PCR方法检测奶牛粪便中鼠隐孢子虫 被引量：16

1

作者 李培英 周金林 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期350-351,共2页

从含有鼠隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中，直接提取 Ｄ Ｎ Ａ 用作 Ｐ Ｃ Ｒ 模板，用 １ 对人工合成的寡核苷酸作为 Ｐ Ｃ Ｒ 引物，扩增大小为 ５４０ ｂｐ 的特异片段。 Ｐ Ｃ Ｒ 产物经电泳鉴定，表明可从含隐孢子卵囊的奶牛粪便标本 ... 从含有鼠隐孢子虫卵囊的奶牛粪便中，直接提取 Ｄ Ｎ Ａ 用作 Ｐ Ｃ Ｒ 模板，用 １ 对人工合成的寡核苷酸作为 Ｐ Ｃ Ｒ 引物，扩增大小为 ５４０ ｂｐ 的特异片段。 Ｐ Ｃ Ｒ 产物经电泳鉴定，表明可从含隐孢子卵囊的奶牛粪便标本 Ｄ Ｎ Ａ 抽提物中扩增出目的片段，而其他几种寄生虫及阴性对照均不能扩增出特异片段。本方法的敏感性最低可检测到含卵囊 ４００ 个／ｍ Ｌ 的样本，具有敏感性高、特异性强的特点。 展开更多

关键词 PCR 鼠隐孢子虫 粪便 隐孢子虫

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环境丰容对笼养川金丝猴日常行为以及粪便皮质醇水平的影响 被引量：13

2

作者 胡新波 何鑫 +1 位作者 黄淑芳 朱岩 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期304-311,共8页

在笼养条件下,由于有限的空间和单调的笼舍结构,川金丝猴行为和生理指标发生变化,包括出现刻板行为和产生较高的粪便内应激激素。本文旨在研究环境丰容对笼养川金丝猴日常行为以及粪便皮质醇水平的影响。于2013年8月1日至11月1日对杭州... 在笼养条件下,由于有限的空间和单调的笼舍结构,川金丝猴行为和生理指标发生变化,包括出现刻板行为和产生较高的粪便内应激激素。本文旨在研究环境丰容对笼养川金丝猴日常行为以及粪便皮质醇水平的影响。于2013年8月1日至11月1日对杭州动物园内7只川金丝猴进行环境丰容后的行为观察。采用瞬时扫描法记录上午08:30-10:30和下午14:00-16:00的动物行为,并统计15种行为的发生频率。比较丰容前后每种行为的发生频率,结果表明环境丰容降低了川金丝猴的不活跃行为(P=0.021)和刻板行为(P=0.034),增加了活跃行为频率(P=0.018)。环境丰容后,动物表现出更多的攀爬(P=0.012)、探究(P=0.014)和环顾行为(P=0.010)。粪便皮质醇激素的测定结果表明,除1只雄性个体激素上升外,其余6只个体的粪便皮质醇含量显著下降(P=0.028)。以上结果提示环境丰容可改善川金丝猴的福利状况。 展开更多

关键词 川金丝猴 环境丰容 皮质醇 粪便

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圈养海南坡鹿的繁殖行为与粪样中孕酮含量的关系 被引量：7

3

作者 刁晓平 梁宁 +1 位作者 杜世川 吕泽宾 《家畜生态学报》 2005年第4期72-74,共3页

利用放射免疫测定法测定了3只坡鹿粪便中孕酮含量的变化,观察记录了圈养坡鹿的繁殖行为。结果显示:圈养坡鹿繁殖行为具有明显的季节变化,如雄鹿的求偶行为、标记行为和雄鹿、雌鹿的性行为等在发情期表现明显。坡鹿怀孕及分娩前后,粪便... 利用放射免疫测定法测定了3只坡鹿粪便中孕酮含量的变化,观察记录了圈养坡鹿的繁殖行为。结果显示:圈养坡鹿繁殖行为具有明显的季节变化,如雄鹿的求偶行为、标记行为和雄鹿、雌鹿的性行为等在发情期表现明显。坡鹿怀孕及分娩前后,粪便中孕酮含量有明显的变化。怀孕前粪便中孕酮的含量维持在较低的浓度水平。怀孕后,孕酮含量明显上升。分娩后,孕酮含量迅速降至低浓度水平。粪便中孕酮含量的变化可以及时地反映坡鹿的生殖生理状况(包括发情、怀孕、分娩等)并作为早期妊娠诊断的依据。 展开更多

