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熟地等4味中药的植物雌激素作用的实验研究 被引量：88
1
作者 郝庆秀 王继峰 +4 位作者 牛建昭 赵丕文 崔烨 孙丽萍 薛晓鸥 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期620-624,共5页
目的:观察熟地黄、白芍、当归、川芎等中药对性未成熟SD大鼠子宫系数的影响,以及含药血清对人乳腺癌MCF7细胞体外增殖的影响,评价其植物雌激素样作用。方法:正常雌性性未成熟SD大鼠,体重(70±5)g,按体重均衡和随机的原则分为7组(正... 目的:观察熟地黄、白芍、当归、川芎等中药对性未成熟SD大鼠子宫系数的影响,以及含药血清对人乳腺癌MCF7细胞体外增殖的影响,评价其植物雌激素样作用。方法:正常雌性性未成熟SD大鼠,体重(70±5)g,按体重均衡和随机的原则分为7组(正常对照、己烯雌酚、熟地黄、白芍、当归、川芎和四物汤组),分别每天分早、晚2次灌胃,给药均持续4 d,第5天腹主动脉取血,分离血清,分离子宫并称重,免疫组化法测定子宫组织雌激素受体表达量;药物血清用于MCF7细胞体外增殖,细胞周期和雌激素受体ERα蛋白表达的测定。结果:熟地黄、白芍和当归组的幼鼠子宫系数均高于正常对照组(P<0.05);川芎组幼鼠子宫系数与正常对照组相比,差异无统计学意义;白芍、当归、川芎的含药血清均可显著促进MCF7细胞MTT体外增殖(P<0.05),并且4味中药的药物血清均能使MCF7细胞S期细胞数和细胞增殖指数PI增加(P<0.01),当归和川芎可提高MCF7细胞ERα蛋白的表达水平(P<0.05),熟地黄和白芍的药物血清对MCF7细胞的ERα蛋白表达水平,与正常对照组相比,差异无统计学意义。结论:熟地黄、白芍和当归等中药的免煎剂有植物雌激素样作用,川芎组整体实验和体外细胞培养结果不完全一致,已烯雌酚在本实验剂量时有使幼鼠体重增长减缓的作用,而实验剂量的中药未表现出此样作用。 展开更多
关键词 熟地黄 植物雌激素 子宫系数 mcf7 MTT 细胞周期 ERΑ
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二氢青蒿素对人乳腺癌MCF-7细胞的体外抑制作用 被引量：35
2
作者 林芳 钱之玉 +1 位作者 丁健 林莉萍 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期934-936,共3页
目的 :研究二氢青蒿素 (青蒿素生物合成中的可能前体 )对肿瘤细胞增殖的影响和机制。方法 :采用体外培养的人乳腺癌MCF 7细胞株 ,利用SRB法测定青蒿素和青蒿琥酯对MCF 7细胞增殖的影响 ,用流式细胞检定法 (FCM )测定细胞周期的变化 ,用... 目的 :研究二氢青蒿素 (青蒿素生物合成中的可能前体 )对肿瘤细胞增殖的影响和机制。方法 :采用体外培养的人乳腺癌MCF 7细胞株 ,利用SRB法测定青蒿素和青蒿琥酯对MCF 7细胞增殖的影响 ,用流式细胞检定法 (FCM )测定细胞周期的变化 ,用亚G1期含量测定法和DAPI荧光染色法观察细胞凋亡。结果 :二氢青蒿素能显著抑制MCF 7细胞的增殖 ,IC50 为 0 .2 6 μmol·L-1;二氢青蒿素作用后细胞周期发生明显变化 ,细胞被阻滞在G0 +G1期 ,S期细胞显著减少。二氢青蒿素作用细胞 2 4h后可轻微诱导MCF 7细胞凋亡。结论 :二氢青蒿素能强烈抑制MCF 7细胞增殖 ,将细胞阻滞于G0 +G1期。 展开更多
关键词 二氢青蒿素 人乳腺癌 mcf-7细胞 体外抑制作用
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氧化苦参碱诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的实验研究 被引量：25
3
作者 周炳刚 孙靖 +1 位作者 范玉琢 苏刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期689-691,共3页
