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bcl-2、bax在NHE-1核酶基因转染所致缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡中的作用 被引量:9
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作者 陆俊羽 姚伟 +3 位作者 钱桂生 杨晓静 陈维中 李淑平 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 2004年第7期394-398,共5页
目的 探讨 bcl 2、bax表达在 Na+ / H+ 交换器 1(NHE 1)抑制而诱导缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)凋亡中的作用。方法 将转染 NHE 1特异性核酶基因大鼠的 PASMCs置于缺氧条件下(O2 的体积分数 <1% )培养 ,分别在缺氧 0、2、6... 目的 探讨 bcl 2、bax表达在 Na+ / H+ 交换器 1(NHE 1)抑制而诱导缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)凋亡中的作用。方法 将转染 NHE 1特异性核酶基因大鼠的 PASMCs置于缺氧条件下(O2 的体积分数 <1% )培养 ,分别在缺氧 0、2、6、12、2 4和 4 8h采用原位细胞凋亡检测法观察细胞凋亡情况 ,荧光指示剂 Fura 2 / AM测定法检测细胞内 Ca2 + 浓度 (〔 Ca2 + 〕i)变化 ,半定量逆转录聚合酶链反应方法检测细胞内 bcl 2 m RNA和 bax m RNA表达变化 ,免疫组化法检测细胞内 Bcl 2蛋白和 Bax蛋白表达的变化。结果 转染 NHE 1特异性核酶基因大鼠的 PASMCs在缺氧培养时 ,其细胞凋亡率随缺氧时间的延长而逐渐升高 ,但是〔 Ca2 + 〕i升高的幅度较小 ,从缺氧 6 h起就显著低于同时间点的对照组和转染逆转录病毒真核表达载体空载体组 (P均 <0 .0 1) ,bcl 2 m RNA及蛋白表达显著降低 ,bax m RNA和蛋白表达显著增加(P均 <0 .0 1)。结论  NHE 1抑制可能通过阻止 PASMCs的〔 Ca2 +〕i增加 ,并引起 bcl 2表达降低及 bax表达增加而诱导和促进缺氧培养的 展开更多
关键词 ^^na^+/h^+交换器-1 bcl-2 凋亡 平滑肌 血管
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小牛血清和血小板源性生长因子对肺动脉平滑肌细胞Na^+/H^+交换器活性和细胞增殖的影响 被引量:7
2
作者 姚伟 钱桂生 +1 位作者 杨晓静 陆俊羽 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 2001年第12期728-731,共4页
目的 :探讨小牛血清和血小板源性生长因子 ( PDGF)对大鼠肺动脉平滑肌细胞 Na+/H+交换器 1( NHE 1)表达和活性的影响 ,及其与细胞增殖的关系。方法 :体外培养肺动脉平滑肌细胞 ,10 %小牛血清、PDGF BB作用 2 4小时后检测细胞 NHE 1m RN... 目的 :探讨小牛血清和血小板源性生长因子 ( PDGF)对大鼠肺动脉平滑肌细胞 Na+/H+交换器 1( NHE 1)表达和活性的影响 ,及其与细胞增殖的关系。方法 :体外培养肺动脉平滑肌细胞 ,10 %小牛血清、PDGF BB作用 2 4小时后检测细胞 NHE 1m RNA表达、2 2 Na摄取量、细胞内 p H( p Hi)和3 H Td R掺入量 ,观察不同浓度 NHE 1抑制剂——乙基 ,异丙基氨氯吡咪 ( EIPA)对细胞凋亡率的影响。结果 :10 %小牛血清、PDGF作用后 2 4小时 ,肺动脉平滑肌细胞中 NHE 1m RNA表达、2 2 Na摄取量明显增加 ,同时伴有 p Hi增高和3 H Td R掺入量增加 ,以 10 %小牛血清作用更为显著。随着 EIPA浓度增加和作用时间延长 ,细胞凋亡率明显增高。结论 :小牛血清、PDGF等生长因子参与调节肺动脉平滑肌细胞 NHE 1表达和激活 ,使细胞内碱化 。 展开更多
关键词 ^^na^+/h^+交换器 血管平滑肌 小牛血清 血小板源性生长因子
