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GCK2软件在p53基因克隆过程中的应用
1
作者 张继承 袁帅 +2 位作者 谢永芳 梁亦龙 舒坤贤 《重庆邮电学院学报（自然科学版）》 2006年第1期96-98,共3页
p53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的抑癌基因,通过克隆p53基因对其表达调控进行研究。利用分子生物学软件GCK2.0对整个克隆过程进行分析,制定克隆策略,通过测序鉴定结果,得到了含目的基因p53cDNA全序列的pTRE-p53重组质粒。通过GC... p53基因是迄今发现与人类肿瘤相关性最高的抑癌基因,通过克隆p53基因对其表达调控进行研究。利用分子生物学软件GCK2.0对整个克隆过程进行分析,制定克隆策略,通过测序鉴定结果,得到了含目的基因p53cDNA全序列的pTRE-p53重组质粒。通过GCK2.0分析,减少了基因克隆的盲目性,提高了工作效率。 展开更多
关键词 GCK2.0软件 P53基因 基因克隆
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SARS-CoV基因检测试剂盒的研制 被引量：1
2
作者 黄海南 郭丽 +3 位作者 潘继红 韩金祥 朱有名 宋长征 《山东医药》 CAS 北大核心 2003年第14期1-4,共4页
为研制可用于 SARS冠状病毒 (SARS- Co V )基因检测的试剂盒 ,针对 SARS- Co V- RNA依赖的 RNA聚合酶基因 ,配制了一套逆转录—巢式聚合酶链反应 (RT- n PCR)体系 ,以梯度稀释法进行灵敏度试验 ,以平行试验法进行重现性试验 ,以混合放... 为研制可用于 SARS冠状病毒 (SARS- Co V )基因检测的试剂盒 ,针对 SARS- Co V- RNA依赖的 RNA聚合酶基因 ,配制了一套逆转录—巢式聚合酶链反应 (RT- n PCR)体系 ,以梯度稀释法进行灵敏度试验 ,以平行试验法进行重现性试验 ,以混合放置法进行稳定性试验 ,同时以正常人标本进行了特异性实验。结果 ,RT- n PCR体系对 SARS- Co V- RNA均可产生 4 4 0 bp(外套 )和 12 1bp(内套 )的扩增带 ,PCR产物稀释到 10 - 6时仍可出现阳性结果 ,6个平行检测管中结果一致 ,RT- PCR体系混合后 - 2 0℃放置 7天仍可正常检出目的带。该体系对正常人血球、血清、咽拭子标本均不产生扩增带。认为该试剂盒可以检测出 SARS- Co V的核酸 ,且具有较高的灵敏度、重现性。 展开更多
关键词 SARS-COV 试剂盒 基因检测 正常人 扩增 标本 特异性 PCR产物 PCR) 核酸
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甲磺酸伊马替尼靶向治疗晚期胃肠道间质瘤 被引量：12
3
作者 沈坤堂 侯英勇 +2 位作者 秦新裕 宋陆军 宿杰阿克苏 《中华胃肠外科杂志》 CAS 2005年第2期129-131,共3页
目的探讨伊马替尼对晚期胃肠道间质瘤(gastrointestinalstromaltumour,GISTs)的治疗作用。方法回顾性分析经伊马替尼治疗的5例晚期胃肠道间质瘤患者的临床资料。结果5例患者的肿瘤组织(其中有4例曾接受1～3次手术)经免疫组织化学法证实... 目的探讨伊马替尼对晚期胃肠道间质瘤(gastrointestinalstromaltumour,GISTs)的治疗作用。方法回顾性分析经伊马替尼治疗的5例晚期胃肠道间质瘤患者的临床资料。结果5例患者的肿瘤组织(其中有4例曾接受1～3次手术)经免疫组织化学法证实表达c-kit基因,因肿瘤严重浸润或广泛转移已无手术指征,对射频和全身化疗无效。经伊马替尼(400mg/d)1～6个月治疗后肿瘤明显缩小,病情稳定;且未发生明显的药物不良反应。结论伊马替尼可有效治疗晚期不可切除或转移的GISTs。跨膜受体酪氨酸激酶(Kit)信号传导通路的抑制剂有别于传统的化疗,是治疗GISTs的一种非常有潜力的治疗方案。 展开更多
关键词 甲磺酸伊马替尼 晚期 胃肠道间质瘤 肿瘤 GIST 患者 靶向治疗 跨膜受体 信号传导通路 表达
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c-kit基因及其靶体SCF在卵巢上皮性肿瘤中的表达 被引量：1
4
作者 安牧尔 吴春凤 安媛 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2007年第10期729-732,共4页
