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基于SCI数据库的人类胚胎干细胞文献计量分析 被引量:14
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作者 孙启贵 郑泉 《中国科技论坛》 CSSCI 北大核心 2010年第7期156-160,共5页
生命科学是21世纪最令人瞩目的研究领域,其中的人类胚胎干细胞研究是生命科学领域里最前沿课题之一。本文通过对1975—2008年被Web of Science收录的人类胚胎干细胞研究文献进行计量学分析,总结概括目前研究的状况和前沿,并结合中国与... 生命科学是21世纪最令人瞩目的研究领域,其中的人类胚胎干细胞研究是生命科学领域里最前沿课题之一。本文通过对1975—2008年被Web of Science收录的人类胚胎干细胞研究文献进行计量学分析,总结概括目前研究的状况和前沿,并结合中国与发达国家的对比分析,为中国深入研究人类胚胎干细胞提供可供借鉴的参考建议。 展开更多
关键词 人类胚胎干细胞 科学引文索引 文献计量分析 分布
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利用Histcite的人胚胎干细胞引文编年图主要路径分析 被引量:11
2
作者 董立平 郭继军 《医学信息学杂志》 CAS 2010年第11期38-40,49,共4页
采用可视化软件Histcite对人胚胎干细胞文献生成可视化引文编年图,将其生成的矩阵导入Histcite描述该领域研究的主要路径,揭示其发展历程,即胚胎干细胞的来源、培养、诱导与分化、多能性的维持。
关键词 HISTCITE 引文编年图 主要路径 人胚胎干细胞
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对我国人胚胎干细胞专利法律保护的思考 被引量:9
3
作者 唐华东 王大鹏 《知识产权》 CSSCI 北大核心 2013年第5期52-57,共6页
世界上主要国家和地区对人胚胎干细胞相关专利申请的审查政策和审查标准存在很大不同,以美国为代表的一些国家实行宽松的专利授权标准,以欧洲和中国为代表的一些国家和地区实行伦理道德审查,对人胚胎干细胞相关主题排除在专利授权之外... 世界上主要国家和地区对人胚胎干细胞相关专利申请的审查政策和审查标准存在很大不同,以美国为代表的一些国家实行宽松的专利授权标准,以欧洲和中国为代表的一些国家和地区实行伦理道德审查,对人胚胎干细胞相关主题排除在专利授权之外。通过与美国、欧洲、日本等国家和地区的专利保护情况进行典型案例对比分析,试图对于我国人胚胎干细胞专利法律保护提出一些理解和建议。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 伦理 专利 审查
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人胚胎干细胞和分化细胞差别基因的筛选 被引量:4
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作者 杜娟 林戈 卢光琇 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期956-962,共7页
人类胚胎干细胞 (humanembryonicstemcell,hESC)在增殖过程中如何保持未分化状态是干细胞生物学的核心问题之一 ,已有的LIF通路、Oct 4因子及Nanog基因的作用还不能对这一问题做出全面的解释。为进一步了解维持hESC未分化状态的机制 ,... 人类胚胎干细胞 (humanembryonicstemcell,hESC)在增殖过程中如何保持未分化状态是干细胞生物学的核心问题之一 ,已有的LIF通路、Oct 4因子及Nanog基因的作用还不能对这一问题做出全面的解释。为进一步了解维持hESC未分化状态的机制 ,采用自行建立培养的hESC及分化的hESC细胞克隆 (differentiatedhESC ,dhESC) ,应用抑制消减杂交 (SuppressionSubtractiveHybridization ,SSH)结合反向cDNA斑点杂交技术 ,筛选出在hESC高表达、在dhESC中低表达或不表达的表达序列标签 (ExpressedSequenceTag,EST)共 10 5个。通过与GenBank比较 ,显示其中76个EST代表 6 1个已知基因 ,18个EST代表 15个假想基因 ,另有 11个属于未知EST。选取其中 8个克隆进行半定量RT PCR分析 ,证实其中 7个克隆在hESC中高表达 ,在dhESC中低表达或不表达。结果表明 ,hESC分化前后涉及多个基因的差异表达 ,对这些在hESC中高表达、在dhESC中低表达或不表达基因的进一步功能研究为阐明维持hESC未分化状态的机制提供了基础。 展开更多
关键词 人类 胚胎干细胞 分化细胞 反向cDNA斑点杂交技术 表达序列标签 差别基因
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人胚胎干细胞向生殖细胞分化的研究进展 被引量:5
5
作者 郭新 蔡志明 桂耀庭 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期17-21,共5页
小鼠胚胎干细胞体外已成功诱导分化为配子细胞,人胚胎干细胞理论上也具备分化为生殖细胞的潜能。本文从影响人胚胎干细胞体外向生殖系分化的基因调控和干细胞小生境(niche)方面进行综述,并指出胚胎干细胞在生殖医学及不孕治疗中的研究... 小鼠胚胎干细胞体外已成功诱导分化为配子细胞,人胚胎干细胞理论上也具备分化为生殖细胞的潜能。本文从影响人胚胎干细胞体外向生殖系分化的基因调控和干细胞小生境(niche)方面进行综述,并指出胚胎干细胞在生殖医学及不孕治疗中的研究方向和应用前景。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 生殖细胞 小生境 基因