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Fas和FasL在Na^+/H^+交换器-1抑制诱导缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡中的作用 被引量:2
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作者 陆俊羽 姚伟 +3 位作者 钱桂生 吴国明 陈维中 李淑平 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期515-518,F0005,共5页
目的探讨Fas、FasL在Na+/H+交换器1(NHE1)抑制所诱导的缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡中的作用。方法将转染NHE1特异性核酶基因的大鼠PASMCs置于缺氧条件下(O2的体积分数低于1%)培养。缺氧培养2、6、12、24和48h后用原位末端标记... 目的探讨Fas、FasL在Na+/H+交换器1(NHE1)抑制所诱导的缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡中的作用。方法将转染NHE1特异性核酶基因的大鼠PASMCs置于缺氧条件下(O2的体积分数低于1%)培养。缺氧培养2、6、12、24和48h后用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况;半定量逆转录聚合酶链反应(sqRTPCR)方法检测细胞内fas和fasLmRNA表达变化;免疫细胞化学法检测细胞内Fas和FasL蛋白表达变化。结果转染NHE1特异性核酶基因的大鼠PASMCs在缺氧培养时,其细胞凋亡率随缺氧时间的延长而逐渐升高,但细胞内fas、fasLmRNA及Fas、FasL蛋白表达与对照组细胞比较差异均无显著性。结论Fas/FasL死亡通路可能不参与NHE1抑制而诱导缺氧大鼠PASMCs凋亡的调控。 展开更多
关键词 ^^na^+/h^+交换器-1 FAS/FASL 细胞凋亡 基因表达 蛋门表达 平滑肌 血管 ^^na^+/h^+交换器 平滑肌细胞凋亡 FASL蛋白
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急性肾损伤相关生物标志物的研究进展 被引量:5
4
作者 任春霞 余自成 《中国临床药学杂志》 CAS 2019年第5期397-400,共4页
急性肾损伤(AKI)是一种临床常见且严重的病症。目前临床上常用血清肌酐(SCr)、血尿素氮和尿量等指标来评价肾功能的下降,但它们的改变仅在严重肾脏损伤后才有意义,且易受非肾因素影响。寻找特异性、敏感性的早期诊断标志物对于AKI的治... 急性肾损伤(AKI)是一种临床常见且严重的病症。目前临床上常用血清肌酐(SCr)、血尿素氮和尿量等指标来评价肾功能的下降,但它们的改变仅在严重肾脏损伤后才有意义,且易受非肾因素影响。寻找特异性、敏感性的早期诊断标志物对于AKI的治疗、降低患者死亡率和改善预后至关重要。AKI早期诊断标志物,主要涉及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)、Klotho、肾损伤分子1(KIM-1)、白细胞介素-18(IL-18)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、高半胱氨酸蛋白61(Cyr 61)、TIMP-2、IGFBP-7、尿Na^+/H^+交换器-3(NHE3)、miRNA、组织蛋白酶(Cats)和肾动脉阻力指数(RRI)等。由于目前还没有一种能够同时具备高灵敏性和高特异性的理想AKI标志物,所以组合标志物将是AKI生物标志物研究的方向。 展开更多
关键词 急性肾损伤 生物标志物 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 半胱氨酸蛋白酶抑制剂C N-乙酰-Β-D-氨基葡萄糖苷酶 ^^尿na^+/h^+交换器-3 肾动脉阻力指数
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Na^+/H^+交换器抑制剂的研究与开发 被引量:3
5
作者 徐云根 张睿 华维一 《药学进展》 CAS 2003年第5期264-269,共6页
