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我国地方品种鸡分离到的一个禽白血病病毒新亚群的鉴定 被引量：85
1
作者 王鑫 赵鹏 崔治中 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期609-614,共6页
为探明我国地方品种鸡群禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)的特点,通过接种DF-1细胞及细胞培养上清液p27抗原的检测,从芦花鸡中分离得到三株外源性ALV禽白血病病毒,分别是JS11C1、JS11C2和JS11C3,并对其进行亚群鉴定分析。用PCR... 为探明我国地方品种鸡群禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)的特点,通过接种DF-1细胞及细胞培养上清液p27抗原的检测,从芦花鸡中分离得到三株外源性ALV禽白血病病毒,分别是JS11C1、JS11C2和JS11C3,并对其进行亚群鉴定分析。用PCR方法扩增env基因测序,并与已知鸡源各亚群ALV的囊膜蛋白(gp85)作氨基酸同源性比较。这三株ALV的env基因的gp85大小为1 005bp,编码335个氨基酸;env基因的gp37大小为609bp,编码203个氨基酸。三个毒株之间gp85的同源性为91.9%～97.0%。与A、B、C、D和E五个经典亚群在GenBank中已发表的18个毒株的gp85的同源性仅在77.7%～84.6%间,显著低于鸡群中常见的A、B、E各亚群内的同源性范围(分别为88.2%～98.5%,91.6%～98.8%和97.9%～99.4%),而与J亚群参考株的同源性更是只有34.2%～36.5%。上述结果表明,芦花鸡分离到的三株病毒可能是不同于鸡源ALV已知6个亚群的一个新亚群,按国际上对ALV亚群分类的习惯,初步将其定名为K亚群。 展开更多
关键词 地方品系鸡 禽白血病病毒新亚群 gp85基因
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芦花鸡中B亚群禽白血病病毒的分离与鉴定 被引量：53
2
作者 赵冬敏 张青婵 崔治中 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期53-57,共5页
通过接种DF-1细胞（C/E）系,从山东某地方品系芦花鸡的鸡群中分离到一株外源性白血病病毒（ALV）SDAU09C2。与GenBank中已发表的不同亚群鸡ALV参考株的囊膜蛋白gp85的氨基酸序列比较,表明该分离株与B亚群ALV（ALV-B）2个参考株的gp85的... 通过接种DF-1细胞（C/E）系,从山东某地方品系芦花鸡的鸡群中分离到一株外源性白血病病毒（ALV）SDAU09C2。与GenBank中已发表的不同亚群鸡ALV参考株的囊膜蛋白gp85的氨基酸序列比较,表明该分离株与B亚群ALV（ALV-B）2个参考株的gp85的氨基酸同源性最高,均为92.5%; 与A、C、D、E亚群ALV的gp85的氨基酸同源性仅在73.2%-87.9%之间; 而与J亚群gp85的氨基酸同源性更低至30.3%-32.4%。这是我国地方品系鸡群中第一次分离和鉴定ALV-B及其gp85基因的报道。 展开更多
关键词 B亚群禽白血病毒 gp85基因 芦花鸡
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地方品系鸡中一株A亚群鸡白血病病毒的分离和鉴定 被引量：32
3
作者 朱美真 吴玉宝 崔治中 《中国动物传染病学报》 CAS 2009年第4期31-35,共5页
将种蛋孵化到9~11d,分别制备成鸡胚成纤维细胞（chicken fibroblast cells,CEF）培养,再将其细胞上清接种对内源性白血病病毒（avian leukosis virus,ALV）有抵抗力的DF1细胞,从山东某地方品系种蛋中分离到一株外源性ALV,SDAU09E1。用PC... 将种蛋孵化到9~11d,分别制备成鸡胚成纤维细胞（chicken fibroblast cells,CEF）培养,再将其细胞上清接种对内源性白血病病毒（avian leukosis virus,ALV）有抵抗力的DF1细胞,从山东某地方品系种蛋中分离到一株外源性ALV,SDAU09E1。用PCR扩增其囊膜蛋白基因（env）并隆测序后,将其gp85序列与已发表的各亚群ALV比较分析表明,该毒株与A亚群6个毒株同源性最高,为89.1%~90.9%,而与已发表的鸡的A、C、D、E亚群ALV的gp85的同源性仅在73.2%~87.9%之间,与目前国内最常见的J亚群的gp85的同源性更是低至30.3%~32.4%。这是我国地方品系鸡群中第一次分离和鉴定出ALV-A及其gp85基因。 展开更多
