博落回总碱对肝癌细胞的毒性作用和体内抗肿瘤作用 被引量：34

1

作者 庞建新 马仁强 +2 位作者 刘兰梅 蒋毅萍 孙莉莎 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期325-328,共4页

目的观察博落回总碱(TAPP)的体内外抗肿瘤活性作用。方法MTT法检测TAPP体外对人肝癌Hep3B细胞、小鼠H22肝癌细胞的抑瘤作用;用小鼠移植性肿瘤法检测TAPP对小鼠H22肝癌细胞、S180肿瘤细胞的体内抑瘤作用。测3次重复实验结果。结果(1)TAP... 目的观察博落回总碱(TAPP)的体内外抗肿瘤活性作用。方法MTT法检测TAPP体外对人肝癌Hep3B细胞、小鼠H22肝癌细胞的抑瘤作用;用小鼠移植性肿瘤法检测TAPP对小鼠H22肝癌细胞、S180肿瘤细胞的体内抑瘤作用。测3次重复实验结果。结果(1)TAPP在体外有明显的细胞毒性作用,可抑制Hep3B、H22细胞增殖,且呈剂量依赖性:其对Hep3B细胞的半数抑制浓度(IC50) 3次重复实验结果分别为3.04、3.98、2.98 μg/ml,对H22细胞则分别为2.89、2.21、2.34 μg/ml。(2)体内实验表明,TAPP可抑制H22细胞皮下移植瘤的生长,在剂量为每天1、2、4 mg/kg·b.w.时,3次腹腔注射给药实验测得抑瘤率分别为18.6%、35.1%、44.9%,而以每天4 mg/kg·b.w.时口服给药抑瘤率则为7.9%;另外,TAPP可明显延长S180腹水瘤小鼠存活时间,剂量为每天1、2、4 mg/kg·b.w. 时静脉注射给药生命延长率3次重复结果平均分别为24.8%、48.9%、52.7%。结论TAPP在体内外均有明显的抗肿瘤活性。 展开更多

关键词 博落回 MTT法 S180/腹水瘤 人肝癌hep3b 鼠肝癌H22/移植瘤

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靶向Cyclin D1基因RNA干扰对肝癌细胞增殖和Mdm2等基因表达影响的研究 被引量：10

2

作者 张弘英 胡树根 +1 位作者 胡利琳 丁浩 《重庆医学》 CAS 2018年第15期1981-1985,共5页

目的探讨Cyclin D1表达下调对Mdm2等基因表达及人肝癌细胞增殖的影响。方法用脂质体将Cyclin D1-siRNA转染人肝癌细胞株Hep3B细胞。实验分为空白对照组、阴性对照siRNA组、Cyclin D1-siRNA组。采用RT-PCR和Western blot检测Cyclin D1、M... 目的探讨Cyclin D1表达下调对Mdm2等基因表达及人肝癌细胞增殖的影响。方法用脂质体将Cyclin D1-siRNA转染人肝癌细胞株Hep3B细胞。实验分为空白对照组、阴性对照siRNA组、Cyclin D1-siRNA组。采用RT-PCR和Western blot检测Cyclin D1、Mdm2、Mdm4、P53和P21表达,流式细胞仪检测细胞周期,MTT检测细胞活力,TUNEL检测细胞凋亡。结果与空白对照组和阴性对照siRNA组相比,Cyclin D1-siRNA组P53和P21表达上调(P<0.05),Cyclin D1、Mdm2和Mdm4表达下调(P<0.01);3组细胞周期G1、S及G2期均无明显差异(P>0.05);Cyclin D1-siRNA组较其他两组细胞活力明显减弱(P<0.01),细胞凋亡明显增强(P<0.01)。结论 Cyclin D1表达下调能抑制Mdm2和Mdm4的表达,并能上调P53和P21的表达;Cyclin D1表达下调能抑制肝癌细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 细胞周期蛋白D1 RNA干扰 hep3b细胞 细胞增殖 MDM2

