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辐射诱导辐射耐受鳞癌细胞株的建立及其生物学特性 被引量:16
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作者 骆志国 周福祥 +3 位作者 周云峰 代静 谢丛华 刘诗权 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期208-212,共5页
目的 通过辐射人喉鳞癌细胞株Hep- 2获得辐射耐受细胞株Hep- 2R ,建立一个放射敏感性研究的对比模型。方法 用γ线反复照射Hep- 2细胞,建立辐射耐受细胞Hep- 2R。成克隆实验法测定两株细胞不同剂量照射后的细胞存活分数,拟合细胞存活... 目的 通过辐射人喉鳞癌细胞株Hep- 2获得辐射耐受细胞株Hep- 2R ,建立一个放射敏感性研究的对比模型。方法 用γ线反复照射Hep- 2细胞,建立辐射耐受细胞Hep- 2R。成克隆实验法测定两株细胞不同剂量照射后的细胞存活分数,拟合细胞存活曲线比较两种细胞株的放射生物学参数。光镜、电镜、活细胞计数、染色体分析及流式细胞仪周期分布比较其生物学差异。结果 经7个月辐射诱导得到了一个放射敏感性不同于亲本细胞株的Hep -2R细胞株,并已稳定传30代以上且辐射耐受性能稳定。其SF2 =0 .6 80、D0 =3.2 4Gy、Dq=1.90Gy、N =1.80 ,而Hep 2细胞SF2 =0 .4 15、D0=2 .0 6Gy、Dq=1.0 1Gy、N =1.6 4。Hep -2R细胞形态及染色体数目发生了改变,群体倍增时间较亲本细胞延长。细胞周期分析显示G1期细胞增多,S、G2 期细胞减少。结论 通过辐射诱导可以从Hep -2细胞株得到辐射耐受细胞株Hep -2R ,这种相同背景、不同放射敏感细胞株为进一步研究放射敏感性的分子机制提供了一个良好对比模型。 展开更多
关键词 辐射耐受 辐射诱导 癌细胞株 生物学特性 hep-2细胞株 放射生物学参数 放射敏感性 细胞存活分数 细胞存活曲线 群体倍增时间 细胞周期分析 敏感性研究 生物学差异 流式细胞仪 染色体数目 不同剂量 细胞计数 分布比较 细胞形态
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华蟾素对喉癌细胞株的诱导分化研究 被引量:14
2
作者 韩仲明 苏红星 +3 位作者 张敏燕 孙宝春 张海荣 黄晋生 《中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志》 2004年第5期241-243,共3页
目的 研究华蟾素(Cinobutacini,CIN)对喉癌细胞的诱导分化作用。方法 体外培养喉癌细胞(Hep-2)放射性同位素掺人法检测CIN对Hep-2的生长抑制作用,原位杂交方法检测c-myc(细胞核内癌基因)的表达变化。结果 CIN低浓度在24小时内有促进Hep-... 目的 研究华蟾素(Cinobutacini,CIN)对喉癌细胞的诱导分化作用。方法 体外培养喉癌细胞(Hep-2)放射性同位素掺人法检测CIN对Hep-2的生长抑制作用,原位杂交方法检测c-myc(细胞核内癌基因)的表达变化。结果 CIN低浓度在24小时内有促进Hep-2细胞分裂、增殖并诱导细胞分化作用;高浓度作用72小时则抑制Hep-2细胞生长。H-脱氧胸苷(H-TdR)掺入量检测提示,CIN短时间作用的Hep-2细胞cpm(每分钟脉冲数)值增高,而长时间作用组则cpm值下降。CIN作用48小时后,Hep-2细胞内c-myc蛋白表达较对照组低,但较平阳霉素组高。结论 中药华蟾素在低浓度和时间相对较短时对人喉癌Hep-2细胞具有诱导分化作用,当作用时间超过72小时,则表现为抑制肿瘤细胞生长作用。 展开更多
关键词 CIN 喉癌 hep-2细胞 华蟾素 诱导分化作用 癌细胞株 原位杂交方法 细胞核 细胞分化 生长
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鳞癌细胞株放射敏感性与端粒酶活性及端粒长度变化的关系 被引量:10
3
作者 骆志国 周福祥 +4 位作者 周云峰 谢丛华 代静 潘东风 刘诗权 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期232-235,共4页
目的探索放射抗拒鳞癌细胞株放射敏感性的改变与端粒酶活性、端粒长度变化的关系。方法以人喉鳞癌细胞株Hep2为实验对象,用γ射线反复照射获得具有放射抗拒性细胞株Hep2R,拟合细胞存活曲线比较两种细胞株的放射生物学参数及端粒酶抑制剂... 目的探索放射抗拒鳞癌细胞株放射敏感性的改变与端粒酶活性、端粒长度变化的关系。方法以人喉鳞癌细胞株Hep2为实验对象,用γ射线反复照射获得具有放射抗拒性细胞株Hep2R,拟合细胞存活曲线比较两种细胞株的放射生物学参数及端粒酶抑制剂AZT(azidothymidine,叠氮胸苷)作用后的变化,用TRAP-ELISA法测定端粒酶活性(OD值),Southernblotting法分析端粒平均长度(TRF),比较端粒酶活性、端粒平均长度的变化。结果辐射诱导出一个具有放射抗拒性的Hep-2R细胞株,并已稳定传代培养30代以上且放射抗拒性能稳定,测得其SF2=0.6798、D0=3.24,Hep-2R细胞的端粒酶活性较Hep-2细胞升高(0.982±0.005vs0.604±0.015),端粒长度延长了2倍(11.12kbvs3.76kb),AZT作用后Hep2R细胞株SF2=0.4892、D0=2.51,端粒酶活性下降为0.708±0.011、端粒长度缩短为10.18kb。Hep2细胞对应的参数SF2=0.4148、D0=2.06,AZT作用后Hep2细胞SF2=0.3843、D0=1.81,端粒酶活性下降为0.364±0.003、端粒长度缩短为2.76kb。结论辐射诱导细胞获放射抗拒性后其端粒酶活性升高、端粒平均长度增长,端粒酶抑制剂能通过降低端粒酶活性、缩短端粒长度而对其有增敏效应。 展开更多