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慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞及其培养 被引量:6
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作者 李宁 朱宝长 +4 位作者 朱宛宛 王淑艳 任萍 关云谦 张愚 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第10期1083-1087,共5页
目的稳定培养人胚胎干细胞,并通过慢病毒载体对其进行绿色荧光蛋白标记。方法利用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层或Matrigel作为基质培养人胚胎干细胞,包装带有GFP序列的慢病毒转染人胚胎干细胞。对转染前后的人胚胎干细胞进行了碱性磷... 目的稳定培养人胚胎干细胞,并通过慢病毒载体对其进行绿色荧光蛋白标记。方法利用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层或Matrigel作为基质培养人胚胎干细胞,包装带有GFP序列的慢病毒转染人胚胎干细胞。对转染前后的人胚胎干细胞进行了碱性磷酸酶和SSEA-3免疫组化鉴定。结果在MEF饲养层和Matrigel上均可培养出呈克隆样生长,表达标志抗原的人胚胎干细胞,经慢病毒转染及抗生素筛选后仍可稳定表达GFP。结论成功地培养了人胚胎干细胞系,并进行了GFP标记。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 绿色荧光蛋白 慢病毒
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人胚胎干细胞定向分化为神经前体细胞 被引量:7
7
作者 李彬 陈洪伟 +4 位作者 胡智兴 谭韬 金立方 王淑芬 季维智 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期311-319,共9页
采用单层贴壁分化的方法在无血清条件下诱导同源饲养层培养的人胚胎干细胞定向分化,得到了高比例的神经前体细胞(97.5±0.83)%(P<0.05)。这些神经前体细胞具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力。在长期的传代培... 采用单层贴壁分化的方法在无血清条件下诱导同源饲养层培养的人胚胎干细胞定向分化,得到了高比例的神经前体细胞(97.5±0.83)%(P<0.05)。这些神经前体细胞具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力。在长期的传代培养中发现,随着培养时间的延长,nestin阳性的神经前体细胞比例下降,同时发育能力也发生了变化。在传代培养的早期,神经前体细胞发育为神经元的比例很高,几乎没有胶质细胞分化出来。随着培养时间的延长,胶质细胞的比例逐渐上升。这与体内神经系统的发育过程非常相似。进一步研究发现具有bHLH(basic helix-loop-helix)结构域的转录因子neurogenein2(Ngn2)和Olig2可能在这一变化中起重要作用。因此,人胚胎干细胞来源的神经前体细胞能够模拟体内神经发育的模式,为在体外研究人的神经发育和再生医学奠定了基础。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 分化 神经前体细胞
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巨噬细胞迁移抑制因子对人胚胎干细胞存活、增殖和分化的影响 被引量:1
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作者 黄婷 郑晓晗 +5 位作者 钟远吉 魏艳召 魏绪芳 曹旭东 冯晓丽 赵振强 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第7期1380-1387,共8页
背景:巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种具有多效性作用的细胞因子,可以在不同类型干细胞中自分泌并且能调控细胞的增殖、分化和迁移。课题组前期研究证实人胚胎干细胞自分泌MIF,且在培养液中浓... 背景:巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种具有多效性作用的细胞因子,可以在不同类型干细胞中自分泌并且能调控细胞的增殖、分化和迁移。课题组前期研究证实人胚胎干细胞自分泌MIF,且在培养液中浓度基本固定。然而,MIF是否参与了人胚胎干细胞的存活、增殖和分化尚不清楚。目的:探究MIF对人胚胎干细胞存活、增殖和分化的作用。方法:(1)培养人胚胎干细胞H9,CCK-8法检测并绘制细胞生长曲线,采用酶联免疫吸附法定量检测培养基中MIF水平。(2)为了明确外源性MIF对人胚胎干细胞存活、增殖的影响,分为:对照组,细胞在干细胞培养基中正常培养;外源性MIF组,在干细胞培养基中分别添加30,100,300 ng/m L的MIF;MIF抑制剂ISO-1组,在干细胞培养基中分别添加2,7,21μmol/L的ISO-1;MIF+ISO-1组,在不同浓度ISO-1组中分别添加100 ng/m L MIF,采用CCK-8法检测上述各组细胞活力。(3)为进一步阐明MIF基因对人胚胎干细胞存活、增殖的影响,采用CRISPRCas9技术构建MIF敲除的H9细胞系,观察建系情况。