关键词 坡鹿 繁殖行为 粪样 激素

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昆明市流浪犬寄生虫感染情况的调查 被引量：9

4

作者 杨建发 朱尤帅 +2 位作者 李文花 谢云 邹丰才 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第10期114-116,共3页

为了解昆明市流浪犬寄生虫感染情况,随机采集25份新鲜粪样进行饱和盐水漂浮法检查;对18只死亡流浪犬进行寄生虫解剖法检查,收集虫体,进行计数和鉴定。结果显示,14份粪样中检出虫卵或卵囊,检出率为56.0%。其中8份检测出球虫卵囊,检出率32... 为了解昆明市流浪犬寄生虫感染情况,随机采集25份新鲜粪样进行饱和盐水漂浮法检查;对18只死亡流浪犬进行寄生虫解剖法检查,收集虫体,进行计数和鉴定。结果显示,14份粪样中检出虫卵或卵囊,检出率为56.0%。其中8份检测出球虫卵囊,检出率32.0%;6份检测出犬弓首蛔虫卵,检出率24.0%,2份检测出绦虫卵,检出率8.0%。7只死亡犬经剖检发现虫体,检出率为38.9%,其中2只犬检到泡状带绦虫成虫,检出率11.1%,5只检到犬复孔绦虫成虫,检出率27.8%。结果表明,昆明市流浪犬寄生虫感染率较高,主要感染犬复孔绦虫、泡状带绦虫、犬弓首蛔虫和球虫等寄生虫。 展开更多

关键词 流浪犬 肠道寄生虫 粪样 调查

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大鼠肠内容物细菌基因组DNA提取方法的比较 被引量：7

5

作者 戴方伟 宋晓明 +4 位作者 周莎桑 柯贤福 李长龙 应华忠 萨晓婴 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2011年第3期246-249,共4页

目的比较两种肠内容物前处理和两种提取方法对清洁级SD大鼠肠内容物细菌基因组DNA提取效率。方法分别选用PBS多次离心漂洗、液氮破细胞两种前处理方法和酚/氯仿抽提、试剂盒过柱法两种提取方法进行组合分析,对4份肠内容物和16份含金黄... 目的比较两种肠内容物前处理和两种提取方法对清洁级SD大鼠肠内容物细菌基因组DNA提取效率。方法分别选用PBS多次离心漂洗、液氮破细胞两种前处理方法和酚/氯仿抽提、试剂盒过柱法两种提取方法进行组合分析,对4份肠内容物和16份含金黄色葡萄球菌肠内容物进行随机提取。结果大鼠肠内容物细菌基因组DNA含量和纯度测定结果显示,与PBS反复离心相比,液氮研磨前处理能显著提高大鼠肠内容物基因组DNA。荧光定量PCR表明,液氮研磨前处理较PBS反复离心能更好地收集细菌基因组DNA,其Ct值最低。结论研究结果表明,采用液氮研磨试剂盒法在大鼠肠内容物DNA提取中是较为优良的方法,该方法为建立实验动物中微生物的定量PCR检测方法打下了基础。 展开更多

关键词 实验动物 肠内容物 细菌 DNA提取方法

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幽门螺杆菌无创性分子生物学检测方法研究进展 被引量：5

6

作者 迟文静 刘涛 +2 位作者 刘宜昕 赵虎 张艳梅 《检验医学》 CAS 2021年第8期880-885,共6页

幽门螺杆菌与慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌等消化系统疾病密切相关,是目前唯一被世界卫生组织列为Ⅰ类致癌原的病原菌。随着分子生物学技术的发展,关于幽门螺杆菌鉴定、耐药或毒力基因分析的分子生物学... 幽门螺杆菌与慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌等消化系统疾病密切相关,是目前唯一被世界卫生组织列为Ⅰ类致癌原的病原菌。随着分子生物学技术的发展,关于幽门螺杆菌鉴定、耐药或毒力基因分析的分子生物学方法不断更新,对幽门螺杆菌的精准诊疗具有重要意义。从口腔和粪便样本中直接检测幽门螺杆菌的无创性分子生物学检测方法具有简便、高效、经济和非侵入性等优点,已成为相关领域的研究热点。文章介绍了幽门螺杆菌无创性分子生物学检测方法的研究进展,并对多种幽门螺杆菌常规检测方法的利弊进行比较,以期为幽门螺杆菌的临床诊治提供参考。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 口腔样本 粪便样本 无创性 分子生物学方法 检测