关键词 A亚型禽白血病病毒 gp85基因 地方品系鸡
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我国2000～2001年J亚群禽白血病病毒分离株gp85基因的序列比较 被引量：18
4
作者 张志 崔治中 赵宏坤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期25-27,共3页
以相当于 J亚群禽白血病病毒 (AL V- J)原型株 HPRS- 10 3基因组碱基 #5 394～ #5 416及 #7811～ #7794的 1对引物做 PCR,在 2 0 0 0～ 2 0 0 1年从山东、河南和宁夏分离的 8株 AL V- J中 ,有 6株可以扩增出含 gp85基因的 2 .2 kb左右... 以相当于 J亚群禽白血病病毒 (AL V- J)原型株 HPRS- 10 3基因组碱基 #5 394～ #5 416及 #7811～ #7794的 1对引物做 PCR,在 2 0 0 0～ 2 0 0 1年从山东、河南和宁夏分离的 8株 AL V- J中 ,有 6株可以扩增出含 gp85基因的 2 .2 kb左右的特异性片段。对其中 5株的扩增片段做了序列分析 ,结果表明 ,这 5个毒株的囊膜糖蛋白 gp85与原型株 HPRS-10 3有 93.4%～ 96 .8%的同源性 ,与我国最早的分离株 SD990 2有 93.7%～ 98.7%的同源性 ,它们相互之间的同源性为 91.2 %～ 98.7%。由此说明 ,我国 AL V- J的 gp85基因正在不断发生变异。 展开更多
关键词 2001年 J亚群禽白血病 病毒分离株 gp85基因 序列比较
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种蛋中内源性禽白血病病毒的检测和鉴定 被引量：19
5
作者 徐海鹏 孟凡峰 +2 位作者 董宣 赵鹏 崔治中 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1317-1323,共7页
某祖代种鸡群临床表现正常,在开产后用商品化禽白血病抗体检测试剂盒(ALV-Ab)和禽白血病抗原检测试剂盒检测发现血清抗体阳性率及蛋清抗原阳性率均显著高于正常水平,但对种蛋中抗原阳性的23只种鸡分别接种DF1细胞和SPF鸡胚来源的成纤维... 某祖代种鸡群临床表现正常,在开产后用商品化禽白血病抗体检测试剂盒(ALV-Ab)和禽白血病抗原检测试剂盒检测发现血清抗体阳性率及蛋清抗原阳性率均显著高于正常水平,但对种蛋中抗原阳性的23只种鸡分别接种DF1细胞和SPF鸡胚来源的成纤维细胞(CEF)后均未分离到病毒。为探明该鸡群是否存在内源性禽白血病病毒(ALV—E)以及能否干扰商品化抗体检测试剂盒的结果判定,将23只种鸡所产种蛋分别孵化后逐一制备成CEF培养,盲传3代后检测到其中1只鸡的细胞培养上清抗原检测为阳性。从该细胞培养上清液提取RNA,RTPCR扩增其gp85基因,序列分析证明该检出病毒为E亚群ALV。将该E亚群ALV接种SPF鸡胚来源CEF后又可检出p27抗原,显示该内源性ALV具备传染性。同时,对该病毒gp85基因进行了原核表达,表达产物免疫鸡后部分鸡血清经ALV—Ab抗体检测试剂盒检测为阳性。本研究分离到1株对CEF具备传染性的内源性ALV-E,并证明其诱导产生的抗体能够干扰对外源性ALV的鉴别诊断,提示在进行临床类似情况的判定时要结合鸡群实际表现做全面分析。 展开更多
关键词 种鸡 E亚群禽白血病病毒 gp85基因 血清交叉反应 P27抗原
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在抗体免疫选择压作用下鸡J亚群白血病病毒gp85基因的变异 被引量：17
6
作者 王增福 崔治中 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2006年第1期9-16,共8页
