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长春西汀微乳的优化及其理化性质的考察 被引量:24
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作者 李华 潘卫三 +2 位作者 吴振 李嘉煜 夏立新 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期681-685,共5页
目的 选择适宜比例的油相、表面活性剂、助表面活性剂和水相制备长春西汀微乳制剂以增加药物的溶解度和经皮渗透量,优化处方,并对其理化性质和刺激性进行研究。方法 绘制伪三元相图,确定各相的比例,以经皮稳态渗透流量为指标,利用单纯... 目的 选择适宜比例的油相、表面活性剂、助表面活性剂和水相制备长春西汀微乳制剂以增加药物的溶解度和经皮渗透量,优化处方,并对其理化性质和刺激性进行研究。方法 绘制伪三元相图,确定各相的比例,以经皮稳态渗透流量为指标,利用单纯形网格法优化处方,并考察优化微乳的pH、粘度、电导率、折光率、粒径分布等理化性质。采用MTT法考察微乳制剂对人体皮肤细胞系模型Hacat细胞的毒性。结果 O/W微乳在相图中的区域随着表面活性剂和助表面活性剂比例的增加而增加;单纯形网格优化法预测的指标值与实测值相近,所得的优化微乳性质稳定,对Hacat细胞无刺激性,与阴性组无显著性差异。结论 长春西汀微乳制剂中药物的溶解度极大提高,经皮稳态渗透流量显著增大,安全稳定,可作为经皮给药的新型载体。 展开更多
关键词 长春西汀 微乳 经皮给药 单纯形网格法 hacat细胞
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灵芝多糖的抗氧化作用研究 被引量:28
2
作者 殳叶婷 高洁 +4 位作者 彭文潇 李钰 顾薇 董洁 陈军 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期504-508,共5页
目的研究灵芝多糖的抗氧化作用,为灵芝多糖化妆品抗皮肤衰老功效提供科学依据。方法化学方法评价灵芝多糖的总还原能力、羟基自由基和DPPH自由基清除能力;检测灵芝多糖脂质体过氧化进程中过氧化物和丙二醛(MDA)的产量考察其抗脂质体氧... 目的研究灵芝多糖的抗氧化作用,为灵芝多糖化妆品抗皮肤衰老功效提供科学依据。方法化学方法评价灵芝多糖的总还原能力、羟基自由基和DPPH自由基清除能力;检测灵芝多糖脂质体过氧化进程中过氧化物和丙二醛(MDA)的产量考察其抗脂质体氧化能力;体外细胞实验考察灵芝多糖对H2O2诱导氧化损伤的HaCaT细胞的保护作用;在体实验考察自制灵芝多糖乳液对D-半乳糖亚急性小鼠衰老模型皮肤中超氧化物歧化酶(SOD)活力、MDA和羟脯氨酸(Hyp)含量的影响。结果灵芝多糖的还原能力和清除2种自由基能力均呈浓度依赖性,而且它能抑制脂质过氧化物生成,60 h灵芝多糖脂质体产生的过氧化物为空白脂质体的九分之一,MDA产量为空白脂质体的三分之一。灵芝多糖在0.3125~1.25 mg/mL的范围内对H2O2氧化损伤的HaCaT细胞有保护作用(P<0.01),且保护作用随多糖浓度升高而增强。小鼠皮肤涂抹低剂量自制灵芝多糖乳液后,皮肤中SOD活力显著高于模型组(P<0.05);高剂量涂抹时,MDA含量显著下降,Hyp含量显著升高(P<0.05),自制灵芝多糖乳液抗氧化能力略优于市售乳液。结论多层面评价了灵芝多糖的抗氧化活性,初步研制出具有抗衰老功效的灵芝多糖乳液,为灵芝多糖抗衰老化妆品的开发提供研究基础。 展开更多
关键词 灵芝多糖 抗氧化 脂质体 hacat细胞 皮肤衰老
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紫草素对IL-17诱导角质形成细胞增殖及趋化因子表达的影响 被引量:23
3
作者 解欣然 张蕾 +3 位作者 刘欣 林燕 张璐 李萍 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期946-949,共4页
目的:观察紫草素(shikonin)对IL-17诱导人角质形成细胞增殖及其分泌趋化因子的影响,探讨紫草素治疗银屑病的作用机制。方法:采用IL-17A(200μg·L-1)刺激体外培养的Ha Ca T细胞,同时加入不同浓度紫草素(2,1mg·L-1)共同作用24 h... 目的:观察紫草素(shikonin)对IL-17诱导人角质形成细胞增殖及其分泌趋化因子的影响,探讨紫草素治疗银屑病的作用机制。方法:采用IL-17A(200μg·L-1)刺激体外培养的Ha Ca T细胞,同时加入不同浓度紫草素(2,1mg·L-1)共同作用24 h。CCK-8法测定细胞增殖;ELISA法测定细胞分泌炎症因子IL-23;Real-time PCR法测定细胞内趋化因子CXCL1,CXCL2和CCL20以及β-防御素4(β-defensin4,DEFB4)的表达。结果:紫草素2,1 mg·L-1能显著抑制IL-17A诱导的Ha Ca T细胞增殖,具有统计学意义(P<0.01);紫草素各浓度组均能减少IL-23分泌,并对细胞内CXCL1,CXCL2,CCL20和DEFB4的表达有一定的抑制作用。结论:紫草素能抑制IL-17A诱导的Ha Ca T细胞增殖和相关细胞因子的分泌,并可以通过抑制趋化因子募集白细胞,从而达到对银屑病的治疗作用。 展开更多
