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高危型HPV阳性宫颈癌患者miRNA-34a-5p的表达及临床意义 被引量：8
1
作者 韩宁 侯芳娟 《传染病信息》 2020年第5期426-430,共5页
目的探讨高危型人乳头状瘤病毒(high risk-human papilloma virus,HR-HPV)阳性宫颈癌患者组织及血清中微小RNA(microRNA,miRNA)-34a-5p的表达及其对宫颈癌的诊断价值。方法将100例HR-HPV阳性宫颈癌患者(宫颈癌组)、70例宫颈上皮内瘤变(c... 目的探讨高危型人乳头状瘤病毒(high risk-human papilloma virus,HR-HPV)阳性宫颈癌患者组织及血清中微小RNA(microRNA,miRNA)-34a-5p的表达及其对宫颈癌的诊断价值。方法将100例HR-HPV阳性宫颈癌患者(宫颈癌组)、70例宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)患者(CIN组)、70例HR-HPV阳性子宫良性病变或者HPV单纯阳性的健康体检者(对照组)作为研究对象。采集上述研究对象的血清标本及70例行手术治疗的宫颈癌组患者癌组织及癌旁组织。使用实时荧光定量PCR技术测定组织及血清中miRNA-34a-5p水平,并分析miRNA-34a-5p与宫颈癌临床、病理指标的关联及血清miRNA-34a-5p对宫颈癌的诊断价值。结果①对照组血清中miRNA-34a-5p的相对表达量高于CIN组和宫颈癌组:(0.933±0.097)vs.(0.554±0.099)vs.(0.369±0.099),差异有统计学意义(F=741.401,P=0.000);宫颈癌组患者术前血清中miRNA-34a-5p相对表达量低于术后1周,差异有统计学意义(t=8.305,P=0.000)。有无淋巴结转移和有无远处转移的宫颈癌患者血清中miRNA-34a-5p相对表达量的差异有统计学意义(P均<0.05)。②宫颈癌组患者癌旁组织中miRNA-34a-5p的相对表达量高于癌组织,差异具有统计学意义(t=40.313,P=0.000)。③宫颈癌组患者癌组织中的miRNA-34a-5p表达水平与血清中的表达水平呈正相关(r=0.908,P=0.000)。④以0.508为miRNA-34a-5p相对表达量的最佳临界值诊断宫颈癌,其灵敏度为83.6%,特异度为79.4%,AUC为0.860,95%置信区间为0.803~0.917。结论HR-HPV阳性宫颈癌患者癌组织和血清中miRNA-34a-5p表达下调,对宫颈癌诊断及预后监测具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 宫颈癌 乳头状瘤病毒 mirna-34a-5p 血清
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miRNA-34a-5p靶向CDK6表达对肺癌细胞生物学特性的影响
2
作者 张秀维 顾桂源 曹斌 《生物技术》 CAS 2024年第1期63-68,55,共7页
[目的]分析miRNA-34a-5p靶向CDK6表达对肺癌细胞生物学特性的影响,探讨两者的作用关系。[方法]采用手术切除治疗的非小细胞肺癌患者的手术肿瘤组织样本和癌旁组织样本,对比miRNA-34a-5p、CDK6 mRNA以及CDK6蛋白表达水平;将miR-34a-5p抑... [目的]分析miRNA-34a-5p靶向CDK6表达对肺癌细胞生物学特性的影响,探讨两者的作用关系。[方法]采用手术切除治疗的非小细胞肺癌患者的手术肿瘤组织样本和癌旁组织样本,对比miRNA-34a-5p、CDK6 mRNA以及CDK6蛋白表达水平;将miR-34a-5p抑制物转染至肺癌A549细胞,观察其对A549细胞存活、克隆形成、凋亡、迁移侵袭的影响;并验证miR-34a-5p对CDK6的靶向调控关系。[结果]肿瘤组织中miRNA-34a-5p(0.21±0.05)显著低于癌旁组织(0.54±0.08),而CDK6 mRNA表达水平(0.76±0.07)显著高于癌旁组织(0.23±0.04)(P<0.05);抑制质粒组的miRNA-34a-5p(0.14±0.03)、CDK6 mRNA(0.94±0.12)、增殖抑制率(17.32±2.39)%、凋亡率(12.32±2.39)%、克隆形成数(103.84±7.68)个、细胞迁移数(233.21±31.02)个、细胞侵袭数(102.16±10.93)个、CDK-6(0.79±0.09)和p-AKT(0.88±0.10)水平均高于空白对照组(0.30±0.05)、(0.75±0.09)、(29.84±5.01)%、(21.23±2.85)%、(77.17±8.43)个、(121.83±20.94)个、(24.39±5.12)个、(0.45±0.07)、(0.54±0.08)和阴性对照组(0.22±0.07)、(0.83±0.14)、(30.17±4.83)%、(22.08±3.94)%、(74.39±10.95)个、(118.38±26.38)个、(26.14±4.38)个、(0.48±0.06)、(0.56±0.07)(P<0.05)。Wt-CDK6荧光素强度(0.38±0.09)显著低于Mut-CDK6(0.99±0.21),且miR-34a-5p转染后CDK-6蛋白表达(0.28±0.05)低于阴性对照(0.95±0.11),差异存在统计学意义(P<0.05)。[结论]miRNA-34a-5p可直接靶向调控CDK6表达对肺癌细胞增殖、凋亡、侵袭、转移、克隆形成等生物学特性进行调控。 展开更多