关键词 端粒酶活性 放射敏感性 癌细胞株 长度变化 TRAP-ELISA法 hep-2细胞 blotting 端粒酶抑制剂 放射生物学参数 放射抗拒 端粒长度 细胞存活曲线 辐射诱导 实验对象 叠氮胸苷 传代培养 增敏效应 AZT γ射线 OD值 平均 缩短
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喉癌STK15基因表达和染色体不稳定的研究 被引量:6
4
作者 李英慧 李福才 +3 位作者 赵旭 赵震 孙开来 孙兴和 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1048-1051,共4页
为研究喉鳞状细胞癌中STK15基因表达及其与染色体不稳定的相关性 ,提取 5 0例喉鳞状细胞癌及配对癌旁正常组织和人喉鳞状细胞癌Hep - 2细胞系的RNA ,反转录合成cDNA ,以 β -actin为内对照进行PCR扩增 ,用软件分析电泳结果 ,研究喉癌中S... 为研究喉鳞状细胞癌中STK15基因表达及其与染色体不稳定的相关性 ,提取 5 0例喉鳞状细胞癌及配对癌旁正常组织和人喉鳞状细胞癌Hep - 2细胞系的RNA ,反转录合成cDNA ,以 β -actin为内对照进行PCR扩增 ,用软件分析电泳结果 ,研究喉癌中STK15基因表达的水平 ;以Hep - 2细胞系为代表应用常规和高分辨G显带方法进行核型分析。在 5 0例喉癌中 ,癌组织STK15表达高于配对癌旁正常组织的有 34例 ,占 6 8% ,经统计学分析 ,肿瘤组与对照组差异显著 ,Hep - 2细胞系中STK15基因表达高于内对照 β-actin ;Hep - 2细胞系中存在显著的染色体不稳定 :染色体数目变化于 4 3~ 84条之间 ,众数为 6 9~ 74条 ,结构畸变主要表现为 13条标记染色体。本研究首次发现STK15基因在喉癌中表达增高 ,它可能通过中心体异常而引起染色体不稳定 ,在喉癌的发生、发展中发挥一定作用。 展开更多
关键词 喉癌 STK15基因 表达 染色体不稳定 喉鳞状细胞癌 中心体 hep-2细胞
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血卟啉衍生物光动力学疗法体外杀伤人喉癌细胞株Hep-2的实验研究 被引量:4
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作者 韩勇 郑志红 +2 位作者 葛平江 刘子文 张宝泉 《农垦医学》 2002年第1期1-2,共2页
目的 :探讨使用血卟啉衍生物对喉癌细胞进行光动力学治疗的有效照光时间和有效药物使用量。方法 :使用波长 6 30nm的激光照射同血卟啉衍生物共同培养的喉癌Hep - 2细胞株 ,用MTT法评价不同的用药浓度(0 μg、5 μg、10 μg、5 0 μg、10... 目的 :探讨使用血卟啉衍生物对喉癌细胞进行光动力学治疗的有效照光时间和有效药物使用量。方法 :使用波长 6 30nm的激光照射同血卟啉衍生物共同培养的喉癌Hep - 2细胞株 ,用MTT法评价不同的用药浓度(0 μg、5 μg、10 μg、5 0 μg、10 0 μg、2 0 0 μg ml)和不同的光照能量密度 (10J cm2 、2 0J cm2 、30J cm2 、4 0J cm2 、5 0J cm2 )细胞毒的作用。结果 :随着药物浓度的增加细胞的死亡率增加 ,但是在 5 0 μg ml以上增加不明显。随着光密度的增加细胞的死亡率增加 ,在 4 0J cm2 以后死亡率没有明显的增加。结论 :血卟啉衍生物在 6 30nm的激光照射下能够有效的在体外杀伤肿瘤细胞 。 展开更多
关键词 血卟啉衍生物 光化学疗法 hep-2细胞系
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三种细胞在脊髓灰质炎病毒检测中的应用比较 被引量:6
6
作者 常哲 徐瑾 +1 位作者 丰达星 赵升 《中国计划免疫》 2001年第3期132-134,共3页
为了比较在常规应用条件下L2 0B细胞与RD、Hep 2细胞对脊髓灰质炎 (脊灰 )病毒 (PV)的敏感性和选择性 ,同时用 3种细胞检测急性弛缓性麻痹 (AFP)病例 412份粪便标本 ,进行PV分离鉴定及效价测定。结果表明 ,L2 0B细胞对PV更敏感 ,对PV有... 为了比较在常规应用条件下L2 0B细胞与RD、Hep 2细胞对脊髓灰质炎 (脊灰 )病毒 (PV)的敏感性和选择性 ,同时用 3种细胞检测急性弛缓性麻痹 (AFP)病例 412份粪便标本 ,进行PV分离鉴定及效价测定。结果表明 ,L2 0B细胞对PV更敏感 ,对PV有完全的选择性和良好的特异性 ,对同时混有非脊灰肠道病毒 (NPEV)和PV的粪便标本 ,L2 0B细胞能更快地检测出PV ,而RD、Hep 2细胞被NPEV的生长所掩盖。L2 0B细胞的PV检出率 (5 34 % )高于RD(4 6 1% )、Hep 2细胞 (2 6 7% )。L2 0B、RD、Hep 2细胞对PV的敏感性分别为 88%、76 %、44 % ,但 3种细胞对PV都出现了不同程度的漏检。从 2 5株PV效价滴定结果分析 ,3种细胞对PV的滴度均为L2 0B、RD细胞高于Hep 2细胞。表明L2 0B细胞能简化粪便标本PV检测过程。它的应用对PV分离不失为一种便捷、省时、省力、经济和可靠的方法。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒 非脊髓灰质炎肠道病毒 L20B细胞 RD细胞 hep-2细胞 敏感性