关键词 紫草素 IL-17 hacat细胞 趋化因子 银屑病
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萜烯类经皮促透剂对皮肤活性表皮层的影响及其机制研究 被引量:21
4
作者 兰颐 王景雁 +4 位作者 刘艳 茹庆国 王逸飞 于竞新 吴清 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期643-648,共6页
该文选择Ha Ca T皮肤角质形成细胞测定萜烯类经皮促透剂对皮肤活性表皮层的影响,探讨其促进药物透皮吸收的作用机制。选择具良好经皮促透效果的萜烯类化合物,即薄荷醇、柠檬烯、1,8-桉树脑、薄荷酮、4-萜品醇和长叶薄荷酮;采用MTT试验... 该文选择Ha Ca T皮肤角质形成细胞测定萜烯类经皮促透剂对皮肤活性表皮层的影响,探讨其促进药物透皮吸收的作用机制。选择具良好经皮促透效果的萜烯类化合物,即薄荷醇、柠檬烯、1,8-桉树脑、薄荷酮、4-萜品醇和长叶薄荷酮;采用MTT试验测定萜烯类经皮促透剂的细胞毒性,利用荧光漂白恢复技术(FRAP)考察不同萜烯类促透剂对细胞膜流动性的影响,采用流式细胞仪测定不同萜烯类促透剂对细胞膜电位的改变,同时考察了萜烯类促透剂对Ha Ca T细胞内Ca2+浓度的影响,采用超微量Ca2+-ATP酶试剂盒测定萜烯促透剂对Ha Ca T细胞内Ca2+-ATP酶活性的影响。实验结果表明,相对于常用化学促透剂氮酮,6种萜烯类促透剂均显示较低细胞毒性;所选择的萜烯类促透剂可显著增加Ha Ca T细胞膜流动性、降低细胞膜电位,同时可降低Ha Ca T细胞Ca2+-ATP酶活性和细胞内Ca2+浓度而影响细胞Ca2+平衡。因此,萜烯类促透剂可能通过改变细胞内Ca2+平衡而影响细胞膜流动性及膜电位,增加皮肤活性表皮流动性而降低皮肤屏障作用,从而利于药物的透皮吸收。 展开更多
关键词 萜烯类促透剂 hacat细胞 细胞膜电位 细胞膜流动性 Ca2+ 经皮促透剂
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扇贝多肽抑制紫外线A波诱导的HaCaT细胞凋亡依赖p38 MAPK通路和caspase-3 被引量:14
5
作者 李金莲 严州萍 +4 位作者 陈雪红 王跃军 孙谧 石宇玺 王春波 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期116-120,共5页
目的从p38促细胞分裂剂激活性蛋白激酶(p38MAPK)通路和半胱天冬酶-3(caspase-3)的角度,研究扇贝多肽(poly-peptidefromChlamysfarreri,PCF)抑制紫外线A波(UVA)引起的HaCaT细胞凋亡的分子机制。方法实验分为6组:对照组、UVA模型组、UVA+5... 目的从p38促细胞分裂剂激活性蛋白激酶(p38MAPK)通路和半胱天冬酶-3(caspase-3)的角度,研究扇贝多肽(poly-peptidefromChlamysfarreri,PCF)抑制紫外线A波(UVA)引起的HaCaT细胞凋亡的分子机制。方法实验分为6组:对照组、UVA模型组、UVA+5.68mmol.L-1维生素C阳性对照组、UVA+5.69mmol.L-1PCF组、UVA+2.84mmol.L-1PCF组、UVA+1.42mmol.L-1PCF组。以正交实验设计确立UVA诱导HaCaT细胞凋亡模型;琼脂糖凝胶电泳分析PCF、p38MAPK抑制剂(SB203580)及caspase-3特异性抑制剂(Ac-DEVD-CHO)对细胞凋亡的影响;蛋白质印迹法检测p38MAPK及磷酸化p38MAPK表达;流式细胞术检测caspase-3的活性。结果PCF能明显抑制UVA引起的HaCaT细胞凋亡;SB203580和Ac-DEVD-CHO对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡有抑制作用;1.425.69mmol.L-1内的PCF可剂量依赖性抑制UVA引起的p38MAPK磷酸化及caspase-3的活化。结论PCF可抑制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡,其作用机制与抑制p38MAPK通路和caspase-3活性有关。 展开更多