综述Na+ /H+ 交换器的病理作用及Na+ /H+ 交换器抑制剂的研究与开发。Na+ /H+ 交换器为细胞膜上的一种转运蛋白质 ,对细胞内pH起调控作用 ,目前已知其有 6个亚型 ,其中亚型 1在心肌缺血再灌注损伤过程中发挥重要作用 ,故而Na+ /H+
关键词 ^^na^+/h^+交换器抑制剂 研究 开发 心肌缺血 再灌注损伤 心肌保护
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Na^+/H^+交换器抑制剂研究进展 被引量:4
6
作者 雷林 徐云根 华维一 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期324-327,共4页
目的 综述最新报道的Na+ /H+ 交换器 (NHE)抑制剂的结构类型及其药理作用 ,为新药研究提供借鉴和指导。方法 通过调研近期国内外文献 ,较全面地介绍了NHE抑制剂研究现状及发展趋势。结果与结论 目前已知有 8个NHE亚型分布于人体的不... 目的 综述最新报道的Na+ /H+ 交换器 (NHE)抑制剂的结构类型及其药理作用 ,为新药研究提供借鉴和指导。方法 通过调研近期国内外文献 ,较全面地介绍了NHE抑制剂研究现状及发展趋势。结果与结论 目前已知有 8个NHE亚型分布于人体的不同组织中 ,在细胞缺血 再灌注发生阶段 ,NHE抑制剂对心脏、脑、肾脏和肝脏产生显著的保护作用 ,是一类有效的细胞缺血 再灌注损伤的治疗药物。 展开更多
关键词 ^^na^+/h^+交换器抑制剂 阿米洛利 缺血-再灌注
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细胞内酸化对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响 被引量:2
7
作者 边肖海 霍静 郑曙民 《长治医学院学报》 2005年第2期81-83,共3页
目的:本实验从细胞酸化角度来探索宫颈癌细胞凋亡的情况,为临床治疗宫颈癌提供新思路。方法:使用EIPA(Na+/H+交换器的特异性抑制剂)抑制Hela细胞中的Na+/H+交换器的作用,通过细胞形态学、DNAladder以及流式细胞检测胞内pH值和DNA亚二倍... 目的:本实验从细胞酸化角度来探索宫颈癌细胞凋亡的情况,为临床治疗宫颈癌提供新思路。方法:使用EIPA(Na+/H+交换器的特异性抑制剂)抑制Hela细胞中的Na+/H+交换器的作用,通过细胞形态学、DNAladder以及流式细胞检测胞内pH值和DNA亚二倍体的方法来研究Hela细胞凋亡的情况。结果:宫颈癌Hela细胞对EIPA产生了剂量依赖性的细胞酸化和凋亡。结论:提示了细胞酸化可能是宫颈癌Hela细胞发生凋亡的一个上游事件,胞内pH值的降低可以引起Hela细胞凋亡。 展开更多
关键词 细胞凋亡 细胞内Ph ^^na^+/h^+交换器 胞内酸化
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Na^+/H^+交换器-1在新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞损伤中的作用 被引量:1
8
作者 陈亮 董文斌 +4 位作者 李清平 邓存良 陈枫 雷小平 熊涛 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第18期1412-1414,共3页
目的探讨Na+/H+交换器-1(NHE1)在新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)损伤中的作用。方法以HK-2为研究对象,以200 mL/L新生儿窒息后血清作为攻击因素处理HK-2细胞。首先将实验分为2组:对照组和窒息组,通过免疫组织化学方法... 目的探讨Na+/H+交换器-1(NHE1)在新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)损伤中的作用。方法以HK-2为研究对象,以200 mL/L新生儿窒息后血清作为攻击因素处理HK-2细胞。首先将实验分为2组:对照组和窒息组,通过免疫组织化学方法检测其HK-2细胞在损伤前后胞内NHE1的表达;再分为3组:对照组、窒息组和5-N-乙基-N-异丙基-阿米洛利(EIPA)干预组(每组8个复孔)。倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HK-2细胞活力,生物化学法检测细胞培养液中LDH漏出率变化。结果与对照组比较,窒息组细胞内和细胞膜上NHE1表达明显增加;与对照组比较,窒息组细胞形态发生改变;窒息组细胞的活细胞数量较对照组明显降低;LDH漏出率明显升高,差异具有显著性意义(Pa=0);与窒息组细胞比较,EIPA干预组细胞形态明显得到改善,活细胞数量明显增加,LDH漏出率降低,差异具有显著性意义(Pa=0)。结论新生儿窒息后血清诱导HK-2细胞NHE1的表达增强可能是导致HK-2损伤的重要机制之一,通过抑制NHE1活性可使细胞损伤减轻,活性增强。 展开更多
