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猪精子体外获能与顶体反应的超微结构研究 被引量:9
1
作者 秦鹏春 谭景和 +2 位作者 吴光明 徐立滨 杨庆章 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1995年第2期207-211,共5页
用4种方法,检测了猪精子体外获能的效果。结果证明:高离子浓度的前培养液和猪卵泡液,具有促进获能过程的作用,实验还获得了获能后顶体反应的一些重要的形态学变化资料,包括质膜的膨胀、断裂.顶体膨胀,顶体外膜内陷或原位局部囊... 用4种方法,检测了猪精子体外获能的效果。结果证明:高离子浓度的前培养液和猪卵泡液,具有促进获能过程的作用,实验还获得了获能后顶体反应的一些重要的形态学变化资料,包括质膜的膨胀、断裂.顶体膨胀,顶体外膜内陷或原位局部囊泡化,质膜再全部丢失。顶体内膜直到与卵母细胞质膜融合,才发生可见的变化。受精过程无论体内或体外,都容易发生多精入卵,体外受精则更甚。在精子穿过卵丘细胞之间时,一方面开始进行顶体反应,另一方面,未发生顶体反应或衰亡的精子又可以被卵匠细胞吞噬。本工作进一步支持并发展了质膜不参与顶体外膜囊泡化的假说。 展开更多
关键词 精子 体外获能 顶体反应 超微结构
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咖啡因和肝素、钙离子载体对家畜冷冻精子体外获能的协同作用 被引量:5
2
作者 张嘉保 董伟 《兽医大学学报》 CSCD 1991年第1期72-75,共4页
本文报道了用咖啡因与肝素、钙离子载体(I-A)协同处理诱导马、驴、猪冷冻精子体外获能的研究结果.咖啡因与肝素、I-A均有协同作用.在肝素或I-A处理中添加咖啡因,不仅能提高穿透率,而且能促进卵内雄原核的形成和发育.精子先经洗涤,再用... 本文报道了用咖啡因与肝素、钙离子载体(I-A)协同处理诱导马、驴、猪冷冻精子体外获能的研究结果.咖啡因与肝素、I-A均有协同作用.在肝素或I-A处理中添加咖啡因,不仅能提高穿透率,而且能促进卵内雄原核的形成和发育.精子先经洗涤,再用咖啡因与肝素或I-A协同处理,可得到良好的获能效果. 展开更多
关键词 家畜 冷冻精子 体外获能 咖啡因
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奶山羊精子体外获能与体外受精
3
作者 钱菊汾 郝志明 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 1992年第S1期115-117,共3页
供体用FSH+LH超排,卵母细胞从注LH后约30h回收。将获能精子与10枚卵母细胞在受精液(mDM+输卵管上皮细胞)和培养液(mDM+30%供体羊血清)中连续培养(38℃)24h后,有6枚卵受精,抛出第二极体。将6枚受精卵移植到3只受体中,有1只妊娠,产出1只... 供体用FSH+LH超排,卵母细胞从注LH后约30h回收。将获能精子与10枚卵母细胞在受精液(mDM+输卵管上皮细胞)和培养液(mDM+30%供体羊血清)中连续培养(38℃)24h后,有6枚卵受精,抛出第二极体。将6枚受精卵移植到3只受体中,有1只妊娠,产出1只试管母山羊。初步表明,本试验的奶山羊精子体外获能与体外受精程序是简便而有效的。 展开更多
关键词 卵子 体外受精 精子 体外获能 体外受精羔羊 山羊
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不同抗氧化剂对牛精子体外获能效果的影响 被引量:3
4
作者 任红贺 李晓霞 +5 位作者 曹平华 禹学礼 张志阳 夏天 王方 刘长豹 《家畜生态学报》 北大核心 2019年第11期54-58,共5页