关键词 扇贝多肽 紫外线A波 细胞分裂剂激活性蛋白激酶 半胱天冬酶-3 凋亡 hacat细胞
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杜仲对紫外线诱导的人皮肤角质形成细胞光老化模型的影响 被引量:17
6
作者 张宁 陈巧云 +1 位作者 徐艳明 李健民 《中医药信息》 2010年第1期31-33,共3页
目的:考查杜仲乙醇提取物对人皮肤角质形成细胞光老化模型的影响,探讨杜仲抗皮肤衰老的作用和机理。方法:UVB照射HaCaT细胞建立光老化细胞模型,用不同浓度的杜仲乙醇提取物进行干预,以倒置显微镜观察细胞形态,使用MTT法检测细胞活性,以... 目的:考查杜仲乙醇提取物对人皮肤角质形成细胞光老化模型的影响,探讨杜仲抗皮肤衰老的作用和机理。方法:UVB照射HaCaT细胞建立光老化细胞模型,用不同浓度的杜仲乙醇提取物进行干预,以倒置显微镜观察细胞形态,使用MTT法检测细胞活性,以细胞培养液中LDH活性为指标评价细胞膜的损伤程度。结果:UVB照射后明显引发HaCaT细胞光老化反应,经50μg.mL-1和100μg.mL-1杜仲乙醇提取物干预后,细胞形态发生改善,细胞活性显著提高,分别为63.52%(P<0.01)和62.53%(P<0.05),培养液中LDH活性显著下降,分别为2547U.L-1(P<0.01)和(2665±87.73)U.L-1(P<0.05)。结论:杜仲乙醇提取物可以减轻UVB诱导HaCaT细胞的光损伤,最佳作用浓度为50μg.mL-1,作用机制可能与其能够清除氧自由基、提高细胞活性、保护细胞膜免受损伤而降低LDH的泄漏有关。杜仲具有抗皮肤衰老的潜力。 展开更多
关键词 杜仲 光老化 hacat细胞 紫外线
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丹皮酚通过STAT3通路抑制IL-17A诱导的角质形成细胞活性和细胞因子分泌 被引量:16
7
作者 解欣然 张蕾 +2 位作者 刘欣 林燕 李萍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1854-1859,共6页
目的:观察丹皮酚对白细胞介素17A(IL-17A)诱导的人角质形成细胞活性、细胞因子分泌及相关信号转导通路的影响。方法:采用IL-17A(200μg/L)刺激体外培养的HaCaT细胞,同时加入不同浓度(200 mg/L和100 mg/L)丹皮酚共同培养24 h。采用CCK-8... 目的:观察丹皮酚对白细胞介素17A(IL-17A)诱导的人角质形成细胞活性、细胞因子分泌及相关信号转导通路的影响。方法:采用IL-17A(200μg/L)刺激体外培养的HaCaT细胞,同时加入不同浓度(200 mg/L和100 mg/L)丹皮酚共同培养24 h。采用CCK-8法测定细胞的活力;CBA法测定Th1/Th2/Th17类炎症细胞因子的变化;ELISA法测定炎症细胞因子IL-23的水平;real-time PCR法测定炎症因子IL-23、IL-6、CXCL2、CXCL8、CCL20和STAT3的mRNA表达;Western blot法测定信号转导通路中STAT3和ERK1/2的蛋白水平。结果:丹皮酚能够显著抑制IL-17A诱导的HaCaT细胞的活力(P<0.05);丹皮酚能够减少IL-6的分泌,同时,能够降低IL-23、CXCL2、CX⁃CL8和CCL20的mRNA表达,并对细胞内STAT3的mRNA和蛋白表达有一定的抑制作用,而对ERK1/2的蛋白水平无显著影响。结论:丹皮酚能够抑制IL-17A诱导的HaCaT细胞的活性和细胞因子的分泌,其作用机制可能与STAT3通路有关。 展开更多
关键词 丹皮酚 银屑病 细胞介素17A hacat细胞 STAT3信号通路
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杜仲对UVA致HaCaT细胞光老化保护作用的实验研究 被引量:16
8
作者 李建民 徐艳明 +2 位作者 陈巧云 祁永华 张宁 《中国美容医学》 CAS 2010年第9期1316-1318,共3页
目的:研究杜仲不同提取部位抗UVA致HaCaT细胞光老化的作用,并初步探讨其作用机制。方法:杜仲乙醇提取物经大孔树脂制备不同浓度乙醇梯度洗脱部位,分别作用于HaCaT细胞光老化模型,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法测定细胞活性,测定细胞... 目的:研究杜仲不同提取部位抗UVA致HaCaT细胞光老化的作用,并初步探讨其作用机制。方法:杜仲乙醇提取物经大孔树脂制备不同浓度乙醇梯度洗脱部位,分别作用于HaCaT细胞光老化模型,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法测定细胞活性,测定细胞培养液中LDH、MDA、SOD活力,确定并筛选杜仲抗皮肤光老化的作用及有效部位。结果:与模型组相比,浓度为1255μg/ml的50%乙醇大孔树脂洗脱部位能提高细胞活性(P<0.05),使培养液中LDH降低(P<0.01)、SOD活力提高(P<0.05)、MDA活力降低(P<0.05);浓度为125μg/ml的水洗脱部位使细胞培养液中LDH活力降低(P<0.05)。结论:杜仲抗皮肤光老化作用的有效成分主要集中在50%乙醇大孔树脂洗脱部位,其作用机制可能与其能清除氧自由基、保护细胞膜免受损伤有关。 展开更多