关键词 ^^na^+/h^+交换器-1 窒息 血清 肾小管上皮细胞 肾损伤 婴儿 新生
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Na^+/H^+交换器与肺动脉平滑肌细胞增殖 被引量:2
9
作者 姚伟 《国外医学(呼吸系统分册)》 1998年第3期144-146,共3页
Na^+/H^+交换器(Na^+/H^+ exchanger,NHE)参与调节细胞内 pH(pHi),在维持细胞正常功能中起着重要作用。NHE活性增高与肺动脉平滑肌细胞增殖有着密切的关系,从而为慢性缺氧性肺动脉高压等疾病的研究及治疗提供了新的思路。
关键词 ^^na^+/h^+交换器 平滑肌 细胞增殖 肺动脉高压
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Roles of NHE-1 in the proliferation and apoptosis of pulmonary artery smooth muscle cells in rats 被引量:1
10
作者 姚伟 钱桂生 杨晓静 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第1期107-109,152-153,共3页
Objective To evaluate the roles of Na +/H + exchanger-1 (NHE-1)in the proliferation and apoptosis of pulmonary artery smooth muscle cells in rats. Methods Twenty Wistar rats were randomized into control group and ... Objective To evaluate the roles of Na +/H + exchanger-1 (NHE-1)in the proliferation and apoptosis of pulmonary artery smooth muscle cells in rats. Methods Twenty Wistar rats were randomized into control group and 3-week hypoxic group. Intracellular pH (pHi) of the smooth muscle was determined with fluorescence measurement of the pH-sensitive dye BCECF-AM, and the expression of NHE-1 mRNA was detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). Primary culture of pulmonary artery smooth muscle cells in vitro was performed. In situ cell death detection kit (TUNEL) was used for studying the effect of specific NHE-1 inhibitor-dimethyl amiloride (DMA) on the apoptosis of muscle cells which had intracellular acidification. Results pHi value and NHE-1 mRNA expression of pulmonary artery smooth muscle cells were significantly higher in the hypoxic group