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圈养华北豹粪便样品中生殖激素的变化规律 被引量：1

7

作者 李亮亮 由玉岩 +5 位作者 张丽霞 李金邦 卫泽珍 胡昕 郝菲儿 张成林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期87-90,共4页

为了提高华北豹的繁殖效率,了解华北豹生殖激素的变化规律,特别是由下丘脑-垂体-性腺轴调控下分泌的雌二醇(E_(2))、促黄体素(LH)和孕酮(P)在华北豹的发情、排卵和妊娠中的作用,本试验采集2~3月和8~9月华北豹的粪便样品,提取样品中的生... 为了提高华北豹的繁殖效率,了解华北豹生殖激素的变化规律,特别是由下丘脑-垂体-性腺轴调控下分泌的雌二醇(E_(2))、促黄体素(LH)和孕酮(P)在华北豹的发情、排卵和妊娠中的作用,本试验采集2~3月和8~9月华北豹的粪便样品,提取样品中的生殖激素E_(2)、LH和P,并利用放射免疫分析法(RIA)测定其含量。结果显示,在2~3月华北豹粪便样品中,E_(2)和P出现规律性的变化,并且E_(2)出现2次峰值;LH呈现脉冲式的变化,并且有2次脉冲式峰值。在8~9月华北豹的粪便样品中,E_(2)、LH和P有一定的规律,LH呈现出1次脉冲式峰值,P维持在高位水平。结果表明,对有发情症状的华北豹可以在2~3月和8~9月进行合笼配种。 展开更多

关键词 华北豹 生殖激素 粪便样品

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基于粪便激素检测的圈养赤斑羚发情周期初探 被引量：1

8

作者 刘群秀 蒋韦斌 +1 位作者 马硕嘉 袁耀华 《野生动物学报》 北大核心 2023年第2期313-319,共7页

采集上海动物园赤斑羚(Naemorhedus baileyi)的粪便,探讨不同粪样保存方法对生殖激素检测结果的影响,并应用粪便生殖激素水平预测赤斑羚的发情周期。结果表明:干燥和冷冻对于雌二醇的保存效果较好;乙醇浸泡和冷冻对孕酮的保存效果较好;... 采集上海动物园赤斑羚(Naemorhedus baileyi)的粪便,探讨不同粪样保存方法对生殖激素检测结果的影响,并应用粪便生殖激素水平预测赤斑羚的发情周期。结果表明:干燥和冷冻对于雌二醇的保存效果较好;乙醇浸泡和冷冻对孕酮的保存效果较好;冷冻对睾酮的保存效果较好;抗生素保存仅在15 d以内有效。综合考虑各方法,冷冻保存的效果最好,乙醇浸泡适合短期样本运输及保存,干燥法作为没有冷冻条件时的替代法。2018年1月—2019年12月的粪便生殖激素测定表明,雌二醇于2018年1月上旬及12月出现波峰,2019年2—4月水平较高,10—12月出现高峰;孕酮在2018年1月、11—12月中旬出现多个峰值,2019年1月出现波峰,2月保持高水平,10—12月中旬持续波动;睾酮水平在2018年11月—2019年2月,以及10月和11月出现峰值。综合考虑所测数据,初步预测雌性赤斑羚发情期为10月—翌年3月末,其中12月—翌年1月为发情高峰期,雄性赤斑羚发情期为10月—翌年2月末。建议在饲养过程中延长雌、雄赤斑羚合笼时间(10月—翌年3月),并加强合笼期间行为的观察和记录,从而提升繁殖成功率。 展开更多

关键词 赤斑羚 圈养 粪样 发情周期

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不同处理措施对牛粪样中隐孢子虫卵囊杀灭效果观察 被引量：1