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乙醛脱氢酶1作为喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞标志物的实验研究 被引量:6
7
作者 金鑫 赵艳 +2 位作者 钱军 唐洁 詹晓东 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期900-904,共5页
目的探讨乙醛脱氢酶1(ALDH1)在人喉癌Hep-2细胞系中的表达,观察ALDH1高表达细胞的体外生长特性,确定喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞标志物。方法采用荧光细胞化学染色和流式细胞术观察和检测喉癌Hep-2细胞系中的ALDH1的表达。采用流式... 目的探讨乙醛脱氢酶1(ALDH1)在人喉癌Hep-2细胞系中的表达,观察ALDH1高表达细胞的体外生长特性,确定喉癌Hep-2细胞系肿瘤干细胞标志物。方法采用荧光细胞化学染色和流式细胞术观察和检测喉癌Hep-2细胞系中的ALDH1的表达。采用流式分选术分离ALDHI高表达细胞,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察ALDH1不同亚群细胞的体外增殖能力,以流式细胞术检测ALDH1高表达细胞的体外分化能力。采用裸鼠成瘤实验比较不同亚群细胞的成瘤能力。结果喉癌Hep-2细胞系中ALDH1呈不同程度的表达,其中ALDHI高表达细胞占2.9%±0.6%。ALDH1高表达细胞的体外增殖能力高于ALDH1低表达和未分选细胞。在含血清的培养液中,经过6d培养,ALDH1高表达细胞由最初分选后的94.2%±3.8%下降至分选前水平。ALDH1高表达细胞的成瘤能力显著高于其他亚群。结论喉癌Hep-2细胞系中,ALDH1高表达细胞具有很强的体外分化能力、增殖能力和成瘤能力,可以作为Hep-2细胞系肿瘤干细胞的标志物之一。 展开更多
关键词 乙醛脱氢酶1 肿瘤干细胞 喉肿瘤 hep-2细胞系
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靶向FAK的siRNA对喉癌细胞增殖及侵袭能力的抑制作用 被引量:2
8
作者 张潜英 叶琳 +4 位作者 余晓燕 沈娜 邓碧 吴晓松 陈鸿雁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期526-529,共4页
目的运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断喉癌Hep-2细胞株中FAK基因的表达,探讨FAK基因沉默后对Hep-2细胞株产生的影响。方法针对FAK基因,构建2条干扰重组质粒FAK-pGenesil-CH1和FAK-pGen-esil-CH2,1条阴性对照重组质粒FAK-pGen... 目的运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术阻断喉癌Hep-2细胞株中FAK基因的表达,探讨FAK基因沉默后对Hep-2细胞株产生的影响。方法针对FAK基因,构建2条干扰重组质粒FAK-pGenesil-CH1和FAK-pGen-esil-CH2,1条阴性对照重组质粒FAK-pGenesil-HK;在脂质体的介导下转染喉癌Hep-2细胞株,用RT-PCR和Western blot分析FAK mRNA及蛋白的表达;MTT法、流式细胞技术及体外侵袭实验测定干扰重组质粒对Hep-2细胞株的增殖、侵袭能力的影响。结果重组质粒能有效地阻断Hep-2细胞株中FAK基因在mRNA和蛋白水平上的表达(P<0.05);重组质粒转染Hep-2细胞后,细胞增殖抑制率分别为58.34%、52.78%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);干扰组G0~G1期细胞增多,S期细胞数量明显减少(P<0.05);FAK-pGenesil-CH1、FAK-pGenesil-CH2作用Hep-2细胞株48h后,Hep-2细胞穿过Matrigel膜的个数分别为(56.0±6.7)、(51.0±5.1),与阴性对照组(152.0±9.4)、正常对照组(139.0±8.1)比较有统计学差异(P<0.05)。结论干扰重组质粒能有效地抑制转染Hep-2细胞株的FAKmRNA及蛋白的表达,并能抑制Hep-2细胞株的增殖及侵袭能力。 展开更多
关键词 FAK SIRNA hep-2细胞株 增殖 侵袭
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Inhibitory Effects of 5-Aza-2'-Deoxycytidine and Trichostatin A in Combination with p53-Expressing Adenovirus on Human Laryngocarcinoma Cells 被引量:3