关键词 杜仲 光老化 hacat细胞
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P物质受体在人表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中的表达调控 被引量:15
9
作者 刘继勇 胡晋红 朱全刚 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期667-670,共4页
目的考察P物质受体(Neurokinin1R,NK1R)在正常人表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中的表达调控特征。方法培养人表皮角质形成细胞株HaCaT细胞和真皮成纤维细胞,应用免疫组织化学法检测NK1R在两种细胞中的表达;采用RTPCR方法检测NK1R在... 目的考察P物质受体(Neurokinin1R,NK1R)在正常人表皮角质形成细胞和真皮成纤维细胞中的表达调控特征。方法培养人表皮角质形成细胞株HaCaT细胞和真皮成纤维细胞,应用免疫组织化学法检测NK1R在两种细胞中的表达;采用RTPCR方法检测NK1R在两种细胞mRNA水平的表达特征,并采用流式细胞术定量检测在不同刺激因素及药物作用下两种细胞中NK1R的表达调控情况。结果NK1R在HaCaT细胞及真皮成纤维细胞中均有表达,阳性部位位于细胞膜及细胞质。NK1RmRNA在HaCaT细胞上的表达水平要高于在真皮成纤维细胞上的表达。P物质和IFNγ可以上调NK1R在两种细胞上的表达,而LPS抑制了NK1R的表达;抗组胺药盐酸西替利嗪和P物质受体特异性拮抗剂SpantideI可以降低两种细胞上NK1R的表达。结论皮肤角质形成细胞和真皮成纤维细胞在细胞、蛋白及mRNA水平均有NK1R的表达,而且这种表达可被过敏炎症因子调控,提示角质形成细胞和真皮成纤维细胞参与了皮肤免疫调控,神经肽P物质可能在皮肤过敏性炎症中起重要作用。 展开更多
关键词 表皮角质形成细胞 hacat细胞 真皮成纤维细胞 P物质受体 皮肤炎症
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丹参酮ⅡA纳米结构脂质载体的体外评价及其对HaCaT细胞增殖的影响 被引量:12
10
作者 郑娟 沈成英 +5 位作者 庞建云 廖卫波 徐平华 刘娟 连王权 袁海龙 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期4340-4344,共5页
目的进一步评价丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体(TⅡ_A-NLC)的性质,并考察其对HaCaT细胞增殖的影响。方法采用纳米粒度仪及HPLC法对TⅡ_A-NLC的粒径和光稳定性进行考察,透析袋法测定TⅡ_A-NLC在72 h内的累积释放量并绘制释放曲线,MTT法考察T... 目的进一步评价丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体(TⅡ_A-NLC)的性质,并考察其对HaCaT细胞增殖的影响。方法采用纳米粒度仪及HPLC法对TⅡ_A-NLC的粒径和光稳定性进行考察,透析袋法测定TⅡ_A-NLC在72 h内的累积释放量并绘制释放曲线,MTT法考察TⅡ_A-NLC对HaCaT细胞增殖的影响。结果 TⅡ_A-NLC的平均粒径为(178±9)nm,多分散度指数(PDI)为0.183±0.017,Zeta电位(-27.5±5.6)m V,体外72 h累积释放量为52.28%,TⅡ_A-NLC能显著降低TⅡ_A的光降解速率,TⅡ_A在一定范围内以剂量依赖性的方式抑制HaCaT细胞增殖,同质量浓度的TⅡ_A-NLC对HaCaT细胞增殖的抑制作用显著高于TⅡ_A溶液。结论 TⅡ_A-NLC稳定性好,具有良好的缓释作用,较好的细胞生物相容性,能显著提高TⅡ_A对HaCaT细胞增殖的抑制作用。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 纳米结构脂质载体 体外释放 光稳定性 hacat细胞 HPLC 细胞增殖 缓释作用 生物相容性