为探讨褪黑素、亚牛磺酸、左旋肉毒碱三种抗氧化剂对牛精子体外获能效果的影响,将荷斯坦牛细管冻精解冻后,各取200μL精液分别添加在含10-4 M褪黑素(MLT)、20μM亚牛磺酸(HT)、10 mM左旋肉毒碱(LC)的获能液中,经上游处理45 min,采用目... 为探讨褪黑素、亚牛磺酸、左旋肉毒碱三种抗氧化剂对牛精子体外获能效果的影响,将荷斯坦牛细管冻精解冻后,各取200μL精液分别添加在含10-4 M褪黑素(MLT)、20μM亚牛磺酸(HT)、10 mM左旋肉毒碱(LC)的获能液中,经上游处理45 min,采用目测法、金霉素(CTC)染色法评估三种抗氧化剂对牛精子活力、精子获能状态的影响。结果表明:添加10-4 M MLT、20μM HT、10 mM LC经上游法获能处理后的牛精子活力(83.67%、80.65%、75.00%vs 66.67%)均显著高于对照组(P<0.05),而顶体反应率(9.87%、10.09%、14.30%vs 18.73%)均显著低于对照组(P<0.05)。另外,添加10 mM LC、10-4 M MLT组获能处理后B型精子所占比率(37.26%、29.84%vs 16.26%)均显著高于对照组(P<0.05),且10 mM LC组精子获能率最高;而20μM HT组与对照组无明显差异(22.80%vs 16.26%,P>0.05)。因此,添加10 mM LC、10-4 M MLT可改善精子体外获能效果,有助于提高体外受精的受精率及早期胚胎的质量。 展开更多
关键词 褪黑素 左旋肉毒碱 亚牛磺酸 精子 体外获能
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肝素浓度对辽宁绒山羊精子体外获能的影响 被引量:2
5
作者 豆兴堂 宋先忱 +1 位作者 张兴会 郭丹 《中国草食动物》 2011年第1期21-23,共3页
在TALP液中添加不同浓度(25、50、100μg/mL)的肝素对辽宁绒山羊精子进行获能处理,在显微镜下检测处理1、2、3、4、5h后的精子活力,用考马斯亮蓝染色法检测获能处理0.5、1、2、4h后的精子获能状况,探讨肝素浓度对绒山羊精子活力、存活... 在TALP液中添加不同浓度(25、50、100μg/mL)的肝素对辽宁绒山羊精子进行获能处理,在显微镜下检测处理1、2、3、4、5h后的精子活力,用考马斯亮蓝染色法检测获能处理0.5、1、2、4h后的精子获能状况,探讨肝素浓度对绒山羊精子活力、存活时间、获能率的影响。结果发现,在38.5℃、5%CO2、饱和湿度条件下,精子活力随肝素浓度升高而下降,3 h以后25μg/mL肝素组精子活力显著高于其它肝素组(P<0.05)。添加肝素组获能率显著高于对照组(P<0.05),各肝素组精子获能率差异不显著(P>0.05)。对照组精子存活时间最长,25μg/mL肝素组精子存活时间为10.12 h,显著高于其它两组(P<0.05)。表明25μg/mL肝素处理辽宁绒山羊精子体外获能较为适宜。 展开更多
关键词 肝素 辽宁绒山羊 精子 体外获能
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用CTC荧光染色法检测添加肝素对牛精子体外获能的影响 被引量:2
6
作者 唐军旺 张明 郑海英 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第6期90-96,共7页
本试验在TALP液中添加不同浓度(0、20、40、80μg.ml-1)的肝素对牛精子进行获能,用CTC染色检测精子获能状况,探讨肝素浓度及诱导时间(1、3、6、9h)对牛精子体外获能的影响。结果显示:随着肝素浓度的提高,精子获能效果增强,3 h达到最高,... 本试验在TALP液中添加不同浓度(0、20、40、80μg.ml-1)的肝素对牛精子进行获能,用CTC染色检测精子获能状况,探讨肝素浓度及诱导时间(1、3、6、9h)对牛精子体外获能的影响。结果显示:随着肝素浓度的提高,精子获能效果增强,3 h达到最高,但添加80μg.ml-1的肝素精子的顶体反应率低于其他组。结果表明:在TALP液中增加高浓度的肝素对精子体外获能有促进作用,用高浓度的肝素获能处理3h后的精子进行体外受精可能会得到较好的效果。 展开更多
关键词 精子 体外获能 CTC 肝素
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奶山羊精子体外获能异体受精试验
7
作者 段恩奎 王光亚 +1 位作者 马保华 王建辰 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 1990年第2期102-104,共3页