将鸡J亚群白血病病毒(ALV—J)中国分离株NX0101接种到已长成单层鸡胚成纤维细胞(CEF)的六孔细胞培养板上,分为A组(培养基中无抗体)和B组(培养基中含抗体),每组设3个独立的传代系列,分别对第10代、20代和30代病毒的囊膜糖蛋白基因(env)... 将鸡J亚群白血病病毒(ALV—J)中国分离株NX0101接种到已长成单层鸡胚成纤维细胞(CEF)的六孔细胞培养板上,分为A组(培养基中无抗体)和B组(培养基中含抗体),每组设3个独立的传代系列,分别对第10代、20代和30代病毒的囊膜糖蛋白基因(env)进行了克隆和测序,序列比较结果表明:原始病毒与无抗体A组不同传代系列的不同代次之间gp85氨基酸序列同源性为97.7%-99.7%;而原始病毒与有抗体B组不同传代系列的不同代次之间gP85的氨基酸序列同源性为93.8%-96.1%.对gp85高变区上有义突变(NS)与沉默突变(S)的比例计算分析表明,无抗体A组三个传代系列在110-120,141-151和189-194aa这3个高变区域上NS/S的值分别为2(8/4),1(3/3)和1.3(4/3);有抗体B组三个传代系列在110—120,140—150和188—193aa这3个高变区域上NS/S的值分别为4.1(13/3),4.7(14/3)和3.3(11/3).该结果是在严格实验条件下显示特异性抗体这一免疫选择压对gp85基因变异的影响. 展开更多
关键词 特异性抗体 鸡J亚群白血病病毒 gp85基因 变异
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禽白血病A亚群病毒gp85的单因子血清制备及其特异性鉴定 被引量：13
7
作者 张恒 李传龙 +1 位作者 杨明 崔治中 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期134-140,共7页
【目的】为了研究出一种能够针对A亚群禽白血病的快速特异性诊断试剂。【方法】将A亚群禽白血病病毒(ALV-A)SDAU09E1株接种于DF1细胞上,以感染细胞DNA为模板,通过PCR方法扩增出1023bp的ALV-A-gp85基因。将其正确阅读框架插入表达载体PET... 【目的】为了研究出一种能够针对A亚群禽白血病的快速特异性诊断试剂。【方法】将A亚群禽白血病病毒(ALV-A)SDAU09E1株接种于DF1细胞上,以感染细胞DNA为模板,通过PCR方法扩增出1023bp的ALV-A-gp85基因。将其正确阅读框架插入表达载体PET-32a(+)中,实现在BL21(Rosetta)宿主菌中表达。将纯化的融合蛋白常规免疫小鼠,制备得抗血清。【结果】实验成功获得52.8kDa的重组融合蛋白,且具有良好的免疫原性。间接免疫荧光试验(IFA)表明该血清可与ALV-A和ALV-B反应,但不与ALV-J反应。【结论】该实验首次在国内外研制出能用于鉴别性检测经典的A/B亚群ALV的单因子血清,可与ALV-J特异性单抗互补作用于外源性ALV感染的鉴别性诊断。我国鸡群同时受经典的ALV-A/B和新出现的ALV-J困扰,鉴别诊断非常必要,研究这种试剂具有较高的实用价值。 展开更多
关键词 A亚群禽白血病病毒 gp85基因 表达 IFA 单因子血清
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J亚群禽白血病病毒SCAU-0901株的分离鉴定 被引量：13
8
作者 张小桃 卢受昇 +4 位作者 张贺楠 陈平洁 赖汉漳 廖明 曹伟胜 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期674-678,共5页
在组织病理学观察的基础上,经接种DF-1细胞系、ELISA抗原检测、聚合酶链式反应(PCR)以及亚群特异性免疫荧光试验(IFA),从送检的疑似禽白血病感染的麻黄肉种鸡中分离并鉴定出1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为SCAU-0901。利用特异性引... 在组织病理学观察的基础上,经接种DF-1细胞系、ELISA抗原检测、聚合酶链式反应(PCR)以及亚群特异性免疫荧光试验(IFA),从送检的疑似禽白血病感染的麻黄肉种鸡中分离并鉴定出1株J亚群禽白血病病毒(ALV-J),命名为SCAU-0901。利用特异性引物分别扩增出长度为545 bp和2.2×103bp的目的片段,并对目的片段进行了克隆测序。序列分析发现,SCAU-0901株的gp85基因与国内外各ALV-J毒株相应核苷酸序列的相似性为86.1%～95.1%,其中与BJ0303株的相似性最高(95.1%),与ADOL-7501株的相似性最低(86.1%)。系统遗传进化分析表明,SCAU-0901株的gp85基因片段与BJ0303株的亲缘关系最近。 展开更多
关键词 禽白血病 J亚群禽白血病病毒 gp85基因 分离 鉴定
