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夹心免疫PCR方法检测蓖麻毒素 被引量：13
1
作者 宋云扬 刘 娟 +4 位作者 应天翼 郝兰群 张 靖 李艳军 王惠芳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期229-231,共3页
目的 建立了双抗夹心免疫PCR的检测技术,检测极微量的抗原。方法 以亲和素作为连接分子连接生物素化抗体和生物素化DNA,应用于免疫PCR中,检测极微量的抗原。结果 建立了双抗夹心兔疫PCR的检测技术,检测蓖麻毒素的灵敏度达0.1pg/mL,与夹... 目的 建立了双抗夹心免疫PCR的检测技术,检测极微量的抗原。方法 以亲和素作为连接分子连接生物素化抗体和生物素化DNA,应用于免疫PCR中,检测极微量的抗原。结果 建立了双抗夹心兔疫PCR的检测技术,检测蓖麻毒素的灵敏度达0.1pg/mL,与夹心ELISA方法比较灵敏度高103。结论 建立的免疫PCR系统灵敏度高,可用于各种微量抗原的检测。 展开更多
关键词 蓖麻毒素 免疫pcr 戊二醛 生物素 亲和素 中药
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西瓜细菌性果斑病菌快速免疫PCR检测 被引量：13
2
作者 宋蕤 刘箐 +5 位作者 刘雅莉 文朝慧 王军平 张丽萍 侯建雄 刘志杰 《植物检疫》 北大核心 2009年第2期4-6,共3页
对种子携带的西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenaesubsp.citrulli)进行简单抽提和纯化,不经过DNA提取而以病原菌为模板进行PCR检测。结果显示,对带菌种子提取液采用直接PCR法最低检出限为3600个细菌/mL,而免疫PCR最低检出限可达到600... 对种子携带的西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenaesubsp.citrulli)进行简单抽提和纯化,不经过DNA提取而以病原菌为模板进行PCR检测。结果显示,对带菌种子提取液采用直接PCR法最低检出限为3600个细菌/mL,而免疫PCR最低检出限可达到600个细菌/mL。免疫PCR法可以有效富集病原后再扩增,方便快速,成本低,灵敏度高,适用于种子携带微量的西瓜细菌性果斑病菌的快速鉴定。 展开更多
关键词 西瓜细菌性果斑病 免疫pcr 快速检测
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应用免疫-PCR检测弓形虫循环抗原的实验研究 被引量：7
3
作者 郑兰艳 王海鹏 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期78-80,共3页
目的　控索弓形虫感染早期诊断方法。方法　用链亲素将生物素化的二抗和生物素化的 DNA偶联起来 ,通过PCR扩增标记 DNA检测固定的抗原 ,建立了弓形虫循环抗原免疫— PCR检测技术 ,用该技术和 EL ISA法平行检测系列稀释的弓形虫的感染鼠... 目的　控索弓形虫感染早期诊断方法。方法　用链亲素将生物素化的二抗和生物素化的 DNA偶联起来 ,通过PCR扩增标记 DNA检测固定的抗原 ,建立了弓形虫循环抗原免疫— PCR检测技术 ,用该技术和 EL ISA法平行检测系列稀释的弓形虫的感染鼠阳性血清中的 CAg以及实验感染鼠血清中 CAg的动态变化 ,对比研究二者之间的敏感性。结果　免疫—PCR法检测弓形虫 CAg吴阳性的血清最高稀释度为 1∶ 10 0 0 ,EL ISA法检测弓形虫 CAg呈阳性的血清最高稀释度为 1∶ 5 ,免疫— PCR最早在鼠感染弓形虫后第 3天测到 CAg,EL ISA最早在鼠感染弓形虫后第 5天测到 CAg。结论　免疫— PCR是一种特异性强、敏感性高的弓形虫 CAg检测方法 ,敏感性较 EL ISA法提高了 2 0 0倍 ,免疫— PCR检出阳性结果时间早 。 展开更多
关键词 免疫pcr 弓形虫病 循环抗原
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夹心免疫PCR方法检测金葡菌肠毒素B 被引量：6
4
作者 宋云扬 吴方晖 +3 位作者 张靖 李蕊 王惠芳 李艳军 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期832-833,共2页
