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三七总皂苷对转化生长因子-β诱导人胚肺成纤维细胞增殖分化及胶原蛋白合成的影响 被引量:11
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作者 耿德海 郭文龙 +6 位作者 王强 刘志勇 薛娟 孙晓芳 谷雨 刘未华 段斐 《中国药业》 CAS 2019年第2期14-17,共4页
目的探讨三七总皂苷对人胚肺成纤维细胞MRC-5增殖分化及胶原蛋白合成的作用。方法体外培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,随机分为正常对照组、模型组、地塞米松组和三七总皂苷组。采用四氮唑(MTT)比色法检测转化生长因子-β(TGF-β)刺激的成... 目的探讨三七总皂苷对人胚肺成纤维细胞MRC-5增殖分化及胶原蛋白合成的作用。方法体外培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,随机分为正常对照组、模型组、地塞米松组和三七总皂苷组。采用四氮唑(MTT)比色法检测转化生长因子-β(TGF-β)刺激的成纤维细胞增殖情况;采用免疫细胞化学染色法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组MRC-5细胞增殖比显著升高,α-SMA及Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达水平显著升高;地塞米松组和三七总皂苷组MRC-5增殖比较模型组显著降低,α-SMA和Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达水平较模型组显著降低。结论三七总皂苷可通过抑制MRC-5细胞增殖及分化,抑制人胚肺成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达,从而延缓及阻止肺纤维化。 展开更多
关键词 肺纤维化 肺成纤维细胞 三七总皂苷 Α-平滑肌肌动蛋白 胶原蛋白 mrc-5细胞
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橙皮苷对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞活化的影响 被引量:5
2
作者 任周新 赵丹瑞 +2 位作者 李丽 沈俊岭 梅晓峰 《中国现代中药》 CAS 2017年第9期1270-1272,共3页
目的:探讨橙皮苷对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞合成细胞外基质的影响。方法:12.5~200μmol·L^(-1)的橙皮苷作用于MRC-5细胞,得出不影响细胞增殖的剂量用于后续实验。5 ng·m L^(-1)的TGF-β1作用于MRC-5细胞,诱导细胞大量... 目的:探讨橙皮苷对TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞合成细胞外基质的影响。方法:12.5~200μmol·L^(-1)的橙皮苷作用于MRC-5细胞,得出不影响细胞增殖的剂量用于后续实验。5 ng·m L^(-1)的TGF-β1作用于MRC-5细胞,诱导细胞大量合成或分泌细胞外基质成分,同时用橙皮苷干预。结果:12.5~50μmol·L^(-1)橙皮苷未发现显著影响MRC-5细胞的增殖(P>0.05)。受到TGF-β1刺激后,MRC-5细胞的Col-I分泌量和α-SMA及FN的合成量均显著增加(P<0.05)。12.5~50μmol·L^(-1)橙皮苷显著减少上述分子的分泌量或合成量(P<0.05)。结论:橙皮苷抑制TGF-β1诱导的人胚肺成纤维细胞合成或分泌细胞外基质成分。 展开更多
关键词 橙皮苷 转化生长因子-betal mrc-5细胞 活化
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羊栖菜硫酸多糖通过PI3K/AKT通路抑制H2O2诱导的MRC-5细胞氧化损伤 被引量:1
3
作者 茹珂烨 阳东昊 +5 位作者 张雨哲 刘涛瑜 虞程翔 屠玉槿 丁浩淼 汪财生 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2023年第6期21-28,共8页
目的阐明羊栖菜硫酸多糖(SFPSⅢ)对过氧化氢(H2O2)诱导的正常人胚肺细胞(MRC-5)氧化应激损伤的保护作用及潜在分子机制。方法通过噻唑蓝(MTT)法检测MRC-5细胞暴露于H2O2或SFPSⅢ后的活力,Hoechst染色法检测细胞凋亡形态,流式细胞仪测定... 目的阐明羊栖菜硫酸多糖(SFPSⅢ)对过氧化氢(H2O2)诱导的正常人胚肺细胞(MRC-5)氧化应激损伤的保护作用及潜在分子机制。方法通过噻唑蓝(MTT)法检测MRC-5细胞暴露于H2O2或SFPSⅢ后的活力,Hoechst染色法检测细胞凋亡形态,流式细胞仪测定细胞凋亡率,酶联免疫吸附实验测定超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)活力、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量。通过免疫印迹Western bloting检测相关蛋白水平。