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A亚群禽白血病病毒QC6281株的分离与gp85基因序列分析 被引量：11
9
作者 乔彦华 王永强 +2 位作者 庞平 金铮 陈福勇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第12期9-12,共4页
本试验通过病理剖检、接种DF-1细胞、ELISA及RT-PCR检测,从北京某种鸡场的疑似禽白血病的父母代蛋鸡中分离到1株A亚群禽白血病病毒,命名为QC6281。并根据GenBank中已发表序列设计引物,扩增env基因片段并将其克隆到pMD19-T-simple载体中... 本试验通过病理剖检、接种DF-1细胞、ELISA及RT-PCR检测,从北京某种鸡场的疑似禽白血病的父母代蛋鸡中分离到1株A亚群禽白血病病毒,命名为QC6281。并根据GenBank中已发表序列设计引物,扩增env基因片段并将其克隆到pMD19-T-simple载体中,扩增的env基因片段大小为1 239 bp,其中包括完整的gp 85基因,将gp 85基因亚克隆到pMD19-T-si mple载体中并测序,gp 85基因大小为1 032 bp,编码344个氨基酸。将env基因片段和推导的氨基酸序列与GenBank中9株ALV的env基因相应序列做同源性分析并制作进化树图谱。发现QC6281与已发表的A亚群禽白血病病毒株该区域核苷酸同源性在83.8%～98%,氨基酸同源性在86.9%～98.5%。其中与Myeloblastosis-associated virus type 1(L10922.1)同源性最高,核苷酸同源性为98%,氨基酸同源性为98.5%;且与Myeloblastosis-associated virus type 1(L10922.1)亲缘关系最近。本研究为该毒株的生物学特性以及致病性研究打下基础。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 gp85基因 ENV基因 序列比较
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鸡内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆及分析 被引量：7
10
作者 杨玉莹 秦爱建 +1 位作者 顾玉芳 赵振华 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期54-59,共6页
为深入探讨J亚群禽白血病病毒(AvianleukosisvirussubgroupJ,ALV J)的亚群特性,利用ALV Jgp85基因两侧的序列片段为引物,从正常SPF蛋鸡、商品肉鸡和DF1细胞基因组中完整地扩增了内源性类ALV Jgp85基因。肉鸡和DF1细胞内源性类ALV Jgp85... 为深入探讨J亚群禽白血病病毒(AvianleukosisvirussubgroupJ,ALV J)的亚群特性,利用ALV Jgp85基因两侧的序列片段为引物,从正常SPF蛋鸡、商品肉鸡和DF1细胞基因组中完整地扩增了内源性类ALV Jgp85基因。肉鸡和DF1细胞内源性类ALV Jgp85基因同源性达99 9%;SPF蛋鸡内源性类ALV Jgp85基因与肉鸡和DF1细胞的内源性类ALV Jgp85基因之间同源性达95 6%、95 3%。三种不同来源的内源性类ALV Jgp85基因DNA与IMC10200株ALV J的gp85基因的同源性分别为91 8%、94 1%、94 0%;与ALV J原型株HPRS 103gp85基因的同源性分别为95 6%、98 3%、99 9%。内源性类ALV Jgp85序列与外源性ALV Jgp85基因具有相似或一致的ORF和Jameson Worlf抗原表位优势。 展开更多
关键词 内源性反录病毒 gp85基因 基因克隆 J亚群禽白血病病毒 鸡
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J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆与表达 被引量：9
11
作者 贾纯琰 张莉 +1 位作者 李永清 张培君 《动物医学进展》 CSCD 2008年第5期7-9,共3页