目的　建立双抗夹心免疫PCR的检测技术 ,用于检测极微量的抗原。方法　以亲和素作为连接分子 ,连接生物素化抗体和生物素化DNA ,应用于免疫PCR中检测极微量金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)。结果　双抗夹心免疫PCR的检测技术 ,检测SEB的灵... 目的　建立双抗夹心免疫PCR的检测技术 ,用于检测极微量的抗原。方法　以亲和素作为连接分子 ,连接生物素化抗体和生物素化DNA ,应用于免疫PCR中检测极微量金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)。结果　双抗夹心免疫PCR的检测技术 ,检测SEB的灵敏度达 0 1ng/L ,与夹心ELISA方法比较灵敏度高 10 3 倍。结论　双抗夹心免疫PCR系统灵敏度高 ,可用于各种微量抗原的检测。 展开更多
关键词 金葡菌肠毒素B 免疫pcr 戊二醛 生物素 亲和素
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免疫PCR检测技术及其在食品安全领域中的应用 被引量：7
5
作者 黄明 肖笑 +3 位作者 徐晟 周兴虎 周光宏 沈文飚 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期119-124,共6页
免疫PCR技术是一种在免疫学和PCR技术基础上建立起来的新型检测技术,这种技术同时具有ELISA的高特异性和PCR的高灵敏性。本文介绍了免疫PCR的技术原理和反应体系,比较其不同种类和应用范围,指出免疫PCR存在的问题并提出相应的对策;归纳... 免疫PCR技术是一种在免疫学和PCR技术基础上建立起来的新型检测技术,这种技术同时具有ELISA的高特异性和PCR的高灵敏性。本文介绍了免疫PCR的技术原理和反应体系,比较其不同种类和应用范围,指出免疫PCR存在的问题并提出相应的对策;归纳了目前免疫PCR在食品安全等领域中的应用;并结合免疫PCR技术的优势提出其在食品安全检测中的应用前景。 展开更多
关键词 免疫pcr 方法学 食品安全
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金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24 被引量：4
6
作者 郑姬 蒋天伦 府伟灵 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期301-304,355,共5页
目的建立以金磁微粒为载体的免疫PCR HIV-1 p24检测体系。方法以金磁微粒作为免疫PCR的载体并通过载体的特异性和非特异性反应验证其可行性;以小鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体包被金磁微粒,生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测... 目的建立以金磁微粒为载体的免疫PCR HIV-1 p24检测体系。方法以金磁微粒作为免疫PCR的载体并通过载体的特异性和非特异性反应验证其可行性;以小鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体包被金磁微粒,生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测抗体;报告DNA用生物素标记的引物通过PCR扩增预先制备,并通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被两抗体夹心捕获的人重组HIV-1 p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测;并对检测的灵敏度和线性检测范围进行分析。结果金磁微粒上偶联抗体的效率可〉95%,偶联抗体的一致性较好,几乎不产生非特异性吸附,分离与洗涤步骤更简便更彻底;免疫PCR检测p24的灵敏度为0.1ng/L,比ELISA法检测的灵敏度高1.5×10^4倍,线性检测范围为p24浓度在0.1～100ng/L。结论金磁微粒是较理想的免疫PCR反应载体,金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24是一种可兹应用的高灵敏度的检测方法。 展开更多
关键词 免疫pcr 金磁微粒 HIV-1 P24