than in the control group (P【0.01, P【0.001). DMA elevated the apoptotic ratio remarkably. The effect was enhanced when DMA concentration increased and the time prolonged.Conclusions With the function of adjusting pHi, NHE-1 may play an important role in the proliferation and apoptosis of pulmonary artery smooth muscle cells. 展开更多
关键词 sodium hydrogen exchanger · pulmonary hypertension · vascular smooth muscle · proliferation · apoptosis
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Na^+/H^+交换器-1反义RNA对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响 被引量:1
11
作者 姚伟 陆俊羽 +1 位作者 钱桂生 杨晓静 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 2002年第9期518-521,共4页
目的 :探讨反义 RNA对大鼠肺动脉平滑肌细胞 Na+ / H+ 交换器 (NHE) 1表达和活性、细胞内 p H(p Hi)的影响 ,及其与细胞增殖的关系。方法 :构建含 NHE 1反义 RNA序列的 p L XSN反转录病毒重组载体 ,将其转染体外培养的大鼠肺动脉平滑肌... 目的 :探讨反义 RNA对大鼠肺动脉平滑肌细胞 Na+ / H+ 交换器 (NHE) 1表达和活性、细胞内 p H(p Hi)的影响 ,及其与细胞增殖的关系。方法 :构建含 NHE 1反义 RNA序列的 p L XSN反转录病毒重组载体 ,将其转染体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞 ,G4 18筛选后获取含有重组载体的细胞克隆 ,检测细胞 NHE 1m RNA表达、2 2 Na摄取量、p Hi和 3H Td R掺入量。结果 :与转染 p L XSN空载体的细胞和正常对照组细胞比较 ,转染了重组载体的肺动脉平滑肌细胞中 NHE 1m RNA表达、2 2 Na摄取量明显减少 ,同时伴有 p Hi降低和 3H Td R掺入量减少 ,正常对照组和空载体组间无显著差异。结论 :NHE 1反义 RNA可以减少 NHE 1表达 ,从而诱导细胞酸化 。 展开更多
关键词 反义Rna ^^na^+/h^+交换器 肺动脉平滑肌细胞 细胞增殖 聚合酶链反应 肺动脉高压 基因治疗
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Ⅰ型Na^+/H^+交换器在LPS引起的大鼠肺微血管内皮细胞损伤中的作用
12
作者 李志斌 李志超 +2 位作者 闫志强 彭利静 张齐 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2006年第9期971-974,共4页
目的探索Ⅰ型Na+/H+交换器(NHE1)在脂多糖(LPS)引起的大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤中的作用。方法培养大鼠PMVECs。MTT比色试验检测细胞活力;比色法测试上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力和丙二醛(MDA)浓度;BECEF-AM荧光探针染色细胞,... 目的探索Ⅰ型Na+/H+交换器(NHE1)在脂多糖(LPS)引起的大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤中的作用。方法培养大鼠PMVECs。MTT比色试验检测细胞活力;比色法测试上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力和丙二醛(MDA)浓度;BECEF-AM荧光探针染色细胞,激光共聚焦显微镜下观察细胞内酸碱度,检测NHE1的活性;PT-PCR技术检测NHE1的mRNA表达。结果LPS不仅使细胞活力降低35%(P<0.05),使上清液中LDH和MDA分别升高3倍和2.5倍(P<0.05),而且使NHE1的活性增强,mRNA表达增多(P<0.05)。但是NHE1的抑制剂———环己阿米洛利(HMA)能显著抑制LPS引起的这些变化(P<0.05)。结论NHE1的活性增强和表达增多是LPS引起大鼠PMVECs损伤的重要机制。 展开更多