9

作者 江斌 陈秀琴 +3 位作者 吴胜会 林琳 张世忠 蔡羲 《福建畜牧兽医》 2023年第5期1-2,共2页

取一例牛隐孢子虫阳性粪样分别采用1%甲醛溶液(A组)、1%二氯异氰脲酸钠溶液(B组)、2%烧碱溶液(C组)以及密封厌氧发酵(D组)处理,经5 d、10 d、15 d、20 d后分别取样采用蔗糖漂浮、涂片以及改良抗酸染色和镜检检查相应样本中隐孢子虫卵囊... 取一例牛隐孢子虫阳性粪样分别采用1%甲醛溶液(A组)、1%二氯异氰脲酸钠溶液(B组)、2%烧碱溶液(C组)以及密封厌氧发酵(D组)处理,经5 d、10 d、15 d、20 d后分别取样采用蔗糖漂浮、涂片以及改良抗酸染色和镜检检查相应样本中隐孢子虫卵囊数量。结果A组4个时间节点卵囊数量分别为3.5枚、0.5枚、0枚、0枚;B组4个时间节点卵囊数量分别为1.75枚、0.25枚、0枚、0枚;C组4个时间节点卵囊数量分别为7.5枚、5.25枚、2.75枚、0.75枚;D组4个时间节点卵囊数量分别为9.75枚、6.50枚、4.75枚、3.00枚;而对照组4个时间节点卵囊数量分别为10.50枚、8.50枚、8.00枚、7.25枚。结果表明:4个试验组对牛隐孢子虫卵囊均有不同程度抑杀效果,其中B组效果相对较好。 展开更多

关键词 牛隐孢子虫 粪样 处理措施 卵囊 抑杀效果

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SYBR Green荧光定量粪检PCR法检测日本血吸虫感染的敏感性研究 被引量：3

10

作者 秦圆方 刘云 +5 位作者 杜学利 孟睿 储凯 季旻珺 Jonathan D Kurtis 吴海玮 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第6期432-435,共4页

目的建立快速、敏感、特异的检测日本血吸虫感染的SYBR Green荧光定量PCR法,准确评估其敏感性。方法将计数的日本血吸虫虫卵掺入健康水牛粪样中,制备人工阳性粪样。采用改良QIAamp DNA Stool Kit粪样DNA提取方法,提取人工阳性粪样DNA,进... 目的建立快速、敏感、特异的检测日本血吸虫感染的SYBR Green荧光定量PCR法,准确评估其敏感性。方法将计数的日本血吸虫虫卵掺入健康水牛粪样中,制备人工阳性粪样。采用改良QIAamp DNA Stool Kit粪样DNA提取方法,提取人工阳性粪样DNA,进行SYBR Green荧光定量PCR,建立Ct值与粪样中克粪虫卵数(EPG)的关系;提取单独(不与牛阴性粪样混合)日本血吸虫虫卵DNA与虫卵生理盐水冲洗液DNA,行定量PCR检测,以对本方法进行严格质量控制。结果每200mg粪样仅含1个虫卵时,荧光定量PCR仍呈阳性,人工阳性粪样EPG的对数与PCR的Ct值存在线性关系。结论SYBR Green荧光定量粪检PCR法检测日本血吸虫虫卵DNA敏感性高,EPG对数与PCR的Ct值存在线性关系。 展开更多

关键词 荧光定量PCR 粪样 血吸虫 日本 敏感性

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不同保存方法对川金丝猴粪便DNA提取效果的影响 被引量：4

11

作者 周芸芸 张宇 +4 位作者 杨万吉 蒋军 余辉亮 李迪强 张于光 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第1期43-47,共5页

