又开始回升。生长后期,不同背膘位置的酶活性差异不显著,而不同层脂肪的酶活性差异明显,内层高于外层。MDH... 北京花猪Ⅱ系在35kg体重时,背膘脂肪中的NADPH-生成酶活性最高,此有随体重的增加而逐渐下降,75kg体重时又开始回升。生长后期,不同背膘位置的酶活性差异不显著,而不同层脂肪的酶活性差异明显,内层高于外层。MDH、G6PDH和6PGDH在脂肪组织中活性较高,而在肝脏、心肌和肌肉中却很低。在遗传上有差异的北京花猪Ⅱ系和长白猪,可由酶活性反映出来。若以肩部外层脂肪的MDH和G6PDH作为早期选种的遗传标记,有望加胴体蓄脂年的育种进程。 展开更多
关键词 组织 nadph-生成酶 活性
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一氧化氮合酶在大鼠胃壁的分布 被引量:4
14
作者 彭曦 冯晋斌 汪仕良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期124-127,共4页
目的:了解一氧化氮合酶(NOS)在大鼠胃壁的分布规律。方法:采用NADPH-黄递酶(NDP)组化法和整装铺片技术对NOS在大鼠胃壁的分布进行定量和定位研究。结果:NOS广泛分布于大鼠胃壁内,主要定位于肌间神经丛,在粘... 目的:了解一氧化氮合酶(NOS)在大鼠胃壁的分布规律。方法:采用NADPH-黄递酶(NDP)组化法和整装铺片技术对NOS在大鼠胃壁的分布进行定量和定位研究。结果:NOS广泛分布于大鼠胃壁内,主要定位于肌间神经丛,在粘膜下丛、胃粘膜表面、胃腺及血管壁等处亦有分布。胃肌丛中NOS阳性神经元形态基本类似,以圆形和卵圆形为主,但在胃不同区域神经元的分布密度、胞体大小和染色强度存在较大差异。密度分别为胃窦部:62.1±37.7个/mm2;胃体部:43.4±31.7个/mm2;胃底部:31.6±27.8个/mm2;胃底部神经元胞体较大,染色较深;胃窦部神经元大小不等,染色深浅不一;胃体部的则介于二者之间,呈过渡态。一些神经纤维的膨体呈NOS阳性反应,它们串在一起形成“串珠”样结构,且多与血管和肌纤维伴行。结论:①一氧化氮(NO)可能参与对胃的运动、分泌和血液循环的调节。②NOS阳性神经元在胃各部肌间神经丛中的分布差异可能与胃的生理功能密切相关。 展开更多
关键词 一氧化氮合酶 酶组织化学 大鼠 NDP
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北京黑猪NADPH生成酶活性的遗传分析 被引量:4
15
作者 王楚端 陈清明 张曼夫 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 1999年第1期12-13,共2页
本文收集1302头北京黑猪个体测定资料,利用最小二乘模型估计北京黑猪背膘脂肪组织NADPH生成酶活性、背膘厚、日增重、饲料转化率等性状的遗传力、遗传相关、表型相关、环境相关等参数,同时估计了1991~1995年间这些... 本文收集1302头北京黑猪个体测定资料,利用最小二乘模型估计北京黑猪背膘脂肪组织NADPH生成酶活性、背膘厚、日增重、饲料转化率等性状的遗传力、遗传相关、表型相关、环境相关等参数,同时估计了1991~1995年间这些性状的变化以及采样体重、性别等因素对NADPH生成酶活性的影响。结果表明:①NADPH生成酶总活性的估计遗传力为0.25±0.03(P<0.01);②NADPH生成酶活性与背膘厚、日增重、饲料转化率的遗传相关分别为0.51,0.75及0.48;③在50kg左右体重采样时,不同性别测定猪NADPH生成酶总活性有显著差别(P<0.05)。 展开更多
关键词 北京黑猪 nadph生成酶 遗传标记
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NADPH氧化酶4在1型糖尿病模型小鼠角膜病变中的致病作用及其机制
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作者 赵文心 张弦 +4 位作者 覃亚周 张明 高宁 秦莉 李晶明 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期602-612,共11页
目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4(Nox4)在1型DM模型小鼠角膜病变中的致病作用及其可能机制。方法选择Nox4基因敲除(Nox4^(-/-))纯合子雄性小鼠40只,以鼠龄、性别匹配的野生型C57BL/6(Nox4^(+/+))小鼠120只作为对照。采用随... 目的探讨还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4(Nox4)在1型DM模型小鼠角膜病变中的致病作用及其可能机制。方法选择Nox4基因敲除(Nox4^(-/-))纯合子雄性小鼠40只,以鼠龄、性别匹配的野生型C57BL/6(Nox4^(+/+))小鼠120只作为对照。采用随机数字表法分别将2种小鼠随机分为DM组和非DM组,DM组小鼠采用链脲佐菌素腹腔内注射法构建1型DM模型。