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Effect of Danzhi decoction on expression of angiogenesis factors in patients with sequelae of pelvic inflammatory disease 被引量:7
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作者 Bao-Qin Liu Xin Gong Zhe Jin 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2014年第12期985-990,共6页
Objective:To investigate the efteets of traditional Chinese medicine.Danzhi decoction,on the expression angiogenesis factors in human endometrial cells during the sequelae of pelvic inflammatoty disease(SPID) and expl... Objective:To investigate the efteets of traditional Chinese medicine.Danzhi decoction,on the expression angiogenesis factors in human endometrial cells during the sequelae of pelvic inflammatoty disease(SPID) and explore the role of Danzhi decction in improving the blood stasis microenvironment of SPID.Methods:A three-dimensional(3D) co—culture system including human vascular endothelial cells(VECs),endometrial stromal cells and glandular epithelial cells was established in vitro and treated with Danzhi decoction,sterilized water and aspirin respectively.A Milliplex multifunctional liquid chip technique was used to measure the expression levels of vascular endothelial growth factor(VEGF)—A/C/D,fibroblast growth factor-1/2.angiopoietin-2.epidermal growth factor(EGF) HB-EGF,bone morphogenetic protein-9.endoglin.endothehn-l.granulocyte colony stimulating factor,hepatocyte growth factor,interleukin-8,follistatin.placenta growth factor and leptin.The location of angiogenesis factors was monitored by immunofluorescence labeling and confocal laser scanning microscope3 D reconstruction.Results:Endometrial stromal cells and glandular epithelial cells were isolated and primary cultured for establishing a 3D co-culture system.The levels of VEGF—A/C/D in Danzhi decoction group and aspirin group were significantly lower than those in mock group(P<0.05).while there was no significant difference between Danzhi decoction group and aspirin group(P>0.05).Furthermore,the alterative location of VEGF—A/C/D was observed in the cytoplasm of endometrial glandular epithelial cells.Conclusions:Danzhi decoction mav inhibit the expression of VEGF in the blood stasis microenvironment of SPID by targeting the cytoplasm of endometrial glandular epithelial cell. 展开更多
关键词 Danzhi DECOCTION SEQUELAE of PELVIC inflammatory disease endometrial cells ANGIOGENESIS factor MICROENVIRONMENT
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人子宫内膜细胞原代培养方法的改良 被引量:8
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作者 陈诚 常青 +2 位作者 梁志清 艾国平 张丽龙 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期507-509,共3页
目的寻求一种简便高效的人子宫内膜上皮细胞和间质细胞分离、纯化与鉴定方法,建立稳定的子宫内膜细胞体外培养体系。方法简化Ryan等的子宫内膜细胞原代培养方法的取材,分离和培养条件,分离出高纯度的子宫内膜上皮细胞和间质细胞进行体... 目的寻求一种简便高效的人子宫内膜上皮细胞和间质细胞分离、纯化与鉴定方法,建立稳定的子宫内膜细胞体外培养体系。方法简化Ryan等的子宫内膜细胞原代培养方法的取材,分离和培养条件,分离出高纯度的子宫内膜上皮细胞和间质细胞进行体外培养和传代。结果培养成功的子宫内膜上皮细胞与间质细胞均可稳定传代,体外生长10~50d,纯度均达90%以上。结论该方法简便高效,可建立稳定的人子宫内膜细胞体外培养体系。 展开更多