目的:川金丝猴(Rhinopithecus roxellana)是我国特有珍稀物种,其粪便作为一种非损伤性样品,为珍稀濒危动物的种群数量调查、遗传多样性评价、亲缘关系、系统进化等研究带来了很大便利,本研究试图建立高效、简便的粪便样品保存方法。方法... 目的:川金丝猴(Rhinopithecus roxellana)是我国特有珍稀物种,其粪便作为一种非损伤性样品,为珍稀濒危动物的种群数量调查、遗传多样性评价、亲缘关系、系统进化等研究带来了很大便利,本研究试图建立高效、简便的粪便样品保存方法。方法:在现有珍稀濒危动物粪便样品保存方法的基础上,分别使用干燥法、冷冻法和干燥-冷冻法保存川金丝猴的粪便样品,比较了不同保存方法的DNA提取效果,以及对mtDNA控制区片段的PCR扩增成功率和微卫星基因的PCR扩增效率。结果:干燥法、冷冻法和干燥-冷冻法三种不同保存方法保存粪便1周时间后,提取的粪便DNA样本扩增mtDNA片段的成功率均为92%,微卫星基因的扩增成功率分别为79%、78%、80%;保存2个月后,mtDNA片段扩增成功率分别为80%、76%和80%,微卫星基因扩增成功率分别为65%、61%、67%;保存6个月后,mtDNA片段扩增成功率分别为56%、52%和64%,微卫星基因扩增成功率分别40%、34%、46%。因此,随着保存时间的增长,三种方法的保存效率都将明显降低,但干燥-冷冻法得到的DNA样本扩增成功率相对较高。结论:粪便样品能够为川金丝猴的遗传多样性评价等相关研究提供有效信息,干燥-冷冻法保存能够更为有效的保证DNA的提取和基因扩增效率。 展开更多

关键词 非损伤性技术 粪便样本 保存方法 线粒体DNA 微卫星标记

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超高效液相色谱-质谱用于2型糖尿病大鼠粪样代谢物指纹图谱研究 被引量：3

12

作者 蔡爽 霍韬光 +3 位作者 徐静华 鹿秀梅 熊志立 李发美 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期811-817,共7页

目的研究Wistar大鼠对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的粪样代谢物谱变化,从代谢组学的角度区分2型糖尿病(DM-2)模型。方法采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)技术对对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的大鼠粪样代谢物谱进行... 目的研究Wistar大鼠对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的粪样代谢物谱变化,从代谢组学的角度区分2型糖尿病(DM-2)模型。方法采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)技术对对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的大鼠粪样代谢物谱进行分析测定。采用主成分分析(PCA)模型对对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的大鼠进行分类。结果对照组、高脂组及2型糖尿病(DM-2)模型组的大鼠粪样代谢物谱存在明显差别。发现了3个潜在的生物标记物。结论粪样代谢物指纹图谱的研究可成功用于2型糖尿病模型的鉴别,为临床诊断提供依据。 展开更多

关键词 2型糖尿病模型 粪样 超高效液相色谱-质谱 代谢物谱 生物标记物

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普氏原羚粪便样品中皮质醇激素保存时效研究 被引量：3

13

作者 刘若爽 董世魁 +2 位作者 刘定震 吴永林 石建斌 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期131-137,共7页

由于采集粪便样品无需对目标动物进行捕捉、限制或影响其行为,检测粪便样品中类固醇激素的方法近几十年来在野生动物保护、行为生态学、生理生态学等诸多领域得到广泛应用。普氏原羚(Procapra przewalskii)由于其种群和行为等方面的特殊... 由于采集粪便样品无需对目标动物进行捕捉、限制或影响其行为,检测粪便样品中类固醇激素的方法近几十年来在野生动物保护、行为生态学、生理生态学等诸多领域得到广泛应用。普氏原羚(Procapra przewalskii)由于其种群和行为等方面的特殊性,较难进行直接的生理监测,因此采用间接手段监测其粪便类固醇激素就显得很有必要。为探讨不同保存方法对普氏原羚粪便中皮质醇的影响,我们将采集到的新鲜粪便样品充分混合后分为30份,各取10份分别保存于﹣20℃、4℃和20℃,在保存2、5、7、10、15、20、25、30 d和50 d时,使用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测样品中的皮质醇含量。单因素方差分析(One-way ANOVA)结果显示,保存于﹣20℃的粪便样品中皮质醇含量在保存50 d内没有显著变化,含量为(11.747±2.951)ng/g(平均值±标准差),(F=1.966,n=81,P>0.05),而保存于4℃和20℃的样品则出现明显波动(4℃:F=23.643,P<0.05;20℃:F=35.126,P<0.05),含量分别为(15.951±6.766)ng/g和(11.042±6.094)ng/g。保存于4℃和20℃的样品中皮质醇含量在24 h内均有上升,在随后的几天逐渐下降。结果表明,﹣20℃冷冻可以简便有效地保存普氏原羚粪便样品中的皮质醇激素。同时,在野外暴露超过24 h的粪便样品会造成测定结果产生误差,在采集样品时要考虑到潜在的影响。 展开更多

