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食管癌高发区HPV检测及与p53的关系 被引量：32
1
作者 陆哲明 陈克能 +5 位作者 郭梅 李涛 邢海平 梅强 杨怀华 柯杨 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期220-223,共4页
目的　探讨食管癌高发区中人乳头瘤病毒 (HPV)、爱泼斯坦 巴尔病毒 (EBV)与食管癌发病的关系 ,并初步研究HPV感染与p5 3过表达之间的关系。方法　设计了多对引物进行PCR、原位杂交及原位PCR、免疫组化 ,并对 30例高发区食管癌进行检测... 目的　探讨食管癌高发区中人乳头瘤病毒 (HPV)、爱泼斯坦 巴尔病毒 (EBV)与食管癌发病的关系 ,并初步研究HPV感染与p5 3过表达之间的关系。方法　设计了多对引物进行PCR、原位杂交及原位PCR、免疫组化 ,并对 30例高发区食管癌进行检测。结果　用PCR检出HPV L1阳性率10 .0 % ,HPV 16 E6阳性率 6 0 .0 % ,HPV 16 E7阳性率 6 3.3% ,HPV 18 E6及EBV的检出率分别为 6 .7%和 0 ,p5 3蛋白的检出率为 73.3%。用原位杂交和原位PCR检出HPV 16 E6阳性率均为 5 3.3%。HPV L1的低检出率及HPV 16 E6、HPV 16 E7基因的较高检出率可能提示 ,在肿瘤细胞中HPV常以部分丢失的形式整合 ,而E6、E7常在整合中保留。结论　HPV 16型可能与高发区食管癌发生密切相关 ,而HPV 18、EBV则关系不大。p5 3突变在食管癌的发病中起重要作用 ,但其与HPV感染之间的关系不大。 展开更多
关键词 食管肿瘤 人乳头瘤病毒 P53基因 原位杂交 聚合酶链反应
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液相杂交技术在聚合酶链反应酶联免疫检测的应用 被引量：20
2
作者 李稻 程建新 +5 位作者 罗伟 施蓉 杭勤 黄东生 顾文莉 陶义训 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期34-36,共3页
目的　采用液相杂交技术 ,简化核酸杂交过程 ,建立乙肝病毒 (HBV)的液相杂交的聚合酶链反应 酶联免疫检测 (PCR ELISA)方法。方法　将 5′端标记生物素的PCR扩增产物与 5′端标记地高辛的探针呈液相混合 ,90℃ 2min ,5 5℃ 1min杂交。... 目的　采用液相杂交技术 ,简化核酸杂交过程 ,建立乙肝病毒 (HBV)的液相杂交的聚合酶链反应 酶联免疫检测 (PCR ELISA)方法。方法　将 5′端标记生物素的PCR扩增产物与 5′端标记地高辛的探针呈液相混合 ,90℃ 2min ,5 5℃ 1min杂交。杂交后产物被链霉亲和素酶标板固定 ,经酶标记抗地高辛标记抗体结合、显色。结果　液相杂交酶联免疫检测条件优化 :探针浓度 3pmol 次 ,酶标记抗体稀释度 1∶10 0 0。液相杂交时间 3min ,固相杂交时间 12 0min ,但其检测结果无明显差别。检测灵敏度 1× 10 4拷贝 ml,34份HBsAg(+ ) ,HBeAg(+ ) ,抗HBc(+ )标本的阳性检出率为 97.1% ;34份HBsAg(+ ) ,抗HBe(+ ) ,抗HBc(+ )标本的阳性检出率 6 7.7% ;17份HBsAg(+ )、抗HBc(+ )阳性检出率 5 8.8% ;其他免疫检测指标组合标本为 34份 (5 .9% ) ;34份献血员标本均为阴性。结论　在PCR ELISA中使用液相杂交技术可使实验操作简便、快速 。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 核酸杂交 聚合酶链反应 酶联免疫检测
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染色体微缺失微重复综合征遗传检测的现状及展望 被引量：18
3
作者 王增阁 郭奇伟 周裕林 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期407-409,共3页