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免疫-PCR法检测梅毒螺旋体特异性抗体 被引量：6
7
作者 史俊岩 刘兵 +1 位作者 牟玲 罗恩杰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期23-25,共3页
以梅毒螺旋体重组蛋白为抗原,应用免疫-PCR方法检测梅毒螺旋体抗体,并同常规ELISA法进行比较,探讨免疫-PCR方法检测梅毒螺旋体特异性抗体的可行性。结果免疫-PCR法敏感性是常规ELISA法的104倍,阳性检出率高于ELISA法;对照血清标本梅毒... 以梅毒螺旋体重组蛋白为抗原,应用免疫-PCR方法检测梅毒螺旋体抗体,并同常规ELISA法进行比较,探讨免疫-PCR方法检测梅毒螺旋体特异性抗体的可行性。结果免疫-PCR法敏感性是常规ELISA法的104倍,阳性检出率高于ELISA法;对照血清标本梅毒螺旋体抗体检测为阴性。表明免疫-PCR方法具有较高敏感性和特异性,有一定的临床推广价值,对梅毒患者的早期诊断及时治疗等具有重要意义。 展开更多
关键词 免疫-pcr 梅毒螺旋体特异性抗体 ELISA
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基于噬菌体展示纳米抗体的绿色免疫PCR检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇 被引量：5
8
作者 江东健 罗秀儿 何庆华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第8期256-261,共6页
目的:在获得脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)抗独特型纳米抗体的前期基础上,将纳米抗体作为酶标抗原的替代物,应用于荧光定量免疫聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系,实现DON的高灵敏、绿色免疫分析。方法:将... 目的:在获得脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)抗独特型纳米抗体的前期基础上,将纳米抗体作为酶标抗原的替代物,应用于荧光定量免疫聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系,实现DON的高灵敏、绿色免疫分析。方法:将特异性结合DON抗体的噬菌体展示纳米抗体(P-28)作为竞争抗原,以编码P-28纳米抗体的DNA为靶标,设计特异性PCR扩增引物,优化荧光定量免疫PCR退火温度、抗DON抗体浓度、P-28投入量等参数,建立基于间接竞争模式的荧光定量免疫PCR检测DON的方法。结果:本研究建立的荧光定量免疫PCR方法线性检测范围为0.1～1 000 ng/mL,IC50值为(3.96±2.21)ng/mL,最低检出限为0.048 ng/mL,并与其他真菌毒素无交叉反应。结论:该方法直接使用噬菌体展示纳米抗体作为竞争抗原的替代物,应用于免疫PCR体系,避免了使用传统的化学合成酶标抗原所带来的环境污染、操作毒性等缺陷,并具有良好的特异性及灵敏度。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 抗独特性抗体 噬菌体展示纳米抗体 酶联免疫吸附测定 免疫pcr
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免疫PCR检测乳腺癌患者血清p185蛋白抗体 被引量：5
9
作者 江晓晖 施民新 刘继斌 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第4期111-113,共3页
目的为乳腺癌诊断提供血清学新标志。方法免疫PCR方法检测血清抗p185蛋白抗体，酶免疫组化方法检测组织p185蛋白表达。结果乳腺癌患者血清抗p185蛋白抗体阳性率为30％，而非癌患者和正常人血清抗p185蛋白抗体均为阴性，乳腺癌患者血清中... 目的为乳腺癌诊断提供血清学新标志。方法免疫PCR方法检测血清抗p185蛋白抗体，酶免疫组化方法检测组织p185蛋白表达。结果乳腺癌患者血清抗p185蛋白抗体阳性率为30％，而非癌患者和正常人血清抗p185蛋白抗体均为阴性，乳腺癌患者血清中抗p185蛋白抗体显著高于非癌患者和正常人（P〈O．01）。p185蛋白阳性表达的乳腺癌患者抗p185蛋白抗体阳性率为69．2％，明显高于p185蛋白阴性表达组，血清p185抗体测定与p185蛋白表达密切相关（P〈0．01）。结论检测血清抗p185蛋白抗体是检测组织p185蛋白理想的替代工具。抗p53蛋白抗体可以作为乳腺癌血清学诊断新标志，用于乳腺癌的普查和早期诊断。 展开更多