关键词 粪便样品 普氏原羚 皮质醇 低温保存

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人粪样中雌马酚含量调查及其与菌群结构相关性研究 被引量：3

14

作者 王宇 尹业师 +1 位作者 朱立颖 王欣 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2013年第7期757-761,共5页

目的调查人粪样中大豆素和雌马酚的含量及其与年龄和性别的关系;了解人粪样中雌马酚含量高低与菌群结构的关系。方法采用高效液相色谱(HPLC)对来自杭州的125份粪样进行大豆素和雌马酚含量检测,并使用生物统计学软件SPSS进行统计学分析;... 目的调查人粪样中大豆素和雌马酚的含量及其与年龄和性别的关系;了解人粪样中雌马酚含量高低与菌群结构的关系。方法采用高效液相色谱(HPLC)对来自杭州的125份粪样进行大豆素和雌马酚含量检测,并使用生物统计学软件SPSS进行统计学分析;使用PCR-DGGE对粪样中雌马酚含量的高低与菌群结构的关系进行初步研究。结果 HPLC检测结果表明,尽管粪样中雌马酚含量的高低与性别关系不大,但却与年龄大小存在很大的相关性,41～50岁年龄组的粪样中雌马酚含量明显高于其他年龄组。PCR-DGGE结果表明,粪样中雌马酚含量的高低与菌群结构无明显相关性。结论人粪样中雌马酚含量的高低与年龄大小有很强的相关性。 展开更多

关键词 大豆素 雌马酚 粪样 菌群结构

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棕熊分子鉴定方法的建立与应用 被引量：2

15

作者 谢培根 胡馨予 +5 位作者 俞可心 胡娟 吴国生 蔡平 管峰 徐爱春 《野生动物学报》 北大核心 2022年第2期364-369,共6页

棕熊(Ursus arctos)是我国二级重点保护野生动物,棕熊鉴定是生物资源调查和多样性保护的一项重要内容,更是解决人兽冲突和打击珍稀动物非法盗猎的重要技术手段之一。研究设计棕熊物种鉴定特异性PCR引物,建立基于粪便材料的棕熊特异性PC... 棕熊(Ursus arctos)是我国二级重点保护野生动物,棕熊鉴定是生物资源调查和多样性保护的一项重要内容,更是解决人兽冲突和打击珍稀动物非法盗猎的重要技术手段之一。研究设计棕熊物种鉴定特异性PCR引物,建立基于粪便材料的棕熊特异性PCR鉴定方法,并对粪便材料进行物种鉴定。结果表明:研究设计的棕熊特异性引物可以鉴别藏棕熊(U.a.pruinosus)、东北棕熊(U.a.lasiotus)和喜马拉雅棕熊(U.a.isabellinus)等亚种且具有较高的特异性,能从粪便材料中高效特异性地鉴定藏棕熊,为棕熊野外调查鉴定提供了技术方法,也为棕熊保护提供了技术支持。 展开更多

关键词 野生动物 棕熊 粪便样品 物种鉴定

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粪便样本不同保存方式对肠道菌群测序结果的影响 被引量：1

16

作者 范馨月 陈璐萍 +2 位作者 朱金滔 律娜 朱宝利 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期520-532,共13页