构建J亚群禽白血病病毒gp85基因的原核表达载体,并在大肠埃希菌中获得表达。根据原核表达载体pET30的酶切图谱设计引物,以重组质粒pBS-T-env为模板,扩增gp85基因。将此段基因克隆到表达载体pET30上,转化大肠埃希菌BL21,用IPTG诱导表达,... 构建J亚群禽白血病病毒gp85基因的原核表达载体,并在大肠埃希菌中获得表达。根据原核表达载体pET30的酶切图谱设计引物,以重组质粒pBS-T-env为模板,扩增gp85基因。将此段基因克隆到表达载体pET30上,转化大肠埃希菌BL21,用IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析,表达出约为70ku的融合蛋白。获得了gp85基因的表达产物,为研制ALV-J的特异性抗血清及国内ALV-J病毒分子诊断试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 J-亚群禽白血病病毒 gp85基因 克隆 表达
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不同地区海兰褐蛋鸡中J亚群-禽白血病病毒株gp85基因的分子演化分析 被引量：11
12
作者 代阳 杨其峰 +5 位作者 王波 刘绍琼 王秀臻 柴家前 崔治中 孙淑红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期635-638,共4页
本研究通过对不同地区海兰褐蛋鸡群中分离的5株J亚群-禽白血病病毒(ALV-J)的囊膜糖蛋白基因(gp85)进行同源性分析,阐述了不同海兰褐鸡群中存在的ALV-J的分子演化规律。对2008-2009年分别从北京、陕西、山东泰安、济阳、曲阜等不同地区... 本研究通过对不同地区海兰褐蛋鸡群中分离的5株J亚群-禽白血病病毒(ALV-J)的囊膜糖蛋白基因(gp85)进行同源性分析,阐述了不同海兰褐鸡群中存在的ALV-J的分子演化规律。对2008-2009年分别从北京、陕西、山东泰安、济阳、曲阜等不同地区饲养的海兰褐鸡分离到的5株ALV-J,用PCR方法克隆gp85基因、测序,并与国内外已发表的14株ALV-Jgp85基因进行同源性比较。结果表明,5株ALV-J与来自白羽肉鸡的HPRS-103株的同源性最近,平均为96.6%(96.4%～96.8%);与来自国内海兰灰蛋鸡的SD07LK1株的同源性平均仅为89.6%(89.3%～89.9%);而5株ALV-J间的同源性高达98.1%以上(98.1%～100%)。本研究发现,不同地区的海兰褐蛋鸡中广泛存在的ALV-J可能有一个共同的来源,即国外的白羽肉鸡。 展开更多
关键词 海兰褐蛋鸡 J亚群-禽白血病病毒 gp85基因 同源性
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山东五大地方鸡禽白血病病毒主要流行亚型鉴定及其分离株gp85基因的分子特征分析 被引量：9
13
作者 陈静 王波 +3 位作者 王海明 程合刚 武星辰 孙淑红 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期451-457,共7页
通过对山东五大地方鸡(寿光鸡、芦花鸡、百日鸡、琅琊鸡、鲁西斗鸡)不同亚型禽白血病病毒(ALV)分离株鉴定及gp85基因序列分析,探究山东五大地方鸡ALV的主要流行亚型及gp85基因分子特征。分别将寿光鸡、百日鸡、芦花鸡的无菌抗凝血和琅... 通过对山东五大地方鸡(寿光鸡、芦花鸡、百日鸡、琅琊鸡、鲁西斗鸡)不同亚型禽白血病病毒(ALV)分离株鉴定及gp85基因序列分析,探究山东五大地方鸡ALV的主要流行亚型及gp85基因分子特征。分别将寿光鸡、百日鸡、芦花鸡的无菌抗凝血和琅琊鸡、鲁西斗鸡的卵白接种CEF培养9~10d,常规方法提取感染细胞的cDNA,用针对J亚型ALV(ALV-J)gp85基因(924bp)的引物和A^J(含囊膜蛋白env基因,2 400bp)的群引物进行PCR扩增、克隆、测序并分析其特点。本研究发现,2009—2011年间,山东五大地方鸡均存在ALV-J感染,5个ALV-J分离株gp85基因之间的相似性为98.4%~99.9%,与原型毒株HPRS-103相似性为97.8%~98.3%;均扩出内源性ALV(ALV-E)片段,与不能产生传染性病毒粒子的ev-1、ev-3、ev-6毒株相似性最高,推测为鸡基因组所携带;同时还发现,琅琊鸡、芦花鸡存在A亚型ALV(ALV-A)的感染。研究结果表明,2009—2011年间的山东五大地方鸡已经普遍存在ALV-J,两大品系中存在ALV-A和ALV-J共感染,同时ALV-E的片段广泛存在,这一结论揭示出山东地方鸡的禽白血病净化工作更加具有挑战性。 展开更多
关键词 地方鸡 禽白血病病毒(ALV) gp85基因 分子特征