目的　研究氧化苦参碱对MCF 7细胞的诱导凋亡作用机制。方法　用光学显微镜、电子显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和DNA凝胶电泳等技术观察细胞凋亡。结果　实验显示氧化苦参碱作用于体外培养的MCF 7细胞可诱导发生凋亡 ,凋亡细... 目的　研究氧化苦参碱对MCF 7细胞的诱导凋亡作用机制。方法　用光学显微镜、电子显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和DNA凝胶电泳等技术观察细胞凋亡。结果　实验显示氧化苦参碱作用于体外培养的MCF 7细胞可诱导发生凋亡 ,凋亡细胞表现为细胞固缩 ,核染色质聚集或碎裂、胞质空泡化等 ;DNA电泳可见DNA梯形条带 ;激光共聚焦显微镜示DNA含量下降 ,流式细胞仪检测sub G1峰在G1期前出现 ,S期细胞比例增高。结论　氧化苦参碱对体外培养MCF 7细胞生长有抑制作用 ,机制与通过阻止细胞周期的进程 ,启动细胞自身调控程序 。 展开更多
关键词 乳腺癌 氧化苦参碱 细胞凋亡 mcf-7细胞 苦豆子
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LRP16对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响 被引量：18
4
作者 韩为东 李雪岭 +4 位作者 卢学春 徐周敏 于力 李明 母义明 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期672-676,共5页
用Northern印迹方法检测雌二醇 (17β E2 )对LRP16mRNA表达的时间及剂量依赖性调控作用 .构建LRP16基因启动子序列调控的萤光素酶报告子 (pS0 ) ,并与雌激素受体α和 β(ERα和ERβ)表达载体共转染COS 7和MCF 7细胞后测定萤光素酶活性 .... 用Northern印迹方法检测雌二醇 (17β E2 )对LRP16mRNA表达的时间及剂量依赖性调控作用 .构建LRP16基因启动子序列调控的萤光素酶报告子 (pS0 ) ,并与雌激素受体α和 β(ERα和ERβ)表达载体共转染COS 7和MCF 7细胞后测定萤光素酶活性 .将LRP16基因的表达载体转染MCF 7细胞 ,测定过表达LRP16对细胞的生长特性的影响 .17β E2 使MCF 7细胞中LRP16mRNA表达水平增加 ,增加幅度未显示出 17β E2 培养时间和剂量的依赖性 .pS0 与ERα表达载体共转染细胞的相对萤光素酶活性较非共转染组 (对照组 )及pS0 ERβ表载体共转染组升高 5～ 10倍 .LRP16基因过表达促进MCF 7细胞的增殖 .研究表明 ,雌激素可能通过ERα上调乳腺癌MCF 展开更多
关键词 LRP16 乳腺癌 细胞增殖 雌二醇
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用人乳腺癌细胞增殖法检测化学物的雌激素样作用 被引量：6
5
作者 常艳 朱心强 +2 位作者 祝慧娟 郑一凡 黄幸纾 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2002年第4期281-283,287,共4页
目的 :引入一种外源性雌激素的快速筛检方法 ,检测外源性化学物的雌激素样活性。方法 :用人乳腺癌细胞体外增殖法 ( E- SCREEN) ,检测硫丹等化学物的雌激素样活性。结果 :成功地建立了 E- SCREEN法 ,该法可检测到 1× 10 - 13 m ol... 目的 :引入一种外源性雌激素的快速筛检方法 ,检测外源性化学物的雌激素样活性。方法 :用人乳腺癌细胞体外增殖法 ( E- SCREEN) ,检测硫丹等化学物的雌激素样活性。结果 :成功地建立了 E- SCREEN法 ,该法可检测到 1× 10 - 13 m ol/ L的雌二醇。发现在该试验条件下 ,己烯雌酚为雌激素受体的全激动剂 ,硫丹为雌激素受体的部分激动剂 ,而 4 -羟化他莫昔酚无雌激素样作用。结论 :E- SCREEN法敏感性高 ,并有快速、简便等优点 ,适用于大量化合物的初筛。 展开更多
关键词 乳腺癌 细胞增殖 mcf-7细胞 雌激素筛检 己烯雌酚 硫丹
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固本抑瘤Ⅱ号及其拆方含药血清诱导MCF7细胞自噬的研究 被引量：8
6
作者 杨亨 王笑民 +3 位作者 陈信义 杨国旺 张甘霖 于明薇 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期920-923,I0001,I0002,共6页