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仙灵骨葆同方提取物的肝细胞毒性研究 被引量：10

3

作者 蔺红伟 江春霞 +1 位作者 陆文铨 朴淑娟 《药学服务与研究》 CAS 2020年第2期98-101,共4页

目的:考察仙灵骨葆同方提取物的肝细胞毒性。方法:不同浓度的仙灵骨葆同方、缺方及各单方提取物作用于人肝癌Hep3B细胞后,用CCK-8试剂盒检测肝细胞毒性。以阳性药物FCCP验证该细胞模型并获得量效参考值,进而筛选出不同提取物的半数抑制... 目的:考察仙灵骨葆同方提取物的肝细胞毒性。方法:不同浓度的仙灵骨葆同方、缺方及各单方提取物作用于人肝癌Hep3B细胞后,用CCK-8试剂盒检测肝细胞毒性。以阳性药物FCCP验证该细胞模型并获得量效参考值,进而筛选出不同提取物的半数抑制浓度(IC50),比较各提取物的肝细胞毒性的差异。结果:全方、缺方和各单方提取物的IC50分别为:全方提取物153.2μg/ml,缺淫羊藿提取物312.2μg/ml,缺续断提取物217.1μg/ml,缺丹参提取物256.5μg/ml,缺知母提取物229.6μg/ml,缺补骨脂提取物246.9μg/ml,缺地黄提取物259.4μg/ml;淫羊藿提取物91.77μg/ml,续断提取物179.0μg/ml,丹参提取物410.6μg/ml,知母提取物307.9μg/ml,补骨脂提取物73.22μg/ml,地黄提取物180.2μg/ml。其中全方提取物、淫羊藿提取物和补骨脂提取物的IC50值明显低于其他提取物,故初步判断仙灵骨葆处方中造成肝毒性的主要是淫羊藿和补骨脂。结论:本研究采用CCK-8法,筛选出仙灵骨葆处方中的肝毒性成分主要为淫羊藿和补骨脂提取物,为深入研究仙灵骨葆的肝毒性打下了基础。 展开更多

关键词 仙灵骨葆 hep3b细胞 CCK-8 肝细胞毒性 体外

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藏族药翼首草正丁醇部位提取物体外抑制人肝癌Hep3B细胞增殖和侵袭转移 被引量：10

4

作者 郭晨旭 吴迎春 +4 位作者 朱元章 田丽莉 陆怡 韩聪 朱国福 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期100-105,共6页

目的：本研究旨在体外筛选出藏族药翼首草正丁醇部位提取物（YSC-ZDC）抑制人肝癌Hep3B细胞侵袭转移的有效萃取部位,并对其抗肿瘤作用机制进行初步探讨。方法：取对数生长期Hep3B细胞,调整细胞密度为4×10^4/m L（MTT法）或2.5×... 目的：本研究旨在体外筛选出藏族药翼首草正丁醇部位提取物（YSC-ZDC）抑制人肝癌Hep3B细胞侵袭转移的有效萃取部位,并对其抗肿瘤作用机制进行初步探讨。方法：取对数生长期Hep3B细胞,调整细胞密度为4×10^4/m L（MTT法）或2.5×105/m L（Western blot,heochst 33258实验）,1×10^5/m L（划痕实验）,5×10^4/m L（Transwell实验）,培养24,48,72 h后分别加入不同质量浓度的药物（50,100,200 mg·L^-1）,分组设3-4个复孔。通过MTT法检测YSC-ZDC对于Hep3B细胞增殖的影响,形态观察该药对Hep3B细胞凋亡的影响。划痕实验和Transwell小室检测YSC-ZDC对Hep3B细胞侵袭、迁移的影响;Western blot检测侵袭转移相关信号通路分子表达的变化。结果：YSC-ZDC 50,100,200 mg·L^-1作用于Hep3B细胞24,48,72 h后可明显抑制其增长。50,100,200 mg·L^-1YSC-ZDC作用于Hep3B细胞24 h后可明显抑制其侵袭和迁移;YSC-ZDC可明显影响上皮-间质转化（EMT）相关蛋白E-钙黏素,N-钙黏素（E-cadherin,N-cadherin）和纤维连接蛋白（FN）的表达（P〈0.05）。结论：YSC-ZDC能显著抑制Hep3B细胞的增殖和侵袭转移,并诱导Hep3B细胞凋亡,其作用机制可能与EMT有关。 展开更多