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地方鸡禽白血病病毒感染调查及主要流行亚群分析 被引量：9
14
作者 杨荣坤 许青荣 +3 位作者 崔卫涛 肖运才 李自力 周祖涛 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期89-93,共5页
为了解湖北省地方鸡禽白血病病毒的感染状态及主要流行亚群,从麻城绿壳蛋鸡、江汉鸡、景阳鸡3个地方品种核心群采集了7477份样品,进行蛋清p27抗原检测、公鸡病毒分离鉴定及分离株gp85基因序列分析。结果显示:3个地方鸡种蛋清p27抗原阳... 为了解湖北省地方鸡禽白血病病毒的感染状态及主要流行亚群,从麻城绿壳蛋鸡、江汉鸡、景阳鸡3个地方品种核心群采集了7477份样品,进行蛋清p27抗原检测、公鸡病毒分离鉴定及分离株gp85基因序列分析。结果显示:3个地方鸡种蛋清p27抗原阳性率分别为1.32%、6.54%和2.82%,公鸡病毒分离率为6.11%、30.14%和8.64%,表明湖北省地方鸡禽白血病病毒感染比较严重,不同品种的感染率不同,公鸡的排毒率高于母鸡。利用PCR方法将分离的15株禽白血病病毒分为两大亚群,分离株gp85基因遗传进化分析结果显示,3个地方鸡品种主要流行J、K亚群禽白血病病毒,均存在J、K亚群禽白血病病毒的共感染,表明湖北省地方鸡禽白血病病毒感染情况较为复杂。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 鸡 病毒感染 病毒分离 gp85基因 病毒亚群 禽病净化
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一株J亚型禽白血病病毒的分离鉴定及其gp85基因的序列分析 被引量：8
15
作者 王元红 鲁智敏 +8 位作者 张学琪 刘自敏 胡子慧 杨侃侃 刘红梅 潘玲 彭开松 李永东 王勇 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期709-715,共7页
为确定安徽巢湖某地方品种养鸡场的疑似禽白血病(avian leukosis,AL)的病原,以DF-1细胞从肿瘤组织中分离病毒,采用RT-PCR方法进行鉴定,并对其感染细胞上清进行透射电镜观察。同时对送检病鸡的心、肝、脾及腺胃等进行组织病理学观察,最... 为确定安徽巢湖某地方品种养鸡场的疑似禽白血病(avian leukosis,AL)的病原,以DF-1细胞从肿瘤组织中分离病毒,采用RT-PCR方法进行鉴定,并对其感染细胞上清进行透射电镜观察。同时对送检病鸡的心、肝、脾及腺胃等进行组织病理学观察,最后将扩增出的gp85基因与GenBank收录的其他ALV序列进行比对分析。结果表明:PCR扩增产物大小约为928 bp,经测序证实为ALV gp85基因,将该分离株命名为AHCH-2018株。透射电镜观察到具有囊膜的大小约100 nm的病毒粒子。组织病理学结果显示,病鸡的心、肝、脾及腺胃中有大量成灶淋巴细胞增殖。遗传进化分析结果表明,分离株的gp85基因与多株ALV J参考毒株核苷酸序列的同源性为94.1%～99.5%,且与GD1401J株的核苷酸同源性最高,达99.5%,与A、B、C、D、E亚群同源性为46.5%～49.7%。该分离株与J亚群原型毒株处于同一大分支。本研究为了解安徽土鸡种群中禽白血病的分子流行病学特点提供了一定的数据参考。 展开更多
关键词 禽白血病 组织病理学 gp85基因 序列分析
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黄羽鸡J亚群禽白血病病毒的分离及gp85基因分析 被引量：8
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作者 潘孝成 赵瑞宏 +5 位作者 胡晓苗 沈学怀 周学利 戴银 侯宏艳 张丹俊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第2期51-54,共4页