结果H2O2处理使MRC-5细胞活力显著降低(P<0.05),而SFPSⅢ(200~600μg/mL)干预可明显增强MRC-5细胞活力。酶联免疫法结果表明,SFPSⅢ干预抑制H2O2诱导的细胞内NO和MDA的过度分泌,并增加了H2O2诱导的细胞内SOD和GSH-Px的活力。免疫印迹结果表明,120μmol/L H2O2处理的细胞中p-AKT和p-mTOR相对蛋白表达水平下调,而p-AKT和p-mTOR相对蛋白表达水平在SFPSⅢ处理的MRC-5细胞中被逆转。结论SFPSⅢ对H2O2诱导的MRC-5细胞氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能是激活PI3K/AKT/mTOR通路发挥其抗凋亡作用。研究结果为羊栖菜高附加值产品开发及天然、安全抗氧化功能因子的筛选提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 羊栖菜 硫酸多糖 mrc-5细胞 PI3K/AKT/mTOR信号通路
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补肾益肺消癥方抑制肺成纤维细胞线粒体自噬与调控JNK/p62/Parkin通路机制的研究 被引量:3
4
作者 马乾 马雪颜 +10 位作者 何毓玺 马林沁 李艳鹏 毕玮 张佳琪 刘艺 吴彩军 高伟华 张沂 果海凤 晏军 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期2203-2206,共4页
目的:探究补肾益肺消癥方干预特发性肺间质纤维化(IPF)进展的可能机制,为“肺络微型癥瘕”理论在中医药防治IPF奠定客观基础。方法:通过TGF-β1诱导MRC-5细胞转分化肺成纤维细胞,制备补肾益肺消癥方冻干粉,激光共聚焦显微镜观察MRC-5细... 目的:探究补肾益肺消癥方干预特发性肺间质纤维化(IPF)进展的可能机制,为“肺络微型癥瘕”理论在中医药防治IPF奠定客观基础。方法:通过TGF-β1诱导MRC-5细胞转分化肺成纤维细胞,制备补肾益肺消癥方冻干粉,激光共聚焦显微镜观察MRC-5细胞线粒体自噬体数量及状况,通过Western Blot法检测NOX4、JNK、p62、Parkin、PINK1蛋白的表达。结果:模型组在TGF-β1刺激后较正常细胞组线粒体自噬现象明显增多,而西药对照组及中药低、中、高浓度组线粒体自噬现象较模型组减少。与正常组比较,模型组TGF-β1可显著激活JNK/p62/Parkin信号通路,各给药组NOX4、JNK、p62表达显著降低(P<0.05),Parkin、PINK1表达显著升高(P<0.05),但中药中浓度组对于降低JNK的表达明显优于其他给药组(P<0.05)。结论:补肾益肺消癥方治疗IPF的机制之一可能是通过抑制细胞线粒体自噬功能与调控JNK/p62/Parkin通路减缓肺组织的纤维化进程。 展开更多
关键词 补肾益肺消癥方 mrc-5细胞 线粒体自噬 JNK/p62/Parkin通路
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狂犬病病毒PM株在人二倍体MRC-5细胞中的感染特性 被引量:4
5
作者 张芮铭 高正伦 +5 位作者 方群 左静 刘海文 郑学学 刘翠 郑森元 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第9期1258-1259,1263,共3页
目的 观察狂犬病病毒PM株在人二倍体MRC-5细胞中的感染特性。方法 分别将0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10MOI的PM株狂犬病病毒接种至MRC-5细胞中,显微镜观察感染细胞的状态;间接免疫荧光法检测病毒收获液的滴度;小鼠NIH法测定病毒... 目的 观察狂犬病病毒PM株在人二倍体MRC-5细胞中的感染特性。方法 分别将0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10MOI的PM株狂犬病病毒接种至MRC-5细胞中,显微镜观察感染细胞的状态;间接免疫荧光法检测病毒收获液的滴度;小鼠NIH法测定病毒灭活液的效价。结果 MOI为0.06~0.07时,病毒收获前细胞出现聚集现象,液体中基本无死细胞;病毒收获液的滴度和病毒灭活液的效价较高。结论 观察了狂犬病病毒PM株在人二倍体MRC-5细胞中的感染特性,为疫苗生产工艺的优化提供了实验依据。 展开更多
关键词 狂犬病病毒PM株 mrc-5细胞 感染特性 滴度 效价
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疫苗生产用人二倍体细胞2BS和MRC-5中猪圆环病毒的检测 被引量:3
6
作者 刘欣玉 黄艳秋 李玉华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第7期732-734,共3页