关键词 翼首草 hep3b细胞 侵袭 转移 上皮-间质转化

原文传递

复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞增殖影响 被引量：9

5

作者 刘璐 李川 韩涛 《临床军医杂志》 CAS 2018年第9期1011-1013,共3页

目的探讨复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞增殖的影响。方法运用细胞计数法(CCK-8)检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞的抑制作用。采用流式细胞术检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞周期的及凋亡的影响。结果复方苦参注射液对Hep3B细胞... 目的探讨复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞增殖的影响。方法运用细胞计数法(CCK-8)检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞的抑制作用。采用流式细胞术检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞周期的及凋亡的影响。结果复方苦参注射液对Hep3B细胞的增殖有明显的抑制作用,且存在时间-浓度依赖性。随着复方苦参注射液浓度的增加,凋亡细胞的比例逐渐增大,G1期细胞逐渐增加,S期细胞逐渐减少。结论复方苦参注射液可以抑制Hep3B细胞的生长,可能与促进细胞凋亡并引起细胞阻滞有关。 展开更多

关键词 复方苦参注射液 肝癌hep3b细胞 周期 凋亡

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多途径丝裂原激活的蛋白激酶介导一氧化氮引起的肝癌细胞凋亡 被引量：3

6

作者 任正刚 刘银坤 +2 位作者 Ziqiu Wang Sid Kar Brian I Carr 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期459-463,共5页

目的 研究非离子型的diazeniumdiolate类一氧化氮供体引起肝癌细胞凋亡的分子机制。方法 利用免疫印迹、免疫沉淀、凝胶阻滞实验研究一氧化氮供体处理Hep3B肝癌细胞后,丝裂原激活的蛋白激酶、AP-1的激活以及和Hep3B肝癌细胞凋亡的关系... 目的 研究非离子型的diazeniumdiolate类一氧化氮供体引起肝癌细胞凋亡的分子机制。方法 利用免疫印迹、免疫沉淀、凝胶阻滞实验研究一氧化氮供体处理Hep3B肝癌细胞后,丝裂原激活的蛋白激酶、AP-1的激活以及和Hep3B肝癌细胞凋亡的关系。结果 一氧化氮可引起细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶和p38激酶的激活,特别是细胞外信号调节的蛋白激酶的持续激活,其中细胞外信号调节的蛋白激酶和c-jun N末端激酶的特异的阻断剂U0126和JNK抑制剂Ⅱ可阻断AP-1的激活和Hep3B细胞的凋亡,而p38激酶的阻断剂SB203580不能阻断AP-1的激活和Hep3B肝癌细胞的凋亡。结论 一氧化氮通过激活细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶,进而激活AP-1而引起Hep3B肝癌细胞的凋亡。 展开更多

关键词 肝肿瘤 hep3b细胞 蛋白激酶类 丝裂原激活的 一氧化氮 细胞凋亡

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汉防己碱对肝癌Hep3b细胞生长的双向作用 被引量：5

7

作者 蒋心惠 黄开顺 +2 位作者 滕永真 何百成 周岐新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1281-1284,共4页

目的考察汉防己碱(tetrandrine,Tet)对肝癌Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长的影响。方法采用体外细胞培养,结合流式细胞术、MTT和Western blot方法研究Tet(0.33～1.0μg/ml)对肝癌Hep3b及Hep3b/5-Fu细胞生长的作用特点。结果 Tet在0.33～1.0... 目的考察汉防己碱(tetrandrine,Tet)对肝癌Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长的影响。方法采用体外细胞培养,结合流式细胞术、MTT和Western blot方法研究Tet(0.33～1.0μg/ml)对肝癌Hep3b及Hep3b/5-Fu细胞生长的作用特点。结果 Tet在0.33～1.0μg/ml时呈浓度依赖性降低Hep3b细胞存活率;0.5和1.0μg/ml显著提高5-Fu对Hep3b细胞的IC50,但降低5-Fu对Hep3b/5-Fu细胞的IC50;0.33μg/ml的Tet明显增加cDDP对Hep3b/5-Fu细胞的IC50,而0.5和1.0μg/ml显著降低cDDP对Hep3b/5-Fu细胞的IC50(P<0.01)。1.0μg/ml的Tet作用48 h后使Hep3b细胞中的P-gp和MRP1表达明显上调(P<0.05)。Tet单用对Hep3b细胞生长有一定抑制作用,高浓度Tet逆转Hep3b/5-Fu细胞对5-Fu耐药和增强cDDP对Hep3b/5-Fu细胞生长的抑制作用,但低浓度分别促进Hep3b细胞和Hep3b/5-FU细胞对5-Fu和cDDP耐药。结论 Tet对Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长呈浓度相关的双向作用,其促进耐药细胞发展的机制至少与提升P-gp和MRP1表达有关。 展开更多

