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分子伴侣Jiv90基因的克隆及其在猪脐静脉血管内皮细胞中的表达
被引量：
3
1
作者
刘伟
杨幼聪
+1 位作者
李宇立
张彦明
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第6期26-30,共5页
为研究分子伴侣Jiv90对猪瘟病毒复制的影响,克隆了分子伴侣Jiv90基因,构建了真核表达载体并在猪脐静脉血管内皮细胞中表达。根据牛的Jiv90基因序列和真核表达载体pEGFP-C1设计引物,经PCR扩增,成功克隆到猪Jiv90基因,回收后与pEGFP-C1载...
为研究分子伴侣Jiv90对猪瘟病毒复制的影响,克隆了分子伴侣Jiv90基因,构建了真核表达载体并在猪脐静脉血管内皮细胞中表达。根据牛的Jiv90基因序列和真核表达载体pEGFP-C1设计引物,经PCR扩增,成功克隆到猪Jiv90基因,回收后与pEGFP-C1载体连接,构建重组表达载体pEGFP-C1-Jiv90,提取质粒并采用脂质体法转染猪脐静脉血管内皮细胞。转染24 h后,荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,经G418抗性筛选得到阳性克隆。本研究成功构建了pEGFP-C1-Jiv90真核表达载体,得到稳定表达Jiv90的细胞株,为今后开展分子伴侣对猪瘟病毒复制影响的研究奠定了基础。
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关键词
猪瘟病毒
真核表达
猪脐静脉血管内皮细胞
jiv
90
基因
下载PDF
职称材料
猪血管内皮细胞中分子伴侣Jiv90基因的克隆与原核表达
被引量：
1
2
作者
杨幼聪
郭抗抗
+5 位作者
张彦明
李宇立
张倩
程媛媛
张三东
彭维刚
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2011年第7期9-13,共5页
克隆到猪Jiv90基因,构建原核表达载体并在大肠埃希菌中表达。从猪血管内皮细胞中克隆到Jiv90基因,将其克隆到pET-32a载体上,构建出重组表达载体,经IPTG诱导表达。结果表明,本试验成功克隆了大小为693 bp的基因,重组质载体pET-32a-Jiv90...
克隆到猪Jiv90基因,构建原核表达载体并在大肠埃希菌中表达。从猪血管内皮细胞中克隆到Jiv90基因,将其克隆到pET-32a载体上,构建出重组表达载体,经IPTG诱导表达。结果表明,本试验成功克隆了大小为693 bp的基因,重组质载体pET-32a-Jiv90所表达的蛋白在大肠埃希菌中以包涵体的形式存在,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定大小为46 ku,与预期结果一致。为进一步研究该蛋白的功能及制备抗体奠定了基础。
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关键词
jiv
90
pET-32a
原核表达
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职称材料
题名
分子伴侣Jiv90基因的克隆及其在猪脐静脉血管内皮细胞中的表达
被引量：
3
1
作者
刘伟
杨幼聪
李宇立
张彦明
机构
西北农林科技大学动物医学院
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010年第6期26-30,共5页
基金
国家转基因培育新品种专项项目(2009ZX08006006B)
陕西省"13115"科技创新工程重大科技专项项目(2009ZDKG-23)
文摘
为研究分子伴侣Jiv90对猪瘟病毒复制的影响,克隆了分子伴侣Jiv90基因,构建了真核表达载体并在猪脐静脉血管内皮细胞中表达。根据牛的Jiv90基因序列和真核表达载体pEGFP-C1设计引物,经PCR扩增,成功克隆到猪Jiv90基因,回收后与pEGFP-C1载体连接,构建重组表达载体pEGFP-C1-Jiv90,提取质粒并采用脂质体法转染猪脐静脉血管内皮细胞。转染24 h后,荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,经G418抗性筛选得到阳性克隆。本研究成功构建了pEGFP-C1-Jiv90真核表达载体,得到稳定表达Jiv90的细胞株,为今后开展分子伴侣对猪瘟病毒复制影响的研究奠定了基础。
关键词
猪瘟病毒
真核表达
猪脐静脉血管内皮细胞
jiv
90
基因
Keywords
CSFV
eukaryotic
expression
swine
umbilicus
vein
endothelial
cell
jiv
90
gene
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
猪血管内皮细胞中分子伴侣Jiv90基因的克隆与原核表达
被引量：
1
2
作者
杨幼聪
郭抗抗
张彦明
李宇立
张倩
程媛媛
张三东
彭维刚
机构
西北农林科技大学动医学院
出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2011年第7期9-13,共5页
基金
国家转基因生物新品种培育重大专项-抗病转基因新品种培育(2009ZX08006-006B)
陕西省"13115"科技创新工程重大科技专项-猪瘟病毒致病机理与抗病育种研究(2009ZDKG-23)
文摘
克隆到猪Jiv90基因,构建原核表达载体并在大肠埃希菌中表达。从猪血管内皮细胞中克隆到Jiv90基因,将其克隆到pET-32a载体上,构建出重组表达载体,经IPTG诱导表达。结果表明,本试验成功克隆了大小为693 bp的基因,重组质载体pET-32a-Jiv90所表达的蛋白在大肠埃希菌中以包涵体的形式存在,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定大小为46 ku,与预期结果一致。为进一步研究该蛋白的功能及制备抗体奠定了基础。
关键词
jiv
90
pET-32a
原核表达
Keywords
pET-32a
jiv
90
gene
prokaryotic
expression
分类号
S852.21 [农业科学—基础兽医学]
Q786 [农业科学—兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
分子伴侣Jiv90基因的克隆及其在猪脐静脉血管内皮细胞中的表达
刘伟
杨幼聪
李宇立
张彦明
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2010
3
下载PDF
职称材料
2
猪血管内皮细胞中分子伴侣Jiv90基因的克隆与原核表达
杨幼聪
郭抗抗
张彦明
李宇立
张倩
程媛媛
张三东
彭维刚
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2011
1
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职称材料
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