关键词 免疫pcr 乳腺癌 P185 抗体
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夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原的研究(英文) 被引量：2
10
作者 李辉 许汴利 +2 位作者 赵旭东 邓艳 蔺西萌 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第9期769-775,共7页
目的建立以多抗为捕获抗体和单抗为检测抗体的夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原。方法利用杂交瘤技术制备抗旋毛虫单抗;旋毛虫抗原免疫家兔,分离纯化兔血清,制备兔抗旋毛虫多抗。多抗作为捕获抗体包被酶标板,单抗为检测抗体,选择适宜多... 目的建立以多抗为捕获抗体和单抗为检测抗体的夹心免疫-PCR检测旋毛虫循环抗原。方法利用杂交瘤技术制备抗旋毛虫单抗;旋毛虫抗原免疫家兔,分离纯化兔血清,制备兔抗旋毛虫多抗。多抗作为捕获抗体包被酶标板,单抗为检测抗体,选择适宜多抗和单抗浓度,建立夹心ELISA方法,再利用亲和素和生物素的高结合力连接起标记了生物素的抗体和DNA片段,将抗原抗体特异反应的免疫技术同无限扩增DNA片段的基因检测技术结合,利用PCR反应对DNA片段的扩增能力,提高检测灵敏度。结果制备了兔抗旋毛虫多抗,间接ELISA法筛选出与多种寄生虫抗原无交叉反应的单抗F4C6,夹心ELISA检测旋毛虫抗原最低浓度为0.05μg/ml,免疫PCR方法检测最低浓度为0.1ng/ml。结论首次建立夹心免疫-PCR检测旋毛虫抗原的方法,检测旋毛虫抗原的灵敏度高于传统ELISA方法104倍。 展开更多
关键词 旋毛虫病 循环抗原 ELISA immuno-pcr
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以金磁微球为载体的H5N1 AIV免疫PCR检测方法的建立 被引量：3
11
作者 邓明俊 肖西志 +4 位作者 朱来华 辛学谦 郑小龙 王群 张彦明 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第12期13-19,共7页
【目的】将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立快速检测低浓度H5N1禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)的免疫PCR方法。【方法】以pUC19为模板,采用5′端标记有生物素的引物进行PCR扩增,制备含有生物素的报告... 【目的】将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立快速检测低浓度H5N1禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)的免疫PCR方法。【方法】以pUC19为模板,采用5′端标记有生物素的引物进行PCR扩增,制备含有生物素的报告DNA分子。以金磁微球为固相吸附载体,通过亲和素-生物素的桥联作用,将含有生物素的报告DNA分子与生物素标记的抗AIVH5N1血凝素蛋白的检测抗体分子连接,H5N1AIV与检测抗体结合后,体外扩增报告DNA,间接放大低含量病毒信号,建立可有效检测微量H5N1AIV的免疫PCR方法。对建立的免疫PCR方法的最适报告DNA浓度、最适链亲和素工作浓度、灵敏度和特异性进行确定和评价。【结果】建立的免疫PCR方法最适报告DNA质量浓度为1ng/mL,最适链亲和素工作质量浓度为20ng/mL,该方法可成功检测到10-4EID50/mL的H5N1AIV,而且特异性良好。【结论】建立的以金磁微球为吸附载体的免疫PCR是一种灵敏度高、特异性好的检测微量H5N1AIV的方法。 展开更多
关键词 免疫pcr H5N1禽流感病毒 金磁微球
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双抗体夹心免疫-PCR检测弓形虫循环抗原的实验研究 被引量：3