9
作者 Ling-yan Jiang Meng Lian +2 位作者 Hong Wang Ju-gao Fang Qi Wang 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第3期232-237,共6页
Objective: To investigate the effects of 5-Aza-2'-deoxycytidine (5-Aza-Cdr) and trichostatin A (TSA) combined with p53-expressing adenovirus (Ad-p53) on Hep-2 cell line in vivo and in vitro, in order to explor... Objective: To investigate the effects of 5-Aza-2'-deoxycytidine (5-Aza-Cdr) and trichostatin A (TSA) combined with p53-expressing adenovirus (Ad-p53) on Hep-2 cell line in vivo and in vitro, in order to explore its possibility in biological treatment of laryngocarcinoma. Methods: Effects of 5-Aza-Cdr and TSA in combination with Ad-p53 on Hep-2 cell line in vivo were determined by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. The effect of drug combination was calculated by Jin's formula. Effects on the cell line in vitro were investigated by establishing the nude mice model. Results: 5-Aza-Cdr and TSA showed inhibitory effects on the proliferation of Hep-2 cells in dose- and time-dependent manner. Ad-p53 can inhibit the growth of Hep-2 cells in vivo and in vitro. However, the combination of epigenetic reagents (5-Aza-Cdr/TSA) and Ad-p53 was less effective than individual use of Ad-p53. 5-Aza-Cdr and Ad-p53 inhibited the growth of transplanted tumors and reduced the volume of tumors, and the tumor volume of Ad-p53 group was significantly smaller than that of the control group (P0.05). Conclusion: Both epigenetic reagents (5-Aza-Cdr/TSA) and Ad-p53 can suppress cell proliferation on Hep-2 in vivo and in vitro and there may be some antagonistic mechanism between Ad-p53 and epigenetic reagents (5-Aza-Cdr/ TSA). 展开更多
关键词 5-Aza-'-deoxycytidine trichostatin A p-expressing adenovirus hep-2cell line
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5-杂氮-2’-脱氧胞苷抑制人喉癌细胞生长机制的研究 被引量:2
10
作者 孔维佳 张松 +2 位作者 韩月臣 张丹 王彦君 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期25-28,共4页