目的检测疫苗生产用人二倍体细胞2BS和MRC-5是否存在外源因子猪圆环病毒1型(porcine circovirus type 1,PCVl)和猪圆环病毒2型(PCV2)污染。方法对已建立的PCR方法进行灵敏度验证后,检测人二倍体细胞2BS和MRC-5中PCV1和PCV2污染情况。结... 目的检测疫苗生产用人二倍体细胞2BS和MRC-5是否存在外源因子猪圆环病毒1型(porcine circovirus type 1,PCVl)和猪圆环病毒2型(PCV2)污染。方法对已建立的PCR方法进行灵敏度验证后,检测人二倍体细胞2BS和MRC-5中PCV1和PCV2污染情况。结果两种细胞上清中最低均可检出1 pg的PCV1和PCV2 DNA,灵敏度较高;两种细胞中PCV检测结果均为阴性。结论在生产用人二倍体细胞2BS和MRC5中,均未检出PCV1和PCV2污染。 展开更多
关键词 人二倍体细胞 2BS细胞 mrc-5细胞 疫苗 猪圆环病毒 聚合酶链反应
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牡丹皮提取物抑制TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞的间质转化和肺成纤维细胞的活化 被引量:4
7
作者 任周新 余海滨 +4 位作者 冯素香 沈俊岭 罗珊 李俊凯 李建生 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第12期2948-2951,共4页
目的:探讨牡丹皮提取物(丹皮酚、总苷和多糖提取物按照一定比例形成的组合物)对TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞的间质转化和肺成纤维细胞的活化的影响。方法:MTT法分析牡丹皮对两种细胞增殖的影响。TGF-β1诱导A549肺泡上皮细胞的间质... 目的:探讨牡丹皮提取物(丹皮酚、总苷和多糖提取物按照一定比例形成的组合物)对TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞的间质转化和肺成纤维细胞的活化的影响。方法:MTT法分析牡丹皮对两种细胞增殖的影响。TGF-β1诱导A549肺泡上皮细胞的间质转化和MRC-5肺成纤维细胞的活化,用不同剂量的牡丹皮干预;圆形度定量法分析细胞形态,免疫细胞化学法检测细胞E-cad和Collagen-I蛋白的表达;双抗体夹心酶联免疫吸附法检测Collagen-I和FN水平。结果:12.5-200μg/m L牡丹皮对A549细胞和MRC-5细胞的增殖没有显著性影响(P〉0.05)。对于A549细胞,与正常组比较,TGF-β1组圆形度和E-cad表达显著降低(P〈0.01),Collagen-I表达显著升高(P〈0.01);与TGF-β1组比较,牡丹皮不能显著抑制圆形度的变化(P〉0.05),但50-200μg/m L牡丹皮能显著抑制E-cad表达的下调(P〈0.05或0.01),200μg/m L牡丹皮能显著抑制Collagen-I表达的上调(P〈0.05)。对于MRC-5细胞,与正常组比较,TGF-β1组FN、Collagen-I的分泌量显著增加(P〈0.01);与TGF-β1组比较,100μg/m L和200μg/m L牡丹皮提取物组的上述两种蛋白的分泌量显著减少(P〈0.05或0.01)。结论:牡丹皮提取物抑制TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞的间质转化和肺成纤维细胞的活化,提示牡丹皮可能具有抑制肺纤维化的形成和发展的作用。 展开更多
关键词 牡丹皮提取物 转化生长刺激因子-beta1(TGF-β1) 肺泡上皮细胞 肺成纤维细胞 抑制作用
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纳米氧化铁颗粒对A549和MRC-5细胞的氧化损伤及DNA损伤毒性评价 被引量:2
8
作者 郭雅娟 文海若 +3 位作者 淡墨 黄芝瑛 王雪 徐丽明 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第22期2673-2680,共8页
目的:比较氧化铁纳米颗粒诱导肿瘤细胞和正常细胞氧化应激损伤和DNA损伤程度的差异。方法:首先,测定胺基表面修饰的氧化铁纳米颗粒(Amine-IONP)对人肺腺癌细胞A549细胞和人胚肺纤维细胞MRC-5细胞生长的影响。然后,联合胞内活性氧簇(reac... 目的:比较氧化铁纳米颗粒诱导肿瘤细胞和正常细胞氧化应激损伤和DNA损伤程度的差异。方法:首先,测定胺基表面修饰的氧化铁纳米颗粒(Amine-IONP)对人肺腺癌细胞A549细胞和人胚肺纤维细胞MRC-5细胞生长的影响。然后,联合胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)含量、线粒体膜电位(mitochondtial membrance potential,MMP)和内质网状态(endoplasmic reticulum stress,ERS)等指标,评价Amine-IONP对A549细胞和MRC-5细胞的氧化损伤的差异。最后,用碱性彗星电泳试验检测氧化铁纳米颗粒对2种细胞DNA损伤的差异。结果:Amine-IONP对MRC-5细胞增殖的抑制作用大于A549细胞(P <0. 05)。Amine-IONP能诱导A549细胞ROS水平、ERS升高,MMP下降(P <0. 05),并呈明显剂量依赖性;而在Amine-IONP相同条件作用下,MRC-5细胞仅显示MMP水平出现显著性降低(P <0. 05),且变化程度与A549细胞相比显著较小(P <0. 05)。彗星试验结果显示,Amine-IONP可导致A549和MRC-5细胞出现不同程度的DNA损伤(P <0. 05),且变化趋势与ROS水平变化相同。结论:Amine-IONP对A549细胞的毒性大于MRC-5细胞,对A549细胞的氧化损伤和遗传毒性均强于MRC-5细胞。研究数据为选择适宜的细胞系来评价纳米材料细胞毒性和遗传毒性提供了理论支持。 展开更多
