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中药骨碎补对人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞体外增殖的实验研究 被引量:10
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作者 刘凤英 许彦枝 +2 位作者 陈彦平 郭晶洁 高永博 《临床和实验医学杂志》 2014年第24期2012-2015,共4页
目的:探讨中药骨碎补对体外培养的人的牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞增殖的影响。方法采用组织块法外培养人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞,取第4、5代培养细胞随机分为实验组和对照组,实验组加不同浓度的骨碎补,对照组只加培养液。... 目的:探讨中药骨碎补对体外培养的人的牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞增殖的影响。方法采用组织块法外培养人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞,取第4、5代培养细胞随机分为实验组和对照组,实验组加不同浓度的骨碎补,对照组只加培养液。通过HE染色观察其对牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞的形态、结构及生长增殖的影响,通过MTT法和考马斯亮蓝法对实验组和对照组的细胞生长情况和总蛋白合成的检测。结果①在10-1000μg/ml浓度范围内骨碎补对人牙髓、牙龈、牙周膜成纤维细胞均有促增殖作用( P <0.05),尤以100μg/ml浓度最为明显( P <0.01);②总蛋白测定结果显示在骨碎补浓度为10μg/ml时,对照组与其总蛋白含量差异无统计学意义( P >0.05),实验组细胞总蛋白含量随骨碎补浓度增加高于对照组( P <0.05),尤以500μg/ml骨碎补浓度组作用牙髓成纤维细胞最佳;而100μg/ml骨碎补浓度组作用牙龈、牙周膜成纤维细胞最显著。结论骨碎补在有效作用浓度范围内,其促增殖效应和总蛋白含量与骨碎补浓度呈剂量依赖关系,随着浓度的增加促增殖作用增强、总蛋白含量增加,浓度达到最大作用后,随着浓度增加作用反而呈现减弱趋势。 展开更多
关键词 骨碎补 人牙髓成纤维细胞 人牙龈成纤维细胞 人牙周膜成纤维细胞 细胞增殖 总蛋白含量
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免疫组化法检测人牙龈成纤维细胞TRAF6表达 被引量:1
2
作者 王翔宇 孙克勤 +3 位作者 李霞 崔娟 李欣欣 霍俊锋 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第2期269-271,共3页
目的:采用免疫组化法检测人牙龈成纤维细胞(HGFs)肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)的表达及LPS的影响。方法:采用原代培养的人牙龈成纤维细胞,取3~8代细胞以LPS梯度浓度干预,24 h后观察干预后人牙龈成纤维细胞形态学的变化,并... 目的:采用免疫组化法检测人牙龈成纤维细胞(HGFs)肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)的表达及LPS的影响。方法:采用原代培养的人牙龈成纤维细胞,取3~8代细胞以LPS梯度浓度干预,24 h后观察干预后人牙龈成纤维细胞形态学的变化,并采用免疫组织化学的方法检测TRAF6在各组细胞中的表达。结果:TRAF-6在正常的HGFs中呈阴性表达,随LPS干预浓度由0.1μg/ml增加到100μg/ml,TRAF-6表达有先逐渐增高然后又降低的趋势。结论:TRAF-6在LPS引发的HGFs炎症损伤中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 LPS 肿瘤坏死因子受体相关因子6
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bFGF和TGF-β_1对人牙龈成纤维细胞生物学作用的影响研究 被引量:4
3
作者 邰佰霞 梁妍 王永兰 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期45-50,共6页