关键词 mirna-34a-5p CDK6 肺癌 生物学特性
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四味土木香散通过调节miR-34a-5p/Notch1信号通路改善机械牵张诱导的H9c2心肌细胞肥大
3
作者 李健英 魏明慧 +3 位作者 鲁子瑜 蒋碧辉 张欣 薛明明 《医学研究杂志》 2024年第8期107-114,共8页
目的探讨四味土木香散(siwei tumuxiang powder,STP)对机械牵张诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大模型的保护作用及作用机制。方法制备STP含药血清及细胞肥大模型,并筛选STP含药血清最适剂量与作用时间;检测H9c2心肌细胞中心房钠尿肽(atrial n... 目的探讨四味土木香散(siwei tumuxiang powder,STP)对机械牵张诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大模型的保护作用及作用机制。方法制备STP含药血清及细胞肥大模型,并筛选STP含药血清最适剂量与作用时间;检测H9c2心肌细胞中心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、miR-34a-5p及Notch1等因子的表达,验证STP是否通过调控miR-34a-5p/Notch1通路对H9c2心肌细胞起保护作用。结果STP含药血清干预模型细胞最适剂量为低剂量(0.972g/kg),作用时间为24h。STP降低了模型细胞中ANP、BNP、miR-34a-5p的表达(P<0.05)。转染miR-34a-5p mimic逆转了STP降低ANP、BNP表达的作用(P<0.05)。用siRNA法敲低Notch1逆转了STP降低ANP、BNP的表达(P<0.05)。Notch1为miR-34a-5p直接靶基因,miR-34a-5p降低了Notch1的表达(P<0.05)。STP干预后,Notch1、NICD1、Hes1蛋白表达降低(P<0.05);转染miR-34a-5p mimic逆转了STP降低Notch1、NICD1、Hes1蛋白表达的作用(P<0.05)。结论STP可能是通过影响miR-34a-5p表达负调控Notch1信号通路对机械牵张诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大发挥保护作用。 展开更多
关键词 心肌肥厚 四味土木香散 mirna-34a-5p Notch1信号通路
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心肌梗死患者血清miR-34a-5p和C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9水平及其与心肌重构的相关性
4
作者 孙宁 李飞 《检验医学与临床》 CAS 2024年第19期2785-2789,共5页
目的探讨心肌梗死患者血清微小RNA(miR)-34a-5p、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9(CTRP9)水平及其与心肌重构的相关性。方法选取2019年3月至2021年3月于该院治疗的急性心肌梗死患者100例作为观察组,另选取同期在该院体检的健康体检者100例... 目的探讨心肌梗死患者血清微小RNA(miR)-34a-5p、C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9(CTRP9)水平及其与心肌重构的相关性。方法选取2019年3月至2021年3月于该院治疗的急性心肌梗死患者100例作为观察组,另选取同期在该院体检的健康体检者100例作为对照组;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清中miR-34a-5p水平;采用酶联免疫吸附试验检测血清中CTRP9水平;通过心脏彩色超声诊断仪检测心肌重构指标[左心房内径(LAD)、左心室重构指数(LVRI)、左心室质量指数(LVMI)、左心室后壁厚度(LVPW)];采用Pearson相关分析血清miR-34a-5p与CTRP9的相关性及二者与心肌重构指标的相关性;采用多因素Logistic回归分析急性心肌梗死发生的影响因素。