关于哺乳动物体外受精的研究,已经历了120多年,直到80年代才获得了第一例“试管家畜”。近年来,尽管“试管婴儿”平均每天有4例问世,但到1990年4月10日为止,全世界获得的“试管家畜”仅有130例,其中“试管牛”54头,“试管猪”52只,“试... 关于哺乳动物体外受精的研究,已经历了120多年,直到80年代才获得了第一例“试管家畜”。近年来,尽管“试管婴儿”平均每天有4例问世,但到1990年4月10日为止,全世界获得的“试管家畜”仅有130例,其中“试管牛”54头,“试管猪”52只,“试管绵羊”23只,“试管山羊”只有1只。 为了克服山羊体外受精的难点,Rao等将山羊输卵管卵母细胞输入事先经子宫输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,培养24~36h,有37.0%完成了异体受精。将这些受精卵移植给9只受体羊后,有1只正常分娩,获得了首例异体受精山羊羔。我们将超排羊输卵管卵母细胞移入事先经阴道输入新鲜羊精的假孕兔输卵管,获得了44.8%的异体受精率。但迄今尚未证实,山羊体外获能的精子与超排卵母细胞在假孕兔输卵管内能否完成受精过程和产出正常后代。本试验旨在研究山羊体外获能的精子与超排的输卵管卵异体受精及受精卵移植后产羔的可能性。 展开更多
关键词 乳羊/异体受精 精子体外获能 兔产羔
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精子获能过程中Zn2+与Mg2+的作用及蛋白质谱变化
8
作者 李光鹏 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2019年第4期404-413,共10页
获能是受精的前提条件,只有获能精子才具有超激活运动、发生顶体反应与受精能力.获能期间,精子发生了极为复杂的生理生化反应:质膜通透性与流动性变化、膜内外离子动态变化、蛋白酪氨酸磷酸化与多级信号传导等.尽管发现精子获能现象已... 获能是受精的前提条件,只有获能精子才具有超激活运动、发生顶体反应与受精能力.获能期间,精子发生了极为复杂的生理生化反应:质膜通透性与流动性变化、膜内外离子动态变化、蛋白酪氨酸磷酸化与多级信号传导等.尽管发现精子获能现象已近70年,但对其机制的了解远未完成.本文重点介绍Zn^2+与Mg^2+在精子获能中的作用及精子获能前后的蛋白质谱变化. 展开更多
关键词 超激活 受精 蛋白质组学 体外获能
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猕猴精子优选及体外获能的研究
9
作者 陈永昌 陈学进 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期73-76,共4页
选择活率高的精子并进行体外获能是开展猕猴体外受精研究的必要程序 ,是研究猕猴受精生物学的重要手段。本实验采用上浮法和Percoll梯度离心法对猕猴精液进行了优选 ,并对处理后的精子形态正常率、精子活率、密度及受精率作了比较 ,发... 选择活率高的精子并进行体外获能是开展猕猴体外受精研究的必要程序 ,是研究猕猴受精生物学的重要手段。本实验采用上浮法和Percoll梯度离心法对猕猴精液进行了优选 ,并对处理后的精子形态正常率、精子活率、密度及受精率作了比较 ,发现二者差异不显著 ;用dbcAMP和咖啡因使精子获能 ,发现只有两种获能剂同时存在才能使猕猴精子获能并使卵母细胞受精。结论为 :上浮法和Percoll法都是有效的精子优选法 ,对受精率的影响差异不显著 ; 展开更多
关键词 猕猴 精子获能 咖啡因 猴体 Percoll梯度离心法 正常 受精率 精子体外获能 精子活率 卵母细胞
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不同培养液对蓝狐精子体外获能效果的比较试验
10
作者 白玉妍 郭婷婷 +1 位作者 于翠平 刘志平 《经济动物学报》 CAS 2010年第2期71-74,79,共5页