染色体微缺失微重复综合征是一类较常见的染色体病，对其的检测在儿科、出生缺陷防控和肿瘤等领域均具有重要意义。目前，应用于微缺失微重复综合征的检测技术主要包括荧光原位杂交、染色体微阵列芯片、实时荧光PCR、多重连接依赖探针... 染色体微缺失微重复综合征是一类较常见的染色体病，对其的检测在儿科、出生缺陷防控和肿瘤等领域均具有重要意义。目前，应用于微缺失微重复综合征的检测技术主要包括荧光原位杂交、染色体微阵列芯片、实时荧光PCR、多重连接依赖探针扩增和高通量测序等。本文就这些检测技术的优缺点及其临床应用作一评析，以期推进微缺失微重复综合征的临床检测与研究。 展开更多
关键词 染色体畸变 染色体缺失 染色体重复 原位杂交 荧光 微阵列分析 聚合酶链反应 高通量核苷酸序列分析 发育障碍
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微量酶联杂交法定量检测HBV基因竞争PCR扩增产物 被引量：14
4
作者 缪晓辉 戚中田 孔宪涛 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期101-104,共4页
目的　建立一种简便、敏感、精确的微反应板酶联杂交技术 ,以鉴定HBV基因的竞争PCR扩增产物。方法　设计了两种捕获探针 ,能分别与竞争PCR扩增产物中的野生片段和突变片段杂交。捕获探针通过 3′ 端修饰的氨基与微量DNA结合板孔表面的NO... 目的　建立一种简便、敏感、精确的微反应板酶联杂交技术 ,以鉴定HBV基因的竞争PCR扩增产物。方法　设计了两种捕获探针 ,能分别与竞争PCR扩增产物中的野生片段和突变片段杂交。捕获探针通过 3′ 端修饰的氨基与微量DNA结合板孔表面的NOS基团化学结合而被“竖直”地包被在反应板上 ;将热变性后的产物加入两种捕获探针反应孔内 ,产物中带有生物素的野生或突变片段的一条单链与相应的捕获探针杂交 ;最后用链亲和素 碱性磷酸酶及底物检测杂交信号。结果　该方法检测PCR产物DNA的灵敏度为 80ng/ml,大于琼脂糖凝胶电泳染色鉴定法。获得野生片段和突变片段杂交信号值后 ,可根据公式计算扩增前野生模板的初始量。结论　本方法操作简单、灵敏度高、结果数据化、特异性强 ,适用于竞争PCR产物分析。 展开更多
关键词 酶联杂交 联合酶链反应 基因定量 乙型肝炎病毒
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CYP11B2 expression in HSCs and its effect on hepatic fibrogenesis 被引量：11
5
作者 Xu Li Ying Meng +3 位作者 Xi Shan Yang Ping Sheng Wu Shu Mei Li Wen Yan Lai 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2000年第6期885-887,共3页
INTRODUCTIONIt has been reported that renin-angiotensin systemexists in tissue and aldosterone can be synthesizedin extra-adrenal tissue including heart,bloodvessels and brain.Recent studies have broughtrich evidences... INTRODUCTIONIt has been reported that renin-angiotensin systemexists in tissue and aldosterone can be synthesizedin extra-adrenal tissue including heart,bloodvessels and brain.Recent studies have broughtrich evidences in favour of aldosterone as a strongstimulator of fibrogenesis and mitogenesis. 展开更多
关键词 HEPATIC FIBROGENESIS HEPATIC stellate cells in situ hybridization reninangiotensin system ALDOSTERONE POLYMERASE chain reaction liver cirrosis/prevention and control
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PCR-反向点杂交技术在女性下生殖道人乳头瘤病毒感染分型检测的应用研究 被引量：12
6