目的:研究固本抑瘤Ⅱ号(GYⅡ)及其拆方大鼠含药血清对人乳腺癌细胞MCF7自噬的影响。方法:制备GYⅡ及其拆方大鼠含药血清,培养MCF7细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制,单丹磺酰尸胺(MDC)及Hoechst 33342双染色荧光显微镜、微管... 目的:研究固本抑瘤Ⅱ号(GYⅡ)及其拆方大鼠含药血清对人乳腺癌细胞MCF7自噬的影响。方法:制备GYⅡ及其拆方大鼠含药血清,培养MCF7细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制,单丹磺酰尸胺(MDC)及Hoechst 33342双染色荧光显微镜、微管相关蛋白1轻链3(MAP-LC3)蛋白Ⅱ(MAP-LC3-Ⅱ)染色激光共聚焦及透射电镜观察自噬,MAP-LC3-Ⅱ/DNA双参数流式细胞术同步分析细胞自噬与细胞周期。结果:与空白组比较,全方组、益气组含药血清处理MCF7细胞表现出细胞抑制效应,活血组、鸡血藤组含药血清处理MCF7细胞均表现出明显的自噬。结论:GYⅡ全方和益气组具有抑制MCF7细胞增殖的效应,而活血组和鸡血藤组未见抑制作用,可能与该两组含药血清诱导MCF7细胞自噬有关。 展开更多
关键词 固本抑瘤Ⅱ号 拆方 含药血清 mcf7细胞 细胞抑制 自噬
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胆固醇合成抑制剂洛伐他汀对MCF-7乳腺癌细胞MAPK活性的影响 被引量：3
7
作者 韦娜 糜漫天 +1 位作者 朱俊东 郎海滨 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第15期1339-1341,共3页
目的　探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀对MCF 7乳腺癌细胞丝裂泵活化蛋白激酶MAPK活性的影响。方法4、8、16μmol L终浓度的洛伐他汀处理上皮来源的MCF 7乳腺癌细胞 ,Westernblotting分析ERK1和p3 8MAPK 蛋白表达 ,激酶活性分析ERK1和p3 8... 目的　探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀对MCF 7乳腺癌细胞丝裂泵活化蛋白激酶MAPK活性的影响。方法4、8、16μmol L终浓度的洛伐他汀处理上皮来源的MCF 7乳腺癌细胞 ,Westernblotting分析ERK1和p3 8MAPK 蛋白表达 ,激酶活性分析ERK1和p3 8MAPK的磷酸化水平。结果　不同剂量的洛伐他汀处理 48～ 72h ,对ERK1蛋白表达无显著影响 ,但在72h后能下调p3 8MAPK蛋白表达 ,同时洛伐他汀处理 48～ 72h均能明显降低ERK1和p3 8MAPK 磷酸化水平 ,二者具有相同趋势。结论　洛伐他汀处理MCF 7乳腺癌细胞可能通过抑制细胞的甲羟戊酸途径 ,或影响胞内酪氨酸激酶磷酸化水平等 。 展开更多
关键词 洛伐他汀 mcf-7细胞 蛋白表达 磷酸化水平 MAPK活性
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影响MCF-7细胞增殖试验相关因素的初步研究 被引量：7
8
作者 朱毅 舒为群 田怀军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期977-979,共3页
目的　了解影响MCF 7细胞增殖试验相关因素 ,为MCF 7细胞增殖试验检测环境雌激素方法的标准化提供试验依据。方法　对不同来源的MCF 7细胞雌激素敏感性进行检测 ,对筛选出的敏感细胞在不同培养条件、去激素培养基中培养不同时间进行细... 目的　了解影响MCF 7细胞增殖试验相关因素 ,为MCF 7细胞增殖试验检测环境雌激素方法的标准化提供试验依据。方法　对不同来源的MCF 7细胞雌激素敏感性进行检测 ,对筛选出的敏感细胞在不同培养条件、去激素培养基中培养不同时间进行细胞增殖试验。结果　不同来源MCF 7细胞对雌激素敏感不同 ;培养基中酚红、血清中内源性雌激素对MCF 7细胞有刺激增殖作用 ;MCF 7细胞在去激素培养基中培养时间越长 ,对雌激素越敏感。结论　进行MCF 7细胞增殖试验前应进行雌激素敏感试验 ,选用敏感细胞 ; 展开更多
关键词 环境雌激素 mcf-7细胞 17Β-雌二醇 细胞培养
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花姜酮对MCF7细胞的增殖和迁移与侵袭的影响及其作用机制研究 被引量：7
9
作者 王梅林 牛精铃 +6 位作者 高杨 梁喜超 王颖熠 杜隆隆 高阳 孙路易 席守民 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期1975-1977,2000,共4页