结果与对照组相比,观察组血清miR-34a-5p水平、LVPW、LVMI、LAD均明显增加(P<0.05),CTRP9水平、LVRI均明显降低(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,miR-34a-5p与CTRP9、LVRI呈负相关(r=-0.572、-0.645,P<0.05),与LVPW、LVMI、LAD呈正相关(r=0.418、0.420、0.569,P<0.05);CTRP9与LVRI呈正相关(r=0.424,P<0.05),与LVPW、LVMI、LAD均呈负相关(r=-0.583、-0.469、-0.518,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-34a-5p水平、LVPW、LVMI、LAD、LVRI、CTRP9水平均是急性心肌梗死发生的影响因素(P<0.05)。结论在急性心肌梗死患者血清中miR-34a-5p水平明显增加,CTRP9水平明显降低,二者呈负相关,且与心肌重构密切相关,是急性心肌梗死发生的影响因素。 展开更多
关键词 心肌梗死 miR-34a-5p C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9 心肌重构 相关性
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二氧化硅粉尘对大鼠肺泡灌洗液外泌体源性miRNA-34a-5p表达和肺组织纤维化的影响
5
作者 宋静 王甜甜 +6 位作者 徐萌彤 郝嘉瑞 王林平 路小婷 张慧芳 孔晓梅 张新日 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期526-531,共6页
目的 探讨二氧化硅(SiO_(2))粉尘对大鼠肺泡灌洗液外泌体源性miRNA-34a-5p表达的影响及其与肺组织纤维化的关系。方法 将64只SPF级雄性8周龄SD大鼠随机分为对照组和SiO_(2)组,各组按结束时间再分为2周、4周、8周、16周4个时间组,每组8... 目的 探讨二氧化硅(SiO_(2))粉尘对大鼠肺泡灌洗液外泌体源性miRNA-34a-5p表达的影响及其与肺组织纤维化的关系。方法 将64只SPF级雄性8周龄SD大鼠随机分为对照组和SiO_(2)组,各组按结束时间再分为2周、4周、8周、16周4个时间组,每组8只。采用非暴露式气管内注入法染尘,SiO_(2)组大鼠一次性注入0.05 g/mL的SiO_(2)粉尘悬液1 mL,对照组注入等量的无菌生理盐水。取2只大鼠新鲜肺组织行常规HE染色和Masson染色进行病理学观察,取6只大鼠获取肺泡灌洗液,灌洗后的肺组织进行羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量测定反映胶原蛋白的代谢情况,对肺泡灌洗液进行外泌体提取(PEG沉淀试剂盒法)、鉴定(透射电镜法、纳米颗粒跟踪分析法和Western bolt法)及miRNA-34a-5p表达量(RT-PCR法)的测定。结果 对照组大鼠肺组织病理结果及羟脯氨酸检测结果无明显变化,SiO_(2)组出现炎细胞浸润、肺泡璧破坏、胶原纤维增多和矽结节现象,其在第8周和第16周时羟脯氨酸含量[(0.58±0.04)μg/mL和(0.67±0.03)μg/mL]与对照组相比显著增加(P<0.05)。透射电镜下可见外泌体呈经典的茶托样结构,纳米颗粒跟踪分析显示其粒径大多数分布在50~150 nm,Western blot检测到外泌体标志蛋白CD9、CD81表达阳性。对照组大鼠肺泡灌洗液内外泌体源性miRNA-34a-5p在第2、4、8、16周的相对表达量分别为(1.00±0.00)、(0.94±0.10)、(1.01±0.00)和(0.71±0.09),即其在前8周表达量稳定,但到第16周表达下降,且与第2、4、8周相比差异有统计学意义(P<0.05);SiO_(2)组大鼠外泌体源性miRNA-34a-5p在第2、4、8、16周的相对表达量分别为(0.81±0.09)、(0.63±0.10)、(0.41±0.08)和(0.35±0.05),即其在第8、16周表达量下降,与第2、4周相比差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,SiO_(2)组大鼠外泌体源性miRNA-34a-5p在第4、8、16周表达降低,差异有统计学意义(P<0.05),即SiO_(2)粉尘会抑制外泌� 展开更多
关键词 二氧化硅 外泌体 mirna-34a-5p 肺纤维化 矽肺
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miRNA-34a-5p靶向Fut8抑制巨噬源性泡沫细胞的运动能力
6
作者 黄云秀 陈林木 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第5期411-416,431,共7页