目的观察5-杂氮-2’-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌细胞系生长增殖的影响,探讨其抗肿瘤效应及可能的机制。方法用5- 杂氮-2’-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌细胞系处理后,甲基化特异性PCR(MSP),T-A克隆测序分析死亡相关蛋白激酶(death-associ- ated pr... 目的观察5-杂氮-2’-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌细胞系生长增殖的影响,探讨其抗肿瘤效应及可能的机制。方法用5- 杂氮-2’-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌细胞系处理后,甲基化特异性PCR(MSP),T-A克隆测序分析死亡相关蛋白激酶(death-associ- ated protein kinase,DAPK)基因甲基化状态,逆转录聚合酶链反应、免疫细胞化学、流式细胞仪检测用药前后DAPK mRNA和蛋白的表达情况及细胞凋亡和周期的变化。结果未经5-杂氮-2’-脱氧胞苷处理的Hep-2细胞中DAPK基因CpG岛甲基化,且 DAPK mRNA不表达。经5-杂氮-2’-脱氧胞苷处理后,甲基化的DAPK基因部分去甲基化,大于或等于10-7 mol·L-1组的细胞中有DAPK mRNA表达,且表达随浓度增高而增强。免疫细胞化学染色显示,经处理后的肿瘤细胞DAPK蛋白表达呈阳性,而对照组不表达。流式分析结果为处理后凋亡率明显增加,且G1期细胞增加,G2/M期减少。结论 5-杂氮-2’-脱氧胞苷能抑制喉癌细胞的生长和增殖,可能的机制是其能使因甲基化而失活的DAPK基因再转录,诱导该基因的重新表达。 展开更多
关键词 hep-2细胞系 5-杂氮-2′-脱氧胞苷 死亡相关蛋白激酶 甲基化特异性PCR
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5-杂氮-2'-脱氧胞苷抑制人喉癌裸鼠移植瘤的机制探讨 被引量:3
11
作者 张松 孔维佳 +2 位作者 郭长凯 王彦君 韩月臣 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第21期1212-1215,共4页
目的:探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌裸鼠移植瘤生长的影响,寻找喉癌治疗的新靶点。方法:建立喉癌裸鼠移植瘤模型,用5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理裸鼠,观察移植瘤的生长情况并绘制其生长曲线。用RT-PCR和免疫组织化学技术检测死亡相... 目的:探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷对Hep-2人喉癌裸鼠移植瘤生长的影响,寻找喉癌治疗的新靶点。方法:建立喉癌裸鼠移植瘤模型,用5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理裸鼠,观察移植瘤的生长情况并绘制其生长曲线。用RT-PCR和免疫组织化学技术检测死亡相关蛋白激酶(Death-associatedproteinkinaseDAPK)基因mRNA及蛋白表达的变化。结果:5-杂氮-2′-脱氧胞苷对人喉癌裸鼠移植瘤处理后用药组和对照组之间裸鼠的体重无明显差异(t=0.011,P>0.05),而移植瘤的体积用药组较对照组明显减小,统计学差异有显著性(t=10.11,P<0.01)。在喉癌移植瘤组织中,对照组DAPK均不表达,而用药组出现表达。结论:5-杂氮-2′-脱氧胞苷在体内能使因甲基化而失活的抑癌基因再转录,诱导其表达,进而抑制喉癌移植瘤的生长。 展开更多
关键词 hep-2细胞系 5-杂氮-2′-脱氧胞苷 裸鼠模型 死亡相关蛋白激酶
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pIRES2-EGFP-SyK(L)载体构建及稳定转染喉癌Hep-2细胞株的建立 被引量:3
12
作者 李志海 蔡志毅 +1 位作者 陶宝鸿 金巧智 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第13期2718-2721,共4页
目的构建Syk(L)全长结构基因真核表达载体,建立稳定高表达Syk(L)的喉癌hep-2细胞系。方法化学合成结合PCR拼接SyK(L)基因,插入pMD18-simpleT载体中,测序验证正确后经XhoI和Hind III双酶切,经T4 DNA连接酶,将其与同样双酶切处理pIRES2-E... 目的构建Syk(L)全长结构基因真核表达载体,建立稳定高表达Syk(L)的喉癌hep-2细胞系。方法化学合成结合PCR拼接SyK(L)基因,插入pMD18-simpleT载体中,测序验证正确后经XhoI和Hind III双酶切,经T4 DNA连接酶,将其与同样双酶切处理pIRES2-EGFP载体连接,构成新的重组质粒pIRES2-EGFP-SyK(L),测序验证正确后,以脂质体法转染喉癌Hep-2细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的Hep-2细胞株,用实时荧光定量PCR检测SyK(L)的mRNA表达。结果成功构建了pIRES2-EGFP-SyK(L)真核表达载体;建立了稳定转染pIRES2-EGFPSyK(L)的Hep-2细胞株;实时荧光定量PCR结果表明pIRES2-EGFP-SyK(L)转染Hep-2细胞株中SyK(L)mRNA表达水平明显高于空载体pIRES2-EGFP转染细胞株及空转染细胞株,差别有统计学意义(P<0.01)。结论 pIRES2-EGFP-SyK(L)真核表达载体的构建及稳定高表达SyK(L)喉癌Hep-2细胞株的建立,为进一步研究SyK(L)对喉癌细胞生物功能的影响奠定了良好的实验基础。 展开更多
关键词 脾酪氨酸激酶 真核表达载体 hep-2细胞 基因表达
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紫杉醇对喉癌细胞CK13mRNA表达的影响 被引量:2