目的:研究c-kit基因及其靶体干细胞因子(stem cell factor,SCF)在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床意义,探讨其在卵巢上皮性癌发生发展中的可能作用。方法:免疫组化SP法测定10例正常卵巢组织,20例卵巢良性上皮性肿瘤,16例卵巢交界性上皮性肿... 目的:研究c-kit基因及其靶体干细胞因子(stem cell factor,SCF)在卵巢上皮性肿瘤的表达及临床意义,探讨其在卵巢上皮性癌发生发展中的可能作用。方法:免疫组化SP法测定10例正常卵巢组织,20例卵巢良性上皮性肿瘤,16例卵巢交界性上皮性肿瘤,58例卵巢上皮性癌标本中c-kit、SCF蛋白的表达。结果:(1)卵巢上皮性癌中c-kit蛋白阳性表达率为63.79%,明显高于正常卵巢组织(0%)及卵巢良性上皮性肿瘤(10.00%),差异有显著性(P<0.01);卵巢交界性上皮性肿瘤中c-kit阳性表达率为43.75%(7/16),也高于正常卵巢组织及卵巢良性上皮性肿瘤,差异有显著性(P<0.05);(2)卵巢上皮性癌中,低分化组的c-kit蛋白阳性表达率高于高、中分化组(P<0.05),c-kit蛋白的阳性表达率随FIGO分期的进展及淋巴结转移而升高(P<0.05);(3)c-kit阳性患者的预后比c-kit阴性患者差(P<0.05);(4)SCF在正常卵巢上皮、卵巢良性上皮性肿瘤、卵巢交界性上皮性肿瘤、卵巢上皮性癌中的阳性表达率分别为30.00%、35.00%、62.50%和74.14%,卵巢上皮性癌的阳性表达率显著高于正常卵巢组织及卵巢良性上皮性肿瘤(均P<0.01)。卵巢癌低分化组SCF的阳性表达率显著高于高、中分化组(P<0.05)。且随FIGO分期的进展及淋巴结转移而升高(P<0.05);(5)c-kit与SCF表达具有明显相关性(r=0.302,P<0.05)。结论:(1)c-kit、SCF表达异常可能在卵巢上皮性癌的发生发展中起重要作用;(2)c-kit、SCF在卵巢上皮性癌中的表达具有相关性,SCF作为c-kit的配体,可促使c-kit活化,两者具有协同作用(3)c-kit蛋白表达与卵巢上皮性癌患者的预后有关,可作为判断卵巢上皮性癌患者预后的指标之一。 展开更多
关键词 基因c—kit 干细胞因子 卵巢肿瘤 免疫组织化学
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补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓单个核细胞c-kit mRNA及CD117影响的研究 被引量：1
5
作者 张守琳 齐德杰 孙伟正 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期49-51,共3页
目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓单个核细胞c-kit mRNA及CD117表达的影响。方法:分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及流式细胞技术检测CAA病人治疗前后骨髓单个核细胞c-kit mRNA及CD117水平的变化。结果:... 目的:探讨补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓单个核细胞c-kit mRNA及CD117表达的影响。方法:分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及流式细胞技术检测CAA病人治疗前后骨髓单个核细胞c-kit mRNA及CD117水平的变化。结果:CAA患者骨髓c-kit mRNA及其CD117表达水平高于正常对照组,治疗后二者表达水平均有不同程度下降,并且补髓生血颗粒对二者表达水平的下调程度优于再障生血片对照组(P<0.05)。结论:CAA患者骨髓c-kit mRNA及CD117的表达存在异常;补髓生血颗粒剂可能通过调节骨髓c-kit mRNA及CD117的表达来改善CAA的骨髓造血功能,促进骨髓造血功能恢复。 展开更多
关键词 补髓生血颗粒 再生障碍性贫血 基因c-kit/CD117(c-kit受体蛋白)
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基于实时荧光定量PCR的番木瓜多重PCR高效检测方法 被引量：1
6
作者 张玉山 陈洁彬 +3 位作者 吴亮君 朱璇 欧阳淑芬 沈志华 《湖北农业科学》 2023年第9期170-174,共5页
以pCaMV35S基因核酸检测试剂盒反应体系为基础,添加多重PCR反应所需的目标基因引物和番木瓜(Carica papaya L.)DNA,进行多重PCR反应,同时考察不合成荧光探针的情况下对目标基因进行实时荧光定量检测。结果表明,在实时荧光定量PCR反应体... 以pCaMV35S基因核酸检测试剂盒反应体系为基础,添加多重PCR反应所需的目标基因引物和番木瓜(Carica papaya L.)DNA,进行多重PCR反应,同时考察不合成荧光探针的情况下对目标基因进行实时荧光定量检测。结果表明,在实时荧光定量PCR反应体系中,多重PCR扩增的基因条带比常规PCR扩增的基因条带更亮,在不合成荧光探针的情况下实现目标基因的实时荧光定量PCR反应,以期建立一种基于实时荧光定量PCR的多重PCR检测方法。 展开更多
关键词 转基因番木瓜(Carica papaya L.) 多重PCR反应 实时荧光定量PCR 荧光探针 pCaMV35S基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
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