采用随机数字表法分别将Nox4^(+/+)小鼠DM组和非DM组分为普通饲料喂养小鼠和添加Nox4抑制剂GKT137831(GKT)饲料喂养小鼠。于DM造模后第16周采用酚红棉线法检测各组小鼠泪液分泌量;采用荧光素钠染色评分法评估角膜上皮完整性;采用激光扫描共聚焦显微镜观察角膜基质层神经纤维密度变化;采用CellROX荧光探针检测角膜上皮中活性氧簇(ROS)含量;采用免疫荧光染色法检测小鼠角膜上皮中E-Cadherin蛋白和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达变化;采用角膜铺片TUBB3染色法检测角膜中央区神经纤维密度。结果Nox4^(+/+)小鼠DM组和非DM组泪液分泌量分别为(2.40±1.18)和(5.30±1.02)mm/min,差异有统计学意义(P<0.01);Nox4^(-/-)小鼠DM组泪液分泌量为(4.19±0.63)mm/min,明显多于Nox4^(+/+)小鼠DM组,差异有统计学意义(P<0.05);普通饲料喂养小鼠与GKT添加饲料喂养小鼠DM组泪液分泌量分别为(2.23±0.83)和(4.02±0.71)mm/min,差异有统计学意义(P<0.01)。与Nox4^(+/+)小鼠非DM组比较,Nox4^(+/+)小鼠DM组角膜荧光素染色评分显著升高,角膜神经纤维密度显著降低,角膜上皮中ROS荧光强度明显增强,E-Cadherin蛋白表达荧光强度减弱,NF-κB蛋白表达荧光强度增强。Nox4^(-/-)或GKT添加饲料喂养小鼠DM组与非DM组比较角膜上皮中ROS荧光增强,E-Cadherin蛋白表达荧光减弱。Nox4^(-/-)和GKT添加饲料喂养小鼠DM组角膜上皮细胞中NF-κB蛋白荧光强度均较弱,与非DM组强度一致。角膜铺片免疫荧光染色显示,Nox4^(+/+)小鼠DM组中TUBB3染� 展开更多
关键词 糖尿病/并发症 角膜病变 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶 氧化应激 酶抑制剂/治疗作用 疾病模型 近交系C57BL小鼠
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NADPH生成酶活性与猪肉质关系的初步研究
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作者 方苏虹 熊远著 +1 位作者 向 王辉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期331-332,共2页
0 前言随着瘦肉型猪在生产上的推广,P.S.E.猪(Pale,Soft and Exudative pigs)在经济上造成的损失也越来越大。七十年代以后,国内、外在对瘦肉型猪选育的同时,广泛开展了对肉质的研究。猪体内酶活性变化与肉质、肉量关系的研究也受到重视... 0 前言随着瘦肉型猪在生产上的推广,P.S.E.猪(Pale,Soft and Exudative pigs)在经济上造成的损失也越来越大。七十年代以后,国内、外在对瘦肉型猪选育的同时,广泛开展了对肉质的研究。猪体内酶活性变化与肉质、肉量关系的研究也受到重视。P.S.E.肉在瘦肉率高的猪中多发;其红细胞易于溶血,肌细胞膜易于受损,破裂;糖代谢活动紊乱等,这似乎都与体内NADPH生成酶活性有关。因此,特作本试验。1 材料与方法1987年春,用ES猪53头。其中:公猪31头,母猪22头。出生年龄差别在20天以内。试猪三月龄时,采血用荧光分光光度法测定苹果酸酶(ME),葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD)三种NADPH生成酶的活性。然后进行氟烷测定。试猪六月龄时,电击后再测血中ME的活性。宰后测定肌肉中ME、G6PD和6PGD三种酶活性。并测定背最长肌的pH值、肉色值和系水力值,算出肉质模糊综合评定值(FSD值)。 展开更多
关键词 生成酶 肉质 nadph 活性
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非生物胁迫对平菇抗氧化酶及NADPH氧化酶活性的影响 被引量:1
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作者 李银凤 刘晓柱 《食品科技》 CAS 北大核心 2022年第7期26-32,共7页
