目的利用质谱技术对类风湿关节炎(RA)患者关节滑膜中的免疫复合物进行全面的抗原谱分析。方法选取本院3例RA患者和3例骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者的关节滑膜,通过蛋白质提取、免疫沉淀、胶内酶解和液相色谱串联质谱系统,对滑膜免...目的利用质谱技术对类风湿关节炎(RA)患者关节滑膜中的免疫复合物进行全面的抗原谱分析。方法选取本院3例RA患者和3例骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者的关节滑膜,通过蛋白质提取、免疫沉淀、胶内酶解和液相色谱串联质谱系统,对滑膜免疫复合物进行抗原谱分析。用FOT值(fraction of total)评价蛋白质的丰度,通过FOT值的比较筛选出上调蛋白和下调蛋白。用David和String软件对差异蛋白质进行功能富集、相互作用网络和信号通路分析。结果在RA和OA患者的关节滑膜组织免疫复合物中分别鉴定出511和526种蛋白质。通过维恩图比较,仅在RA组出现的蛋白质有170种。RA组有45种蛋白质发生上调,85种蛋白质发生下调。结论热休克蛋白HSP90AA1、HSP70、人类白细胞抗原(HLA)-G、硫氧还蛋白、膜联蛋白A2和玻连蛋白可能通过不同的机制参与RA的发病过程,具有RA新的生物标志物的潜在应用价值。展开更多
文摘目的利用质谱技术对类风湿关节炎(RA)患者关节滑膜中的免疫复合物进行全面的抗原谱分析。方法选取本院3例RA患者和3例骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者的关节滑膜,通过蛋白质提取、免疫沉淀、胶内酶解和液相色谱串联质谱系统,对滑膜免疫复合物进行抗原谱分析。用FOT值(fraction of total)评价蛋白质的丰度,通过FOT值的比较筛选出上调蛋白和下调蛋白。用David和String软件对差异蛋白质进行功能富集、相互作用网络和信号通路分析。结果在RA和OA患者的关节滑膜组织免疫复合物中分别鉴定出511和526种蛋白质。通过维恩图比较,仅在RA组出现的蛋白质有170种。RA组有45种蛋白质发生上调,85种蛋白质发生下调。结论热休克蛋白HSP90AA1、HSP70、人类白细胞抗原(HLA)-G、硫氧还蛋白、膜联蛋白A2和玻连蛋白可能通过不同的机制参与RA的发病过程,具有RA新的生物标志物的潜在应用价值。
文摘目的研究CD163分子在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)免疫复合物感染肺泡巨噬细胞(pulmonary alveolar macrophage cells,PAMs)中的作用。方法将纯化的PRRSV特异性Ig G做4倍稀释后与等体积的TCID50为104.6/0.1 ml PRRSV混合,制成感染性免疫复合物。分别用鼠抗猪CD163-P1、CD163-P2、CD163-P3、CD163-P4和CD163-H抗体组封闭PAM细胞,然后将感染性免疫复合物感染封闭后的PAM细胞同时设鼠阴性Ig G封闭组和感染性免疫复合物组作对照。分别培养24 h和48 h后裂解PAM细胞提取RNA,用已建立的PRRSV实时荧光定量PCR方法检测PRRSV拷贝数,并用Graph Pad Prism 5软件处理所得到的数据。结果在免疫复合物处理24 h和48 h时,鼠抗猪CD163-P1和CD163-P2抗体封闭组的PRRSV m RNA拷贝数与相应的鼠阴性Ig G对照组比较均差别不大;鼠抗猪CD163-P3抗体组的PRRSV增殖水平均却显著低于对照组,且鼠抗猪CD163-P3抗体封闭组在24 h时间段的PRRSV m RNA水平是鼠阴性Ig G对照组的0.87倍,在48 h时是对照组的0.75倍(P<0.01);鼠抗猪CD163-P4抗体组的PRRSV m RNA拷贝数均低于鼠阴性Ig G对照组,但差异不显著;而鼠抗猪CD163-H抗体组PRRSV m RNA拷贝数均显著低于鼠阴性Ig G对照组,在24 h时PRRSV m RNA水平是鼠阴性Ig G对照组的0.88倍(P<0.05),在48 h时是对照组的0.83倍(P<0.05)。结论鼠抗猪CD163抗体能够阻碍PRRSV的增殖,且鼠抗猪CD163-P3抗体具有显著的抑制作用。