作者 向华国 黎国 +1 位作者 曾锦婷 刘镜光 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第8期916-917,共2页
目的探讨PCR-反向点杂交分型技术在临床人乳头瘤病毒(HPV)感染基因分型中的应用。方法采用PCR-反向点杂交分型技术,对1702例女性进行下生殖道23种HPV亚型感染筛查。结果 HPV总感染率为17.6%(300/1702),有21种型别被检出,感染率最高的为... 目的探讨PCR-反向点杂交分型技术在临床人乳头瘤病毒(HPV)感染基因分型中的应用。方法采用PCR-反向点杂交分型技术,对1702例女性进行下生殖道23种HPV亚型感染筛查。结果 HPV总感染率为17.6%(300/1702),有21种型别被检出,感染率最高的为低危HPV43型(3.82%),其他型别分别为HPV16(3.70%)、52(2.70%)、6(2.47%)、58(1.88%)、18(1.76%)、56(1.53%)、68(1.29%)、11(0.88%)、33(0.82%)、66(0.71%)、59(0.59%)、53(0.53%)、42(0.53%)、31(0.35%)、73(0.24%)、51(0.18%)、35(0.18%)、83(0.12%)、45(0.06%)和39(0.06%),高危型感染13.9%(237/1702),低危型感染6.4%(109/1702),多型感染3.5%(59/1702);1702例HPV感染高峰年龄为大于或等于50岁(29.41%),各年龄段HPV感染检出率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PCR-反向杂交分型技术能够同时检测高危和低危HPV,可判断多型感染,在临床诊断和普查方面均有重要意义。 展开更多
关键词 人乳头瘤状病毒 基因亚型 核酸杂交 聚合酶链反应
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肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒核心区基因及其表达产物的检测 被引量：10
7
作者 李江 王文亮 +1 位作者 于欣欣 郑建勇 《中华实验和临床病毒学杂志》 CSCD 2000年第1期47-51,共5页
目的　采用多种方法检测丙型肝炎病毒 (HCV)核心区基因和表达产物在肝细胞肝癌(HCC)组织中的分布及其在HCC发生和发展中的作用。方法　对 39例HCC患者进行免疫组化和原位杂交的检测。IS RT PCR法用于检测并定位HCVRNA。微切组织的RT PC... 目的　采用多种方法检测丙型肝炎病毒 (HCV)核心区基因和表达产物在肝细胞肝癌(HCC)组织中的分布及其在HCC发生和发展中的作用。方法　对 39例HCC患者进行免疫组化和原位杂交的检测。IS RT PCR法用于检测并定位HCVRNA。微切组织的RT PCR法分别检测癌与癌旁组织中的HCVRNA ,以便能够控制扩增产物的来源。同时还进行血清学ELISA和RT PCR的检测。结果　血清ELISA的阳性率 (30 8% )并不总与RT PCR的阳性率 (43 6 % )一致 ,后者对于反映HCRRNA存在更为敏感和准确。免疫组化结果显示HCV核心抗原的表达率为 38 5 %。阳性信号位于癌旁肝细胞的胞浆 ,而在癌组织中发生了显著的核转位表达 (73 3% )。IS RT PCR结果显示阳性信号位于肝 (癌 )细胞的胞浆。阳性率 (5 3 8% )与血清中的HCVRNA的水平显著相关。但有 4例肝内HCVRNA高表达而血清HCVRNA的水平很低或是阴性 ,提示血清中HCVRNA的水平并不总能反映肝内HCVRNA的水平。微切组织RT PCR法的检测结果显示癌与癌旁组织中HCVRNA的阳性率一致 ,为 5 9 0 %。结论　HCVRNA在HCC组织中的高表达提示HCVRNA在肝细胞恶性转化中起着重要的作用。IS RT PCR是一个理想的检测并定位HCVRNA的方法。微切组织的RT PCR具有与众不同的优点 ,我们期待这种方法为确定HCV在肝细胞恶性转? 展开更多
关键词 肝细胞瘤 原位杂交 免疫组织化学 HCV PCR
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中国株和德国株兔出血症病毒的基因组比较 被引量：8
8
作者 崔治中 段玉友 +1 位作者 王永坤 朱国强 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期242-247,共6页
以兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）德国株基因组ｃＤＮＡ的部分片段为探针，与中国的ＮＪ株和ＬＷ株ＲＨＤＶ的基因组做分子杂交，结果表明，它们属于同一病毒。将中国株ＲＨＤＶ感染兔肝组织，用硫氰酸胍－氯化铯超速离心法提取的核酸沉淀，... 以兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）德国株基因组ｃＤＮＡ的部分片段为探针，与中国的ＮＪ株和ＬＷ株ＲＨＤＶ的基因组做分子杂交，结果表明，它们属于同一病毒。将中国株ＲＨＤＶ感染兔肝组织，用硫氰酸胍－氯化铯超速离心法提取的核酸沉淀，或将提纯病毒悬液经苯酚抽提法获取的核酸沉淀，在用ＲＮａｓｅ或ＤＮａｓｅ，消化后直接做Ｄｏｔｂｌｏｔ，或将相应样品做ＰＣＲ后再做Ｄｏｔｂｌｏｔ或Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ，再与经Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的ｃＤＮＡ探针做分子杂交，结果证明，在中国的二个不同来源的兔出血症病料中，与德国株ＲＨＤＶ基因组ｃＤＮＡ同源的病毒是一种ｓｓＲＮＡ病毒。本文还讨论了在中国兔出血症病料中存在另一种ＤＮＡ病毒的可能性。 展开更多
关键词 兔出血症病毒 中国株 德国株 基因组
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应用改良消减杂交技术克隆妊娠高血压综合征致病相关基因 被引量：4
9
作者 姚元庆 师娟子 +6 位作者 晏伟 朱峰 赵忠良 刘彦仿 尹国武 高平 杨艳红 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期585-589,共5页
目的　研究妊娠高血压综合征 (妊高征 )致病相关基因 ,探讨妊高征的发病机理。方法采用基于聚合酶链反应 (PCR)基础上的改良消减杂交技术 ,克隆妊高征患者及正常产妇的胎盘组织中差异表达的cDNA ,并进行DNA的序列测定。结果　从 86个消... 目的　研究妊娠高血压综合征 (妊高征 )致病相关基因 ,探讨妊高征的发病机理。方法采用基于聚合酶链反应 (PCR)基础上的改良消减杂交技术 ,克隆妊高征患者及正常产妇的胎盘组织中差异表达的cDNA ,并进行DNA的序列测定。结果　从 86个消减杂交获得的cDNA克隆中 ,确定、筛选出 14个含有妊高症患者及正常产妇胎盘组织差异表达的cDNA ,即为可能与妊高征发病相关的基因片段。经与美国国立卫生研究院国家生物技术信息中心的表达序列标签数据库 (dbEST)比较 ,发现其中 11个为已知序列片段 ,3个为未知序列片段。将 3个未知序列片段登录美国国立卫生研究院基因库 ,登录号分别为AF2 32 2 16、AF2 32 2 17、AF2 336 48。结论　采用消减杂交技术从妊高征患者胎盘组织中克隆出 14个可能与妊高征发病相关的基因片段 。 展开更多
关键词 妊娠并发症 心血管 高血压 杂交 聚合酶链反应 克隆 分子
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T淋巴母细胞淋巴瘤／白血病的临床病理研究 被引量：10
10
作者 于兵 杜金荣 +4 位作者 谢建兰 于冉 郑晓丹 朱红 周小鸽 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期452-457,共6页
目的分析和总结T淋巴母细胞淋巴瘤／白血病（T—LBI／ALL）的临床、组织学、免疫表型特征，以提高对T—LBT／ALL的认识和诊断水平。方法采用HE、免疫组织化学（EliVision法）、原位杂交及聚合酶链反应等方法结合临床资料对128例T—LBL／... 目的分析和总结T淋巴母细胞淋巴瘤／白血病（T—LBI／ALL）的临床、组织学、免疫表型特征，以提高对T—LBT／ALL的认识和诊断水平。方法采用HE、免疫组织化学（EliVision法）、原位杂交及聚合酶链反应等方法结合临床资料对128例T—LBL／ALL进行了分析。结果男94例，女34例。男女比2．8：1。年龄4～88岁，平均27岁，中位年龄22岁。58例病变累及淋巴结，27例累及淋巴结外，43例淋巴结内外均有累及。其中73．3％（74／101）累及颈部淋巴结，42．6％（43／101）累及纵隔。病变以弥漫为主，少数呈结节状。多数病例的瘤细胞为中小细胞，少数瘤细胞较大。瘤细胞表达末端脱氧核苷酸转移酶（TdT，94．5％，121／128）、CD34（49．0％，48／98）、CD3（72．