13
作者 王承龙 肖健云 +1 位作者 赵素萍 邱元正 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第19期2933-2935,共3页
目的探讨紫杉醇对喉癌细胞Hep-2生长抑制作用;紫杉醇对细胞角蛋白基因13(cytokeratin13,CK13)mRNA表达的影响。方法应用MTT法检测紫杉醇对Hep-2细胞的抑制率;采用半定量RT-PCR法检测紫杉醇作用Hep-2细胞后CK13mRNA的表达。结果紫杉醇在1... 目的探讨紫杉醇对喉癌细胞Hep-2生长抑制作用;紫杉醇对细胞角蛋白基因13(cytokeratin13,CK13)mRNA表达的影响。方法应用MTT法检测紫杉醇对Hep-2细胞的抑制率;采用半定量RT-PCR法检测紫杉醇作用Hep-2细胞后CK13mRNA的表达。结果紫杉醇在10-7mol/L以上浓度时,对Hep-2细胞抑制率大于30%(P<0.01);10-8mol/L以上浓度的紫杉醇可下调CK13mRNA的表达,其作用呈剂量依赖性。结论Hep-2细胞对10-7mol/L以上浓度紫杉醇具有高度敏感性;紫杉醇可能通过抑制CK13mRNA表达从而抑制肿瘤的侵袭及转移。 展开更多
关键词 紫杉醇 喉癌细胞株 CK13mRNA 表达
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TPA处理增强喉鳞状细胞癌细胞株Hep-2细胞的增殖 被引量:1
14
作者 刘巍巍 曾宗渊 肖锡宾 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第17期788-789,共2页
目的:探讨TPA对体外培养的人喉鳞状细胞癌细胞株HEp-2细胞的作用.方法:应用不同浓度TPA处理体外培养的HEp-2细胞,MTT法检测HEp-2细胞的存活比率.结果:HEp-2细胞经TPA处理后其细胞增殖能力呈现峰型,高峰出现在10 μg/L水平上,此时处理细... 目的:探讨TPA对体外培养的人喉鳞状细胞癌细胞株HEp-2细胞的作用.方法:应用不同浓度TPA处理体外培养的HEp-2细胞,MTT法检测HEp-2细胞的存活比率.结果:HEp-2细胞经TPA处理后其细胞增殖能力呈现峰型,高峰出现在10 μg/L水平上,此时处理细胞的增殖能力是对照组的1.3~1.4倍.随着TPA浓度的增高,HEp-2细胞的增殖能力逐渐下降.结论:TPA处理可以增强HEp-2细胞的增殖能力. 展开更多
关键词 TPA 喉肿瘤 hep-2细胞株 细胞增殖
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CD133基因启动子调控增强型绿色荧光蛋白基因在喉癌Hep-2细胞中的表达 被引量:2
15
作者 王晓峰 周翔宇 +3 位作者 张桂珍 王伟 杜珍武 张天夫 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期498-502,I0001,共6页
目的:构建人CD133基因启动子启动加强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因表达载体,观察在喉癌Hep-2细胞系中人CD133基因启动子启动eGFP基因表达能力,为应用CD133基因启动子调控靶向肿瘤干细胞(CSCs)基因治疗奠定实验基础。方法:采用PCR方法从人... 目的:构建人CD133基因启动子启动加强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因表达载体,观察在喉癌Hep-2细胞系中人CD133基因启动子启动eGFP基因表达能力,为应用CD133基因启动子调控靶向肿瘤干细胞(CSCs)基因治疗奠定实验基础。方法:采用PCR方法从人外周血基因组中克隆人CD133基因启动子,通过基因重组技术将人CD133基因启动子克隆入慢病毒基因转移载体pWPXLd-eGFP中,构建人CD133基因启动子启动eGFP基因表达载体,PCR以及酶切鉴定构建载体的正确性。应用脂质体介导该载体转染入Hep-2细胞中,细胞分为空白对照组(未转染质粒)、阳性对照组(转染pWPXLd)和实验组(转染pWPXLd-eGFP-CD133)。应用荧光显微镜观察各组eGFP基因在喉癌Hep-2细胞内的表达。结果:PCR法获得了约1 810bp大小的CD133基因启动子片段;酶切与PCR鉴定,成功构建了人CD133基因启动子启动eGFP基因表达载体。荧光显微镜下,阳性对照组和实验组转染的Hep-2细胞株有eGFP的表达,而空白组对照组的Hep-2细胞内无eGFP的表达。结论:构建的人CD133基因启动子启动eGFP基因表达载体可以调控eGFP基因在喉癌Hep-2细胞内的表达。 展开更多
关键词 CD133启动子 加强型绿色荧光蛋白 肿瘤干细胞 hep-2细胞系
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人喉鳞癌细胞端粒长度与放射敏感性的关系探讨 被引量:1
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作者 肖创映 周福祥 +3 位作者 刘诗权 谢丛华 代静 周云峰 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期193-195,共3页
