本文研究了聚乙烯亚胺-胆固醇阳离子聚合物(PEI-Chol)基因载体的性能及其结合中性脂质、聚乙二醇修饰脂质微泡介导的基因传递系统(微泡/PEI-Chol/DNA)的体外细胞基因转染效率。采用胆固醇甲酰氯与聚乙烯亚胺(Mw1800)通过酰胺化制得PEI-C...本文研究了聚乙烯亚胺-胆固醇阳离子聚合物(PEI-Chol)基因载体的性能及其结合中性脂质、聚乙二醇修饰脂质微泡介导的基因传递系统(微泡/PEI-Chol/DNA)的体外细胞基因转染效率。采用胆固醇甲酰氯与聚乙烯亚胺(Mw1800)通过酰胺化制得PEI-Chol,并运用IR、1H NMR和MADI-TOF-MS(基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱)对其结构和分子量进行测定,平均相对分子质量约为2000。采用反相挥发法制备DPPC、DSPE-PEG2000和全氟丙烷构建的粒径为2~8μm的脂质微泡,并运用自组装技术将PEI-Chol/DNA复合物与微泡融合,构建微泡/PEI-Chol/DNA(bubble/PEI-Chol/DNA)基因转染系统;以pEGFP-Cl(enhanced green fluorescent protein,增强型绿色荧光蛋白)为报告基因,用凝胶滞留试验考察PEI-Chol的DNA压缩能力,同时在A549和MCF-7两种细胞中比较以PEI-Chol为核心构建的各种载体系统的细胞毒性、抗血清沉淀作用以及细胞转染效率。结果发现,当N/P比值为4以上时,PEI-Chol能有效压缩DNA;PEI-Chol和构建的微泡系统对A549和MCF-7两种细胞几乎没有毒性;本微泡介导基因转染系统,一方面降低PEI-Chol的毒性,提高抗血清蛋白沉淀作用,另一方面提高其基因转染效果。研究表明新型bubble/PEI-Chol/DNA是一种高效低毒的非病毒基因载体系统。展开更多
目的对自制的脂质囊泡超声造影剂进行质量评价,研究不同剂量与正常猪肝彩色多普勒显影效果间的相互关系。方法显微镜观察脂质囊泡的形态、激光粒度测定仪测定粒径及粒度分布,用血细胞分析仪统计不同放置时间条件下和配制浓度粒径在28μ...目的对自制的脂质囊泡超声造影剂进行质量评价,研究不同剂量与正常猪肝彩色多普勒显影效果间的相互关系。方法显微镜观察脂质囊泡的形态、激光粒度测定仪测定粒径及粒度分布,用血细胞分析仪统计不同放置时间条件下和配制浓度粒径在28μm范围内的囊泡浓度以及光照和温度对囊泡浓度和平均粒径的影响。进行造影剂剂量与正常猪肝实质彩色多普勒显影效果间的相互关系实验,观察3个不同剂量造影剂对彩色多普勒显影视频强度及增强时间的影响。结果自制的脂质囊泡形态圆整,平均粒径3.33.5μm,囊泡浓度超过4×10^8个/m l。正常猪肝实质区彩色多普勒显影增强强度和增强时间基本呈剂量依赖性,0.02 m l/kg剂量水平对正常猪肝实质区显像增强强度和增强时间最好。结论自制的脂质囊泡可以在动物实验中作为有效的超声造影剂。展开更多
文摘本文研究了聚乙烯亚胺-胆固醇阳离子聚合物(PEI-Chol)基因载体的性能及其结合中性脂质、聚乙二醇修饰脂质微泡介导的基因传递系统(微泡/PEI-Chol/DNA)的体外细胞基因转染效率。采用胆固醇甲酰氯与聚乙烯亚胺(Mw1800)通过酰胺化制得PEI-Chol,并运用IR、1H NMR和MADI-TOF-MS(基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱)对其结构和分子量进行测定,平均相对分子质量约为2000。采用反相挥发法制备DPPC、DSPE-PEG2000和全氟丙烷构建的粒径为2~8μm的脂质微泡,并运用自组装技术将PEI-Chol/DNA复合物与微泡融合,构建微泡/PEI-Chol/DNA(bubble/PEI-Chol/DNA)基因转染系统;以pEGFP-Cl(enhanced green fluorescent protein,增强型绿色荧光蛋白)为报告基因,用凝胶滞留试验考察PEI-Chol的DNA压缩能力,同时在A549和MCF-7两种细胞中比较以PEI-Chol为核心构建的各种载体系统的细胞毒性、抗血清沉淀作用以及细胞转染效率。结果发现,当N/P比值为4以上时,PEI-Chol能有效压缩DNA;PEI-Chol和构建的微泡系统对A549和MCF-7两种细胞几乎没有毒性;本微泡介导基因转染系统,一方面降低PEI-Chol的毒性,提高抗血清蛋白沉淀作用,另一方面提高其基因转染效果。研究表明新型bubble/PEI-Chol/DNA是一种高效低毒的非病毒基因载体系统。
文摘目的对自制的脂质囊泡超声造影剂进行质量评价,研究不同剂量与正常猪肝彩色多普勒显影效果间的相互关系。方法显微镜观察脂质囊泡的形态、激光粒度测定仪测定粒径及粒度分布,用血细胞分析仪统计不同放置时间条件下和配制浓度粒径在28μm范围内的囊泡浓度以及光照和温度对囊泡浓度和平均粒径的影响。进行造影剂剂量与正常猪肝实质彩色多普勒显影效果间的相互关系实验,观察3个不同剂量造影剂对彩色多普勒显影视频强度及增强时间的影响。结果自制的脂质囊泡形态圆整,平均粒径3.33.5μm,囊泡浓度超过4×10^8个/m l。正常猪肝实质区彩色多普勒显影增强强度和增强时间基本呈剂量依赖性,0.02 m l/kg剂量水平对正常猪肝实质区显像增强强度和增强时间最好。结论自制的脂质囊泡可以在动物实验中作为有效的超声造影剂。