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冰片对HaCaT细胞膜流动性及膜电位的影响 被引量:11
11
作者 傅大莉 雍小兰 +1 位作者 刘德芳 肖爽 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2015年第4期62-66,共5页
目的研究冰片对皮肤活性表皮作用方式,探究冰片作为经皮促透剂的促透作用机制。方法选择常用经典化学经皮促透剂氮酮作为阳性对照促透剂,采用CCK-8试剂盒测定并计算冰片对HaCaT细胞的半数抑制率(IC50),利用荧光漂白恢复技术测定不同浓... 目的研究冰片对皮肤活性表皮作用方式,探究冰片作为经皮促透剂的促透作用机制。方法选择常用经典化学经皮促透剂氮酮作为阳性对照促透剂,采用CCK-8试剂盒测定并计算冰片对HaCaT细胞的半数抑制率(IC50),利用荧光漂白恢复技术测定不同浓度冰片对HaCaT细胞膜流动性的影响,采用流式细胞仪测定冰片对HaCaT细胞膜电位及细胞膜内Ca2+浓度的影响。结果冰片和氮酮的药物IC50分别为2.826、0.172 mmol/L;冰片可增加HaCaT细胞膜流动性,且随着药物浓度的增大而增加,呈剂量依赖性关系;冰片可降低HaCaT细胞膜电位和HaCaT细胞内Ca2+浓度,表现出类似氮酮作用特点。结论冰片的经皮促透作用机制可能与其影响角质细胞内Ca2+浓度进而改变活性表皮角质形成细胞膜电位和膜流动性有关。 展开更多
关键词 冰片 促透剂 细胞膜流动性 hacat细胞 细胞膜电位
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花椒油对HaCaT细胞膜流动性及膜电位的影响及其机制研究 被引量:11
12
作者 兰颐 李辉 +4 位作者 陈岩岩 章烨雯 张庆 康倩 吴清 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第1期44-51,共8页
目的:本文选择Ha Ca T角质形成细胞测定花椒挥发油对其细胞膜流动性和膜电位的影响及其机制,研究花椒挥发油对皮肤活性表皮的影响,探讨其促进药物透皮吸收的作用机制。方法:采用CCK-8试验测定花椒挥发油的细胞毒性,利用荧光漂白恢复技术... 目的:本文选择Ha Ca T角质形成细胞测定花椒挥发油对其细胞膜流动性和膜电位的影响及其机制,研究花椒挥发油对皮肤活性表皮的影响,探讨其促进药物透皮吸收的作用机制。方法:采用CCK-8试验测定花椒挥发油的细胞毒性,利用荧光漂白恢复技术(FRAP)考察不同浓度花椒挥发油对细胞膜流动性的影响,采用流式细胞仪测定不同浓度花椒挥发油对细胞膜电位的改变,同时考察了花椒挥发油对Ha Ca T细胞内Ca2+浓度的影响,采用超微量Ca2+-ATP酶试剂盒测定花椒挥发油对Ha Ca T细胞内Ca2+-ATP酶活性的影响。结果:相对于常用化学促透剂氮酮,花椒挥发油具有较低细胞毒性,花椒挥发油可增加Ha Ca T细胞膜流动性、降低细胞膜电位,同时可降低Ca2+-ATP酶活性、增加Ha Ca T细胞内Ca2+浓度而影响细胞Ca2+平衡。结论:花椒挥发油可能通过改变细胞内Ca2+平衡而影响细胞膜流动性及膜电位,增加活性表皮流动性以降低皮肤表皮屏障作用,从而利于药物的透皮吸收。 展开更多
关键词 花椒挥发油 hacat细胞 细胞膜电位 细胞膜流动性 Ca2+ 促透剂
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人表皮黑素细胞与HaCaT细胞共培养体外模型的建立 被引量:9
13
作者 马慧军 田燕 +3 位作者 刘雯 李铀 赵广 杨庆琪 《中国美容医学》 CAS 2009年第2期188-190,共3页
目的:建立人表皮黑素细胞与HaCaT细胞共培养的体外模型,观察α-促黑素以及烟酰胺对黑素在两细胞间传递的影响。方法:分别培养人表皮黑素细胞和HaCaT细胞,接种黑素细胞48h后再将HaCaT细胞以1:2的比例与黑素细胞共培养,分别以不同浓度的α... 目的:建立人表皮黑素细胞与HaCaT细胞共培养的体外模型,观察α-促黑素以及烟酰胺对黑素在两细胞间传递的影响。方法:分别培养人表皮黑素细胞和HaCaT细胞,接种黑素细胞48h后再将HaCaT细胞以1:2的比例与黑素细胞共培养,分别以不同浓度的α-促黑素和烟酰胺干预共培养的细胞9天,Fontana-Masson银染法观察共培养模型中黑素颗粒在两细胞间传递的情况。结果:培养3天即可观察到约20%HaCaT细胞核周围出现从邻近黑素细胞传递来的黑素颗粒,随着时间的延长阳性染色HaCaT细胞比例逐渐增多,第7天达到高峰(约80%),α-促黑素以及烟酰胺分别以浓度依赖方式促进/抑制了黑素颗粒在两细胞间的传递。结论:成功建立了人表皮黑素细胞与HaCaT细胞共培养体外模型,为大规模筛选促/抑黑素传递的药物奠定了实验基础。 展开更多