12
作者 华海涌 周永华 薛忠权 《中国现代医药杂志》 2005年第6期1-2,共2页
目的探索弓形虫病的病原学检测方法。方法用游离的亲合素将生物素化的二抗和生物素化的腺病毒六邻体基因重组质粒DNA偶联起来,通过PCR扩增标记的DNA检测弓形虫循环抗原,建立了免疫-PCR检测方法;用该方法和ELISA法平行检测感染鼠的血清,... 目的探索弓形虫病的病原学检测方法。方法用游离的亲合素将生物素化的二抗和生物素化的腺病毒六邻体基因重组质粒DNA偶联起来,通过PCR扩增标记的DNA检测弓形虫循环抗原,建立了免疫-PCR检测方法;用该方法和ELISA法平行检测感染鼠的血清,对比研究两者敏感性及循环抗原的检出时间。结果免疫-PCR法检测弓形虫循环抗原阳性血清的最大稀释度为1∶2560,ELISA法为1∶10;免疫-PCR法在感染后第2天检测到循环抗原,ELISA法在第4天检测到循环抗原。结论免疫-PCR是一种特异性高、敏感性强的弓形虫循环抗原的检测方法,可作为弓形虫病病原学的诊断方法。 展开更多
关键词 免疫-pcr 弓形虫 循环抗原
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乳腺癌P^(53)蛋白表达及其血清抗体检测分析 被引量：2
13
作者 范火亮 《中国热带医学》 CAS 2006年第5期768-769,共2页
目的探讨乳腺癌患者P53蛋白及抗体表达情况。方法采用免疫PCR方法检测血清抗P53蛋白抗体,酶免疫组化方法检测组织P53蛋白表达。结果乳腺癌患者血清抗P53蛋白抗体阳性率为39.5%,而非癌患者和正常人血清抗P53蛋白抗体均为阴性(P<0.01)... 目的探讨乳腺癌患者P53蛋白及抗体表达情况。方法采用免疫PCR方法检测血清抗P53蛋白抗体,酶免疫组化方法检测组织P53蛋白表达。结果乳腺癌患者血清抗P53蛋白抗体阳性率为39.5%,而非癌患者和正常人血清抗P53蛋白抗体均为阴性(P<0.01)。P53蛋白阳性表达的乳腺癌患者抗P53蛋白抗体阳性率为64.2%,明显高于P53蛋白阴性表达组,血清P53抗体测定与P53蛋白表达密切相关(P<0.01)。结论检测血清抗P53蛋白抗体是检测组织P53蛋白理想的替代工具,可作为乳腺癌血清学诊断新标志,用于乳腺癌的普查和早期诊断。 展开更多
关键词 乳腺癌 P^53蛋白 抗P^53蛋白抗体 免疫pcr
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免疫PCR的方法学研究进展及临床应用
14
作者 曾常茜 晏舒 胡景新 《北华大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第1期26-28,共3页
详细介绍了免疫PCR方法的原理、方法学类型、实验条件控制及临床应用.
关键词 免疫pcr方法 实验条件 临床应用 方法学类型 技术原理 DNA标记 产物检测
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应用免疫-PCR检测癌症的初步研究 被引量：2
15
作者 张美华 汪晓燕 +2 位作者 吴自荣 祝献民 宋频杰 《生物技术》 CAS CSCD 2000年第5期9-11,共3页
探索一种简便、灵敏度高、特异性强且易推广的血清中突变型p53蛋白检测方法 ,用于肿瘤早期诊断。用突变型p53蛋白的单克隆抗体 ,与特定DNA片段连接制成基因探针 ,用免疫 -PCR技术 ,对 117例病人血清样品进行检测。在 117例病人血清样品... 探索一种简便、灵敏度高、特异性强且易推广的血清中突变型p53蛋白检测方法 ,用于肿瘤早期诊断。用突变型p53蛋白的单克隆抗体 ,与特定DNA片段连接制成基因探针 ,用免疫 -PCR技术 ,对 117例病人血清样品进行检测。在 117例病人血清样品中 ,检测总阳性率为 4 1 88% ( 4 9/ 117) ,在临床怀疑为癌症及肿瘤病人中阳性率达 52 11% ( 37/ 71)。 展开更多
关键词 P53 突变型P53 免疫-pcr 癌症
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免疫PCR法诊断梅毒螺旋体抗原和抗体的方法学研究 被引量：3
16
作者 马秋林 郭义红 《中国医药导报》 CAS 2012年第15期116-118,共3页