关键词 汉防己碱 肝癌hep3b细胞 逆转耐药性 促进耐药

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基于转录组测序探究OSW-1抗肝癌的作用机制

8

作者 徐博 姜汀 +1 位作者 金旺德 金星林 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第24期346-352,共7页

目的:基于转录组测序发掘虎眼万年青皂苷(Ornithogalum saundersiae Saponins,OSW-1)作用于肝癌细胞(HEP3B)后的关键通路及差异表达基因。方法:利用转录组测序技术检测OSW-1处理HEP3B的基因表达数据,通过测定的序列信息精确地分析转录本... 目的:基于转录组测序发掘虎眼万年青皂苷(Ornithogalum saundersiae Saponins,OSW-1)作用于肝癌细胞(HEP3B)后的关键通路及差异表达基因。方法:利用转录组测序技术检测OSW-1处理HEP3B的基因表达数据,通过测定的序列信息精确地分析转录本,筛选与细胞存活相关的表达差异基因,得到核心基因,并通过实验验证OSW-1是否通过调控核心靶点治疗肝细胞癌。结果:MTT结果表明,经OSW-1给药后HEP3B细胞活性明显降低,且呈浓度依赖性。通过转录组测序检测,共获得1381个存在明显表达差异的基因,并且多数基因富集在TNF信号通路。进一步通过免疫荧光及Western blot表明,OSW-1干预HEP3B细胞后,p-PI3K、p-AKT、p-NF-κB蛋白水平表达降低。结论:OSW-1可能通过调控炎症信号通路降低炎症反应,抑制HEP3B细胞活性,可作为潜在的治疗肝癌的药物,以及为保肝护肝的保健食品研发提供实验依据。 展开更多

关键词 虎眼万年青皂苷 转录组测序 hep3b细胞 差异表达基因

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双硫仑联合二价铜离子诱导铜死亡抑制肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭

9

作者 唐敏 黄娟婵 +2 位作者 韦杏雯 罗雪文 赵伟 《中国癌症防治杂志》 CAS 2024年第4期417-423,共7页

目的探讨双硫仑(disulfiram,DSF)联合二价铜离子(Cu^(2+))对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养肝癌Hep3B细胞,分别采用DSF(30 nmol/L)溶液、Cu^(2+)(1μmol/L)溶液和铜螯合剂四硫代钼酸铵(ammonium tetrathiomo... 目的探讨双硫仑(disulfiram,DSF)联合二价铜离子(Cu^(2+))对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养肝癌Hep3B细胞,分别采用DSF(30 nmol/L)溶液、Cu^(2+)(1μmol/L)溶液和铜螯合剂四硫代钼酸铵(ammonium tetrathiomolybdateⅥ,ATTM)(30 nmol/L)溶液单独或联合干预,以二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(30 nmol/L)作用的细胞为对照组。分别采用CCK-8实验、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力;采用免疫荧光实验检测细胞中铜死亡相关蛋白二氢硫辛酰胺-S-乙酰转移酶(dihydrolipoamide S-acetyltransferase,DLAT)和铁氧还蛋白1(ferredoxin 1,FDX1)的表达。结果与对照组相比,DSF、Cu^(2+)单独或联合干预后Hep3B细胞的增殖、迁移和侵袭能力均下降(均P<0.05),其中DSF+Cu^(2+)联合干预的细胞增殖、迁移和侵袭能力下降更加显著(均P<0.0001)。在DSF联合Cu^(2+)的基础上加入ATTM后逆转了DSF联合Cu^(2+)对Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,其增殖、迁移以及侵袭能力较DSF+Cu^(2+)组增强(均P<0.05)。与对照组相比,DSF、Cu^(2+)单独干预后铜死亡相关蛋白DLAT和FDX1的荧光强度改变并不明显,但Cu^(2+)联合DSF后DLAT蛋白的荧光强度增加而FDX1蛋白的荧光强度减弱,加入ATTM后则逆转了DLAT和FDX1蛋白的表达趋势。结论DSF联合Cu^(2+)能抑制肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能是通过诱导铜死亡的发生实现。 展开更多