采用上游法分离优化精子,用mTyrod’s液(T)、BO液(B)以及高渗液(HIS)3种不同培养液,在5%CO2的培养箱中进行获能培养,获能培养时间为6h。利用考马斯亮蓝染色法检测精子顶体反应率,伊红-苯胺黑染色法检测活精子比率以及观测法检测精子活... 采用上游法分离优化精子,用mTyrod’s液(T)、BO液(B)以及高渗液(HIS)3种不同培养液,在5%CO2的培养箱中进行获能培养,获能培养时间为6h。利用考马斯亮蓝染色法检测精子顶体反应率,伊红-苯胺黑染色法检测活精子比率以及观测法检测精子活力。在培养的0、1、2、4、6h时分别检测上述指标并统计分析,从而筛选出适合蓝狐精子体外获能的培养液。结果显示:B培养液优于T、HIS培养液,最佳获能培养时间t≥6h;HIS可以提高精子顶体反应率,但较高的渗透压不利于精子保存,不建议使用。 展开更多
关键词 培养液 蓝狐 精子 体外获能
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钾离子外流在小鼠精子获能中作用
11
作者 龚伟 程洁 +2 位作者 张习春 王昌松 肖杭 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期455-456,共2页
目的观察钾离子外流在小鼠精子体外获能的作用及机制。方法以金霉素(chlortetracycline,CTC)荧光染色后涂片观察小鼠精子体外获能率,进一步应用膜片钳技术在小鼠生精细胞膜上记录延迟整流钾离子电流(IDRK)。结果终浓度为50 nmol/L的钾... 目的观察钾离子外流在小鼠精子体外获能的作用及机制。方法以金霉素(chlortetracycline,CTC)荧光染色后涂片观察小鼠精子体外获能率,进一步应用膜片钳技术在小鼠生精细胞膜上记录延迟整流钾离子电流(IDRK)。结果终浓度为50 nmol/L的钾离子通道载体缬氨霉素处理小鼠精子,其B型精子发生率(%)与对照组相比显著增加(n=10,P<0.05);50 nmol/L缬氨霉素显著增大小鼠粗线期精母细胞延迟整流钾离子电流,上调其I-V曲线。结论缬氨霉素通过激活延迟整流钾通道,增加胞内钾离子的外流,促发小鼠精子体外获能。 展开更多
关键词 精子细胞 体外获能 延迟整流钾通道 缬氨霉素
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不同方法诱导西门塔尔公牛精子体外获能的研究
12
作者 武晓英 《太原师范学院学报(自然科学版)》 2003年第2期83-86,共4页
实验对西门塔尔牛精子体外获能培养基及方法的选择进行研究 .结果表明 :以 m B-ww为培养基 ,添加咖啡因 2 mmol/L,亚牛磺酸 70 μmol/L经 5 0 μg/ml肝素和 1 g/L透明质酸酶处理牛精子 。
关键词 诱导 西门塔尔公牛 精子体外获能 肝素 咖啡因 亚牛磺酸 透明质酸酶 受精能力
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肝素和羊血清对绵羊附睾精子体外获能的影响 被引量:12
13
作者 李英 侯健 +2 位作者 郑云胜 顾文艺 郭志勤 《内蒙古农牧学院学报》 1998年第4期20-24,共5页
通过体外受精试验检验了肝素和羊血清在绵羊附睾精子体外获能中的作用。结果表明,在获能液SOFM+0.6%牛血清白蛋白(BSA)中加入5、15、25、50IU/ml肝素不能有效诱导精子获能,所得卵裂率(16.1%,11.... 通过体外受精试验检验了肝素和羊血清在绵羊附睾精子体外获能中的作用。结果表明,在获能液SOFM+0.6%牛血清白蛋白(BSA)中加入5、15、25、50IU/ml肝素不能有效诱导精子获能,所得卵裂率(16.1%,11.2%,14.5%,15.8%)与不加肝素的对照组(10.0%)相比,差异不显著;获能液SOFM+20%羊血清(SS)对精子获能效果优于SOFM+0.6%BSA+肝素,二者卵裂率差异显著(50%VS14.7%P<0.05);获能液SOFM+20%SS中再加入5、15、25IU/ml肝素可明显增强获能效果,所得卵裂率(81.4%,80.4%,81.3%)与不加肝素的对照组(46%)相比,差异显著(P<0.05)。 展开更多
关键词 绵羊 附睾精子 体外获能 肝素 羊血清