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子-β(1TGF-β1)单独及联合应用时对人牙龈成纤维细胞(HGF)增殖及I型胶原的分泌和糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)合成的影响。方法体外培养HGF,MTT法动态检测两种生长因子单独及联... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和转化生长因子-β(1TGF-β1)单独及联合应用时对人牙龈成纤维细胞(HGF)增殖及I型胶原的分泌和糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)合成的影响。方法体外培养HGF,MTT法动态检测两种生长因子单独及联合作用后的增殖效应;羟脯氨酸试剂盒消化法及阿利新蓝法分别检测最佳增殖浓度时上清液中I型胶原及糖胺多糖含量。结果第3天开始bFGF和TGF-β1促进HGF增殖,第5天最显著(P<0.05),bFGF和TGF-β1的浓度分别为10 ng/mL和1 ng/mL时增殖效应最佳,联合作用更显著(P<0.05);最佳增殖浓度时TGF-β1促进I型胶原分泌,而bFGF起抑制作用(P<0.05),联合应用时TGF-β1的促进作用占优势,但作用减弱(P<0.05);最佳增殖浓度时bFGF和TGF-β1促进GAG合成(P<0.05),联合应用时更显著(P<0.05)。结论除bFGF单独作用时抑制I型胶原的合成外,bFGF和TGF-β1单独及联合应用时能促进HGF增殖和细胞外基质的合成。 展开更多
关键词 牙龈成纤维细胞 碱性成纤维细胞生长因子 转化生长因子-β1 I型胶原 糖胺多糖
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二极管激光对牙龈卟啉单胞菌脂多糖刺激下人牙龈成纤维细胞增殖和炎症反应的影响
4
作者 杨文文 张献丽 +4 位作者 张欣然 王萌 薛栋 唐路 赵颖 《临床口腔医学杂志》 2023年第11期648-652,共5页
目的:探讨二极管激光对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGFs)增殖和炎症反应的影响,初步揭示二极管激光对慢性牙周... 目的:探讨二极管激光对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下的人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGFs)增殖和炎症反应的影响,初步揭示二极管激光对慢性牙周炎的作用机制。方法:原代培养HGFs;不同浓度的LPS和2μg/mL LPS+二极管激光作用于HGFs 24、48、72 h后,细胞增殖实验检测增殖能力变化;2μg/mL LPS,2μg/mL LPS+二极管激光作用于HGFs 24 h后,免疫荧光实验观察波形蛋白(Vimentin)的表达,实时定量PCR检测炎症因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)和IL-8的表达。结果:运用组织块贴壁法培养出HGFs;与对照组相比,LPS抑制HGFs的增殖,但二极管激光改善LPS对HGFs增殖影响,促进HGFs的增殖;LPS能够提高HGFs中IL-6和IL-8的表达,抑制Vimentin的表达,二极管激光可显著逆转LPS刺激下HGFs中IL-6、IL-8和Vimentin的表达水平。结论:二极管激光可逆转P.gingivalis LPS对HGFs的增殖作用及其对炎症反应影响,二极管激光能够抑制LPS在慢性牙周炎过程中的作用。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌脂多糖 人牙龈成纤维细胞 增殖 炎症
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彩色不锈钢弓丝和托槽的细胞毒性研究 被引量:2
5
作者 胡芳 樊新民 +3 位作者 龚爱秀 顾永佳 邵胜 陈文静 《口腔医学》 CAS 2005年第6期368-369,共2页
目的研究一种新型彩色弓丝和托槽对体外培养的人牙龈成纤维(HGF)细胞的毒性作用.方法将彩色的和未染色的两种弓丝和托槽的浸提液与HGF细胞接触后,用MTT法测定各孔吸光度值,计算细胞相对增殖率,用六级毒性分类法评级.结果培养期不同浓度... 目的研究一种新型彩色弓丝和托槽对体外培养的人牙龈成纤维(HGF)细胞的毒性作用.方法将彩色的和未染色的两种弓丝和托槽的浸提液与HGF细胞接触后,用MTT法测定各孔吸光度值,计算细胞相对增殖率,用六级毒性分类法评级.结果培养期不同浓度的两种材料浸提液培养的细胞均大量增殖,毒性评级为0~1级.两种材料之间差异无统计学意义(P>0.05).结论这种彩色弓丝和托槽具有良好的细胞相容性. 展开更多
关键词 彩色弓丝 托槽 人牙龈成纤维细胞 细胞毒性 不锈钢