关键词 肝癌 hep3b细胞 双硫仑 铜死亡 增殖 迁移 侵袭

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顺铂对肝细胞癌Hep3B细胞程序性死亡配体1表达及药物敏感性的研究

10

作者 赵向阳 刘双池 +2 位作者 张懿刚 陶滔 谈燚 《中华普通外科学文献（电子版）》 CAS 2024年第1期51-55,共5页

目的探讨顺铂对肝细胞癌Hep3B细胞程序性死亡配体1(PD-L1)表达以及PD-L1对顺铂敏感性的影响。方法使用不同浓度的顺铂(0、5、10、20 mg/L)处理Hep3B细胞,利用q PCR、Western blotting法检测细胞中PD-L1的表达情况。设置对照组(加入PBS)... 目的探讨顺铂对肝细胞癌Hep3B细胞程序性死亡配体1(PD-L1)表达以及PD-L1对顺铂敏感性的影响。方法使用不同浓度的顺铂(0、5、10、20 mg/L)处理Hep3B细胞,利用q PCR、Western blotting法检测细胞中PD-L1的表达情况。设置对照组(加入PBS)、顺铂组(5 mg/L)、MK2206组(AKT抑制剂,5μmol/L)和顺铂+MK2206组(5 mg/L顺铂处理前1 h给予5μmol/L MK2206),分别干预Hep3B细胞,Western blotting检测AKT、p-AKT和PD-L1的表达情况。si RNA-PD-L1转染Hep3B细胞,Western blotting检测PD-L1和上皮-间质转化标志物(E-cadherin和N-cadherin)表达变化,CCK-8、细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞功能变化。结果顺铂可上调Hep3B细胞中PD-L1的蛋白表达水平(P<0.05)。与对照组相比,5 mg/L的顺铂显著促进Hep3B细胞中PD-L1的m RNA水平(P<0.05)。MK2206可抑制顺铂对p-AKT和PD-L1的上调(P<0.05),而AKT的蛋白水平差异无统计学意义。si RNA-PD-L1可抑制顺铂对Hep3B细胞PD-L1表达的上调(P<0.05),增强顺铂对Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭的抑制,以及对E-cadherin的表达上调和N-cadherin的表达下调(P<0.05)。结论顺铂可促进肝细胞癌Hep3B细胞PD-L1表达,其机制可能与上调了AKT通路蛋白的磷酸化水平相关;抑制PD-L1表达可增强肝细胞癌Hep3B细胞对顺铂的敏感性。 展开更多

关键词 肝细胞癌 顺铂 程序性死亡配体1 敏感性 hep3b细胞

原文传递

六神丸和砷化合物对人肝癌Hep3B细胞增殖的影响 被引量：3

11

作者 梁世霞 刘正芸 +5 位作者 余丽梅 刘云 郭静 贾智诚 拓军雄 刘杰 《遵义医学院学报》 2016年第6期558-562,共5页

目的中药六神丸(LSW)含雄黄(As_4S_4)。近年研究表明砷化合物对血液肿瘤有显著的抑制作用,但其对实体瘤的作用报道少。故我们就六神丸和砷化合物[Na_2HAsO_4(As^(5+))、NaAsO_2(As^(3+))、As_2O_3、As_4S_4和As_2S_2]对人肝癌Hep3B细胞... 目的中药六神丸(LSW)含雄黄(As_4S_4)。近年研究表明砷化合物对血液肿瘤有显著的抑制作用,但其对实体瘤的作用报道少。故我们就六神丸和砷化合物[Na_2HAsO_4(As^(5+))、NaAsO_2(As^(3+))、As_2O_3、As_4S_4和As_2S_2]对人肝癌Hep3B细胞的抗肿瘤作用进行了研究。方法采用MTS法检测六神丸、雄黄及其他含砷化合物对人肝癌Hep3B细胞的杀灭作用,通过原子吸收光谱测定各砷化合物中砷(As)的溶出度;流式细胞仪检测药物对细胞周期和细胞凋亡的影响;荧光定量PCR检测相关基因的表达。结果六神丸中As的溶出度高于雄黄和As_2S_2,但低于亚砷酸钠(As^(3+))、砷酸钠(As^(5+))和As_2O_3。六神丸对Hep3B有较好的抑制增殖和杀灭作用其作用仅次于亚砷酸钠。六神丸可诱导Hep3B细胞凋亡,作用机制与降低Bcl-2及Bcl-w的表达有关,并降低ABCG2、VEGF(血管内皮生长因子)和肿瘤转移相关基因MMP-9的表达。但六神丸对细胞周期无明显影响。结论六神丸通过多途径对肝癌Hep3B细胞具有明显的抗增殖作用。 展开更多