(4)为了明确高浓度MIF对人胚胎干细胞初步分化是否有影响,在培养基中分别添加100 ng/m L MIF和100 ng/m L CXCR4中和抗体,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-q PCR)、免疫细胞荧光、蛋白质印迹法(Western blot)检测干细胞自我更新因子(KLF4、c-MYC、NANOG、OCT4、SOX2)及分化转录因子(FOXA2、OTX2)的表达水平。结果与结论:(1)人胚胎干细胞H9的对数生长期为3-6 d,正常生长的情况下自分泌MIF水平约为20 ng/m L,与细胞量无关;(2)与对照组相比,添加不同质量浓度MIF对人胚胎干细胞的增殖无影响(P>0.05);ISO-1明显抑制人胚胎干细胞的增殖,ISO-1浓度越大,抑制越明显(P<0.05);ISO-1中添加MIF可以减少ISO-1的抑制作用(P<0.05);(3)RT-q PCR检测MIF基因敲除约50%后,人胚胎干细胞生长活力显著降低并且无法建系成功;(4)� 展开更多
关键词 巨噬细胞迁移抑制因子 人胚胎干细胞 自分泌 存活 分化 CXCR4 KLF4 FOXA2
辅助生殖技术中废弃胚胎继续培养的影响因素分析 被引量:7
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作者 魏丽娜 吴晓云 +2 位作者 朱玉蓉 邱惠麒 刘春玲 《医学研究杂志》 2013年第2期113-116,共4页
目的探讨辅助生殖技术中废弃胚胎继续培养的潜能,为今后利用废弃胚胎建立胚胎干细胞系提供参考。方法将D1观察为无原核(0PN)、单原核(1PN)、多原核(≥3PN)和受精正常(2PN),D3评分为Ⅳ级的胚胎继续培养至囊胚期,观察囊胚形成率。比较年... 目的探讨辅助生殖技术中废弃胚胎继续培养的潜能,为今后利用废弃胚胎建立胚胎干细胞系提供参考。方法将D1观察为无原核(0PN)、单原核(1PN)、多原核(≥3PN)和受精正常(2PN),D3评分为Ⅳ级的胚胎继续培养至囊胚期,观察囊胚形成率。比较年龄、受精方式、不同来源、D3卵裂球细胞数、D3胚胎碎片与囊胚形成率的关系。结果共收集143个取卵周期499个废弃胚胎进行继续培养,形成囊胚105个(21.04%),优质囊胚为24个(22.86%)。年龄、不同来源、D3卵裂球的奇偶性、D2卵裂球的数目各组之间差异不显著(P>0.05);受精方式、D3卵裂球数目、胚胎碎片各组之间差异显著(P<0.05)。结论部分废弃胚胎有继续发育成囊胚的潜能,受精方式、D3卵裂球的数目和胚胎碎片情况可能为囊胚形成的主要影响因素。 展开更多
关键词 废弃胚胎 序贯培养 囊胚 人类胚胎干细胞
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体外产生可移植的人造血干细胞的研究进展 被引量:4
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作者 张庆云 董芳 Hideo Ema 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期320-324,共5页
造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)移植被广泛应用于恶性血液病、非恶性衰竭性血液疾病以及非血液系统疾病(遗传性疾病和某些实体瘤)的治疗,并取得了良好疗效。临床上常用的移植HSC源有骨髓、动员的外周血及脐带血。但是,由于这... 造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)移植被广泛应用于恶性血液病、非恶性衰竭性血液疾病以及非血液系统疾病(遗传性疾病和某些实体瘤)的治疗,并取得了良好疗效。临床上常用的移植HSC源有骨髓、动员的外周血及脐带血。但是,由于这些组织中HSC含量很少,及组织相容性抗原特异的供者稀缺等问题,导致许多病人无法获得足够量的组织相容性匹配的HSC。因此,如何通过体外培养获得满足临床需要的HSC已成为近年来学者们研究的热点问题。目前体外产生HSC的主要来源为人多能干细胞(human pluripotent stem cell,hPSC),包括人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)和人诱导多潜能干细胞(human induced pluripotent stem cell,hiPSC),并且有望成为HSC移植的新来源。虽然有研究首次证实通过iPSC可以在体外产生HSC,但是体外产生HSC的功能特性以及其产生的分子机制的探究仍是一个巨大挑战。本文旨在对近年来体外产生人HSC策略和方法的最新研究进展作一综述,并就其存在的问题及面临的挑战展开讨论。 展开更多
关键词 造血干细胞 体外产生 人多能干细胞 人胚胎干细胞 人诱导多潜能干细胞
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Applications of stem cells and bioprinting for potential treatment of diabetes 被引量:2
11
作者 Shweta Anil Kumar Monica Delgado +1 位作者 Victor E Mendez Binata Joddar 《World Journal of Stem Cells》 SCIE CAS 2019年第1期13-32,共20页