目的 探讨人喉鳞癌细胞端粒长度与放射敏感性的关系,以寻求能够预测肿瘤细胞内在放射敏感性的分子标志物。方法 体外长期传代的人喉鳞癌细胞系Hep 2 经0、2、4、8、12Gy剂量照射3 次后的存活后代体外培养20代,以克隆形成实验测定其放... 目的 探讨人喉鳞癌细胞端粒长度与放射敏感性的关系,以寻求能够预测肿瘤细胞内在放射敏感性的分子标志物。方法 体外长期传代的人喉鳞癌细胞系Hep 2 经0、2、4、8、12Gy剂量照射3 次后的存活后代体外培养20代,以克隆形成实验测定其放射敏感性参数SF2,用Southern blotting法测定其端粒长度(TRF)。结果 体外长期传代的Hep 2 细胞系随着受照剂量的增加, 其放射存活后代的SF2逐渐升高(P<0.05),其TRF逐渐缩短(P<0.01);而且,SF2与TRF呈现明显的正相关关系(r=0.921,P<0.01)。结论 通过不同放射剂量处理体外长期传代的人喉鳞癌细胞系可获得不同放射敏感性的细胞存活后代,且放射存活后代的放射敏感性与其细胞端粒长度具有较好的负相关关系,提示端粒长度检测有望成为预测肿瘤细胞内在放射敏感性的分子标志物。 展开更多
关键词 hep-2细胞系 端粒长度 内在放射敏感性
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白花蛇舌草对人喉癌细胞凋亡及增殖的影响 被引量:2
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作者 苏芳 魏菁 何龙 《实用中医内科杂志》 2012年第7S期1-2,4,共3页
[目的]研究中药白花蛇舌草(Hedyotis diffusa HD)对人喉癌Hep-2细胞凋亡、周期及增殖的影响,以探讨其在喉癌肿瘤治疗方面的作用机制。[方法]分别用不同浓度的HD作用于体外培养的Hep-2细胞,MTT法检测药物对细胞增殖抑制作用,流式细胞术... [目的]研究中药白花蛇舌草(Hedyotis diffusa HD)对人喉癌Hep-2细胞凋亡、周期及增殖的影响,以探讨其在喉癌肿瘤治疗方面的作用机制。[方法]分别用不同浓度的HD作用于体外培养的Hep-2细胞,MTT法检测药物对细胞增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化。[结果]HD浓度为80mg/mL时,MTT 48h和72h细胞抑制率分别为43.80%和55.00%,与对照组比较有显著性差异(P【0.01);细胞周期结果显示随着药物浓度增加和作用时间延长,G0/G1期细胞减少,S期细胞显著性增加,细胞阻滞在S期;细胞早期凋亡率明显增加,48h和72h凋亡率分别为7.10%和19.47%,与对照组1.49%和2.75%比较结果有显著性差异(P【0.01)。[结论]HD浓度为80mg/mL时对体外培养的Hep-2细胞具有明显增殖抑制作用,使细胞阻滞在S期,并诱导细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 人喉癌hep-2细胞 白花蛇舌草 细胞凋亡 细胞增殖
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喉鳞状细胞癌Hep-2细胞系常规及高分辨染色体分析 被引量:2
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作者 李福才 富伟能 +1 位作者 康宁 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期167-169,共3页
目的 :探讨喉鳞状细胞癌 Hep- 2细胞系染色体畸变及其核型特征 ,认识喉癌的细胞遗传学改变与其发病机制的相关性。方法 :应用常规和高分辨 G显带方法进行核型分析。结果 :Hep- 2细胞系的染色体数目变化于 5 4~ 84条之间 ,众数为 6 9~... 目的 :探讨喉鳞状细胞癌 Hep- 2细胞系染色体畸变及其核型特征 ,认识喉癌的细胞遗传学改变与其发病机制的相关性。方法 :应用常规和高分辨 G显带方法进行核型分析。结果 :Hep- 2细胞系的染色体数目变化于 5 4~ 84条之间 ,众数为 6 9~ 74条。可识别其结构的稳定的标记染色体为 13条 ,部分核型中存在双微体 ,是基因扩增的细胞遗传学标志。结论 :喉癌 Hep- 2细胞系属超三倍体细胞 ,存在染色体数目和结构畸变并具有稳定的标记染色体及基因扩增。结构畸变涉及易位、缺失和等臂染色体。染色体断裂重接导致染色体重排 ,3、5、6和 展开更多
关键词 喉癌 鳞状细胞癌 hep-2细胞系 染色体畸变
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人喉鳞癌细胞端粒长度、端粒酶活性与放射敏感性的关系
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作者 肖创映 周福祥 +3 位作者 刘诗权 谢丛华 代静 周云峰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期653-656,共4页