【目的】本文探究了3种室温保存剂和–80°C冷冻保存对粪便样本中菌群结构的影响,为大规模、标准化的采样提供参考。【方法】本研究采集了5名健康志愿者的新鲜粪便作为测试样本,采用4种不同的保存方式保存:DETs室温保存、GITC室温... 【目的】本文探究了3种室温保存剂和–80°C冷冻保存对粪便样本中菌群结构的影响,为大规模、标准化的采样提供参考。【方法】本研究采集了5名健康志愿者的新鲜粪便作为测试样本,采用4种不同的保存方式保存:DETs室温保存、GITC室温保存、RNAlater室温保存和–80°C冷冻保存,在保存0、1、3、7、14、28 d后,采用高通量测序技术测定样本中微生物16S rRNA基因V3-V4区序列,通过比较不同保存剂、不同保存时间后的样本与新鲜样本的差异,分析保存剂和保存时间对粪便样本菌群组成及丰度的影响。【结果】5组样本共得到489个操作分类单元(operational taxonomic units,OTUs),其中488个OTUs为5组所共有,且样本alpha多样性无统计学差异。从属水平上看,与fresh组(新鲜样本)相比,DETs组的拟杆菌属相对丰度显著升高,且部分OTUs在保存超过3 d后发生明显变化;其余保存方式无显著差异。综合分析微生物群落多样性和丰度,结果表明,在保存不同天数后,4种保存方式的样本与fresh组的菌群结构均无显著差异,其中-80°C保存的样本与fresh组样本菌群结构相似程度最高,但不同志愿者与各自新鲜样本的相似程度变化较大,且整体相似程度随着时间的推移与fresh组差异呈下降趋势;而使用DTEs保存剂和GITC保存剂保存的样本,志愿者个体间差异小,保存效果稳定,且随时间变化小。聚类分析结果表明,无论使用哪种保存方式,保存方式和时间带来的差异均小于志愿者个体间的差异。【结论】在满足低温冷冻保存条件时优先选择–80°C冷冻保存粪便样本,无法满足立即冷冻保存的条件时,可以选择添加保存剂室温保存,且GITC保存剂优于其他保存剂。 展开更多

关键词 粪便样本 室温保存 肠道菌群 保存剂 高通量测序

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上海市1例输入性华支睾吸虫病例的检测与溯源 被引量：1

17

作者 王真瑜 张耀光 +7 位作者 欧海凤 吴寰宇 马晓疆 戴思敏 江莉 余晴 潘浩 陈健 《热带医学杂志》 CAS 2022年第5期706-710,744,共6页

目的对上海市1例输入性华支睾吸虫病例进行实验室检测与基因溯源分析。方法收集该病例的临床资料,并进行流行病学调查。对患者的粪便样本分别采用饱和盐水漂浮法和改良加藤厚涂片法进行制片,显微镜镜检并计数虫卵,计算感染度。使用QIAam... 目的对上海市1例输入性华支睾吸虫病例进行实验室检测与基因溯源分析。方法收集该病例的临床资料,并进行流行病学调查。对患者的粪便样本分别采用饱和盐水漂浮法和改良加藤厚涂片法进行制片,显微镜镜检并计数虫卵,计算感染度。使用QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit提取患者粪样DNA,根据核糖体DNA第二内转录间隔区(ITS-2)合成特异性CS1/CS2引物,对模板DNA进行PCR扩增,并对扩增产物测序比对后应用Neighborjoining方法构建系统发育树,使用Bootstrap方法进行评估。结果饱和盐水漂浮法和改良加藤厚涂片法镜下均查见大量华支睾吸虫卵,改良加藤厚涂片法中计数虫卵数量,每克粪便虫卵数(EPG)=45912个虫卵/克粪便,为重度感染。用引物CS1/CS2对患者粪样DNA进行ITS-2基因扩增,得到315 bp条带,与预期的ITS-2基因CS1/CS2片段大小一致。扩增产物片段序列与华支睾吸虫序列相似性为100%。基于ITS基因序列构建的系统发育树显示,上海患者感染虫株与华支睾吸虫均聚到一个分支上,且与来源地为广西壮族自治区南宁市虫株亲缘关系最近。结论根据基因序列和流行病学分析,明确该病例的病原体为广西壮族自治区南宁市华支睾吸虫虫株,为输入性病例。应加强食源性寄生虫病的监测和管理。 展开更多

关键词 华支睾吸虫 粪便样本 实验室检测 溯源 输入性

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粪样中^(241)Am测量方法的探索 被引量：1

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作者 宋伟娜 尹云云 +3 位作者 李爱云 汪传高 骆志平 庞洪超 《中国辐射卫生》 2022年第5期542-547,共6页