关键词 氧化铁纳米颗粒 A549细胞 mrc-5细胞 氧化应激 彗星试验
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冻干人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)非临床安全性研究 被引量:1
9
作者 谭小东 杨世龙 +5 位作者 王丽 许娜娜 徐文龙 周沛 张艳飞 周锋 《安徽医药》 CAS 2022年第4期671-675,共5页
目的 对冻干人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)进行全身主动过敏试验、肌肉刺激性、单次给药毒性和溶血性评价,以考察其安全性。方法 本研究起止时间为2014年3月至2016年10月。按照确定的工艺和质量标准,使用人二倍体细胞MRC-5培养狂犬病固定毒... 目的 对冻干人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)进行全身主动过敏试验、肌肉刺激性、单次给药毒性和溶血性评价,以考察其安全性。方法 本研究起止时间为2014年3月至2016年10月。按照确定的工艺和质量标准,使用人二倍体细胞MRC-5培养狂犬病固定毒株,灭活、纯化后制备冻干人用狂犬病疫苗,质量检定合格后,用于开展全面的动物毒理试验。结果 在本试验条件下,含有人血白蛋白的赋形剂组、低剂量和高剂量疫苗组均会引起豚鼠过敏症状,第14和21天激发后病死率分别为0(0/6)、0(0/6)、16.67%(1/6)和33.33%(2/6)、50.00%(3/6)、33.33%(2/6),三组病死率差异无统计学意义(P>0.05),不含人血白蛋白的赋形剂组无过敏症状;单次或多次给药均不会引起家兔肌肉刺激性反应;最高剂量50 IU/kg时,均未见明显的ICR小鼠毒性反应;疫苗不会引起红细胞溶血和凝聚。结论 动物试验表明,冻干人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)显示出良好的安全性。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 冷冻干燥法 mrc-5细胞 非临床安全性 过敏试验 肌肉刺激试验 豚鼠
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小檗碱对转化生长因子β1诱导人胚肺成纤维细胞转分化及丝裂原活化蛋白激酶信号通路蛋白磷酸化水平的影响 被引量:2
10
作者 任志涛 游雪甫 +1 位作者 于会明 杨信怡 《中国医药生物技术》 2015年第4期340-345,共6页
目的探讨小檗碱对转化生长因子β1诱导的人胚肺成纤维细胞MRC-5转分化过程中细胞外羟脯氨酸和细胞内平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白及丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关蛋白磷酸化水平的影响。方法体外培养MRC-5细胞,采用MTT法检测不同浓度小... 目的探讨小檗碱对转化生长因子β1诱导的人胚肺成纤维细胞MRC-5转分化过程中细胞外羟脯氨酸和细胞内平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白及丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关蛋白磷酸化水平的影响。方法体外培养MRC-5细胞,采用MTT法检测不同浓度小檗碱对细胞增殖的抑制作用,确定适合的作用范围;Western blot法检测不同浓度转化生长因子β1刺激MRC-5细胞转分化过程中平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白表达水平,确定适宜的转化生长因子β1诱导浓度。不同浓度小檗碱预处理的MRC-5细胞经转化生长因子β1刺激后,采用比色法测定细胞外羟脯氨酸水平,对于细胞内平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白表达水平以及丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关蛋白p38 MAPK、SAPK/JNK、ERK1/2的磷酸化水平采用Western blot法进行检测。结果参考MTT法检测结果 ,选定小檗碱适宜浓度(20、40、80μmol/L)进行研究。Western blot结果显示2 ng/ml浓度转化生长因子β1可明显诱导MRC-5细胞转分化。小檗碱预处理的MRC-5细胞,较单纯转化生长因子β1诱导细胞,培养液中羟脯氨酸水平明显降低。Western blot法检测结果显示,小檗碱预处理细胞较单纯转化生长因子β1诱导细胞,平滑肌肌动蛋白、纤连蛋白表达水平明显受到抑制,丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关蛋白p38 MAPK、SAPK/JNK、ERK1/2磷酸化水平亦受到不同程度抑制。结论小檗碱预处理对转化生长因子β1诱导的MRC-5细胞转分化过程有抑制作用,其机制可能与小檗碱下调丝裂原活化蛋白激酶信号通路相关蛋白的磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 小檗碱 转化生长因子Β1 特发性肺纤维化 P38丝裂原活化蛋白激酶类 mrc-5细胞