关键词 六神丸 抗肿瘤 hep3b细胞 砷化合物 凋亡

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一种新的蝮蛇蛇毒磷脂酶A2同源物的分离纯化及其对Hep3B细胞基因谱的影响 被引量：2

12

作者 马安德 吴少瑜 +5 位作者 张嘉杰 李志琴 徐伟 文晓芸 余乐 吴曙光 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期75-79,共5页

目的从中国蝮蛇蛇毒中分离纯化出一种新的磷脂酶A2(PLA2)同源物,并研究其对Hep3B细胞基因谱的影响。方法用C18反相高效液相层析从蛇毒粗毒中分离纯化出PLA2同源物,并检测其纯度。用电喷雾质谱仪测定PLA2 同源物分子量。体外培养Hep3B细... 目的从中国蝮蛇蛇毒中分离纯化出一种新的磷脂酶A2(PLA2)同源物,并研究其对Hep3B细胞基因谱的影响。方法用C18反相高效液相层析从蛇毒粗毒中分离纯化出PLA2同源物,并检测其纯度。用电喷雾质谱仪测定PLA2 同源物分子量。体外培养Hep3B细胞,以139μg／ml PLA2同源物处理12 h,应用基因芯片检测基因表达的改变。结果从蛇毒粗毒中分离纯化出一种新的PL,A2同源物,纯度为97．2％,相对分子质量为13 900。139μg／ml PLA2同源物处理 Hep3B细胞12 h后,19个基因表达下调,20个基因表达上调。表达改变的基因按功能分主要为以下6类:细胞周期控制和DAN损伤修复类、细胞调亡和衰老类信号转导分子和转录因子、细胞黏附类、血管生成类以及肿瘤细胞入侵和转移类。结论PLA2同源物作用于Hep3B细胞后,可影响细胞多种基因的表达,表达改变的基因主要参与肿瘤细胞的生长和转移。本研究为进一步深入研究PLA2对肿瘤细胞的作用机制提供线索和依据。 展开更多

关键词 蛇毒 蝮蛇 PLA2同源物 hep3b细胞 基因芯片

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人参皂苷Rg3联合奥沙利铂对肝癌Hep3B细胞株增殖及凋亡的影响 被引量：1

13

作者 孙海凤 郭亚焕 +5 位作者 经里 赵征 苏智祥 雷宝霞 焦敏 南克俊 《疑难病杂志》 CAS 2015年第9期963-966,共4页

目的探讨人参皂苷Rg3(GS-Rg3)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对肝癌Hep3B细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法培养Hep3B细胞株,采用不同浓度GS-Rg3(12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L)(G组)、LOHP(1.25、2.50、5.00、10.00 mg/L)(O组... 目的探讨人参皂苷Rg3(GS-Rg3)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对肝癌Hep3B细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法培养Hep3B细胞株,采用不同浓度GS-Rg3(12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L)(G组)、LOHP(1.25、2.50、5.00、10.00 mg/L)(O组)单药及联合应用(L组)进行干预,并设空白对照组(C组),MTt法观察各组对Hep3B细胞株生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对Hep3B细胞株凋亡率的影响。结果GS-Rg3、L-OHP单药及联合采用对Hep3B细胞株的抑制作用均呈明显的时间与浓度依赖关系,O组较G组抑制率高,且与O组、G组比较,L组抑制率更高(P<0.05)。与C组比较,G组、O组、L组细胞凋亡率均增高(P<0.05),O组高于G组,且C组均高于O组、G组(P<0.05)。与GS-Rg3组比较,L-OHP组对Hep3B细胞株的抑制率及诱导凋亡率均较高(P<0.05)。结论 GS-Rg3、L-OHP能够抑制肝癌Hep3B细胞株增殖并诱导凋亡,两药联合有协同作用,且西药L-OHP抗增殖效应和诱导凋亡作用,均比中药GS-Rg3强。 展开更多