2％，78／108）、CD7（96．3％，104／108）、CD43（88．9％，56／63）、CD79a（7．1％，5／70）、CD10（32．9％，25／76）、CD99（96．7％，58／60）、Pax-5（4．4％，4／91）；128例髓过氧化物酶（MPO）均为阴性。共随访51例（39．8％），随访时间1～53个月。总体存活率68．6％；总体中位生存时间12个月。不同年龄组中CD3阳性率差异有统计学意义，30岁以上的病例CD3阳性率显著降低。CD10阳性患者的生存时间较阴性患者的生存时间短。5例T细胞受体（TCR）基因重排检测结果显示，4例有TCR基因克隆性重排。结论T-LBL／ALL主要发生于青少年，以颈部淋巴结肿大和（或）纵隔肿物为主要临床表现。多数病例的肿瘤细胞以中小细胞为主，弥漫分布，但是也应注意到少数病例细胞较大，或结节状生长。免疫组织化学CD7、Pax-5、TdT、CD34、Ki-67五项抗体的联合应用有助于大多数病例确诊。对极少数病例可辅以TCR基因重排检测。 展开更多
关键词 淋巴瘤 淋巴母细胞 免疫表型分型 杂交技术 聚合酶链反应
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t(12;21)儿童急性淋巴细胞白血病的研究 被引量：9
11
作者 林冬 刘世和 +7 位作者 竺晓凡 薄丽津 李承文 陈玉梅 刘旭平 秦爽 代芸 王建祥 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期17-21,共5页
目的　研究t(12 ;2 1)儿童急性淋巴细胞白血病 (ALL)的临床与预后特征。方法　应用常规核型分析 (CCA)、双色间期荧光原位杂交 (I FISH)和RT PCR技术 ,对 5 1例ALL患儿骨髓或外周血有核细胞进行t(12 ;2 1)和TEL AML1融合基因检测。结果... 目的　研究t(12 ;2 1)儿童急性淋巴细胞白血病 (ALL)的临床与预后特征。方法　应用常规核型分析 (CCA)、双色间期荧光原位杂交 (I FISH)和RT PCR技术 ,对 5 1例ALL患儿骨髓或外周血有核细胞进行t(12 ;2 1)和TEL AML1融合基因检测。结果　 11例患儿存在t(12 ;2 1) ,占儿童初治ALL的2 1.6 % ,占非T细胞系ALL的 2 6 .9% (41例中 11例 ) ;中位发病年龄 6 .8岁 (2 .9～ 12 .0岁 ) ;非T细胞系免疫表型 ,以普通型ALL为主 ,不伴髓系抗原高表达 ;CCA检测核型多正常 ,仅 1例有t(12 ;2 1) ;72 7%的患儿伴TEL等位基因缺失。与其他儿童非T细胞系ALL相比 ,t(12 ;2 1)患儿的血小板计数和IgH重排发生率低 ;男女性别比、初诊时贫血、出血、器官肿大程度、白细胞计数和完全缓解 (CR)率、4周内达CR比例、持续CR时间及复发率未见显著差异。结论　t(12 ;2 1)是我国儿童ALL最常见的染色体易位。为非T细胞系免疫表型 ,以普通型ALL为主 ,多伴TEL等位基因丢失。临床表现和近期疗效与其他非T细胞系儿童ALL无显著差异。与国外报道相比 ,患儿的发病年龄偏大 ,血小板计数和IgH重排率低 ,核型多为正常。 展开更多
关键词 儿童 急性淋巴细胞白血病 预后 融合基因 染色体异位
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分子诊断技术的临床应用进展 被引量：9
12
作者 刘婉彤 童梅 +2 位作者 林福玉 高向东 刘金毅 《生物技术通讯》 CAS 2020年第2期240-250,共11页
分子诊断技术主要包括核酸分子杂交技术、核酸扩增技术、基因芯片技术、基因测序技术,已广泛应用于临床各科。比如在肿瘤疾病中应用荧光原位杂交技术(FISH)检测乳腺癌中HER-2基因扩增,应用基因芯片技术检测胃癌进程中基因拷贝数变化,应... 分子诊断技术主要包括核酸分子杂交技术、核酸扩增技术、基因芯片技术、基因测序技术,已广泛应用于临床各科。比如在肿瘤疾病中应用荧光原位杂交技术(FISH)检测乳腺癌中HER-2基因扩增,应用基因芯片技术检测胃癌进程中基因拷贝数变化,应用高通量测序技术(HTS)检测肺癌中的EGFR基因突变;在遗传病中应用FISH技术针对唐氏综合征进行产前诊断,应用数字PCR技术进行无创产前筛查,应用HTS技术进行Hermansky-Pudlak综合征的诊断;在感染性疾病中应用RT-PCR试剂盒进行新冠肺炎的检测,应用基因芯片技术筛选抗生素抗性基因,应用HTS技术进行耐药基因的筛选等。本文主要介绍分子诊断技术在这三大类疾病领域的临床应用最新进展。 展开更多