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牛副流感病毒3型在不同细胞中的复制动力学分析 被引量:1
11
作者 赵红丽 刘智慧 +7 位作者 李婷婷 黄晓娜 初佳芮 陶冬 张楠 柏丛 霍琦 刘辉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第12期1255-1257,1261,共4页
目的对牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)在Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞中的复制动力学进行分析。方法将BPIV3分别接种至Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞,盲传3代,逐日观察细胞病变(CPE)情况;采用直接免疫荧光... 目的对牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)在Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞中的复制动力学进行分析。方法将BPIV3分别接种至Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞,盲传3代,逐日观察细胞病变(CPE)情况;采用直接免疫荧光抗体法检测3种细胞盲传3代后BPIV3的增殖情况;将病毒滴度为1.0×104TCID50/ml的BPIV3分别接种至MDBK和Vero-E6单层细胞中,培养7 d,逐日测定各细胞中的病毒滴度。结果BPIV3在MDBK细胞中盲传1代即可观察到明显的CPE;在Vero-E6细胞中盲传2、3代可见CPE;在MRC-5细胞中盲传3代未见CPE。在MDBK细胞中盲传3代可检测到较强荧光信号;在Vero-E6细胞中盲传3代荧光强度较弱;在MRC-5细胞中盲传3代未检测到荧光信号。BPIV3在MDBK和Vero-E6细胞中分别于培养第5和6天时病毒滴度达峰值,分别为1.2×1010和1.0×105 TCID50/ml。结论 BPIV3在MDBK细胞中的复制动力强于Vero-E6细胞,最适用于培养该病毒,MRC-5细胞不适用于培养BPIV3。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3型 VERO-E6细胞 mrc-5细胞 MDBK细胞 复制动力学
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EGCG-S Impacts Oxidative Stress and Infection of Enterovirus 69 in Lung Cells
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作者 Hager Mohamed Lee H. Lee Sandra D. Adams 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 2021年第5期109-124,共16页
<div style="text-align:justify;"> <span style="font-family:Verdana;">Enteroviruses are responsible for emerging diseases which cause diverse symptoms and may result in neurological comp... <div style="text-align:justify;"> <span style="font-family:Verdana;">Enteroviruses are responsible for emerging diseases which cause diverse symptoms and may result in neurological complications. An antiviral with multiple mechanisms of action can help prevent enterovirus mediated disease despite differences in the pathogenesis between enteroviruses, including the recently identified enterovirus 69 (EV-69) for which pathogenesis is not well understood. This study investigated the efficacy of epigallocatechin-3-gallate stearate (EGCG-S), a modified form of the antioxidant green tea catechin epigallocatechin-3-gallate (EGCG), in inhibiting EV-69 infection of lung fibroblast cells </span><i><span style="font-family:Verdana;">in vitro</span></i><span style="font-family:Verdana;">. Treatment with EGCG-S resulted in moderate protection from EV-69 mediated cytotoxicity as demonstrated by increased metabolic activity as well as maintenance of cell morphology and mitochondrial function. These effects were correlated with reduced hydrogen peroxide production in infected cells following EGCG-S treatment with concentrations less than 100 μM, suggesting a role for inhibition of EV-69 mediated oxidative stress. This study provides insight into characteristics of EV-69 infection as well as the efficacy of EGCG-S mediated inhibition of EV-69 infection.</span> </div> 展开更多
关键词 ROS Enterovirus 69 PICORNAVIRUS Green Tea Flavanol ANTIOXIDANT Antivi-ral mrc-5 cells A549 cells
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国产与进口MEM培养基培养MRC-5细胞效果的比较 被引量:1
13
作者 陈嘉雯 王佳凤 +3 位作者 徐俊峰 周欣 曲成 陈维金 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第5期639-641,共3页
目的对国产及进口MEM培养基培养MRC-5细胞的效果进行比较。方法用国产及进口MEM培养基培养37代MRC-5细胞,于显微镜下观察培养24、48、72 h后的细胞的生长情况,并对细胞在33~37代传代过程中的细胞活性进行检测;以0.008 MOI的Oka株水痘-... 目的对国产及进口MEM培养基培养MRC-5细胞的效果进行比较。方法用国产及进口MEM培养基培养37代MRC-5细胞,于显微镜下观察培养24、48、72 h后的细胞的生长情况,并对细胞在33~37代传代过程中的细胞活性进行检测;以0.008 MOI的Oka株水痘-带状疱疹病毒感染37代MRC-5细胞,观察细胞病变情况。结果国产及进口MEM培养基培养的37代MRC-5细胞,细胞形态、贴壁、伸展、牵手、成网、单层等生长情况均相似,细胞数量也无明显差异,均可使细胞保持较高的活力,两组间细胞存活率比较,差异无统计学意义(P〉0.05);细胞病变均比较典型、广泛,病变程度均在70%以上,且细胞完整,未见明显撕裂现象。结论国产及进口MEM培养基均可满足MRC-5细胞的生长和病毒培养的宿主条件。 展开更多
关键词 MEM培养基 mrc-5细胞 细胞培养
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不同pH值对人胚肺二倍体成纤维细胞MRC-5生长的影响 被引量:1
14
作者 陈通威 赵鹏 《山西医科大学学报》 CAS 2014年第5期347-349,共3页
目的在不同pH值培养液中培养人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5),观察其生长情况,选出最有利于MRC-5细胞生长的pH值范围。方法采用细胞培养技术,分别在pH值为6.8,6.9,7.0,7.1,7.2,7.3,7.4,7.5,7.6的培养液中培养MRC-5细胞,通过显微技术观察... 目的在不同pH值培养液中培养人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5),观察其生长情况,选出最有利于MRC-5细胞生长的pH值范围。方法采用细胞培养技术,分别在pH值为6.8,6.9,7.0,7.1,7.2,7.3,7.4,7.5,7.6的培养液中培养MRC-5细胞,通过显微技术观察细胞形态、对细胞进行计数,然后对MRC-5细胞的生长情况进行分析比较。结果在不同pH值的培养液中,MRC-5细胞的生长状况不同,细胞数量和细胞形态都有差异,当培养液的pH值为7.2-7.3时,细胞生长形态最好,细胞数量最高可达2.37×106/ml。结论研究表明,培养液的pH值为7.2-7.3时,MRC-5细胞的生长状况最佳。 展开更多
关键词 人胚肺二倍体成纤维细胞 mrc-5 PH值 细胞培养
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细胞工厂培养箱与普通培养箱用于生产水痘疫苗的比较 被引量:2