目的研究花姜酮对乳腺癌MCF7细胞增殖、迁移及侵袭的影响及潜在分子机制。方法以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测花姜酮对MCF7细胞增殖的影响;根据MTT结果,将实验分为4组:空白对照组和低、中、高3个剂量实验组。实验组分别给予5,10,20μmol&#... 目的研究花姜酮对乳腺癌MCF7细胞增殖、迁移及侵袭的影响及潜在分子机制。方法以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测花姜酮对MCF7细胞增殖的影响;根据MTT结果,将实验分为4组:空白对照组和低、中、高3个剂量实验组。实验组分别给予5,10,20μmol·L-1的花姜酮,空白对照组给予等体积的二甲基亚砜(DMSO),处理48 h。用划痕、Transwell和平板克隆实验测定花姜酮对MCF7细胞迁移、侵袭和克隆形成能力;以免疫印迹法检测相关蛋白表达情况。结果与空白对照组相比,低、中、高剂量花姜酮处理48 h后,MCF7细胞的增殖能力分别降至(89.7±5.4)%,(82.0±6.9)%,(62.7±4.6)%,迁移能力分别降至为(72.7±5.7)%,(55.0±3.9)%,(32.7±4.6)%,侵袭能力降至(77.6±7.8)%,(49.1±4.7)%,(40.8±6.2)%,差异均有统计学意义(均P<0.01)。空白对照组的克隆形成率为(41.4±6.3)%,低、中、高3个剂量实验组依次降至(27.4±4.8)%,(20.4±5.1)%,(5.4±0.8)%,实验组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。花姜酮处理MCF7细胞后,Ecadherin的表达量随低、中、高3个浓度而梯度上调,但N-cadherin的表达量随浓度而梯度下降,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论花姜酮能够抑制MCF7细胞的增殖、迁移和侵袭,机制可能与促进E-cadherin、抑制N-cadherin的表达有关。 展开更多
关键词 花姜酮 mcf7细胞 增殖 侵袭 迁移
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胶艾汤及参芪胶艾汤的雌激素样作用及可能机制 被引量：6
10
作者 赵丕文 牛建昭 +3 位作者 王继峰 于杰 郝庆秀 李亚东 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期2503-2507,共5页
目的：观察胶艾汤及其加味方参芪胶艾汤的植物雌激素样作用，并利用雌激素受体（ER）（＋）MCF7细胞探讨其发挥雌激素样作用的可能靶点和机制。方法：正常昆明种性未成熟雌性小鼠60只，体重9～12g，按体重均衡和随机的原则分为6组：正... 目的：观察胶艾汤及其加味方参芪胶艾汤的植物雌激素样作用，并利用雌激素受体（ER）（＋）MCF7细胞探讨其发挥雌激素样作用的可能靶点和机制。方法：正常昆明种性未成熟雌性小鼠60只，体重9～12g，按体重均衡和随机的原则分为6组：正常组给予等体积蒸馏水，阳性药己烯雌酚组按0．35mg·kg·d^-1给予己烯雌酚，胶艾汤和参芪胶艾汤低，高剂量组分别按2．5，5．0g·kg·d^-1给予中药方剂，给药持续4d。第5天眼眶取血，分离血清，称取子宫并计算子宫系数。通过MTT细胞增殖实验观察2个方剂含药血清对MCF7细胞增殖的影响；运用实时荧光定量RT—PCR技术检测含药血清对雌激素效应基因pS2及ERα，ERβ表达的调控作用；并以雌激素受体拮抗剂IC1182，780干预，探讨其发挥雌激素样作用的可能机制。结果：高剂量胶艾汤及参芪胶艾汤能够明显提高性未成熟小鼠的子宫系数（P〈0．05）；其含药血清能够显著促进MCF7细胞增殖（P〈0．05或0．01），加入ER拮抗剂IC1182，780可抑制其促增殖作用（P〈0．05或0．01）。与己烯雌酚组一致，2个方剂含药血清也可提高靶细胞pS2表达水平（P〈0．01），加入IC1182，780可抑制pS2表达水平的提高（P〈0．01）；2个方剂含药血清还可明显提高ERα（P〈0．05）和ERβ（P〈0．01）的表达水平。结论：胶艾汤及参芪胶艾汤均具有一定的通过ER介导的雌激素样作用，并可提高靶细胞ER亚型（特别是ERβ）mRNA的表达水平。 展开更多
关键词 胶艾汤 参芪胶艾汤 雌激素样作用 子宫系数 mcf7细胞 细胞增殖 雌激素受体亚型 .