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家兔精子体外获能与体外受精试验 被引量:6
14
作者 徐君 钱菊汾 +1 位作者 张涌 王建辰 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 1990年第1期19-24,共6页
本试验目的在于建立一种简便而有效的系统,能使家兔射出的精子完成体外获能,并获得体外受精、早期卵裂和正常产仔。精子体外获能采用三种方法:A.HIS(15min)+DM(1~2h);B.HIS(15min)+DM(11~12h);C.m-HIS(15min)+m-DM(2~4h)。经上述方... 本试验目的在于建立一种简便而有效的系统,能使家兔射出的精子完成体外获能,并获得体外受精、早期卵裂和正常产仔。精子体外获能采用三种方法:A.HIS(15min)+DM(1~2h);B.HIS(15min)+DM(11~12h);C.m-HIS(15min)+m-DM(2~4h)。经上述方法处理的精子与512枚输卵管卵母细胞进行体外受精和体外培养的结果表明,A组的受精和早期卵裂发育延迟;B组的受精卵大都停留在原核期;C组的受精和早期卵裂发育正常。将C组60枚2-4细胞移植至9只受体兔,5只妊娠,其中2只产4只试管仔兔,另外3只获得12个胎儿。 展开更多
关键词 卵体外受精/精子体外获能 试管动物 试管兔
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牛卵母细胞体外受精和体外成熟技术 被引量:1
15
作者 桑国俊 《中国牛业科学》 2007年第1期30-34,共5页
文章从卵母细胞的来源、精子体外获能、卵母细胞体外成熟、体外受精和体外受精早期胚胎培养五个方面综述了牛卵母细胞体外受精和体外成熟技术的研究进展。同时指出了影响精子体外获能的因素、影响卵母细胞成熟培养的因素、体外受精存在... 文章从卵母细胞的来源、精子体外获能、卵母细胞体外成熟、体外受精和体外受精早期胚胎培养五个方面综述了牛卵母细胞体外受精和体外成熟技术的研究进展。同时指出了影响精子体外获能的因素、影响卵母细胞成熟培养的因素、体外受精存在的问题及解决办法等。并且对影响该技术的主要因素进行了系统分析。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外获能 体外受精 体外成熟
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特定电磁波照射对家兔体外受精的影响
16
作者 黄依明 安民 《福建农业大学学报》 CSCD 1994年第2期213-215,共3页
家兔精液用特定电磁波(TDP)照射3min,精子体外获能采用m—HIS(15min)+m-DM(2-4h).家兔卵母细胞经TDP照射5min并体外培养10-12h.家兔的卵泡卵母细胞经体外受精和体外培养的结果表明,经... 家兔精液用特定电磁波(TDP)照射3min,精子体外获能采用m—HIS(15min)+m-DM(2-4h).家兔卵母细胞经TDP照射5min并体外培养10-12h.家兔的卵泡卵母细胞经体外受精和体外培养的结果表明,经TDP照射的精液与未经TDP照射的卵母细胞的体外受精,原核形成率达64.7%,对照织为44.4%,两者差异显著(P<0.05),2-细胞以上的受精卵发育率分别为56.8%和50%(P>0.05),经TDP照射的卵母细胞与未经TDP照射的精液的体外受精,原核形成率达63.7%,对照组为46.7%,两者差异显著(P<0.05),2-细胞以上的受精卵发育率分别为58.9%和47.2%(P>0.05)、用TDP照射精液或卵母细胞能显著提高其体外受精率. 展开更多
关键词 特定电磁波 体外受精 家兔
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家兔精子体外获能与受精研究 被引量:1
17
作者 赵庆顺 范必勤 《江苏农业学报》 CSCD 1992年第2期25-30,共6页
建立了有效的家兔精子体外获能和体外受精技术.体外受精卵的卵裂率为67.8%.体外受精胚胎经4℃保存3天后,体外培养可发育至扩张囊胚.92枚体外受精胚胎移植至8只受体,其中6只妊娠.4只受体产下4只正常幼子.