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作者 郑波 王亮 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期455-458,共4页
目的比较细胞工厂培养箱及普通培养箱用于生产水痘疫苗的差异。方法对两种培养箱进行温度测试。比较两种培养箱内培养人胚肺成纤维MRC-5细胞的生长情况及活细胞数量,并对制备出的相应水痘疫苗原液进行无菌检查及病毒滴度测定。结果与普... 目的比较细胞工厂培养箱及普通培养箱用于生产水痘疫苗的差异。方法对两种培养箱进行温度测试。比较两种培养箱内培养人胚肺成纤维MRC-5细胞的生长情况及活细胞数量,并对制备出的相应水痘疫苗原液进行无菌检查及病毒滴度测定。结果与普通培养箱比较,细胞工厂培养箱的温度更稳定;培养MRC-5细胞的贴壁范围更大,活细胞数更高,且批内及批间的均一性更好;其制备水痘疫苗原液的病毒滴度略高,批内及批间的均一性更好,且无菌检查均合格。结论应用细胞工厂培养箱制备水痘疫苗,可提高疫苗的批间均一性,降低人工劳动强度及污染风险,适用于大规模疫苗生产。 展开更多
关键词 细胞工厂培养箱 水痘疫苗 人胚肺成纤维mrc-5细胞 病毒滴度
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稀有人参皂苷对特发性肺纤维化的影响 被引量:1
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作者 姚磊 屈琳琳 范代娣 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期607-613,共7页
探究稀有人参皂苷是否可以缓解特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)。体内实验选用C57BL/6小鼠,小鼠分为对照组、博来霉素(bleomycin,BLM)诱导IPF组、稀有人参皂苷Rk1、Rk3、Rh4、Rg5组,除对照组外其余小鼠均腹腔注射BLM... 探究稀有人参皂苷是否可以缓解特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)。体内实验选用C57BL/6小鼠,小鼠分为对照组、博来霉素(bleomycin,BLM)诱导IPF组、稀有人参皂苷Rk1、Rk3、Rh4、Rg5组,除对照组外其余小鼠均腹腔注射BLM 28 d以构建IPF模型,各治疗组同时分别灌胃给予人参皂苷Rk1、Rk3、Rh4、Rg5,实验结束后收集小鼠的肺脏组织,通过苏木精-伊红染色法(HE)观察小鼠肺部的病理变化;测量小鼠肺部组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量;检测小鼠肺部组织IPF相关基因的表达。体外实验选用人胚肺成纤维细胞(MRC-5),使用(TGF-β1)诱导IPF细胞模型,通过细胞毒性实验、HYP含量测定和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析4种皂苷对IPF相关基因表达的影响。4种稀有人参皂苷均能有效缓解IPF引起的肺泡结构破坏等病理进程,降低HYP含量,下调IPF相关基因的表达,表明稀有人参皂苷能够有效缓解IPF。 展开更多
关键词 肺纤维化 稀有人参皂苷 mrc-5细胞 转化生长因子Β1 博来霉素
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BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性
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作者 黄帅 王汀 《中国人兽共患病学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期1146-1150,共5页
目的 评价BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性。方法 将食蟹猴随机分为对照组、3针组及4针组,经后肢肌肉免疫,1.0 mL/剂。3针组及4针组均接种BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗,3针组于0 d、7 d、21 d各接种1... 目的 评价BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性。方法 将食蟹猴随机分为对照组、3针组及4针组,经后肢肌肉免疫,1.0 mL/剂。3针组及4针组均接种BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗,3针组于0 d、7 d、21 d各接种1剂,4针组于0 d、3 d、7 d、14 d各接种1剂;对照组接种市售国产同类疫苗,于0 d注射2剂、7 d及21 d各1剂。初免前(0 d)及初免后7 d、14 d、28 d、35 d、49 d、63 d后肢隐静脉采血,分离血清及外周血淋巴细胞。快速荧光灶抑制实验(Rapid Fluorescent focus Inhibition Test, RFFIT)及酶联免疫斑点检测技术(Enzyme-linked Immunospot Assay, ELISPOT)分别检测血清中抗狂犬病病毒中和抗体水平和外周血淋巴细胞中细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平。