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重组质粒pcDNA3/sTNFR(p55)转染牙龈成纤维细胞的瞬时表达检测
6
作者 徐艳 章锦才 +4 位作者 张蕴惠 李谨 刘来奎 江宏兵 马骏驰 《口腔医学》 CAS 2005年第6期326-328,共3页
目的检测重组质粒pcDNA3/sTNFR(p55)对人牙龈成纤维细胞的转染效率及瞬时表达。方法人牙龈成纤维细胞体外原代培养并传代,重组质粒用脂质体包裹介导进行体外转染。双抗体夹心ELISA法对重组质粒在人牙龈成纤维细胞中表达产物的含量进行... 目的检测重组质粒pcDNA3/sTNFR(p55)对人牙龈成纤维细胞的转染效率及瞬时表达。方法人牙龈成纤维细胞体外原代培养并传代,重组质粒用脂质体包裹介导进行体外转染。双抗体夹心ELISA法对重组质粒在人牙龈成纤维细胞中表达产物的含量进行检测。结果人可溶性肿瘤坏死因子受体[sTNFR(p55)]在基因转染24 h后开始表达,72 h最高,转染组细胞培养液和冻融液中sTNFR(p55)表达量均高于对照组(P<0.05),1周后表达逐渐减弱,2周后仍有少量表达。结论重组质粒pcDNA3/sTNFR(p55)在人牙龈成纤维细胞系中具有表达功能,并且在细胞外及细胞内均具有特异性表达产物。 展开更多
关键词 人可溶性肿瘤坏死因子受体 人牙龈成纤维细胞 体外转染 基因治疗 重组质粒pcDNA3
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Ni^(2+)与EGCG相互作用对人牙龈成纤维细胞的生物学效应 被引量:1
7
作者 苏俭生 罗真兰 王海波 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期519-525,共7页
目的分析表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)、Ni2+及其相互作用对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGF)的生物学效应。方法用MTT法检测HGF的存活率,运用彗星电泳检测细胞的DNA损伤情况,使用... 目的分析表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)、Ni2+及其相互作用对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGF)的生物学效应。方法用MTT法检测HGF的存活率,运用彗星电泳检测细胞的DNA损伤情况,使用流式细胞仪法检测HGF周期变化。结果 Ni2+可呈时间依赖性抑制HGF的生长,造成细胞DNA损伤,并且可使细胞周期阻滞于S期,诱导细胞凋亡。高浓度的EGCG(>200μmol/L)可明显抑制HGF生长,使细胞的DNA损伤。Ni2+与EGCG相互作用后增加了对HGF的抑制(P<0.01),DNA的损伤及凋亡细胞也明显增加(P<0.05)。结论 Ni2+和EGCG相互作用后使Ni2+对HGF的抑制作用增强,加剧HGF的DNA损伤和细胞周期阻滞,并明显增加细胞凋亡。 展开更多
关键词 NI2+ 表没食子儿茶素没食子酸酯 生物学效应 彗星电泳 人牙龈成纤维细胞
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pEGFP-N1/hIL-1ra重组真核表达载体的构建及其在人牙龈成纤维细胞中的瞬时表达 被引量:1
8
作者 苏毅 何雅丽 +2 位作者 王子露 李建民 徐艳 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1533-1536,1577,共5页
目的:构建重组人白细胞介素1受体拮抗剂(rhIL-1ra)基因真核表达载体pEGFP-N1/hIL-1ra,瞬时转染人牙龈成纤维细胞并检测其表达,为牙周炎症的基因治疗提供实验基础。方法:TRIzol法提取人乳腺癌组织总RNA进行RT-PCR,将纯化的扩增产物hIL-1r... 目的:构建重组人白细胞介素1受体拮抗剂(rhIL-1ra)基因真核表达载体pEGFP-N1/hIL-1ra,瞬时转染人牙龈成纤维细胞并检测其表达,为牙周炎症的基因治疗提供实验基础。方法:TRIzol法提取人乳腺癌组织总RNA进行RT-PCR,将纯化的扩增产物hIL-1ra与克隆载体pMD18-T连接、转化,测序正确后将重组体pMD18-T/hIL-1ra与真核表达质粒pEGFP-N1分别进行双酶切,连接后转化感受态细菌E.coliTOP10。将构建正确的pEGFP-N1/hIL-1ra重组质粒DNA瞬时转染人牙龈成纤维细胞,荧光显微镜观察绿色荧光的表达,RT-PCR方法检测其基因的表达。结果:构建的pEGFP-N1/hIL-1ra真核表达载体经PCR及双酶切鉴定均表明人IL-1ra基因已与pEGFP-N1正确重组。瞬时转染人牙龈成纤维细胞后能观察到绿色荧光,RT-PCR可得到目的片段。结论:成功构建了重组质粒pEGFP-N1/hIL-1ra,瞬时转染人牙龈成纤维细胞后检测到其基因水平的表达,为炎性细胞因子拮抗剂基因用于牙周炎抗炎治疗奠定了实验基础。 展开更多