关键词 人参皂苷RG3 奥沙利铂 hep3b细胞株 增殖 凋亡

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COX-2 siRNA诱导人肝癌Hep3B细胞凋亡实验研究

14

作者 刘靳波 何鹏 +2 位作者 朱喜丹 陶华林 王开正 《泸州医学院学报》 2012年第1期30-34,共5页

目的:观察COX-2在人肝癌细胞Hep3B中的表达及小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默COX-2基因对COX-2 mRNA和蛋白表达、细胞增殖及凋亡的影响。方法:将siRNA-COX-2质粒载体转染Hep3B细胞,WST-8法检测细胞增殖抑制情况,透射电镜观... 目的:观察COX-2在人肝癌细胞Hep3B中的表达及小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默COX-2基因对COX-2 mRNA和蛋白表达、细胞增殖及凋亡的影响。方法:将siRNA-COX-2质粒载体转染Hep3B细胞,WST-8法检测细胞增殖抑制情况,透射电镜观察凋亡小体出现情况;筛选单克隆细胞株Hep3B-sh,采用RT-PCR和Western blotting检测COX-2 mRNA和蛋白情况。结果:siRNA-COX-2能抑制Hep3B细胞的增殖,稳定转染pshRNA-COX-2可使Hep3B细胞中COX-2 mRNA及蛋白的表达明显减弱(P<0.01);透射电镜下可见凋亡小体出现,发生凋亡细胞数增加。结论:COX-2siRNA能有效抑制肝癌Hep3B细胞中COX-2的表达和细胞的增殖,促进凋亡发生,为肝细胞癌基因治疗提供实验依据和治疗靶点。 展开更多

关键词 肝癌 小分子干扰 COX-2 细胞凋亡 hep3b细胞

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类泛素FAT10高表达肝癌细胞株Hep3B酵母双杂交cDNA文库的构建

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作者 余新 刘天 +2 位作者 德洪波 李国惠 邵江华 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期400-403,共4页

目的:构建类泛素FAT10高表达肝癌细胞株Hep3B的酵母双杂交用cDNA文库.方法:从肝癌细胞Hep3B中提取总RNA,分离mRNA.利用反转录酶M-MLV与Oligo(dT)AnchorPrimer合成1stStrandcDNA,用E.coliDNAPolymerase与E.coliDNALigase将RNA链置换成DNA... 目的:构建类泛素FAT10高表达肝癌细胞株Hep3B的酵母双杂交用cDNA文库.方法:从肝癌细胞Hep3B中提取总RNA,分离mRNA.利用反转录酶M-MLV与Oligo(dT)AnchorPrimer合成1stStrandcDNA,用E.coliDNAPolymerase与E.coliDNALigase将RNA链置换成DNA链,合成2ndStrandcDNA.将双链cDNA与EcoRⅠAdaptor连接,然后用EcoRⅠ/XhoⅠ进行酶切.使用SpinColumn除去短链cDNA与pGADT7载体连接,转化入E.coliDH10B,建成原始文库.然后对其进行扩增并随机挑取单菌落,酶切鉴定重组子插入片段大小.结果:提取的总RNA降解少且分子完整;RNA纯度高,相对分子质量为400-5000bp;成功合成双链cDNA,均符合建库要求;库容量达到1.03×106克隆,原始文库滴度为2.50×109cfu/L,扩增后的文库滴度为3.60×1012cfu/L.插入片段大小分布为0.5-3.5kb,平均长度约为2.0kb.结论:所构建文库的各项指标均达到要求,为筛选FAT10作用蛋白奠定了重要基础. 展开更多

关键词 人肝癌细胞hep3b 酵母双杂交cDNA文库 FAT10

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肝癌细胞来源的exosomes提取方法的改进及电镜观察 被引量：3

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作者 萨仁高娃 吴岩 肖文华 《内蒙古医学院学报》 2008年第6期424-426,共3页