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洛伐他汀对BRCA1基因高表达MCF-7乳腺癌细胞p21的影响 被引量：2
11
作者 罗远琼 糜漫天 +2 位作者 许红霞 韦娜 张乾勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期386-389,共4页
目的　探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀 (LOV)对高表达BRCA1基因MCF 7乳腺癌细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制剂p2 1的影响。方法　应用基因转染技术获得BRCA1高表达的MCF 7乳腺癌细胞 (MCF 7BRCA1)。 8μmol/LLOV处理细胞 1、2、3d后 ,通过... 目的　探讨胆固醇合成抑制剂洛伐他汀 (LOV)对高表达BRCA1基因MCF 7乳腺癌细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制剂p2 1的影响。方法　应用基因转染技术获得BRCA1高表达的MCF 7乳腺癌细胞 (MCF 7BRCA1)。 8μmol/LLOV处理细胞 1、2、3d后 ,通过MTT、Western blot等方法检测MCF 7及MCF 7BRCA1两种细胞的增殖功能以及周期素依赖性蛋白激酶抑制剂p2 1表达的改变。结果　LOV处理后 ,细胞生长减慢 ,细胞的增殖能力降低 ,而p2 1的蛋白表达增加 ,其中 ,以BRCA1基因转染的细胞经LOV处理后变化更为显著。结论　BRCA1基因能增强LOV对MCF 7乳腺癌细胞的增殖抑制作用 ,诱导周期素依赖性蛋白激酶抑制剂p2 1活性增加 ,推测这可能是LOV抑制BRCA1基因高表达MCF 7乳腺癌细胞增殖的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 LOVASTATIN mcf-7细胞 细胞增殖 乳腺癌 P21
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败酱草单萜环烯醚酯类对Hep G2、MCF7细胞增殖及凋亡的影响? 被引量：2
12
作者 计莉强 吴景敏 +2 位作者 闵炜 陈毅芳 谢明华 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期692-697,共6页
目的探讨败酱草单萜环烯醚酯类(patrinia monoterpene iridoid ether esters,PMIEE)对HepG2和MCF7细胞增殖抑制和凋亡的影响。方法 HepG2和MCF7细胞经PMIEE作用后,采用CCK8法检测细胞增殖抑制情况;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检... 目的探讨败酱草单萜环烯醚酯类(patrinia monoterpene iridoid ether esters,PMIEE)对HepG2和MCF7细胞增殖抑制和凋亡的影响。方法 HepG2和MCF7细胞经PMIEE作用后,采用CCK8法检测细胞增殖抑制情况;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡及周期情况;细胞划痕实验检测细胞迁移状况;Western blot法检测Bcl-2、Bax、caspase3、cdc2和CyclinB1的表达情况。结果 CCK8、划痕实验和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测显示,PMIEE对HepG2和MCF7细胞均有显著的增殖抑制、促凋亡率和降低迁移率作用(P<0.05),呈一定量效关系,且PMIEE对HepG2细胞的周期阻滞以G2/M期为主,MCF7细胞以G0/G1期为主;Western blot结果显示,PMIEE可显著下调2种细胞Bcl-2、cdc2、CyclinB1的表达,上调Bax和caspase3的表达水平。结论 PMIEE可诱导HepG2和MCF7细胞增殖抑制和凋亡,下调Bcl-2、cdc2和CyclinB1表达及上调Bax和caspase3表达,其抗癌的潜在机制可能与此有关。 展开更多
关键词 败酱草 HEPG2细胞 mcf7细胞 增殖 凋亡
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MicroRNA-493抑制乳腺癌MCF7细胞增殖、迁移和成瘤能力 被引量：2
13
作者 韦唯 葛葵葵 +2 位作者 徐宇强 黄晋江 黄青山 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2015年第4期486-492,共7页