关键词 重组人白细胞介素1受体拮抗剂 真核表达载体 瞬时转染 人牙龈成纤维细胞
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Satb2和Cbfα1基因在人牙龈成纤维细胞中的表达 被引量:1
9
作者 吕春旭 陈晓霞 +1 位作者 张瑾 孙钦峰 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2012年第10期561-564,共4页
目的:观察Satb2和Cbfα1在人牙龈成纤维细胞(HGFs)中的表达,为进一步研究二者在牙周组织再生中的作用奠定基础。方法:体外组织块法培养HGFs,并观察其形态和生长方式;同时采用RT-PCR和Western blot方法检测HGFs中Satb2和Cbfα1的表达。结... 目的:观察Satb2和Cbfα1在人牙龈成纤维细胞(HGFs)中的表达,为进一步研究二者在牙周组织再生中的作用奠定基础。方法:体外组织块法培养HGFs,并观察其形态和生长方式;同时采用RT-PCR和Western blot方法检测HGFs中Satb2和Cbfα1的表达。结果:体外培养的HGFs中hSatb2和hCbfα1 mRNA均呈阳性表达,但在蛋白质水平只检测到hSatb2蛋白的表达。结论:Satb2和Cbfα1在HGFs中有不同程度的表达,但能否作为刺激HGFs骨向分化的有效生长因子尚需进一步研究。 展开更多
关键词 Satb2 Cbfα1 人牙龈成纤维细胞
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全冠修复材料对人牙龈成纤维细胞的毒性 被引量:5
10
作者 马红 刘梅 +1 位作者 章非敏 王娟 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2008年第5期510-514,共5页
目的:观察镍铬合金、金合金、铸造陶瓷对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGFC)的毒性。方法:制备镍铬合金、金合金、铸造陶瓷的细胞培养基浸提液,采用四唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT法)... 目的:观察镍铬合金、金合金、铸造陶瓷对人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast cells,HGFC)的毒性。方法:制备镍铬合金、金合金、铸造陶瓷的细胞培养基浸提液,采用四唑盐比色分析法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT法)测定材料对HGFC生长的影响;在材料周围接种HGFC,观察细胞的生长情况。采用Stata9.1软件对实验结果进行析因分析。结果:金合金的细胞相对增殖率为1.016、1.014、0.824、0.796,镍铬合金的细胞相对增殖率为1.028、1.079、0.903、0.809,铸造陶瓷的细胞相对增殖率为1.018、1.030、0.924、0.818。金合金和镍铬合金对细胞相对增殖率的影响有统计学差异(P=0.021),但金合金与铸造陶瓷、镍铬合金与铸造陶瓷之间无统计学差异(P>0.05)。金合金、镍铬合金和铸造陶瓷的细胞毒性级别(cytotoxical grade,CG)为0-1级。倒置显微镜观察3种材料周围均有细胞生长,镍铬合金周围有细胞坏死带产生。结论:镍铬合金与HGFC直接接触引起的细胞损伤比析出的金属离子对细胞损伤大。金合金和铸造陶瓷具有良好的生物相容性。 展开更多
关键词 人牙龈成纤维细胞 四唑盐比色分析法 镍铬合金 金合金 铸造陶瓷
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20~40nm银的体外生物安全性研究 被引量:3
11
作者 刘玉 尹伟 史春 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期120-122,共3页