Currently, there does not exist a strategy that can reduce diabetes and scientists are working towards a cure and innovative approaches by employing stem cellbased therapies. On the other hand, bioprinting technology ... Currently, there does not exist a strategy that can reduce diabetes and scientists are working towards a cure and innovative approaches by employing stem cellbased therapies. On the other hand, bioprinting technology is a novel therapeutic approach that aims to replace the diseased or lost β-cells, insulin-secreting cells in the pancreas, which can potentially regenerate damaged organs such as the pancreas. Stem cells have the ability to differentiate into various cell lines including insulinproducing cells. However, there are still barriers that hamper the successful differentiation of stem cells into β-cells. In this review, we focus on the potential applications of stem cell research and bioprinting that may be targeted towards replacing the β-cells in the pancreas and may offer approaches towards treatment of diabetes. This review emphasizes on the applicability of employing both stem cells and other cells in 3 D bioprinting to generate substitutes for diseased β-cells and recover lost pancreatic functions. The article then proceeds to discuss the overall research done in the field of stem cell-based bioprinting and provides future directions for improving the same for potential applications in diabetic research. 展开更多
关键词 BIOPRINTING Tissue engineering PLURIPOTENT stem cellS Mesenchymal stem cellS human embryonic stem Adult human liver cellS β-cells Islet cellS Biomaterials Bioink stem cell DIABETES
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人胚胎干细胞培养及其cDNA文库的构建 被引量:5
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作者 周素芳 Angela M Eastham Peter L Stern 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第17期2049-2053,共5页
目的构建人胚胎干细胞cDNA文库,为筛查疾病抗原基因奠定基础。方法培养和收集人胚胎干细胞克隆,提取胚胎干细胞总RNA,分离纯化mRNA,利用mRNA作模板反转录合成双链cDNA,双链DNA经pfu-DNA聚合酶将链末端补平,与EcoRⅠ接头连接,XhoⅠ酶切... 目的构建人胚胎干细胞cDNA文库,为筛查疾病抗原基因奠定基础。方法培养和收集人胚胎干细胞克隆,提取胚胎干细胞总RNA,分离纯化mRNA,利用mRNA作模板反转录合成双链cDNA,双链DNA经pfu-DNA聚合酶将链末端补平,与EcoRⅠ接头连接,XhoⅠ酶切消化产生粘端。用Sepharose CL2B柱分离纯化及除去小分子cDNA片段,与Uni-ZAP XR噬菌体连接,体外转化XL1-blue MRF'菌,建成cDNA文库并计算重组效率。对cDNA文库进行扩增,测定扩增文库的滴度。阳性重组子用EcoRⅠ+XhoⅠ双酶切鉴定插入片段的大小。结果构建成含1.2×106重组子的人胚胎干细胞cDNA文库,重组子插入外源DNA片段长度不小于1000kb。结论已成功构建人胚胎干细胞cDNA文库,适合用于筛选目的基因克隆。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 CDNA文库 分子克隆
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人胚胎干细胞发明的可专利性探讨 被引量:6
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作者 吴秀云 潘荣华 《科技管理研究》 CSSCI 北大核心 2015年第6期128-133,共6页