为了研究miR-493对乳腺癌MCF7细胞增殖、迁移和肿瘤形成能力的影响及其可能的机制,该文使用pc DNA3.1(+)/miR-493重组质粒转染MCF7细胞,通过筛选获得高表达miR-493的细胞克隆。通过荧光定量PCR检测miR-493在MCF10A和MCF7及各细胞克隆中... 为了研究miR-493对乳腺癌MCF7细胞增殖、迁移和肿瘤形成能力的影响及其可能的机制,该文使用pc DNA3.1(+)/miR-493重组质粒转染MCF7细胞,通过筛选获得高表达miR-493的细胞克隆。通过荧光定量PCR检测miR-493在MCF10A和MCF7及各细胞克隆中的表达;CCK8实验检测miR-493对MCF7细胞增殖能力的影响;Transwell和划痕实验观察miR-493高表达后MCF7细胞迁移和侵袭能力的改变,软琼脂克隆形成实验以及裸鼠实验检测miR-493对MCF7细胞肿瘤形成能力的影响。软件预测miR-493可能的靶基因,并通过荧光定量PCR和Western blot进行验证。该研究证明,miR-493能够有效抑制乳腺癌MCF7细胞的增殖、迁移、浸润和肿瘤形成的能力。 展开更多
关键词 miR-493 mcf7 细胞增殖 细胞迁移 肿瘤形成
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诺美孕酮逆转乳腺癌耐药细胞株多药耐药性的研究 被引量：2
14
作者 李杰 许良中 +4 位作者 何开玲 郭伟剑 朱雄增 郑云红 夏鹏 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期129-132,共4页
目的　研究诺美孕酮 (NOM)对乳腺癌耐药细胞株 (MCF7/ADR)多药耐药性 (MDR)的影响 ,探讨其调节机制。方法　应用MTT法 ,研究NOM对MCF7/ADR药物敏感性的影响。采用半定量逆转录聚合酶联反应 (RT PCR)和免疫细胞化学染色 ,分析耐药基因MDR... 目的　研究诺美孕酮 (NOM)对乳腺癌耐药细胞株 (MCF7/ADR)多药耐药性 (MDR)的影响 ,探讨其调节机制。方法　应用MTT法 ,研究NOM对MCF7/ADR药物敏感性的影响。采用半定量逆转录聚合酶联反应 (RT PCR)和免疫细胞化学染色 ,分析耐药基因MDR1、谷胱甘肽S转移酶Pi(GSTπ)、拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)和多药耐药相关蛋白 (MRP)表达的变化。通过流式细胞技术观察NOM对MCF7/ADR细胞内药物积累和细胞周期的影响。结果　NOM对MCF7/ADR的MDR具有明显的逆转作用 ,在 2 0 ,10和 5 μmol/L浓度时的逆转倍数分别为 2 1,12和 8倍 ,逆转强度明显高于前身化合物甲地孕酮 ,而与维拉帕米相当。 5 μmol/LNOM处理MCF7/ADR后 ,MDR1的mRNA表达水平明显降低 ,呈现时间依赖性变化 ;P糖蛋白 (P gp)和GSTπ蛋白的变化符合相应mRNA表达的变化 ;MRP和TopoⅡα基因表达未见明显变化。用NOM 2 0 ,10和 5 μmol/L分别处理 2h后 ,ADR在细胞内的积累分别增加到 2 .7倍、2 .3倍和 1.5倍。同时 ,NOM可明显加强ADR对MCF7/ADR细胞在G2 M期的阻滞作用。结论　NOM具有较强的逆转MCF7/ADR细胞MDR的作用 ,其逆转机制为多种途径 ,包括时间依赖性下调MDRI和GSTπ基因的表达 ,增加细胞内药物积累 ,加强ADR对MCF7/ADR在G2 展开更多
关键词 诺美孕酮 多药耐药 乳腺癌 耐药细胞株
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薯蓣次苷A通过下调STAT3及糖代谢相关基因表达抑制MCF7细胞生长 被引量：2
15
作者 王天晓 时小燕 +2 位作者 丛悦 张中庆 刘迎滑 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1510-1514,共5页
肿瘤的发生和发展是一个复杂的过程,肿瘤细胞的失控性生长是肿瘤的重要生物学特征,而肿瘤细胞的快速生长则依赖于葡萄糖代谢提供能量ATP及代谢中间产物用于肿瘤细胞生物大分子的合成。正常组织细胞在有氧时通过糖的有氧分解获取能量,只... 肿瘤的发生和发展是一个复杂的过程,肿瘤细胞的失控性生长是肿瘤的重要生物学特征,而肿瘤细胞的快速生长则依赖于葡萄糖代谢提供能量ATP及代谢中间产物用于肿瘤细胞生物大分子的合成。正常组织细胞在有氧时通过糖的有氧分解获取能量,只有在缺氧时才进行无氧糖酵解。但肿瘤细胞即使在供氧充足的条件下,也主要依赖糖酵解进行代谢,肿瘤细胞的这种特性被称为Warburg效应。 展开更多
关键词 STAT3 糖代谢 细胞凋亡 mcf7细胞
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过表达外源M-CSF促进MCF7细胞增殖 被引量：2
16
作者 涂剑 姚志红 +2 位作者 龙治峰 朱炳阳 唐圣松 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期132-136,共5页
