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贵州省2011年急性胃肠炎诺如病毒的哨点监测及其基因特征分析 被引量：1
1
作者 阎岩 吴悦 +2 位作者 郭军 田克诚 王定明 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期51-55,共5页
为了解贵州省2011年诺如病毒的基因型,监测了2011年5月至12月于贵州省人民医院就诊的急性胃肠炎病例,收集粪便标本,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)初步鉴定,并对阳性株的VP1基因区克隆及测序。检测标本70份,GⅠ型... 为了解贵州省2011年诺如病毒的基因型,监测了2011年5月至12月于贵州省人民医院就诊的急性胃肠炎病例,收集粪便标本,采用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)初步鉴定,并对阳性株的VP1基因区克隆及测序。检测标本70份,GⅠ型诺如病毒阳性1株,阳性率1.43%,GⅡ型诺如病毒阳性34株,阳性率48.57%,获得7份GⅡ型诺如病毒VP1基因序列,3株为GⅡ.4亚型,为新型变异株(GⅡ4 2011),与GⅡ4 2006b变异株的亲缘关系最近,有1个氨基酸位发生了回复突变;4株为GⅡ.3亚型,分为2个基因簇,1簇与2008～2009年韩国株(HM635118)及上海株(GU991355)的亲缘关系最近,1簇与2010年日本株(AB629943)及2007年印度株(EU921389)等的亲缘关系最近,有4个氨基酸位点易发生回复突变。 展开更多
关键词 诺如病毒 gⅱ4型 gⅱ3型 VP1基因 贵州
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一起重庆市GⅡ.3型诺如病毒聚集性疫情的流行病学调查 被引量：1
2
作者 赖流庆 付莎莉 张鹏 《热带医学杂志》 CAS 2022年第5期719-723,共5页
目的分析重庆市某学校一起诺如病毒感染性腹泻疫情的发生特点及其感染病毒的基因型别,为有效控制疫情提供科学依据,同时为类似疫情现场处置提供经验。方法运用描述性和分析性流行病学方法对疫情的流行特征和危险因素进行分析,采集病例... 目的分析重庆市某学校一起诺如病毒感染性腹泻疫情的发生特点及其感染病毒的基因型别,为有效控制疫情提供科学依据,同时为类似疫情现场处置提供经验。方法运用描述性和分析性流行病学方法对疫情的流行特征和危险因素进行分析,采集病例、可能的无症状感染者、桶装水及环境有关标本,采用实时荧光定量RTPCR检测标本诺如病毒RNA,阳性标本进行逆转录PCR扩增、电泳、测序和发育树分析。结果本次疫情共有8例病例,均发生在同一班级,该班共有28名学生,班级学生罹患率28.57%,男生、女生罹患率分别为30.77%和26.67%;主要临床症状为呕吐、腹痛、腹泻,8名患病学生、4名无任何症状的该班老师、学生课桌、学生晨检牌检出诺如病毒GⅡ阳性。8株疫情病毒经序列测定和比对分析,均为GⅡ.3亚型。结论该起事件是由诺如病毒GⅡ.3感染所致的群体性事件。密切接触、无症状感染者以及共用物品可能导致此次诺如病毒的传播。 展开更多
关键词 诺如病毒 gⅱ.3型 急性胃肠炎 学校
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GⅡ.3型诺如病毒重组衣壳蛋白的表达和纯化鉴定 被引量：1
3
作者 王佳慧 李凤琴 +2 位作者 李楠 韩春卉 江涛 《中国食品卫生杂志》 2017年第1期9-13,共5页