目的探讨miRNA-34a-5p/岩藻糖基转移酶8(fucosyltransferase,Fut8)轴对巨噬源性泡沫细胞运动能力的影响。方法首先利用生物信息学和RT-PCR寻找并检测Fut8基因上游的调控miRNA变化情况;其次利用Pearson相关性分析观察斑块组患者血清中Fut... 目的探讨miRNA-34a-5p/岩藻糖基转移酶8(fucosyltransferase,Fut8)轴对巨噬源性泡沫细胞运动能力的影响。方法首先利用生物信息学和RT-PCR寻找并检测Fut8基因上游的调控miRNA变化情况;其次利用Pearson相关性分析观察斑块组患者血清中Fut8和miRNA的相关性;最后构建泡沫细胞模型观察miRNA对泡沫细胞运动能力的影响并明确Fut8在其中的重要作用。结果miRNA-34a-5p和miRNA-449b-5p在斑块组患者血清中均显著上升,但miRNA-34a-5p与Fut8有更大的相关性。miRNA-34a-5p在泡沫细胞形成时含量显著升高,抑制miRNA-34a-5p表达会促进Fut8的表达。高表达的miRNA-34a-5p会导致穿透到下室的细胞数量减少。过表达Fut8预处理细胞,会增加穿透到下室的细胞数量。结论miRNA-34a-5p为Fut8的上游miRNA之一,通过下调Fut8表达而抑制巨噬源性泡沫细胞运动能力。 展开更多
关键词 mirna-34a-5p mirna-449b-5p Fut8 泡沫细胞 运动能力
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基于miRNA-34a-5p/PI3K/Akt信号通路探讨泄浊解毒方预防小鼠结直肠腺瘤的作用机制 被引量：1
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作者 贾苏杰 孙超迪 +5 位作者 张艺凡 郎晓猛 刘建平 康欣 任士杰 刘静远 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期156-165,共10页
目的:通过生物信息学方法寻找并分析结直肠腺瘤(CRA)的关键微小RNA(miRNAs),筛选差异表达基因(DEGs)构建调控关系,推测泄浊解毒方预防CRA的作用机制,并通过动物实验进行验证。方法:从基因表达谱数据库(GEO)获取CRA患者肠黏膜组织miRNAs... 目的:通过生物信息学方法寻找并分析结直肠腺瘤(CRA)的关键微小RNA(miRNAs),筛选差异表达基因(DEGs)构建调控关系,推测泄浊解毒方预防CRA的作用机制,并通过动物实验进行验证。方法:从基因表达谱数据库(GEO)获取CRA患者肠黏膜组织miRNAs数据集GSE50194,通过GEO2R、Excel筛选差异表达的miRNAs;运用TargetScan、miRTarbase、miRDB数据库对差异表达的miRNAs进行靶基因预测并取得交集;通过STRING数据库及Cytoscape软件筛选关键DEGs,并利用TRRUST数据库预测下游结合转录因子;通过Metascape数据库对交集mRNA进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,通过DIANA TOOLS工具对关键miRNAs进行KEGG富集分析,选取关键信号通路进行动物实验验证。动物实验采用葡聚糖硫酸钠(DSS)饮用联合氧化偶氮甲烷(AOM)腹腔注射方法(10 mg·kg^(-1))诱导CRA小鼠模型建立,同时给予泄浊解毒方(9.62、19.24、38.48 g·kg^(-1))及阿司匹林(0.015 g·kg^(-1))灌胃干预9周。苏木素-伊红(HE)染色法观察结直肠组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测腺瘤组织中miR-34a-5p mRNA表达量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化-PI3K(p-PI3K)、磷酸化-Akt(p-Akt)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平;免疫组织化学法(IHC)检测细胞周期蛋白D1(CCND1)的表达;原位末端标记法(TUNEL)检测腺瘤组织细胞凋亡情况。结果:GEO数据库筛选出GSE50194数据集,从CRA与正常肠黏膜组织中筛选出miR-34a-5p作为研究对象,筛选出93个DEGs,其GO和KEGG富集分析发现主要与转录调控复合体、RNA聚合酶Ⅱ转录调控复合物、酶联受体蛋白信号通路、DNA结合转录激活因子活性等生物学过程,癌症途径、PI3K/Akt信号通路等密切相关,miR-34a-5p主要汇集在PI3K/Akt信号通路、细胞周期、结直肠癌等途径。通过Matescape数据库筛选出5个� 展开更多
关键词 生物信息学 结直肠腺瘤 泄浊解毒方 miR-34a-5p/磷脂酰肌醇3-激酶(pI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路
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