为探讨过表达外源巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对细胞增殖的影响,将重组载体pCMV/cyto/myc-M-CSF转染MCF7细胞、G418筛选,RT-PCR、Western印迹和免疫荧光鉴定M-CSF的mRNA表达、蛋白表达及定位,通过计算细胞倍增时间、MTT法及反义寡核苷... 为探讨过表达外源巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对细胞增殖的影响,将重组载体pCMV/cyto/myc-M-CSF转染MCF7细胞、G418筛选,RT-PCR、Western印迹和免疫荧光鉴定M-CSF的mRNA表达、蛋白表达及定位,通过计算细胞倍增时间、MTT法及反义寡核苷酸抑制实验分析M-CSF对细胞增殖的影响.结果表明,转染M-CSF的MCF7细胞过表达M-CSF mRNA及蛋白,并且定位表达于细胞质;与转染空载体及未转染M-CSF组细胞比较,转染M-CSF的MCF7细胞倍增时间明显缩短、增殖能力显著增强,M-CSF的特异性反义寡核苷酸能抑制转染M-CSF的MCF7细胞的增殖,且抑制率随着反义寡核苷酸浓度的增高而增强;以上结果提示,胞质过表达M-CSF可促进MCF7细胞的增殖. 展开更多
关键词 巨噬细胞集落刺激因子 pCMV/cyto/myc—M—CSF载体 mcf7细胞 胞质 细胞增殖
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报告基因方法对壬基酚、双酚A雌激素样活性的体外研究 被引量：1
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作者 赵海涛 张天宝 +3 位作者 朱勇飞 万旭英 朱玉平 马玺里 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期13-15,共3页
目的利用基于报告基因的MCF7细胞体外雌激素检测方法对壬基酚(NP)、双酚A(BPA)的雌激素样活性及作用机制进行研究。方法合成人雌激素反应元件(ERE)核心片断并将其插入pGL3promoter载体的多克隆位点构建而成雌激素反应元件ERE调控的报告... 目的利用基于报告基因的MCF7细胞体外雌激素检测方法对壬基酚(NP)、双酚A(BPA)的雌激素样活性及作用机制进行研究。方法合成人雌激素反应元件(ERE)核心片断并将其插入pGL3promoter载体的多克隆位点构建而成雌激素反应元件ERE调控的报告质粒pERELuc,用脂质体转染法将pERELuc及内对照质粒phRLSV40瞬时转染MCF7细胞,用17β雌二醇(E2)、三苯氧胺(Tam)、壬基酚、双酚A等处理后检测报告基因荧光素酶的表达。结果转染pERELuc的MCF7细胞的报告基因表达与E2呈明显的剂量-反应关系,1×10-11molLE2可引起报告基因的表达,至1×10-9molL可达到最大表达值,而未转染pERELuc时与E2无明显反应,三苯氧胺可以显著抑制E2引起的报告基因的表达。1×10-6molL以上NP和BPA出现雌激素样作用。NP的雌激素样活性略强于BPA。结论本试验建立并采用的基于报告基因的体外雌激素检测方法是可行的,NP和BPA有一定的雌激素样活性作用。 展开更多
关键词 雌激素样活性 mcf7细胞 雌激素反应元件 报告基因方法 壬基酚 双酚A
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脂肪间充质干细胞源exosomes对乳腺癌细胞系MCF7中microRNA表达谱的影响 被引量：2
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作者 王世华 林瑞竹 +1 位作者 李霄霞 赵春华 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第5期621-626,共6页
目的观察脂肪间充质干细胞源exosomes的生物学特性，初步探讨其对乳腺癌细胞系MCF7中microRNAs表达谱的影响。方法收集脂肪间充质干细胞培养上清液，以超滤和超离的方法提取exosomes；电镜下观察形态；用Western blot检测exosomes表面... 目的观察脂肪间充质干细胞源exosomes的生物学特性，初步探讨其对乳腺癌细胞系MCF7中microRNAs表达谱的影响。方法收集脂肪间充质干细胞培养上清液，以超滤和超离的方法提取exosomes；电镜下观察形态；用Western blot检测exosomes表面蛋白标志物的表达情况；用Dil染料标记exosomes后加入到乳腺癌细胞MCF7上清中，荧光显微镜下观察MCF7对exosomes的内吞作用；用microRNA芯片检测MCF7在exosomes处理24h后microRNAs表达谱的变化以及exosomes中含有的microRNAs种类。结果脂肪间充质干细胞分泌30～100nm的exosomes，exosomes表达CD63和HSP70，可被乳腺癌细胞MCF7内吞；exosomes作用24h，可引起MCF7中244个microRNAs表达发生变化（其中174个表达上调，70个表达下调，倍数〉2倍）；对脂肪间充质干细胞exosomes中microRNAs的分析提示MCF7中microRNAs的上调大部分是内源性的，不是exosomes输入的。结论脂肪间充质干细胞源exosomes可以诱导乳腺癌细胞MCF7microRNA表达谱发生变化，揭示了间充质干细胞影响乳腺癌细胞发生和发展的一个新机制。 展开更多