生物技术的迅速发展给专利法律制度带来新的挑战,人胚胎干细胞研究有巨大的治疗价值,但对其研究成果能否获得专利保护存在伦理道德和公共利益方面的争议。目前世界上不同国家和地区对人胚胎干细胞研究采取了不同的法律政策,就我国而言,... 生物技术的迅速发展给专利法律制度带来新的挑战,人胚胎干细胞研究有巨大的治疗价值,但对其研究成果能否获得专利保护存在伦理道德和公共利益方面的争议。目前世界上不同国家和地区对人胚胎干细胞研究采取了不同的法律政策,就我国而言,采取严格排除专利授予原则,不利于科学研究的发展和社会公共健康利益,因而应适当放宽人胚胎干细胞相关发明的专利授予条件。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 伦理道德 公共利益 专利
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对人类胚胎干细胞来源的伦理审视 被引量:4
14
作者 张新庆 樊春良 陈琦 《中国医学伦理学》 2007年第6期56-58,共3页
伦理审查的重点之一:胚胎干细胞的来源是否符合了伦理要求,2003年出台的《人胚胎干细胞研究的伦理指导原则》没有提供可操作的审查要求。结合我国国情,审视了人胚胎干细胞来源中若干伦理问题,并提出了四点审查要点:①在目前的情况下,&qu... 伦理审查的重点之一:胚胎干细胞的来源是否符合了伦理要求,2003年出台的《人胚胎干细胞研究的伦理指导原则》没有提供可操作的审查要求。结合我国国情,审视了人胚胎干细胞来源中若干伦理问题,并提出了四点审查要点:①在目前的情况下,"冷冻的多余的胚胎"可以作为胚胎干细胞研究的主要来源,但研究者不可过度依赖多余的胚胎;②在接受自愿捐献的卵子时,研究者要实现对捐卵者的伤害最低化,不得采取胁迫、引诱的方式获取卵子;③在使用"流产胎儿"时,要获得孕妇或家庭的知情同意,不可为获得一个研究用的流产胎儿,而让一个妇女先怀孕。④为达治疗性克隆研究之目的,研究者可以通过体细胞核移植技术制造胚胎干细胞,但研究中胚胎要在14天内销毁。 展开更多
关键词 人类 胚胎干细胞 伦理审查
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荧光素酶标记转基因人胚胎干细胞的活体观察 被引量:6
15
作者 蔡柳洪 周灿权 张滨 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期174-178,共5页
【目的】研究荧光素酶作为报告基因在活体定量和定位监测转基因人胚胎干细胞移植的动向的可行性。【方法】酶切pGL3 base质粒获得荧光素酶基因,酶切LTBR-uGIP获得载体骨架,连接荧光素酶基因和载体骨架构建慢病毒载体pULP,按照常规方法... 【目的】研究荧光素酶作为报告基因在活体定量和定位监测转基因人胚胎干细胞移植的动向的可行性。【方法】酶切pGL3 base质粒获得荧光素酶基因,酶切LTBR-uGIP获得载体骨架,连接荧光素酶基因和载体骨架构建慢病毒载体pULP,按照常规方法包装和扩增。ULP转导293T细胞以检测其荧光素酶的表达。人胚胎干细胞H9(P40)以W3R细胞为饲养层常规培养,人胚胎干细胞转导iDuet101-IDO(吲哚胺2,3双氧化酶,IDO)或iDuet101-CTLA4Ig(细胞毒性T细胞相关分子4免疫球蛋白,CTLA4Ig),经过筛选后再次转导ULP,即iDuet101-ULP(有荧光素酶表达)、iDuet101-CTLA4Ig-ULP(有荧光素酶和CTLA4Ig表达),iDuet101-IDO-ULP(有荧光素酶和IDO表达)。经过2次转导的3组人胚胎干细胞分别移植于5只BALB/C小鼠(实验组,共15只)和2只RAG-/-γC-/-小鼠(对照组,共6只),在注射后当日、3、5、7、14、21d和28d检测荧光素酶信号。【结果】在体外最少22000个两次转导外源基因的人胚胎干细胞可检测到荧光信号。异种移植只需要5×106的细胞即可检测到荧光信号,iDuet 101-CTLA4Ig-ULP组与iDuet101-IDO-ULP组RAG-/-γC-/-小鼠在移植后荧光信号逐渐增强,观察期间逐渐上升到3×107电子和1.5×107电子,iDuet101-ULP组两只RAG-/-γC-/-小鼠在移植后第7天因伤口感染退出实验。3组BALB/C小鼠在第7天荧光信号消失,直到移植后两个月信号没有恢复。【结论】构建慢病毒载体共表达抗生素抗性基因和目的基因,结合W3R细胞作为饲养层细胞以筛选细胞保证外源基因的表达。在细胞移植免疫缺陷小鼠后,荧光素酶基因可用于活体定量和定位监测转基因人胚胎干细胞移植的动向。 展开更多
关键词 荧光素酶 报告基因 人胚胎干细胞 异种移植 转基因
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解读美国人类胚胎干细胞研究现行法律与政策 被引量:6
16
作者 肇旭 《武汉科技大学学报(社会科学版)》 2010年第5期43-47,共5页
2009年3月9日,美国总统奥巴马在白宫签署行政命令,宣布将解禁联邦基金对胚胎干细胞研究的资助限制。美国的胚胎干细胞研究走过了克林顿、布什两届政府,正式进入了奥巴马时代。通过对美国胚胎干细胞研究法律与政策的历史回顾,解读了现行... 2009年3月9日,美国总统奥巴马在白宫签署行政命令,宣布将解禁联邦基金对胚胎干细胞研究的资助限制。美国的胚胎干细胞研究走过了克林顿、布什两届政府,正式进入了奥巴马时代。通过对美国胚胎干细胞研究法律与政策的历史回顾,解读了现行法律与政策及对该项研究的影响。笔者认为,奥巴马秉持的"政治不干预科学"的政治立场对人类胚胎干细胞研究有良好的促进作用,但由于Dicky修正案及专利体系的影响,目前该项研究的前景依然不明朗。 展开更多
关键词 美国 人类胚胎干细胞 现行法律与政策
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一种新的人胚胎干细胞自身来源的滋养层支持其体外培养 被引量:4
17