关键词 分子诊断 荧光原位杂交 聚合酶链式反应 基因芯片 基因测序技术
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乙型肝炎病毒(HBV)相关性肾炎患者肾活检组织中HBV DNA分布的分子生物学检测 被引量：8
13
作者 张爱平 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期237-239,共3页
为探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）相关性肾炎的发病机理，应用地高辛素标记ＨＢＶＤＮＡ探针原位分子杂交（ＩＳＨ）和直接原位聚合酶链反应（ＩＳ－ＰＣＲ）技术，对２０例临床诊断为ＨＢＶ相关性肾炎患者肾活检石蜡包埋组织切片检查。在... 为探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）相关性肾炎的发病机理，应用地高辛素标记ＨＢＶＤＮＡ探针原位分子杂交（ＩＳＨ）和直接原位聚合酶链反应（ＩＳ－ＰＣＲ）技术，对２０例临床诊断为ＨＢＶ相关性肾炎患者肾活检石蜡包埋组织切片检查。在ＩＳＨ中采用ＨＢＶＤＮＡ两种探针：用全长段探针，８５％（１７／２０）ＨＢＶＤＮＡ阳性，这１７例阳性肾组织切片再用ＨＢＶＤＮＡＳ加Ｃ段探针检测，１４例阳性（８２．３５％）。在ＩＳ－ＰＣＲ中本组病例８５％（１７／２０）亦阳性。发现ＨＢＶＤＮＡ阳性颗粒弥漫沉积于肾小球毛细血管袢、系膜区、肾小管，表现形式以浆核型、核型为主。同组病例肾组织免疫组化染色法（ＬＳＡＢ）显示，ＨＢｓＡｇ与ＨＢＶＤＮＡ的存在部位基本一致。提示ＨＢＶ引起的肾脏病变不仅是免疫介导的损害，亦可能有病毒侵犯参加免疫反应。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 原位杂交 聚合酶链反应 病毒学
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基于适配体杂交链式反应检测郫县豆瓣中黄曲霉毒素B1 被引量：8
14
作者 黄玉坤 陶璇 +4 位作者 邵坤 王冲 王力均 车振明 陈祥贵 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第22期301-307,共7页
建立一种基于AFB1适配体杂交链式反应的荧光检测方法。研究cDNA和HP1、HP2浓度、杂交孵育时间、氧化石墨烯质量浓度对该方法性能的影响,确定最优条件为cDNA浓度50 nmol/L,HP1、HP2浓度60 nmol/L,杂交孵育时间60 min,氧化石墨烯质量浓度5... 建立一种基于AFB1适配体杂交链式反应的荧光检测方法。研究cDNA和HP1、HP2浓度、杂交孵育时间、氧化石墨烯质量浓度对该方法性能的影响,确定最优条件为cDNA浓度50 nmol/L,HP1、HP2浓度60 nmol/L,杂交孵育时间60 min,氧化石墨烯质量浓度50μg/mL。在该条件下,本方法的线性范围为2~60 ng/mL,检测限为1.84 ng/mL,在郫县豆瓣中的加标回收率为85.73%~94.25%。该方法用于12种不同品牌的郫县豆瓣的检测,与国标中的酶联免疫吸附试剂盒检测结果无显著差异(P>0.05)。本研究建立的检测方法能简单、快速、灵敏的检测郫县豆瓣中的AFB1含量,具有用于复杂基质样品中AFB1快速检测应用潜力。 展开更多
关键词 AFB1 适配体 氧化石墨烯 杂交链式反应 郫县豆瓣
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联合应用FISH和巢式RT-PCR技术检测慢性髓系白血病bcr/abl融合基因 被引量：8
15
作者 吴彬 周淑芸 +2 位作者 刘晓力 宋兰林 张燕 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期235-237,共3页
目的　检测慢性髓系白血病 (CML)bcr/abl融合基因 ,协助临床诊断。方法　联合应用荧光原位杂交 (FISH)、Northern杂交和巢式RT PCR技术。结果　在 16例被检测的CML患者中 ,有 3例两种方法的结果不一致 ,经Northern杂交验证发现 ,RT PCR... 目的　检测慢性髓系白血病 (CML)bcr/abl融合基因 ,协助临床诊断。方法　联合应用荧光原位杂交 (FISH)、Northern杂交和巢式RT PCR技术。结果　在 16例被检测的CML患者中 ,有 3例两种方法的结果不一致 ,经Northern杂交验证发现 ,RT PCR较FISH更敏感 ,但存在假阳性 ;另外 ,FISH较容易检测到bcr/abl融合的少见类型 ,而巢式RT PCR需要同时设计多对特殊引物 ,否则极易漏诊。结论　联合应用FISH和巢式RT PCR技术检测CMLbcr/abl融合基因可以优势互补 ,使结果更加准确、可靠 ,更适合于临床诊断、疗效判定以及对微量残留病的监测。 展开更多