目的通过杆状病毒表达系统,获取高纯度GⅡ.3型诺如病毒重组衣壳蛋白,为制备抗GⅡ.3型诺如病毒单克隆和多克隆抗体提供免疫原。方法将GⅡ.3型诺如病毒衣壳蛋白基因片段修饰后插入p HTA表达载体中,经测序鉴定,将鉴定正确的重组质粒转化到M... 目的通过杆状病毒表达系统,获取高纯度GⅡ.3型诺如病毒重组衣壳蛋白,为制备抗GⅡ.3型诺如病毒单克隆和多克隆抗体提供免疫原。方法将GⅡ.3型诺如病毒衣壳蛋白基因片段修饰后插入p HTA表达载体中,经测序鉴定,将鉴定正确的重组质粒转化到MAX Efficiency~DH10Bac^(TM)感受态细胞中,获取表达杆粒并转染SF9细胞,表达GⅡ.3型诺如病毒重组衣壳蛋白。重组蛋白用Ni-NTA His蛋白亲和柱纯化,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法鉴定。结果 SDS-PAGE和Western blot结果表达了分子量约为60 k Da的重组蛋白,动物试验表明重组蛋白具有较好的免疫原性,为制备抗GⅡ.3型诺如病毒单克隆抗体和多克隆抗体、建立相应的免疫学检测方法奠定了基础。结论构建了GⅡ.3型诺如病毒衣壳蛋白表达载体,并获得GⅡ.3型诺如病毒重组衣壳蛋白。 展开更多
关键词 重组蛋白 gⅱ.3型诺如病毒 杆状病毒表达系统 表达 纯化 鉴定 食品污染物 食品安全
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抗GⅡ.3型诺如病毒阻断型单克隆抗体的制备和鉴定
4
作者 霍玉奇 郑礼钧 刘金瑾 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期98-105,共8页
诺如病毒(norovirus,NoV)是引起非细菌性急性肠胃炎的主要病原体之一。目前国内外还没有关于抗GⅡ.3NoV组织血型抗原(histo-blood group antigens,HBGAs)阻断型单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的报道,本研究制备了抗GⅡ.3型NoV HBG... 诺如病毒(norovirus,NoV)是引起非细菌性急性肠胃炎的主要病原体之一。目前国内外还没有关于抗GⅡ.3NoV组织血型抗原(histo-blood group antigens,HBGAs)阻断型单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的报道,本研究制备了抗GⅡ.3型NoV HBGA阻断型mAbs,并对这些抗体特性进行了初步的鉴定。采用纯化的GⅡ.3型(GenBank登录号:KY767665)NoV病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)免疫BALB/c小鼠。将GⅡ.3,GⅡ.4(GenBank登录号,KF306214),GⅡ.3S/GⅡ.6P,GⅡ.6S/GⅡ.3P,GⅡ.4-VP1/GⅡ.3-P2主要衣壳蛋白(VP1)抗原或嵌合抗原作为包被抗原采用间接ELISA方法分别对细胞克隆株进行筛选,采用体外HBGA-VLP结合阻断实验对筛选的mAbs进行阻断活性鉴定,利用基于涵盖GⅡ.3突环区(protruding domain,P区)的重叠多肽ELISA和western blot(WB)对阻断抗体结合位点进行特性分析。体外HBGA-VLPs阻断实验显示三株细胞分泌抗体具有阻断活性。挑选目标株制备腹水并对mAbs进行纯化。WB结果显示三株HBGA阻断型mAbs只识别非变性的GⅡ.3 VP1蛋白;基于GⅡ.3 P区重叠多肽的间接ELISA结果显示三株HBGA阻断型mAbs与被检测多肽无结合活性。本研究制备了具有HBGAs阻断活性的GⅡ.3 NoV特异性mAbs,全部只识别非变性的GⅡ.3 VP1蛋白,且结合位点位于GⅡ.3 VP1 P2区。抗GⅡ.3 NoV HBGAs阻断型mAbs的获得为后续研究GⅡ.3 NoV的进化、感染机制和HBGAs结合位点提供了原材料。 展开更多
关键词 gⅱ.3型诺如病毒(NoV) 组织血型抗原(HBgAs) 阻断型单克隆抗体(blocking mAbs) 多肽 表位
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