目的建立免疫PCR方法检测梅毒螺旋体抗原和梅毒螺旋体抗体两种方法学,并比较两种方法学的敏感性、特异性和重复性。方法选择2011年我院梅毒血清学ELISA法检测者1520例并梅毒分期;建立免疫PCR法检测梅毒螺旋体抗原和梅毒螺旋体抗体两种方... 目的建立免疫PCR方法检测梅毒螺旋体抗原和梅毒螺旋体抗体两种方法学,并比较两种方法学的敏感性、特异性和重复性。方法选择2011年我院梅毒血清学ELISA法检测者1520例并梅毒分期;建立免疫PCR法检测梅毒螺旋体抗原和梅毒螺旋体抗体两种方法,然后对梅毒螺旋体血清学阳性标本10倍系列稀释,比较免疫PCR法敏感性;同时采用正常健康血清标本观察免疫PCR法特异性;最后采集梅毒阳性血液分装成两份标本,监测两种免疫PCR法试验批内和日间重复性。结果 1 520例患者中,梅毒患者136例。梅毒患者中女性占77.2%(105/136),孕妇占19.1%(26/136)。梅毒分期以一期梅毒感染为主,与其他期比较具有统计学意义(P<0.05)。IPCR-Ag法检测梅毒螺旋体抗原敏感性是ELISA法的104倍,TPPA和TRUST法的106。IPCR-Ab法检测梅毒螺旋体抗体敏感性是ELISA法的103倍,TPPA和TRUST法的105。两种免疫PCR法测检查正常健康人群梅毒螺旋体结果均为阴性。IPCR-Ab法试验批内CV为11.61%,日间CV为18.12%;IPCR-Ag法试验批内CV为18.61%,日间CV为22.24%,两者相比具有统计学意义(P<0.05)。结论免疫PCR法检测梅毒螺旋体具有高度的敏感性和特异性,但重复性较差。 展开更多
关键词 免疫pcr法 梅毒螺旋体 TpN47 抗体
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Immuno-PCR法诊断早期梅毒的方法学建立及其应用 被引量：1
17
作者 蒲荣 梁玉冰 +2 位作者 梁浩凡 刘伟 张德纯 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期563-564,569,共3页
目的建立Immuno-PCR法诊断早期梅毒的方法学,评价其灵敏度、特异性、重复性及其临床应用。方法利用基因重组TpN47抗原免疫新西兰兔,制备抗体并用Weston blotting检测;利用抗TpN47抗体作为捕获抗体与血清中TpN47抗原结合,通过链霉亲和素... 目的建立Immuno-PCR法诊断早期梅毒的方法学,评价其灵敏度、特异性、重复性及其临床应用。方法利用基因重组TpN47抗原免疫新西兰兔,制备抗体并用Weston blotting检测;利用抗TpN47抗体作为捕获抗体与血清中TpN47抗原结合,通过链霉亲和素、生物素化抗体、生物素化DNA和PCR扩增等建立Immuno-PCR法检测梅毒螺旋体抗原TpN47体系;评价该方法的灵敏度、特异性和重复性;收集200例临床标本通过Immuno-PCR法、ELISA、TPPA和TURST法进行临床应用比较。结果 Weston blotting结果显示TpN47抗体阳性;Immuno-PCR比ELISA法敏感性强103倍,比TPPA、TURST强105倍;特异性高,重复性好。临床标本中Immuno-PCR法敏感性和特异性分别为86.00%(P<0.05)和100.00%,ELISA法为71.00%和98.00%,TPPA法为65.00%和100.00%,TRUST法为68.00%和95.00%。结论 Immuno-PCR法检测梅毒螺旋体TpN47抗原敏感性高,特异性强,重复性好,可作为梅毒螺旋体感染的早期诊断方法 。 展开更多
关键词 immuno-pcr 梅毒螺旋体 TpN47抗原 ELISA TPPA TURST
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免疫PCR检测HIV-1 p24的实验研究 被引量：2
18
作者 郑姬 蒋天伦 府伟灵 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第9期809-811,共3页