作者 安世民 曾桥 +8 位作者 滕祥云 龙志高 李娟 潘乾 邬玲仟 梁德生 夏昆 夏家辉 张灼华 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1567-1573,共7页
通过人胚胎干细胞(Human embryonic stemcells,hESCs)经体内分化获取间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)为人胚胎干细胞提供一种新的滋养层。将约5×106个hESCs注射入重症免疫联合缺陷小鼠形成畸胎瘤,8周后再从畸胎瘤中分离... 通过人胚胎干细胞(Human embryonic stemcells,hESCs)经体内分化获取间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)为人胚胎干细胞提供一种新的滋养层。将约5×106个hESCs注射入重症免疫联合缺陷小鼠形成畸胎瘤,8周后再从畸胎瘤中分离MSCs并鉴定,将MSCs作为hESCs的滋养层细胞,并检测和观察hESCs的生长情况、细胞特性和分化能力。从畸胎瘤中获得了纯度较高的具有类似骨髓来源的MSC特性的细胞群,其形态相似、表面抗原标志相似(CD34和CD45阴性,CD29、CD49b、CD105、CD73和CD90阳性),经诱导可以向成骨细胞和成脂细胞分化。将hESCs在MSCs滋养层细胞上传代培养10代以上,hESCs依然具有正常的细胞形态,反转录PCR证实其特异转录因子Oct4、Nanog的表达,干细胞表面标记SSEA-1显示为阴性,SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81显示为阳性,碱性磷酸酶染色显示为阳性,并且核型正常。体外EB形成和体内畸胎瘤形成证明了其全能性。因此来源于hESCs本身的MSCs可以被用来作为支持胚胎干细胞生长并维持其未分化状态的滋养层细胞。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 间充质干细胞 滋养层
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Neural precursors derived from human embryonic stem cells 被引量:2
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作者 Peng Hongmei 1,2 & Chen Gui’an 1 1. Department of Obstetrics and Gynecology, Peking University Third Hospital, Beijing 100083, China 2. Department of Obstetrics and Gynecology, General Hospital of PLA, Beijing 100853, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2005年第3期295-299,共5页
Human embryonic stem (hES) cells provide a promising supply of specific cell types for transplantation therapy. We presented here the method to induce differentiation of purified neural precursors from hES cells. hES ... Human embryonic stem (hES) cells provide a promising supply of specific cell types for transplantation therapy. We presented here the method to induce differentiation of purified neural precursors from hES cells. hES cells (Line PKU-1 and Line PKU-2) were cultured in sus- pension in bacteriological Petri dishes, which differentiated into cystic embryoid bodies (EBs). The EBs were then cultured in N2 medium containing bFGF in poly-L-lysine-coated tissue culture dishes for two weeks. The central, small cells with 2―3 short processes of the spreading out- growth were isolated mechanically and replated. The resulting neurospheres were cultured in suspension for 10 days, then dissociated into single cell suspension with a Pasteur pipette and plated. Cells grew vigorously in an attached way and were passed every 4―5 days. Almost all the cells were proved nestin positive by immunostaining. Following withdrawal of bFGF, they differentiated into neurons expressing β-tubulin isotypeIII, GABA, serotonin and synaptophysin. Through induction of PDGF-AA, they differentiated into astrocytes expressing GFAP and oli- godendrocytes expressing O4. The results showed that hES cells can differentiate into typical neural precursors expressing the specific marker nestin and capable of generating all three cell types of the central nervous system (CNS) in vitro. 展开更多