关键词 ^^Ⅰ型na^+/h^+交换器 脂多糖 肺微血管内皮细胞 环己阿米洛利
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醛固酮和食盐促进心肌肥大的机制——MR阻断剂的作用点 被引量:1
13
作者 吉村道博 李龙虎 《日本医学介绍》 2007年第5期208-211,共4页
醛固酮可引起心血管重构,不应忽视与其相关的重要参与因子,这个因子就是食盐。食盐是醛固酮发挥心肌损害作用不可欠缺的成分。醛固酮本身对心血管系统不仅有不良作用,在高盐状态下,极短时间内还有抗细胞脱水作用(细胞保护作用)。但是,... 醛固酮可引起心血管重构,不应忽视与其相关的重要参与因子,这个因子就是食盐。食盐是醛固酮发挥心肌损害作用不可欠缺的成分。醛固酮本身对心血管系统不仅有不良作用,在高盐状态下,极短时间内还有抗细胞脱水作用(细胞保护作用)。但是,在高盐条件下,醛固酮长期作用会使心肌细胞显著肥大。这种效应与Na+/H+交换器1(NHE1)有密切关系。有趣的是盐皮质激素受体(Mineralocorticoid Receptor,MR)阻断剂只是抑制了醛固酮的不良作用(心肌肥大作用),而没有阻断它的有益效应(抗细胞脱水作用)。 展开更多
关键词 醛固酮 食盐 ^^na^+/h^+交换器1 盐皮质激素受体 心肌肥大
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脂多糖对肺动脉内皮细胞Ⅰ型Na^+/H^+交换器表达的影响 被引量:1
14
作者 赵澎涛 李志超 +1 位作者 刘毅 李剑 《心脏杂志》 CAS 2003年第3期199-201,204,共4页
目的 :探讨脂多糖 ( LPS)对培养的牛肺动脉内皮细胞 ( PAEC) 型 Na+ /H+交换器 ( NHE-1)表达的影响及其与内皮细胞死亡的关系。方法 :体外培养牛 PAEC,MTT比色检测细胞存活率 ,并提取总 RNA,应用反转录聚合酶链式反应 ( RT-PCR)及 DNA... 目的 :探讨脂多糖 ( LPS)对培养的牛肺动脉内皮细胞 ( PAEC) 型 Na+ /H+交换器 ( NHE-1)表达的影响及其与内皮细胞死亡的关系。方法 :体外培养牛 PAEC,MTT比色检测细胞存活率 ,并提取总 RNA,应用反转录聚合酶链式反应 ( RT-PCR)及 DNA电泳技术 ,以 NHE-1与β-actin电泳条带光密度值之比 ( e/c)作数据分析 ,以其比值反映 NHE-1m RNA的表达程度。应用 Fluo3 /Amy荧光探针标记 ,激光共聚焦观察细胞内钙离子的浓度。结果 :在L PS( 0 .0 1~ 1.0 μg/ml)作用 48h后 ,MTT比色吸光度值分别为 0 .3 5± 0 .0 7,0 .3 1± 0 .0 7,0 .2 6± 0 .0 4,低于对照组 0 .44± 0 .0 6( P<0 .0 1)。e/c分别为 0 .43± 0 .11,0 .83± 0 .14 ,1.2 2± 0 .19,高于对照组 0 .2 8± 0 .0 8( P<0 .0 1,n=4)。激光共聚焦结果显示 L PS引起细胞内钙离子增多 ,呈剂量依赖型。结论 :LPS可以引起肺动脉内皮细胞NHE-1表达增加 ,抑制细胞增殖 ,导致细胞死亡 ,钙离子可能参与 NHE-1的激活及表达。 展开更多
关键词 脂多糖 ^^Ⅰ型na^+/h^+交换器 肺动脉内皮细胞 钙离子
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潜在治疗靶点:心肌Na^+/H^+交换器
15
作者 尤蓓 戚文航 《国外医药(合成药.生化药.制剂分册)》 2002年第4期198-201,共4页
细胞内Ph(pHi)的变化(如心肌缺血后细胞内酸中毒)对心脏收缩力影响很大,而其作用机制复杂.pHi反映了碱化与酸化过程的净平衡.控制细胞内酸中毒主要有两种碱化交换器,即Na+/H+交换器(NHE)和Na+-HCO3-同向转运(symport).