目的：分离提纯两种肝癌细胞HepG2细胞和Hep3B细胞来源的exosomes，并在透射电镜下观察exosomes的形态特征，为肿瘤免疫治疗寻找肿瘤新抗原提供实验材料。方法：采用离心超滤联合蔗糖密度梯度离心等方法分离出HepG2和Hep3B细胞释放exoso... 目的：分离提纯两种肝癌细胞HepG2细胞和Hep3B细胞来源的exosomes，并在透射电镜下观察exosomes的形态特征，为肿瘤免疫治疗寻找肿瘤新抗原提供实验材料。方法：采用离心超滤联合蔗糖密度梯度离心等方法分离出HepG2和Hep3B细胞释放exosomes，经透射电镜观察其超微结构。结果：HepG2和Hep3B细胞分泌释放的exosomes为直径50-100nm的膜性微囊结构，圆形或椭圆形，腔内为低电子密度成分。结论：离心超滤和蔗糖密度梯度离心法分离提纯exosomes方法是较为简便高效，对肿瘤细胞培养上清提纯exosomes而言具有可行性。 展开更多

关键词 EXOSOMES hepG2细胞 hep3b细胞 透射电镜

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通道抑制剂NVP与3-MA联合应用对肝癌细胞凋亡的影响

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作者 郭雪峰 常哲兴 +2 位作者 罗钫月 郭华涛 王影 《北华大学学报（自然科学版）》 CAS 2019年第6期746-749,共4页

目的以人类Hep3B和PLC-PRF-5两种肝癌细胞为研究对象,探讨自噬在NVP-BEZ235引起的细胞凋亡中的作用.方法人肝癌细胞Hep3B和PLC-PRF-5在培养基中培养,行细胞活性检测实验,洗涤后应用流式细胞仪对JC-1阳性细胞进行检测,并行线粒体膜电位(M... 目的以人类Hep3B和PLC-PRF-5两种肝癌细胞为研究对象,探讨自噬在NVP-BEZ235引起的细胞凋亡中的作用.方法人肝癌细胞Hep3B和PLC-PRF-5在培养基中培养,行细胞活性检测实验,洗涤后应用流式细胞仪对JC-1阳性细胞进行检测,并行线粒体膜电位(MMP)分析.结果 NVP-BEZ235能够有效增加LC3-Ⅱ的表达,并同时降低p62的表达,当NVP-BEZ235与自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合应用时,肝癌细胞的生长明显被抑制.结论 NVP-BEZ235与3-MA联合应用能够促进细胞凋亡,为肝癌和其他恶性肿瘤的临床治疗提供参考. 展开更多

关键词 hep3b肝癌细胞 PLC-PRF-5肝癌细胞 NVP-bEZ235 细胞凋亡

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Iressa对肝癌细胞Hep-3B、HepG2裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量：2

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作者 徐立 张耀军 +1 位作者 林小军 李锦清 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第4期447-450,共4页

背景与目的:Iressa是一种新型分子靶向药物,在治疗晚期非小细胞肺癌中显示出较好疗效,对Iressa治疗肝癌的研究国内外报道较少。本研究旨在探讨Iressa对肝癌Hep-3B、HepG2细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其毒副作用。方法:肝癌Hep-3B、HepG2... 背景与目的:Iressa是一种新型分子靶向药物,在治疗晚期非小细胞肺癌中显示出较好疗效,对Iressa治疗肝癌的研究国内外报道较少。本研究旨在探讨Iressa对肝癌Hep-3B、HepG2细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其毒副作用。方法:肝癌Hep-3B、HepG2细胞移植瘤裸鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,分别用葡萄糖溶液、Iressa100mg/kg和Iressa200mg/kg每日一次灌胃,每周灌五天,连用3周,用药结束后2天处死动物。分别计算Iressa对两种肝癌的抑瘤率,比较各组裸鼠肿瘤大小、体重及脾指数。结果:给药前各组裸鼠体重和肿瘤体积无差异。低剂量组和高剂量组Iressa对Hep-3B肝癌移植瘤的抑瘤率分别为32.77%、46.99%;低剂量组和高剂量组Iressa对HepG2肝癌移植瘤的抑瘤率分别为68.57%、75.24%。两种肿瘤类型的高剂量组裸鼠的脾指数和体重下降与对照组比较均有显著性差异,低剂量组和对照组裸鼠的脾指数和体重比较无明显差异。结论:Iressa对肝癌Hep-3B、HepG2细胞移植瘤生长均有明显抑制作用,但高剂量可能引起裸鼠体重下降并影响免疫器官功能。 展开更多

关键词 肝肿瘤 hep-3b细胞 hepG2细胞 裸鼠 移植瘤 Iressa/药理学

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