关键词 human embryonic stem cell differentiation NEURAL precursor.
原文传递
Developments in cell culture systems for human pluripotent stem cells 被引量:1
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作者 Weiwei Liu Chunhao Deng +2 位作者 Carlos Godoy-Parejo Yumeng Zhang Guokai Chen 《World Journal of Stem Cells》 SCIE 2019年第11期968-981,共14页
Human pluripotent stem cells(hPSCs)are important resources for cell-based therapies and pharmaceutical applications.In order to realize the potential of hPSCs,it is critical to develop suitable technologies required f... Human pluripotent stem cells(hPSCs)are important resources for cell-based therapies and pharmaceutical applications.In order to realize the potential of hPSCs,it is critical to develop suitable technologies required for specific applications.Most hPSC technologies depend on cell culture,and are critically influenced by culture medium composition,extracellular matrices,handling methods,and culture platforms.This review summarizes the major technological advances in hPSC culture,and highlights the opportunities and challenges in future therapeutic applications. 展开更多
关键词 human pluripotent stem cellS human embryonic stem cellS cell CULTURE CULTURE medium stem cell niche Signal transduction EMBRYOID bodies
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人类胚胎干细胞特异表达新基因HPESCRG1的克隆和特性分析 被引量:4
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作者 杜娟 林戈 +1 位作者 乜照燕 卢光琇 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第6期542-547,共6页
目的克隆一个人类胚胎干细胞特异表达的新基因并对其特性进行分析。方法从一个在人类胚胎干细胞(embryonicstem,ES)中特异表达的表达序列标签CF948547出发,应用生物信息学方法和分子生物学技术克隆一个新基因,采用逆转录-聚合酶链反应... 目的克隆一个人类胚胎干细胞特异表达的新基因并对其特性进行分析。方法从一个在人类胚胎干细胞(embryonicstem,ES)中特异表达的表达序列标签CF948547出发,应用生物信息学方法和分子生物学技术克隆一个新基因,采用逆转录-聚合酶链反应分析新基因的表达谱,并应用增强型绿色荧光蛋白真核表达系统分析新基因的亚细胞定位。结果成功克隆了一个新基因HPESCRG1,GenBank登录号为AY283672。该基因cDNA长1395bp,包含9个外显子和8个内含子,开放阅读框为250~1146bp,定位在3q13.13,预测编码297个氨基酸,预计分子量为33784,等电点为9.35。其编码蛋白有一个SAP功能域,该蛋白定位在细胞核内。该基因仅在人类ES细胞中表达,而在其分化细胞不表达,在人胚胎成纤维细胞、人间充质干细胞、成人和流产胚胎的多种正常组织中不表达。结论HPESCRG1基因是一个人类ES细胞中表达特异性新基因,很可能与人类ES细胞的自我更新和维持其未分化状态密切相关。 展开更多
关键词 新基因 特异表达 人类胚胎干细胞 克隆 正常组织 类ES细胞 计分 分化细胞 内含子 真核表达系统
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