关键词 EXOSOMES 间充质干细胞 MICRORNAS mcf7细胞
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沉默葡萄糖调节蛋白94对乳腺癌MCF7细胞的影响及可能的机制 被引量：2
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作者 王维伊 赵建华 《中国妇幼保健》 CAS 2018年第16期3797-3800,共4页
目的探讨沉默葡萄糖调节蛋白94(GRP94)对乳腺癌MCF7细胞的影响及可能的作用机制,旨在对GRP94在乳腺癌发生发展中的作用及机制提供数据参考。方法将人乳腺癌细胞株MCF7细胞随机分为空白对照组、空白转染组和实验组,其中空白转染组和实验... 目的探讨沉默葡萄糖调节蛋白94(GRP94)对乳腺癌MCF7细胞的影响及可能的作用机制,旨在对GRP94在乳腺癌发生发展中的作用及机制提供数据参考。方法将人乳腺癌细胞株MCF7细胞随机分为空白对照组、空白转染组和实验组,其中空白转染组和实验组分别转染siRNA和siRNA-GRP94,采用CCK8实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡,qRT-PCR检测GRP94 mRNA表达,Western blot检测GRP94、c-myc、CyclinD1、Survivin蛋白表达。结果实验组GRP94 mRNA和蛋白表达量分别为(0.106±0.031)和(0.211±0.068),明显低于空白对照组的(0.984±0.122)和(0.943±0.117)及空白转染组的(0.980±0.120)和(0.946±0.121),差异有统计学意义(P<0.05)。实验组培养24 h、48 h MCF7细胞增殖A值分别为(0.426±0.120)和(0.547±0.114),明显低于空白对照组的(0.864±0.121)和(1.064±0.117)及空白转染组的(0.870±0.119)和(1.060±0.110),差异有统计学意义(P<0.05)。实验组MCF7细胞凋亡率为(8.92±1.01)%,明显高于空白对照组的(3.16±0.64)%和空白转染组的(3.20±0.59)%,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组MCF7细胞c-myc、CyclinD1、Survivin蛋白相对表达量分别为(0.813±0.104)、(0.214±0.067)和(0.511±0.121),明显低于空白对照组和空白转染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GRP94可抑制乳腺癌MCF7细胞增殖、诱导凋亡,可能与其下调c-myc、CyclinD1、Survivin蛋白表达有关。 展开更多
关键词 沉默葡萄糖调节蛋白94 乳腺癌 mcf7细胞 增殖 凋亡
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PUMA基因在水飞蓟宾诱导乳腺癌细胞凋亡的作用 被引量：2
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作者 羊涛 张嘉越 +3 位作者 岑延增 李松明 李瑞 冷津立 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2013年第36期6044-6046,共3页
目的:探讨凋亡相关基因PUMA在体外水飞蓟宾(silybin,SIL)诱导乳腺癌MCF7细胞凋亡过程中的作用。方法:MCF7细胞分为二组:对照组和SIL组,SIL组处理浓度分别为10、20、40 mg/L,各组细胞分别培养24、48及72 h。MTT法检测SIL对乳腺癌MCF7杀伤... 目的:探讨凋亡相关基因PUMA在体外水飞蓟宾(silybin,SIL)诱导乳腺癌MCF7细胞凋亡过程中的作用。方法:MCF7细胞分为二组:对照组和SIL组,SIL组处理浓度分别为10、20、40 mg/L,各组细胞分别培养24、48及72 h。MTT法检测SIL对乳腺癌MCF7杀伤率,TUNEL法(DNA断裂的原位末端标记法)测定各组细胞凋亡率,Caspase-Glo⑧3/7定量试剂盒测定细胞Caspase3/7的表达情况,Western blot法检测PUMA蛋白表达水平。结果:上述浓度下的SIL对MCF7细胞增殖均具有抑制作用(P<0.01),其中浓度为40mg/LSIL处理的MCF7细胞在72h时抑制效果最明显,结果呈药物浓度及时间依赖效应;TUNEL法检测显示(48h)SIL可以显著增加MCF7细胞的凋亡率(P<0.01);Caspase3/7检测显示SIL可以使Caspase3/7活性显著升高(P<0.01);Western blot法检测显示SIL可以诱导PUMA蛋白的表达升高。结论:凋亡相关基因PUMA在水飞蓟宾诱导乳腺癌MCF7细胞凋亡过程中具有显著作用,诱导PUMA蛋白表达可能是水飞蓟宾抗癌作用的机制之一。 展开更多
关键词 水飞蓟宾 PUMA 乳腺癌 mcf7细胞
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