目的以HIV-1 p24为检测对象,建立以金磁微粒为固相载体的免疫PCR检测技术。方法以鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体,包被金磁微粒,以生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测抗体。报告DNA为甘蓝型油菜肉桂酰辅酶A还原酶基因的一个片段... 目的以HIV-1 p24为检测对象,建立以金磁微粒为固相载体的免疫PCR检测技术。方法以鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体,包被金磁微粒,以生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测抗体。报告DNA为甘蓝型油菜肉桂酰辅酶A还原酶基因的一个片段,用生物素标记的引物通过PCR扩增预先制备,通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被两抗体夹心捕获的人重组HIV-1 p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测。并且优化了免疫PCR的检测条件,对检测灵敏度进行了分析。结果为降低非特异性扩增,链亲和素和用于标记的DNA的浓度分别控制在0.1mg/L和10ng/L。免疫PCR检测的灵敏度为0.1ng/L,比ELISA法检测的灵敏度高1.5×104倍。结论金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24抗原是一种灵敏度较高的检测方法。 展开更多
关键词 免疫pcr 金磁微粒 HIV-1 P24抗原
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免疫PCR检测乳腺癌患者血清p185对其诊断及预后的价值 被引量：2
19
作者 林兰 施民新 刘继斌 《现代检验医学杂志》 CAS 2010年第4期128-130,共3页
目的 为乳腺癌诊断提供血清学新尝试,评价免疫PCR方法在乳腺癌血清学诊断以及预后中的价值.方法 免疫PCR方法检测血清p185蛋白,酶免疫组化方法检测组织p185蛋白表达.结果 乳腺癌患者血清p185蛋白阳性率为41.1%,而非癌患者和正常人血清p... 目的 为乳腺癌诊断提供血清学新尝试,评价免疫PCR方法在乳腺癌血清学诊断以及预后中的价值.方法 免疫PCR方法检测血清p185蛋白,酶免疫组化方法检测组织p185蛋白表达.结果 乳腺癌患者血清p185蛋白阳性率为41.1%,而非癌患者和正常人血清p185蛋白均为阴性,乳腺癌患者血清中p185显著高于非癌患者和正常人（P〈0.01）.组织p185蛋白阳性表达的乳腺癌患者血清p185阳性率为84.6%,明显高于组织p185蛋白阴性表达组,血清p185测定与组织p185蛋白表达密切相关（P〈0.01）.结论 检测血清p185是检测组织p185蛋白理想的替代方法,对乳腺癌患者的诊断以及预后有重要意义.抗p53蛋白抗体可以作为乳腺癌血清学诊断新标志,用于乳腺癌的普查和早期诊断. 展开更多
关键词 免疫pcr 乳腺癌 P185 预后
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免疫PCR检测微量H5亚型禽流感病毒 被引量：2
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作者 邓明俊 肖西志 +5 位作者 吴振兴 张彦明 辛学谦 郑小龙 王群 王昌军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1039-1045,共7页
为了有效检测低浓度禽流感病毒,笔者通过将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立了一种快速检测痕量H5亚型禽流感病毒的间接免疫PCR方法和间接"三明治"抗体夹心免疫PCR方法。以TopYield 96孔板为固相... 为了有效检测低浓度禽流感病毒,笔者通过将高特异性的抗原-抗体反应与高灵敏性的PCR扩增技术相结合,建立了一种快速检测痕量H5亚型禽流感病毒的间接免疫PCR方法和间接"三明治"抗体夹心免疫PCR方法。以TopYield 96孔板为固相免疫吸附载体,以禽流感病毒H5蛋白为检测对象,通过一系列免疫反应及亲和素-生物素桥联作用,将生物素标记的报告DNA分子和生物素标记的禽流感病毒H5亚型抗体分子连接。充分洗涤后,在TopYield板孔中添加PCR反应液,对板壁偶联的报告DNA进行PCR扩增,间接达到检测微量禽流感病毒H5蛋白的目标。通过优化报告DNA分子和链亲和素的浓度,2种免疫PCR技术都可检测到约1fg的禽流感病毒H5蛋白,与常规ELISA方法相比,灵敏性提高了近1 000倍。 展开更多
关键词 免疫pcr 禽流感病毒 H5血凝素蛋白
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