目的:本课题组之前的实验结果提示纳米银具有强有力的杀菌作用,本实验将探讨纳米银的体外生物安全性。方法:将人牙龈成纤维细胞与0.1%、0.5%、1.0%、1.5%和2%的纳米银-PLGA载体共同培养一定的时间,利用MTT法检测人牙龈成纤维细胞的增... 目的:本课题组之前的实验结果提示纳米银具有强有力的杀菌作用,本实验将探讨纳米银的体外生物安全性。方法:将人牙龈成纤维细胞与0.1%、0.5%、1.0%、1.5%和2%的纳米银-PLGA载体共同培养一定的时间,利用MTT法检测人牙龈成纤维细胞的增殖情况,并在骨向诱导培养基条件下分析人牙龈成纤维细胞碱性磷酸酶活性。结果:与对照组相比,人牙龈成纤维细胞的增殖情况在不同浓度的纳米银-PLGA组未出现明显减少,各组间也无明显差异。在骨向诱导培养条件下,人牙龈成纤维细胞表现出一定碱性磷酸酶活性,并且该活性未收到各浓度纳米银的影响。结论:本研究所采用的20~40nm银对人牙龈成纤维细胞具有良好的体外生物安全性。 展开更多
关键词 20~40纳米纳米银 人牙龈成纤维细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶 生物安全性
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卡波济肉瘤相关疱疹病毒体外感染人牙龈成纤维细胞初探 被引量:1
12
作者 吴婴南 倪杰 +2 位作者 卢春 秦娣 朱玲 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期138-142,共5页
目的:探索卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)体外感染人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast,HGF)的途径和方法,为研究KSHV导致口腔卡波济肉瘤病变的机制提供依据。方法:用12-O-十四烷... 目的:探索卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)体外感染人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast,HGF)的途径和方法,为研究KSHV导致口腔卡波济肉瘤病变的机制提供依据。方法:用12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酯(12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate,TPA)刺激人原发性渗出性淋巴瘤(primary effusion lymphoma,PEL)细胞系的BC-3细胞,收集细胞上清(含KSHV病毒颗粒),感染HGF细胞。观察细胞病变效应(cytopatric effect,CPE),采用RT-PCR和Western blot分别检测HGF细胞内KSHV编码基因的转录情况和蛋白表达水平。结果:KSHV感染HGF细胞后可出现CPE;感染后采用RT-PCR可检测到不同时间点ORF26和ORF73基因的转录;感染后12 h可检测到vIL-6蛋白的表达。结论:KSHV可感染HGF细胞并建立潜伏感染,为进一步研究KSHV导致的口腔KS发病机制提供了较好的体外模型。 展开更多
关键词 口腔卡波济肉瘤 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 人牙龈成纤维细胞 感染
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重组质粒pcDNA3/sIL-1R(Ⅰ)转染牙龈成纤维细胞的瞬时表达检测
13
作者 徐艳 章锦才 +1 位作者 张蕴惠 刘怡 《广东牙病防治》 2004年第4期243-245,i001,共4页
目的 检测以sIL 1R胞外成熟肽编码区基因作为目的基因构建的重组质粒pcDNA3/sIL 1R(Ⅰ )对人牙龈成纤维细胞的转染效率及瞬时表达量 ,为pcDNA3/sIL 1R(Ⅰ )导入动物牙龈组织提供依据。方法 人牙龈成纤维细胞体外原代培养并传代 ,重组... 目的 检测以sIL 1R胞外成熟肽编码区基因作为目的基因构建的重组质粒pcDNA3/sIL 1R(Ⅰ )对人牙龈成纤维细胞的转染效率及瞬时表达量 ,为pcDNA3/sIL 1R(Ⅰ )导入动物牙龈组织提供依据。方法 人牙龈成纤维细胞体外原代培养并传代 ,重组质粒用脂质体包裹介导进行体外转染。ELISA法对重组质粒在人牙龈成纤维细胞的表达产物进行含量检测。结果 sIL 1R(Ⅰ )在基因转染 2 4h内开始表达 ,72h最高 ,转染组细胞培养液和细胞冻融液中sIL 1R表达量均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,1周后表达逐渐减弱 ,2周后仍有少量表达。结论 通过脂质体介导的基因转染方法 ,重组质粒pcDNA3/sIL 1R(Ⅰ )在人牙龈成纤维细胞系中具有表达功能 。 展开更多
关键词 IL-1 人牙龈成纤维细胞 重组质粒 PCDNA3 基因转染 瞬时表达 脂质体介导 进行体 表达功能 导入
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