目的对粪样中超铀核素^(241)Am的分析测量方法进行研究,初步建立粪样中^(241)Am的分析方法,为工作人员内照射监测提供技术支持。方法利用自行研制的粪样取样器和碳化灰化炉对粪样采集处理;采用DGA树脂对粪样中^(241)Am进行分离纯化的方... 目的对粪样中超铀核素^(241)Am的分析测量方法进行研究,初步建立粪样中^(241)Am的分析方法,为工作人员内照射监测提供技术支持。方法利用自行研制的粪样取样器和碳化灰化炉对粪样采集处理;采用DGA树脂对粪样中^(241)Am进行分离纯化的方法研究,用^(243)Am为示踪剂并采用正交法进行条件优化实验。结果初步确定以6 Mol/LHNO^(3)为上柱酸度、0.6 mL/min上柱速度和解析体积为12 mL的最佳分离纯化的条件;同时基于ICP-MS对粪样进行质谱测量分析,确定了基于ICP-MS的^(241)Am的检出限为9.79×10^(−4)Bq,测量结果理想,具有可行性。结论本文建立的方法在一定程度上弥补了对粪样中^(241)Am测量方法研究的空缺,对内照射监测和分析人员保护有实际意义。 展开更多

关键词 粪样 ^(241)Am 分离纯化 ICP-MS

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圈养华北豹粪便样品中雌二醇提取方法的研究 被引量：1

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作者 李亮亮 由玉岩 +7 位作者 金修哲 张卓 孙乐天 卫泽珍 杨引亮 刘学锋 张成林 李晓光 《野生动物学报》 北大核心 2020年第4期1060-1063,共4页

本研究以圈养华北豹粪便样品中雌二醇的提取方法为研究对象。本实验中比较了甲醇加热法、乙醇加热法和乙醇蒸馏水,3种粪样中提取雌二醇的技术方法,利用放射免疫分析法测定雌二醇的含量。结果显示,甲醇加热法、乙醇加热法和乙醇蒸馏水法... 本研究以圈养华北豹粪便样品中雌二醇的提取方法为研究对象。本实验中比较了甲醇加热法、乙醇加热法和乙醇蒸馏水,3种粪样中提取雌二醇的技术方法,利用放射免疫分析法测定雌二醇的含量。结果显示,甲醇加热法、乙醇加热法和乙醇蒸馏水法3种方法分别提取浓度为(2815.47±597.47)pg/mL、(7660.25±1546.11)pg/mL和(1937.83±531.71)pg/mL。其中乙醇加热法是这3种方法中提取含量可达(7660.25±1546.11)pg/mL,通过统计学分析发现,乙醇加热法与其他2种方法差异显著。实验证明:利用乙醇加热法提取圈养华北豹粪便雌二醇是一种比较理想的方法。 展开更多

关键词 华北豹 雌二醇 粪便样品 提取

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四川某奶牛场粪样中寄生虫的调查研究 被引量：1

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作者 沈青义 张传师 +4 位作者 罗正中 雍康 何清 王一 曹随忠 《中国奶牛》 2019年第6期36-40,共5页

为了解四川某奶牛场奶牛寄生虫感染情况,进而制订合理有效的防治措施,本调查对该场奶牛粪样做了寄生虫检查。采集了犊牛、育成牛、泌乳牛的新鲜粪样共90份,分别采用饱和盐水漂浮法、离心沉淀法和斯陶尔氏计数法对粪样中虫卵进行定性检... 为了解四川某奶牛场奶牛寄生虫感染情况,进而制订合理有效的防治措施,本调查对该场奶牛粪样做了寄生虫检查。采集了犊牛、育成牛、泌乳牛的新鲜粪样共90份,分别采用饱和盐水漂浮法、离心沉淀法和斯陶尔氏计数法对粪样中虫卵进行定性检查和定量检查。结果显示,在粪样中检出了球虫卵囊、线虫卵、吸虫卵和绦虫卵,其中球虫卵囊的阳性率为14.44%(13/90),线虫卵的阳性率为57.78%(52/90),绦虫卵和吸虫卵只在泌乳牛的粪样中检出,泌乳牛阳性率分别为2%(1/50)、12%(6/50)。该奶牛场混合感染率为33.33%(18/54)。结果表明,该奶牛场寄生虫感染普遍,总感染率为60%(54/90),主要为线虫,其次是球虫和吸虫,混合感染情况普遍。 展开更多

关键词 奶牛 粪样 寄生虫

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