背景与目的:肿瘤细胞的端粒长度、端粒酶活性与其增殖能力和恶性程度关系密切,而且端粒和端粒酶还可能参与放射诱导的DNA损伤的修复;由此推测肿瘤细胞的端粒长度、端粒酶活性与放射敏感性之间可能存在联系。本研究旨在探讨人喉鳞癌细胞... 背景与目的:肿瘤细胞的端粒长度、端粒酶活性与其增殖能力和恶性程度关系密切,而且端粒和端粒酶还可能参与放射诱导的DNA损伤的修复;由此推测肿瘤细胞的端粒长度、端粒酶活性与放射敏感性之间可能存在联系。本研究旨在探讨人喉鳞癌细胞端粒长度、端粒酶活性与放射敏感性的关系。方法:体外长期传代的人喉鳞癌细胞系Hep鄄2经0、2、4、8、12Gy剂量照射3次后的存活后代体外培养20代,以克隆形成实验测定其放射敏感性参数SF2,Southernblot法测定其端粒长度(meanlengthoftelomererestrictionfragments,TRF),TRAP鄄ELISA法测定其端粒酶活性(telomeraseactivity,TA)。结果:人喉鳞癌细胞不同放射剂量存活后代的SF2:0.47~0.64,TRF:3.76~9.43kb,TA:2.606~1.761,且它们各自的SF2、TRF、TA存在差异(P均<0.05);而且,SF2与TRF呈现明显的正相关(r=0.921,P<0.01),SF2与TA呈现明显的负相关(r=-0.929,P<0.01),TRF与TA呈现明显的负相关(r=-0.944,P<0.01)。结论:人喉鳞癌细胞接受不同放射剂量存活后代的放射敏感性与其端粒长度和端粒酶活性具有一定的相关性,提示端粒长度与端粒酶活性检测对预测肿瘤细胞放射敏感性有一定意义。 展开更多
关键词 喉肿瘤 hep-2细胞系 端粒长度 端粒酶活性 放射敏感性
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Effect of DRB on the Biological Characteristics of Human Laryngeal Carcinoma Hep-2 Cell Line
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作者 王建亭 龚树生 +3 位作者 付勇 薛秋红 陈广理 刘英鹏 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2007年第1期104-106,共3页
In order to study the effect of 5, 6-Dichloro-l-13-D-ribofuranosyl-benzimidazole (DRB) on the biological characteristics of human laryngeal carcinoma Hep-2 cell line in vitro, Hep-2 cells cultured in vitro were trea... In order to study the effect of 5, 6-Dichloro-l-13-D-ribofuranosyl-benzimidazole (DRB) on the biological characteristics of human laryngeal carcinoma Hep-2 cell line in vitro, Hep-2 cells cultured in vitro were treated with different concentrations of DRB. Changes in cell proliferation, apoptotic rate and invasiveness were detected by MTT assay, flow cytometry (FCM) and matrigel in vitro invasion assay, respectively. It was found that DRB inhibited the proliferation of Hep-2 cells in a dose- and time-dependent manner. After being treated with 0, 10, 20, 40, 80 μmmol/L DRB for 24 h, the apoptotic rate in Hep-2 cells was (0.68±0.19)%, (1.95±0.12)%, (8.51±0.26)%, (11.26±0.17)% and (14.99±0.32)%, respectively. The matrigel in vitro invasion assay revealed that DRB began to inhibit the invasion of Hep-2 cells at the concentration of 5 μmmol/L, and with the increase of DRB concentration, the inhibitory effect was enhanced. It was suggested that DRB could influence the essential biological characteristics of Hep-2 cells, inhibit Hep-2 cells proliferation, reduce invasive ability and induce apoptosis of Hep-2 cells. 展开更多
关键词 protein-serine-threonine kinases 5 6-Dichloro-1-β-D-ribofuranosyl- benzimidazole laryngeal neoplasms hep-2 cell line
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