关键词 黑素细胞 共培养 hacat细胞 黑素传递
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以HaCaT细胞为种子细胞构建新型人组织工程皮肤 被引量:9
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作者 朱崇涛 彭代智 +5 位作者 周新 刘敬 罗海水 王丽华 王勇 蒋丽莉 《现代生物医学进展》 CAS 2007年第6期817-818,829,共3页
目的:评估以人永生化角朊细胞HaCaT为种子细胞构建新型人组织工程皮肤的可行性。方法:对HaCaT进行无血清培养(DK-SFM)及传代培养;取处于对数生长期的细胞进行接种;利用物理化学方法,采用SD大鼠网状层真皮制备(Acelluar dermal matrix,AD... 目的:评估以人永生化角朊细胞HaCaT为种子细胞构建新型人组织工程皮肤的可行性。方法:对HaCaT进行无血清培养(DK-SFM)及传代培养;取处于对数生长期的细胞进行接种;利用物理化学方法,采用SD大鼠网状层真皮制备(Acelluar dermal matrix,ADM);应用MTT比色法作生长曲线观察HaCaT细胞长满真皮支架所需时间。HE染色法观察脱细胞前后真皮支架和细胞单层及初步形成的细胞多层。结果:脱细胞真皮的细胞成分消失,组织疏松,为理想的组织皮肤支架;将HaCaT细胞按2×10~5/cm^2密度接种到ADM上,细胞长满支架的时间为5天。 展开更多
关键词 hacat细胞 MTT 组织工程皮肤
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山楂果胶低聚半乳糖醛酸提取物对中波紫外线辐射HaCaT细胞氧化损伤和光老化的保护作用 被引量:11
15
作者 刘素稳 吴瞻邑 +1 位作者 由璐 常学东 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第21期210-218,共9页
探讨了山楂果胶低聚半乳糖醛酸提取物对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)辐射后人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT)的氧化损伤和光老化的保护作用。体外培养HaCaT细胞,分为对照组(HaCaT细胞不照射UVB,不给予山楂果胶低聚半乳糖醛酸提取物处... 探讨了山楂果胶低聚半乳糖醛酸提取物对中波紫外线(ultraviolet B,UVB)辐射后人永生化表皮角质形成细胞(HaCaT)的氧化损伤和光老化的保护作用。体外培养HaCaT细胞,分为对照组(HaCaT细胞不照射UVB,不给予山楂果胶低聚半乳糖醛酸提取物处理)、UVB辐射组(30 mJ/cm^2)、低剂量(5μg/mL)山楂果胶低聚半乳糖醛酸+30 mJ/cm^2 UVB辐射组、高剂量(10μg/mL)山楂果胶低聚半乳糖醛酸+30 mJ/cm^2 UVB辐射组。以噻唑蓝比色法检测细胞活力,采用试剂盒检测超氧化物歧化酶(superoxide dismulase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)质量浓度和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。采用酶联免疫吸附测定实验检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)质量浓度和基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase 1,MMP-1)含量。结果表明,经UVB照射后,Ha Ca T细胞活力明显降低。低、高剂量的山楂果胶低聚半乳糖醛酸提取物对经UVB辐射的HaCaT细胞具有显著的增殖作用(P<0.05);SOD、GSH-Px、CAT活力增加;LDH活力、ROS水平和MDA含量下降;Hyp质量浓度增加;MMP-1含量和TNF-α、IL-6质量浓度下降,且与辐射组比较均具有显著或极显著差异(P<0.05或P<0.01)。实时荧光定量聚合酶链式反应检测MMP-1、TNF-α及IL-6 m RNA表达水平与其含量或质量浓度检测结果一致。因此,山楂果胶低聚半乳糖醛酸对UVB辐射Ha Ca T细胞的氧化损伤及光老化具有保护作用。 展开更多
关键词 果胶低聚半乳糖醛酸 中波紫外线辐射 hacat细胞 抗氧化 光老化
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表没食子儿茶素没食子酸酯抑制长波紫外线诱导的HaCaT细胞氧化损伤和凋亡 被引量:11