为分析非生物胁迫对平菇抗氧化酶以及NADPH氧化酶活性的影响,采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)培养平菇菌丝体,并进行温度胁迫(高温和低温)、盐胁迫、脱水胁迫、酸碱胁迫、氧化胁迫以及重金属胁迫(Cd、Pb)等非生物胁迫处理,测定各胁迫... 为分析非生物胁迫对平菇抗氧化酶以及NADPH氧化酶活性的影响,采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)培养平菇菌丝体,并进行温度胁迫(高温和低温)、盐胁迫、脱水胁迫、酸碱胁迫、氧化胁迫以及重金属胁迫(Cd、Pb)等非生物胁迫处理,测定各胁迫处理组的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)以及NADPH氧化酶的活性,同时实时荧光定量PCR方法检测各非生物胁迫处理组NADPH氧化酶基因NoxA的表达量。结果表明,非生物胁迫均可增强SOD、POD和CAT的活性,高温和低温胁迫、脱水胁迫以及重金属胁迫均可提高NADPH氧化酶的活性,上调NADPH氧化酶基因NoxA的表达;而盐胁迫、酸、碱胁迫以及氧化胁迫则降低了NADPH氧化酶的活性,下调NoxA的表达。因而,非生物胁迫可造成平菇菌丝体的氧化胁迫,提高了抗氧化酶的活性;同时NADPH氧化酶也参与了平菇响应非生物胁迫过程,但对不同的非生物胁迫响应模式具有差异性。 展开更多
关键词 平菇 菌丝体 非生物胁迫 抗氧化酶 nadph氧化酶
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福辛普利对糖尿病大鼠肾脏NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA表达的影响
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作者 彭炎强 纪玉莲 +2 位作者 姜宗培 余学清 张海燕 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期343-348,共6页
目的观察福辛普利对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶p22phox亚基mRNA表达及细胞外基质(ECM)聚积的影响,并探讨其可能机制。方法STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病非治疗组(DM组)和福辛... 目的观察福辛普利对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶p22phox亚基mRNA表达及细胞外基质(ECM)聚积的影响,并探讨其可能机制。方法STZ诱导的糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病非治疗组(DM组)和福辛普利治疗组(DM+Fosin组,福辛普利10mg·kg^-1·d^-1),疗程12周。RT-PCR法检测肾脏NADPH氧化酶p22phox mRNA的表达;免疫组织化学方法检测肾脏纤连蛋白(FN)表达;白明胶酶谱法检测肾脏基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性;并检测Scr、尿蛋白排泄量和肾质量指数等指标。结果实验第4周,DM+Fosin组大鼠肾脏NADPH氧化酶p22phox mRNA表达较DM组减少45%(P〈0.05)。第8周时,DM+Fosin组的肾小球和肾小管间质FN表达较DM组分别降低52.5%和42.9%(均P〈0.05);肾脏MMP-9的活性升高29.6%(P〈0.05)。实验第12周时,DM+Fosin组大鼠Scr水平、尿蛋白量(24h)和肾质量指数较DM组分别降低35.9%、50.2%和17.2%(均P〈0.05)。DM+Fosin组和DM组血糖的差异无统计学意义(P〉0.05)。结论福辛普利可延缓糖尿病肾病的发生和发展,其机制可能与通过抑制NADPH氧化酶p22phox亚基mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶抑制剂 nadph氧化酶 氧化应激 糖尿病 细胞外基质
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非膜重组血红素加氧酶系中各分子对血红素降解的作用 被引量:1
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作者 龚兴国 易春光 《吉首大学学报》 1992年第5期87-92,共6页
利用高效液相色谱分别检测NADPH—细胞色素C还原酶、血红素加氧酶、胆绿素还原酶及三者混合物催化血红素降解的产物.发现由NADPH—细胞色素C还原酶和血红素加氧酶的联合活性使血红素氧化降解产生专一性的胆绿素Ⅸ_α.然后,这种胆色素又... 利用高效液相色谱分别检测NADPH—细胞色素C还原酶、血红素加氧酶、胆绿素还原酶及三者混合物催化血红素降解的产物.发现由NADPH—细胞色素C还原酶和血红素加氧酶的联合活性使血红素氧化降解产生专一性的胆绿素Ⅸ_α.然后,这种胆色素又被胆绿素还原酶催化还原成胆红素Ⅸ_α,利用Sepharose-4B柱亲和层析,进一步证明上述三种酶之间存在强烈的相互作用,形成酶的三元复合物.这种复合物通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离产生原来的三种酶,浓度近似于等摩尔比. 展开更多
关键词 非膜重组 血红素加氧酶 降解
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