为了解禽白血病病毒在黄羽鸡中的流行情况,采用DF-1细胞接种、细胞培养上清P27抗原检测、PCR扩增,对送检疑似禽白血病的黄羽鸡病料进行了病毒分离,并对分离病毒gp85基因进行了测序和序列比较.结果表明,自黄羽鸡分离到2株J亚群禽白血病... 为了解禽白血病病毒在黄羽鸡中的流行情况,采用DF-1细胞接种、细胞培养上清P27抗原检测、PCR扩增,对送检疑似禽白血病的黄羽鸡病料进行了病毒分离,并对分离病毒gp85基因进行了测序和序列比较.结果表明,自黄羽鸡分离到2株J亚群禽白血病病毒（ALV-J）,分别命名为AHaq01和AHaq02,它们之间的核苷酸序列同源性为93.8％,与ALV-J参考毒株序列同源性为91.1％～99.8％,其中与ALV-J原型毒株HPRS-103的序列同源性分别为93.3％和98.1％,与分离株AHaq01和AHaq02同源性最高的分别是WN100404（95.0％）和SD09TA04 （99.8％）.进化分析进一步表明,2个分离株间的亲缘关系较远,为来源不同的ALV-J毒株. 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 gp85基因 分离 黄羽鸡
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J亚群禽白血病病毒gp85基因的原核表达及间接ELISA方法建立 被引量：7
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作者 刘丽娜 邵华斌 +5 位作者 程国富 杨峻 张琳 谢华丽 栗绍文 罗青平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期38-41,共4页
为建立检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体间接ELISA方法,本实验根据已发表的ALV-J gp85基因序列设计一对特异性引物,以该病毒cDNA为模板进行PCR扩增,将目的基因克隆于pET-28a(+)载体中,原核表达的重组蛋白约为38 ku,经western blot分析... 为建立检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体间接ELISA方法,本实验根据已发表的ALV-J gp85基因序列设计一对特异性引物,以该病毒cDNA为模板进行PCR扩增,将目的基因克隆于pET-28a(+)载体中,原核表达的重组蛋白约为38 ku,经western blot分析表明,重组蛋白gp85具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA抗体检测方法,该方法对其它相关的禽类病原无交叉反应,其组内和组间的变异系数均低于13%,具有良好的重复性。对458份临床血清样品进行检测,同时用IDEXX的同类ELISA抗体检测试剂盒进行对比,总符合率达到96.29%。本研究为ALV-J的流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病 gp85基因 蛋白表达 酶联免疫吸附试验
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A、B、J亚群禽白血病病毒混合感染的鉴定及gp85基因序列分析 被引量：1
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作者 窦俊峰 汪最 +5 位作者 李丽 卢琴 金鑫鑫 凌小淳 罗青平 翟新国 《中国畜牧兽医》 CSCD 北大核心 2024年第1期302-311,共10页
【目的】了解湖北地区禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)亚群之间混合感染及其gp85基因遗传变异情况,为进一步研究ALV混合感染的流行病学提供参考。【方法】对来自湖北宜昌疑似感染ALV的一只病死鸡进行病理剖检,无菌采集病变组... 【目的】了解湖北地区禽白血病病毒(Avian leukosis virus, ALV)亚群之间混合感染及其gp85基因遗传变异情况,为进一步研究ALV混合感染的流行病学提供参考。【方法】对来自湖北宜昌疑似感染ALV的一只病死鸡进行病理剖检,无菌采集病变组织接种DF-1细胞进行病毒分离,通过PCR、ELISA及间接免疫荧光试验(IFA)等方法进行亚群鉴定,进一步对分离株gp85基因的相似性和变异情况进行分析。【结果】剖检结果可见病死鸡肾脏、脾脏肿大,肺脏出血,表面可见灰白色肿瘤结节;组织匀浆接种DF-1细胞后,ELISA检测发现细胞上清P27抗原呈阳性;IFA检测发现,感染细胞里有特异性绿色荧光;PCR鉴定能同时扩增出A(692 bp)、B(847 bp)和J(545 bp)亚群的特异性条带。鉴定结果表明,从该病死鸡中分离到A、B和J亚群ALV毒株,分别命名为HBYC2022-A、HBYC2022-B和HBYC2022-J。分离株gp85基因核苷酸相似性分析显示,HBYC2022-A与江苏株JS-A1201相似性最高,为99.6%;HBYC2022-B与江苏株JS-B1204相似性最高,为99.7%;而HBYC2022-J与黑龙江株PK19FA01、广西株GX20YL12 J及安徽株AHaq02相似性均为100%。此外,分离株gp85基因高突变区域(hr1、hr2)氨基酸序列并未出现特殊点突变。【结论】鸡群存在A、B和J不同亚群ALV的混合感染情况,提示国内养禽场需提高警惕并加强针对ALV各亚群的流行病学调查。 展开更多