关键词 慢性髓系白血病 BCR/ABL融合基因 荧光原位杂交 Northem杂交 巢式RT-PCR技术
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两例Turner综合征患者微小额外标记染色体来源鉴定 被引量：7
16
作者 文娟 梁德生 +6 位作者 廖希 薛晋杰 唐桂芝 夏艳 龙志高 戴和平 邬玲仟 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期659-663,共5页
目的为指导遗传咨询和临床治疗，对两例特纳综合征患者微小额外标记染色体（smallsupernumerarymarkerchromosome，sSMC）来源进行鉴定。方法高分辨染色体G显带和c显带核型分析；PCR扩增SRY基因；中期染色体荧光原位杂交。结果两例患者... 目的为指导遗传咨询和临床治疗，对两例特纳综合征患者微小额外标记染色体（smallsupernumerarymarkerchromosome，sSMC）来源进行鉴定。方法高分辨染色体G显带和c显带核型分析；PCR扩增SRY基因；中期染色体荧光原位杂交。结果两例患者核型分析结果分别为45，X[29]／46，x，＋mar131]和45，X[713／46，x，＋rnar[29]。病例1SRY基因检测阳性，其sSMC来源于Y染色体，通过荧光原位杂交最终确定其核型为45，X[29]／46，X，idic（Y）（q10）[31]．ishidic（Y）（q10）（RP11-115H13×2）（SRY＋）。病例2sSMC来源于X染色体，核型最终确定为45，X[71]／46，X，r（x）（p11．23q21）[29]ishr（x）（p11．23q21）（AL591394．11＋，AC092268．3-）。结论联合应用多种遗传学检测技术，准确鉴定了两例特纳综合征患者微小额外标记染色体的来源，以正确指导临床诊断和治疗。 展开更多
关键词 TURNER综合征 微小额外标记染色体 核型 荧光原位杂交 聚合酶链反应
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46XY女性性反转综合征一例sry基因的错义突变分析 被引量：7
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作者 武桂芳 金瑞林 贾和平 《解放军医药杂志》 CAS 2011年第1期4-6,109,共4页
目的探讨46XY女性性反转综合征患者发病的分子机制。方法应用荧光原位杂交技术(FISH)、聚合酶链反应(PCR)扩增、限制性内切酶分析、单链构象多态性分析及基因测序技术对1例46XY女性性反转综合征进行sry基因的错义突变分析。结果本例FIS... 目的探讨46XY女性性反转综合征患者发病的分子机制。方法应用荧光原位杂交技术(FISH)、聚合酶链反应(PCR)扩增、限制性内切酶分析、单链构象多态性分析及基因测序技术对1例46XY女性性反转综合征进行sry基因的错义突变分析。结果本例FISH证实为X、Y染色体结构,无嵌合体存在;PCR扩增出现609 bp特异性片段;限制性内切酶分析及单链构象多态性分析发现单链电泳带发生变异;且基因克隆测序分析证实HMG盒内第244位核苷酸位置存在点突变(A→T),造成第82位密码子由原来编码天冬酰胺Asn(AAT)变为编码酪氨酸Tyr(TAT),发生错义突变,以致出现女性表型。结论 sry基因在性别决定中起主导作用,对46XY女性患者应在sry基因检测的基础上寻找其他相关病因,以进一步了解其发生性反转的分子遗传学机制,为判断真实性别提供依据。 展开更多
关键词 性反转综合征 基因 sry 原位杂交 荧光 聚合酶链反应 限制性酶切-单链构象多态性
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PCR结合导流杂交技术在育龄妇女α和β地中海贫血诊断中的应用 被引量：7
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作者 曾赤佳 刘建雷 +1 位作者 庄锡伟 刘佳 《分子诊断与治疗杂志》 2014年第2期93-96,共4页