结果 食蟹猴血清中和抗体水平于免疫前均呈阴性(抗体效价<0.5 IU/mL),3针组和对照组在初免后7~28 d呈上升趋势,于28 d达最高,4针组在14 d达最高;在初免后28 d,对照组、3针组中和抗体水平显著高于4针组;初免后35 d,3针组中和抗体水平显著高于4针组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。3针组及4针组外周血淋巴细胞中IL-2及IFN-γ水平在7~14 d呈上升趋势,于14 d达最高,且3针组IFN-γ水平显著高于对照组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义。结论 BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)具有良好的免疫原性,具有优化狂犬病免疫接种程序的应用价值。 展开更多
关键词 狂犬病疫苗 BCG-CpG-DNA佐剂 mrc-5细胞 食蟹猴 免疫原性
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应用人胚肺成纤维细胞MRC-5培养分离寨卡病毒研究 被引量:1
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作者 李幸乐 李懿 +5 位作者 王若琳 苏佳 康锴 郭大城 许汴利 黄学勇 《疾病监测》 CAS 2018年第9期715-717,共3页
目的应用人胚肺成纤维细胞MRC-5培养并分离鉴定寨卡病毒。方法收集寨卡病毒病确诊病例的精液样本并在MRC-5细胞中进行培养,观察致细胞病变效应(CPE)。采用实时荧光PCR(real-time PCR)方法鉴定培养,同时对培养物进行序列测定和比对分析... 目的应用人胚肺成纤维细胞MRC-5培养并分离鉴定寨卡病毒。方法收集寨卡病毒病确诊病例的精液样本并在MRC-5细胞中进行培养,观察致细胞病变效应(CPE)。采用实时荧光PCR(real-time PCR)方法鉴定培养,同时对培养物进行序列测定和比对分析。结果病例精液样本经MRC-5细胞盲传3代,未观察到明显的特异性致CPE,MRC-5细胞3代培养物寨卡病毒经real-time PCR检测结果呈阳性。毒株命名为Henan/001/2016,GenBank编号为MF593625,属于亚洲基因簇系。Henan/001/2016与Natal RGN株的亲缘关系最为接近,在E基因区段的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.7%和100%。结论 MRC-5细胞适用于寨卡病毒的分离、培养和鉴定。 展开更多
关键词 寨卡病毒 mrc-5细胞 病毒分离 进化分析
原文传递
康复新液对转化生长因子-β1诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5纤维化模型的干预作用 被引量:3
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作者 徐秋颖 刘伟伟 +2 位作者 王宝家 马秀英 高永翔 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期432-437,共6页
为探讨康复新液对人胚肺成纤维细胞纤维化模型的干预作用,以转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5构建细胞纤维化模型,并运用CCK-8(cell counting kit-8)法检测康复新液对MRC-5细胞的毒性.以测... 为探讨康复新液对人胚肺成纤维细胞纤维化模型的干预作用,以转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5构建细胞纤维化模型,并运用CCK-8(cell counting kit-8)法检测康复新液对MRC-5细胞的毒性.以测得的最高不致死给药浓度(80倍稀释)的康复新液干预TGF-β1诱导的MRC-5细胞模型,进而通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(WB)检测细胞纤维化指标的mRNA及蛋白质表达水平变化.结果显示:10ng/mL TGF-β1可成功诱导MRC-5细胞发生纤维化,且细胞内α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、层黏连蛋白(laminin,LN)、纤维连结蛋白(fibronectin,FN)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)的mRNA表达水平均显著升高;以80倍稀释的康复新液为最高不致死给药浓度,对MRC-5细胞纤维化模型进行干预,上述纤维化指标的mRNA及蛋白质表达水平均出现显著下降,与地塞米松(Dexamethasone,DXM)的干预效果相当.综上,康复新液可改善由TGF-β1诱导MRC-5细胞纤维化的表型,有望被应用于肺纤维化的治疗. 展开更多
关键词 康复新液 肺纤维化 转化生长因子-Β1 mrc-5细胞
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