目的探讨淫羊藿苷对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446的作用及其机制。方法将对数生长期NCI-H446细胞分成对照组和淫羊藿苷组。对照组细胞常规培养,淫羊藿苷组细胞培养体系中加入淫羊藿苷(8μmol/L)。各组细胞培养48 h后,利用噻唑蓝检测细胞...目的探讨淫羊藿苷对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446的作用及其机制。方法将对数生长期NCI-H446细胞分成对照组和淫羊藿苷组。对照组细胞常规培养,淫羊藿苷组细胞培养体系中加入淫羊藿苷(8μmol/L)。各组细胞培养48 h后,利用噻唑蓝检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时定量聚合酶链式反应检测细胞Janus激酶2(JAK2)和信号转导子与转录激活子3(STAT3)基因表达;蛋白质印迹法检测细胞中JAK2、STAT3、磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、Bax和BCL-2蛋白的变化。结果与对照组相比,淫羊藿苷组NCI-H446细胞增殖率明显下降(P<0.05),凋亡率明显升高,NCI-H446细胞JAK2 m RNA与STAT3 m RNA无明显差异。蛋白质印迹法检测显示,淫羊藿苷组NCI-H446细胞JAK2、STAT3总蛋白无明显变化(P>0.05);但p-JAK2、p-STAT3和Bax蛋白明显增加,而BCL-2明显减少(P<0.05)。结论淫羊藿苷能抑制NCI-H446细胞增殖,促进NCI-H446细胞凋亡,其作用可能是通过影响JAK2/STAT3信号传导通路实现的。展开更多
目的探讨星形胶质细胞外泌体(Astrocyte exosomes,Ast-exos)对癫痫大鼠小胶质细胞活化及Janus激酶2(Janus kinase,JAK2)/信号转导与转录激活子3(Signal transducer and activator of transcription,STAT3)通路的影响。方法将雄性SD大鼠...目的探讨星形胶质细胞外泌体(Astrocyte exosomes,Ast-exos)对癫痫大鼠小胶质细胞活化及Janus激酶2(Janus kinase,JAK2)/信号转导与转录激活子3(Signal transducer and activator of transcription,STAT3)通路的影响。方法将雄性SD大鼠用随机数字表法分为正常对照组、模型组、Ast-exos组(尾静脉注射Ast-exos,0.5 mg/kg)、Coumermycin A1组(JAK2通路激活剂,4.0 mg/kg)、Ast-exos+Coumermycin A1组,每组各10只;腹腔注射戊四氮(35 mg/kg)建立大鼠癫痫模型,各组给药14 d后观察大鼠行为,对癫痫症状进行评分;处死大鼠,取海马组织,免疫组化法检测小胶质细胞活化数目;酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测海马组织炎性因子-白细胞介素(Interleukin,IL)-1β、IL-6及神经递质γ氨基丁酸水平;尼氏及原位末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)染色观察海马组织神经元损伤及凋亡状况;免疫荧光共定位法检测JAK2磷酸化蛋白(Phosphorylated JAK2,p-JAK2)与活化小胶质细胞共表达数目;蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测JAK2/STAT3通路磷酸化蛋白p-JAK2、磷酸化STAT3(Phosphorylated STAT3,p-STAT3)、通路下游炎症相关蛋白IL-1β、IL-6、凋亡靶蛋白-半胱氨酸天冬氨酸酶-3(Cysteyl aspartate specific protease,Caspase-3)表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠癫痫发作频率及发作等级评分升高,海马神经元损伤及凋亡加重,海马组织中炎性因子表达、小胶质细胞活化数目、p-JAK2与活化小胶质细胞阳性共表达数目均升高,JAK2/STAT3磷酸化活化蛋白及其介导的下游炎症及凋亡途径相关蛋白表达水平升高(P<0.05);Ast-exos可改善癫痫发作症状,缓解癫痫大鼠海马神经元损伤及凋亡,抑制JAK2/STAT3磷酸化活化及其介导的下游炎症及凋亡途径激活,降低p-JAK2在活化小胶质细胞中表达,降低小胶质细胞活化数目及炎症因子表达水平(P<0.05);JAK2通路激活剂-Coume展开更多
文摘目的探讨淫羊藿苷对人小细胞肺癌细胞株NCI-H446的作用及其机制。方法将对数生长期NCI-H446细胞分成对照组和淫羊藿苷组。对照组细胞常规培养,淫羊藿苷组细胞培养体系中加入淫羊藿苷(8μmol/L)。各组细胞培养48 h后,利用噻唑蓝检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时定量聚合酶链式反应检测细胞Janus激酶2(JAK2)和信号转导子与转录激活子3(STAT3)基因表达;蛋白质印迹法检测细胞中JAK2、STAT3、磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、Bax和BCL-2蛋白的变化。结果与对照组相比,淫羊藿苷组NCI-H446细胞增殖率明显下降(P<0.05),凋亡率明显升高,NCI-H446细胞JAK2 m RNA与STAT3 m RNA无明显差异。蛋白质印迹法检测显示,淫羊藿苷组NCI-H446细胞JAK2、STAT3总蛋白无明显变化(P>0.05);但p-JAK2、p-STAT3和Bax蛋白明显增加,而BCL-2明显减少(P<0.05)。结论淫羊藿苷能抑制NCI-H446细胞增殖,促进NCI-H446细胞凋亡,其作用可能是通过影响JAK2/STAT3信号传导通路实现的。