关键词 治疗靶点 ^^na^+/h^+交换器 NhE抑制剂 NhE1特异性抑制剂 活性调节 药理学 化学结构 心肌缺血 缺血再灌注损伤 冠心病 心力衰竭 慢性心肌梗死
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Na^+/H^+交换器1核酶对缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响
16
作者 陆俊羽 钱桂生 +3 位作者 吴国明 姚伟 陈维中 李淑平 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期639-640,共2页
关键词 ^^na^+/h^+交换器 肺动脉平滑肌细胞 凋亡 核酶 大鼠 增殖 缺氧 鼠肺
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锤头状核酶对大鼠肺动脉平滑肌NHE-1活性的影响
17
作者 姚伟 陆俊羽 +1 位作者 钱桂生 杨晓静 《重庆医学》 CAS CSCD 2002年第11期1074-1076,共3页
目的 探讨锤头状核酶对大鼠肺动脉平滑肌细胞Na+ /H+ 交换器 (NHE) 1表达和活性、pHi的影响。方法 构建含锤头状核酶序列的 pLXSN反转录病毒重组载体 ,将其转染体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞 ,G4 18筛选后获取含有重组载体的细胞... 目的 探讨锤头状核酶对大鼠肺动脉平滑肌细胞Na+ /H+ 交换器 (NHE) 1表达和活性、pHi的影响。方法 构建含锤头状核酶序列的 pLXSN反转录病毒重组载体 ,将其转染体外培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞 ,G4 18筛选后获取含有重组载体的细胞克隆。检测细胞NHE 1mRNA表达、pHi和Na+ /H+ 交换活性变化。结果 与转染 pLXSN空载体的细胞和正常对照组细胞比较 ,转染了重组载体的肺动脉平滑肌细胞中NHE 1mRNA表达减少 ,Na+ /H+ 交换活性降低 ,同时伴有pHi降低。结论 所设计的锤头状核酶可对NHE 1mRNA进行特异性切割 ,减少其表达 ,使其活性下降 ,从而诱导细胞酸化。 展开更多
关键词 锤头状核酶 ^^na^+/h^+交换器 肺动脉平滑肌细胞
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肾性高血压大鼠心房肌L型钙通道α_(1C)亚单位和Na^+-Ca^(2+)交换器mRNA变化的意义
18
作者 杨东辉 张万琴 +3 位作者 杨延宗 李世军 夏云龙 林治湖 《中华心律失常学杂志》 2003年第6期363-367,共5页
目的 利用“2肾 1夹”型Goldblatt高血压大鼠模型 ,观察在高血压形成过程中心房肌L型钙通道α1C亚单位 (CaL α1C)和Na+ Ca2 + 交换器 (NCX)mRNA的变化 ,在基因水平探讨其潜在的意义。方法 Sprague Dawley大鼠 ,高血压组用U型银夹夹... 目的 利用“2肾 1夹”型Goldblatt高血压大鼠模型 ,观察在高血压形成过程中心房肌L型钙通道α1C亚单位 (CaL α1C)和Na+ Ca2 + 交换器 (NCX)mRNA的变化 ,在基因水平探讨其潜在的意义。方法 Sprague Dawley大鼠 ,高血压组用U型银夹夹住左肾动脉 ,右肾保留 ;假手术组只分离左肾动脉 ,不夹银夹。套尾法监测尾动脉血压 ,分别于手术后 2、4、6周处死动物 (各 6只 ) ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)半定量法分析CaL α1C和NCXmRNA的表达量 (以三磷酸甘油醛脱氢酶 ,即GAPDH为内参照 )。结果 在高血压形成过程中左心耳CaL α1C的mRNA水平在 2、4周时分别是假手术组的2 5、2 4倍 (P <0 0 1) ,6周时接近正常水平 ,右心耳在 6周才明显增多 (是假手术组的 2 5倍 ,P <0 0 1) ;左心耳NCX的mRNA水平在 4、6周分别是假手术组的 1 9、1 4倍 (P <0 0 1) ,而右心耳NCX的mRNA水平在 2、4、6周都明显增高 (分别是假手术组的 1 4、1 5、1 4倍 ,P <0 0 2 )。结论 肾性高血压大鼠在高血压形成过程中 ,心房肌CaL α1C、NCX的mRNA水平均表现为上调 ,左心房比右心房变化明显 ,与以往研究中左心室的变化类似 ,与心房颤动模型的差别较大 ,仍可能是发生房性心律失常的基质。 展开更多
关键词 肾性高血压 大鼠 心房肌 L型钙通道 α1c亚单位 ^^na^+-Ca^2+交换器 心房颤动
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