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作者 李敏 骆丹 林向飞 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期80-83,共4页
目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否能对长波紫外线(UVA)诱导的人角质形成细胞(HaCaT细胞)氧化损伤和凋亡起保护作用以及其可能的作用机制。方法:将HaCaT细胞分成空白组、EGCG组、UVA照射组以及UVA照射+EGCG组。采用四甲基偶... 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是否能对长波紫外线(UVA)诱导的人角质形成细胞(HaCaT细胞)氧化损伤和凋亡起保护作用以及其可能的作用机制。方法:将HaCaT细胞分成空白组、EGCG组、UVA照射组以及UVA照射+EGCG组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,筛选最佳药物浓度;检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量变化;流式细胞仪检测细胞膜电位变化;末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测不同组细胞凋亡率。结果:UVA照射组的SOD和GSH-Px明显下降、MDA相应上升,线粒体膜电位下降,凋亡率上升(P<0.05)。EGCG处理的细胞UVA照射后其活性以及上清液中的SOD、GSH-Px活性相对于未加药UVA照射组明显增加,MDA相应下降;线粒体膜电位上升,细胞凋亡率明显下降(P<0.05)。结论:EGCG可以减少UVA诱导HaCaT细胞氧化损伤和细胞凋亡,其机制可能与增强抗氧化成分活性和减少氧自由基有关。 展开更多
关键词 紫外线 长波 表没食子儿茶素没食子酸酯 hacat细胞 损伤 氧化 凋亡
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降钙素基因相关肽对HaCaT细胞表达血管内皮生长因子的调控 被引量:10
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作者 于晓静 李春阳 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期689-691,共3页
目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对角质形成细胞表达和分泌血管内皮生长因子(VEGF)的调控。方法用实时定量PCR(RT-PCR)方法检测CGRP、CGRP1型受体拮抗剂CGRP8-37、细胞外信号调节激酶ERK1/2特异性的抑制剂PD98059、p38MAPK特异性拮抗剂S... 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对角质形成细胞表达和分泌血管内皮生长因子(VEGF)的调控。方法用实时定量PCR(RT-PCR)方法检测CGRP、CGRP1型受体拮抗剂CGRP8-37、细胞外信号调节激酶ERK1/2特异性的抑制剂PD98059、p38MAPK特异性拮抗剂SB203580对HaCaT角质形成细胞表达VEGF mRNA水平的影响;用酶联免疫吸附方法检测HaCaT细胞分泌至培养液中VEGF蛋白的水平。结果CGRP时间依赖性地促进HaCaT细胞表达VEGF mRNA和分泌VEGF蛋白; CGRP8-37和PD98059均可明显抑制CGRP刺激的HaCaT细胞表达和分泌VEGF,SB203580不能减弱CGRP刺激的VEGF表达和分泌。结论CGRP可以上调HaCaT细胞表达和分泌VEGF,CGRP1型受体及其相关的ERK1/2信号通路参与其调控。 展开更多
关键词 降钙素基因相关肽 血管内皮生长因子类 hacat细胞
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竹叶总黄酮对UVB诱导HaCaT细胞氧化损伤的保护作用 被引量:11
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作者 高扬 易若琨 宋家乐 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期165-169,共5页