关键词 禽白血病病毒(ALV) 分离鉴定 混合感染 gp85基因 序列分析
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从芦花鸡分离的J亚群ALV病毒及其gp85基因演化 被引量：7
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作者 秦卓明 徐怀英 +5 位作者 马秀丽 黄兵 李玉峰 李福伟 于可响 崔治中 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期1180-1185,共6页
采用RT-PCR方法直接从芦花鸡肿瘤中进行禽白血病病毒（Avian leucosis virus,ALV）的核酸扩增,经测序证实为ALV。将上述病料接种DF1细胞（C/E）进行盲传,并对其感染细胞上清进行ALV P27抗原检测,结果为阳性,证实获得了一株病毒,命名为SD... 采用RT-PCR方法直接从芦花鸡肿瘤中进行禽白血病病毒（Avian leucosis virus,ALV）的核酸扩增,经测序证实为ALV。将上述病料接种DF1细胞（C/E）进行盲传,并对其感染细胞上清进行ALV P27抗原检测,结果为阳性,证实获得了一株病毒,命名为SDJN2012。用PCR方法扩增其囊膜蛋白gp85基因并测序,与GenBank中的ALV参考毒株进行核苷酸或氨基酸同源性比较。结果表明：SDJN2012与山东较早发现的J亚群ALV代表株SD0001的核苷酸（氨基酸）同源性最高,达93.4%（92.6%）,与J亚群不同年代的代表株同源性为88.6%～93.3%（88.2%～90.6%）,而与A,C,D,E亚群ALV毒株的同源性仅为19.7%～32.2%（10.2%～32.2%）,进一步确证分离到的病毒为J亚群ALV。对种蛋的跟踪监测证实：ALV蛋清P27抗原阳性率为37.6%,而血清学监测则呈现多样性的变化：鸡群发病前J亚群ALV抗体检测为阴性,发病后阳性率仅为9.35%,而A/B亚群阳性率则由发病前的9.8%,攀升到发病后的75.4%,彰显出ALV病原学、血清学和分子流行病学的复杂性。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 gp85基因 J亚群
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J亚群禽白血病病毒安徽分离株的鉴定及其gp85基因序列分析 被引量：6
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作者 安好峰 戴银 +5 位作者 潘孝成 侯宏艳 赵瑞宏 胡晓苗 李福宝 张丹俊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第12期6-10,共5页
从安徽省的黄羽肉鸡和罗曼蛋鸡中各分离鉴定出1株J亚群禽白血病病毒,克隆获得了2条相应的gp85基因序列,并与参考毒株进行序列比对。结果表明,两分离毒株与J亚群参考毒株同源性为82.1%～99.4%,分离毒株之间同源性为85.4%。其中肉鸡分离... 从安徽省的黄羽肉鸡和罗曼蛋鸡中各分离鉴定出1株J亚群禽白血病病毒,克隆获得了2条相应的gp85基因序列,并与参考毒株进行序列比对。结果表明,两分离毒株与J亚群参考毒株同源性为82.1%～99.4%,分离毒株之间同源性为85.4%。其中肉鸡分离毒株与J亚群原型毒株HPRS-103同源性为97.1%,与J亚群国内毒株SD09TA04、SDYC02J同源性均为99.4%;蛋鸡分离毒株与HPRS-103的同源性为89.0%,与SD09TA04和SDYC02J同源性仅为88.6%。两分离毒株的gp85氨基酸序列出现突变和缺失,在高变区hr1、hr2变异明显。进化分析进一步表明,2个分离毒株亲缘关系较远,可能来源于不同的原始病毒株。 展开更多
关键词 J亚群禽白血病病毒 安徽分离毒株 gp85基因 序列分析
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