目的探讨PCR结合导流杂交技术诊断试剂盒在育龄妇女α和β地中海贫血诊断中的应用。方法以平均红细胞体积(MCV)<80fl筛查出141表型阳性病例,凯普α和β地中海贫血诊断试剂盒检测地贫。结果检测出80例存在α-地中海贫血,包括9种类型,... 目的探讨PCR结合导流杂交技术诊断试剂盒在育龄妇女α和β地中海贫血诊断中的应用。方法以平均红细胞体积(MCV)<80fl筛查出141表型阳性病例,凯普α和β地中海贫血诊断试剂盒检测地贫。结果检测出80例存在α-地中海贫血,包括9种类型,常见类型为--^(SEA)/αα、-α^(3.7)/αα、-α^(4.2)/αα,其中4例存在两种缺失;53例存在β-地中海贫血,包括11种类型,常见β地贫基因型β41-42、β654、β17、β28,其中2例存在两种突变;5例同时存在α-地贫和β-地贫;13例未检测到缺失或突变;同时还检测出5例MCV>80fl的α-地中海贫血病例,其中1例合并β-地贫。结论本试剂盒优势为同一基因芯片上进行α和β地贫的测定,缩短了检测时间,降低检测成本,减少复合地贫漏诊,适合基层实验室用于常见地贫的诊断。但仅能检测常见类型α和β地贫,具有一定局限性,在出现该试剂无法检测到的地贫基因缺失或突变,而MCV<80fl时,建议进行缺铁性贫血的筛查和地贫基因序列的检测。 展开更多
关键词 地中海贫血 导流杂交技术 多重聚合酶链反应
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乙型肝炎病毒D基因型与原发性肝癌的关系 被引量：6
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作者 许正锯 张江灵 +2 位作者 杨红 张启华 陈先礼 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期385-386,共2页
根据HBV全基因序列的同源性差异≥8%,现已将HBV分为A～G 8个基因型[1].HBV DNA的基因型别呈一定的地域性分布,不同的基因型与HBV感染途经、致病性亦有一定的相关性[2].在我国约有90%原发性肝癌(HCC)合并HBV感染,HBV感染与HCC的发生密切... 根据HBV全基因序列的同源性差异≥8%,现已将HBV分为A～G 8个基因型[1].HBV DNA的基因型别呈一定的地域性分布,不同的基因型与HBV感染途经、致病性亦有一定的相关性[2].在我国约有90%原发性肝癌(HCC)合并HBV感染,HBV感染与HCC的发生密切相关.然而,迄今为止对HBV感染后的确切致癌机制还不甚清楚,有关HBV基因型与HCC关系的研究甚少.应用P CR微板核酸杂交酶联免疫吸附试验(ELISA)对73例HBV DNA阳性HCC患者进行了基因分型,旨在探讨HBV基因型与HCC的关系. 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 D基因型 原发性肝癌 HBV 基因序列 肝细胞 聚合酶链反应
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杂交链式反应在生物传感探针设计方面的应用 被引量：6
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作者 杨婵 王瑞嘉 +4 位作者 何婧琳 肖慧 邓伟 向建南 曹忠 《化学传感器》 CAS 2017年第3期8-16,共9页
杂交链式反应(Hybridization chain reaction,HCR)是一种新型的信号扩增技术,它利用分子识别和杂交反应依次打开多个发卡探针,得到累计信号,实现选择性检测靶分子的目的。其特点是整个反应过程无酶参与,避免了非特异性扩增对分析结果的... 杂交链式反应(Hybridization chain reaction,HCR)是一种新型的信号扩增技术,它利用分子识别和杂交反应依次打开多个发卡探针,得到累计信号,实现选择性检测靶分子的目的。其特点是整个反应过程无酶参与,避免了非特异性扩增对分析结果的影响,且反应条件温和,易控制。基于这些特点,HCR受到了研究人员广泛的关注,并结合各种DNA探针用于检测各种目标物,如:DNA、蛋白质、生物小分子、金属离子等等。该文总结了近些年来HCR反应在生物传感探针设计方面的应用。 展开更多
关键词 杂交链式反应 生物传感器 DNA探针 应用
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