关键词 精子 体外获能 体外受精
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不同获能液对猪精子获能效果的初步观察
18
作者 赵曌 徐捷 +2 位作者 赵菊 张志刚 高建明 《北京农学院学报》 2009年第1期33-35,共3页
为了探讨不同获能液对猪精子获能效果的影响,以新鲜猪精液为材料,进行mTBM+咖啡因、mTBM+咖啡因+BSA,mTBM+肝素三种获能液获能效果的比较。利用金霉素荧光染色法对其获能效果进行检验。结果表明,mTBM+肝素组诱发B型(获能)精子率极显著高... 为了探讨不同获能液对猪精子获能效果的影响,以新鲜猪精液为材料,进行mTBM+咖啡因、mTBM+咖啡因+BSA,mTBM+肝素三种获能液获能效果的比较。利用金霉素荧光染色法对其获能效果进行检验。结果表明,mTBM+肝素组诱发B型(获能)精子率极显著高于mTBM+咖啡因组(P<0.01),显著高于mTBM+咖啡因+BSA组(P<0.05);三种获能液诱发的AR型(顶体反应)精子率差异不显著(P>0.05)。说明,添加肝素更有助于提高猪精子获能效果。 展开更多
关键词 精子获能 金霉素荧光染色
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诱导牛精子体外获能的培养基及方法 被引量:11
19
作者 黄建民 黄天华 +4 位作者 张维政 蔡敏 潘顺波 庞也非 秦达念 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期197-199,共3页
用去透明带金黄地鼠异种精子体外穿透试验,检测冻精复苏经各种处理后的精子穿卵率。发现在4种基本培养基(BO、mBWW、TYH、HamF10+RPMI-1640)中不加亚牛磺酸时,牛精子不能耐受较高浓度(4μmol/L)... 用去透明带金黄地鼠异种精子体外穿透试验,检测冻精复苏经各种处理后的精子穿卵率。发现在4种基本培养基(BO、mBWW、TYH、HamF10+RPMI-1640)中不加亚牛磺酸时,牛精子不能耐受较高浓度(4μmol/L)钙离子载体(IA)的刺激(以10min计);而低浓度IA(低于4μmol/L)处理精子不能诱导获能。生物活性物质,如肝素、咖啡因、亚牛磺酸、肾上腺素单独或联合低浓度IA处理精子,短期(6h)内也不能诱导获能。当基本培养基中含有亚牛磺酸时,牛精子能耐受高浓度IA(10μmol/L)的刺激,并使牛精子获能;亚牛磺酸与肾上腺素、咖啡因联合使用,并在获能液中添加透明质酸酶时,穿卵率进一步提高,获能效果显著改善。以HamF10+RPMI1640为主的混合培养基,在牛精子的存活时间、穿卵率等方面优于BO、mBWW、TYH培养基。结果表明,用F10和1640的混合培养基,添加亚牛磺酸、肾上腺素、咖啡因、透明质酸酶,经10μmol/LIA处理牛精子10~15min。 展开更多
关键词 精子 体外获能 穿卵试验 钙离子载体
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