目的研究了竹叶总黄酮对紫外线B(UVB)诱发Ha Ca T角质细胞氧化损伤的保护效果和机制。方法 Ha Ca T细胞经竹叶总黄酮预处理24 h后,以辐射剂量为20 m J/cm2的UVB照射细胞2 h后,MTT法测定细胞生存率。同时测定细胞内活性氧(ROS)水准,脂质... 目的研究了竹叶总黄酮对紫外线B(UVB)诱发Ha Ca T角质细胞氧化损伤的保护效果和机制。方法 Ha Ca T细胞经竹叶总黄酮预处理24 h后,以辐射剂量为20 m J/cm2的UVB照射细胞2 h后,MTT法测定细胞生存率。同时测定细胞内活性氧(ROS)水准,脂质过氧化程度,抗氧化酶(超氧化物歧化酶,SOD;过氧化氢酶,CAT和过氧化物歧化酶,GSH-Px)并利用RTPCR法分析其mRNA转录水准。ELISA法分析TNF-α和IL-6分泌量。结果竹叶总黄酮可有效地抑制UVB导致的细胞氧化损伤并提高其细胞生存率。与对照组相比,竹叶总黄酮还能有效降低受损细胞内ROS水准,脂质过氧化程度,并提高SOD、CAT和GSH-Px等3种内源性抗氧化酶的活性及其它们的mRNA转录水平。此外,竹叶总黄酮还能抑制UVB所造成受损细胞分泌TNF-α和IL-6炎性细胞因子的能力。结论竹叶总黄酮可通过降低细胞内ROS水平,抑制细胞脂质过氧化,调节细胞内氧化酶的活性抑制UVB导致的Ha Ca T细胞氧化损伤。此外,竹叶总黄酮还可降低UVB所诱发的TNF-α和IL-6分泌。 展开更多
关键词 总黄酮 竹叶 hacat细胞 UVB 抗氧化
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黄连膏提取工艺优化及其体外抗炎活性 被引量:11
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作者 王远茜 韩冰 +3 位作者 王丹 王思明 李娜 赵大庆 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1977-1982,共6页
目的优化黄连膏提取工艺,并评价其体外抗炎活性。方法以药材粒度、煎炸时间、煎炸温度、浸泡时间为影响因素,姜黄素总量为评价指标,正交试验优化提取工艺。检测黄连膏提取油(0.05、0.5、1μL/mL)对Hacat细胞中TARC、MDC、RANTES、IL-8... 目的优化黄连膏提取工艺,并评价其体外抗炎活性。方法以药材粒度、煎炸时间、煎炸温度、浸泡时间为影响因素,姜黄素总量为评价指标,正交试验优化提取工艺。检测黄连膏提取油(0.05、0.5、1μL/mL)对Hacat细胞中TARC、MDC、RANTES、IL-8水平的抑制作用。结果最佳工艺为饮片不浸泡而直接投入5倍量香油中,200℃下煎炸4 h,姜黄素总量为1.198 g。黄连膏提取油降低了TARC、MDC、RANTES、IL-8水平,并呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论该方法稳定可行,可用于提取体外抗炎活性较强的黄连膏。 展开更多
关键词 黄连膏 提取 体外抗炎活性 正交试验 炎症因子 hacat细胞
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紫草素抑制表皮生长因子促HaCaT细胞增殖的机制 被引量:10
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作者 刘依璐 杨晓红 +2 位作者 马丽俐 陶茂灿 曹毅 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期5129-5131,共3页
目的:研究紫草素抑制表皮生长因子(EGF)促HaCaT细胞增殖的机制及miR-21在其中的可能作用。方法:MTT法检测EGF、紫草素、miR-21模拟剂及miR-21抑制剂对HaCaT细胞增殖的影响;Western Blot法检测紫草素、EGF、miR-21模拟剂及miR-21抑制剂对... 目的:研究紫草素抑制表皮生长因子(EGF)促HaCaT细胞增殖的机制及miR-21在其中的可能作用。方法:MTT法检测EGF、紫草素、miR-21模拟剂及miR-21抑制剂对HaCaT细胞增殖的影响;Western Blot法检测紫草素、EGF、miR-21模拟剂及miR-21抑制剂对HaCaT细胞PCNA表达的影响。结果:EGF浓度依赖性促进HaCaT细胞增殖;紫草素浓度依赖性抑制HaCaT细胞增殖;miR-21抑制剂、紫草素抑制EGF对HaCaT细胞的促增殖作用以及PCNA蛋白表达的上调作用,EGF、miR-21模拟剂部分逆转紫草素抑制HaCaT细胞增殖的作用以及对HaCaT细胞PCNA蛋白表达的下调作用。结论:紫草素可明显抑制EGF对HaCaT细胞的促增殖作用,其机制可能为通过抑制miR-21的表达,达到抑制HaCaT细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 银屑病 hacat细胞 表皮生长因子 紫草素 MIR-21 细胞增殖 机制
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