关键词 子宫内膜细胞 原代培养 改良
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家兔子宫内膜细胞和平滑肌细胞的分离培养 被引量:6
3
作者 陈秀荔 赵永贞 +1 位作者 靳亚平 张彦明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1242-1247,共6页
本试验旨在体外分离培养兔子宫内膜细胞(腺上皮细胞和基质细胞)和平滑肌细胞,并且探讨纯化子宫内膜上皮细胞和基质细胞的方法。用差速离心法和差速贴壁法获得纯化的子宫内膜上皮细胞和基质细胞,用滤网法分离得到子宫平滑肌细胞,分别在添... 本试验旨在体外分离培养兔子宫内膜细胞(腺上皮细胞和基质细胞)和平滑肌细胞,并且探讨纯化子宫内膜上皮细胞和基质细胞的方法。用差速离心法和差速贴壁法获得纯化的子宫内膜上皮细胞和基质细胞,用滤网法分离得到子宫平滑肌细胞,分别在添加20%胎牛血清(FBS)、100μg/mL牛胰岛素、63.5 nmol/L雌二醇(E2)、7.14nmol/L孕酮(P4)的DMEM/F12(1∶1)培养液和37℃5%CO2的饱和湿度条件下培养;用免疫组化和免疫荧光法鉴定细胞并检测分离的细胞纯度。结果表明用该方法成功地分离培养了兔子宫内膜上皮细胞和基质细胞,且2种细胞纯度都达98%左右,基质细胞出现蜕膜化;子宫平滑肌细胞的纯度为97%左右,而且出现横纹状的生长。本研究表明子宫内膜细胞和平滑肌细胞能够在体外成功培养;在含20%FBS、100μg/mL牛胰岛素、63.5 nmol/L E2、7.14 nmol/L P4的DMEM/F12(1∶1)培养液和37℃5%CO2饱和湿度的培养条件下最有利于体外培养的子宫内膜细胞和平滑肌细胞的生长。 展开更多
关键词 子宫内膜细胞 平滑肌细胞 免疫组织化学 免疫荧光 蜕膜化
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磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B与子宫内膜蜕膜化关系的研究进展
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作者 李新颖 卢利霞 +2 位作者 吴天思 杨丹丹 林晓华 《医学综述》 CAS 2024年第3期269-273,278,共6页
子宫内膜蜕膜化是决定妊娠能否成功的关键因素之一。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)是哺乳动物细胞内基础信号转导通路中的主要细胞因子,在细胞的生长、增殖、凋亡、自噬、血管生成等生理和病理过程中发挥着极其重要的生物学功能。PI3K/蛋白激... 子宫内膜蜕膜化是决定妊娠能否成功的关键因素之一。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)是哺乳动物细胞内基础信号转导通路中的主要细胞因子,在细胞的生长、增殖、凋亡、自噬、血管生成等生理和病理过程中发挥着极其重要的生物学功能。PI3K/蛋白激酶B(PKB/Akt)信号通路在细胞代谢、迁移、分化等方面影响子宫内膜蜕膜化。深入研究PI3K/Akt在子宫内膜蜕膜化中的作用,可为蜕膜化缺陷相关疾病的诊断和治疗提供新思路,对更好地指导临床、提高妊娠成功率具有重要意义。 展开更多
关键词 子宫内膜细胞 蜕膜化 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B
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雌激素对子宫内膜细胞凋亡的影响及其机制探讨 被引量:6
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作者 翟永宁 仲丹 +4 位作者 张蕾 吴王飞 卢莹 周静 沈宇飞 《山东医药》 CAS 2013年第48期1-3,共3页
目的观察雌激素对子宫内膜细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将原代培养的子宫内膜细胞随机分为C组和E8、E7、E6组。C组不加雌激素,E8、E7、E6组分别加入浓度为10-8、10-7、10-6mol/L的雌激素。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,Real-time... 目的观察雌激素对子宫内膜细胞凋亡的影响,并探讨其机制。方法将原代培养的子宫内膜细胞随机分为C组和E8、E7、E6组。C组不加雌激素,E8、E7、E6组分别加入浓度为10-8、10-7、10-6mol/L的雌激素。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,Real-time PCR法检测前列腺特异性酸性磷酸酶(PSAP)基因;构建PSAP基因干扰载体,并转染至子宫内膜细胞,观察转染前后细胞凋亡率和PSAP基因表达量。结果 C、E8、E7、E6组细胞凋亡率(gate1)分别为10.8%±0.1%、15.5%±0.2%、15.8%±0.1%、16.6%±0.3%,E8组和E7组比较,P>0.05;其余两两比较,P均<0.05。C、E8、E7、E6组细胞凋亡率(gate2)分别为4.2%±0.2%、4.5%±0.1%、5.4%±0.2%、5.7%±0.1%,两两比较,P均<0.05。C、E8、E7、E6组PSAP基因表达量分别为0.46±0.05、0.33±0.03、0.26±0.03、0.40±0.02,两两比较,P均<0.05。干扰前后细胞凋亡率分别为18.2%±1.3%、10.2%±0.7%,PSAP基因表达量分别为50.4±3.2、19.2±1.3,P均<0.05。结论雌激素作用后子宫内膜细胞凋亡增加,PSAP基因表达降低;PSAP基因被干扰后,细胞凋亡减少。雌激素可能通过抑制PSAP基因表达促进子宫内膜细胞凋亡。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 雌激素 子宫内膜细胞 凋亡 前列腺特异性酸性磷酸酶
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黄芪总黄酮通过ERα/STAT3信号通路调节子宫内膜异位症中子宫内膜细胞增殖和迁移
6
作者 陈西 欧阳紫婷 +3 位作者 罗岚 沈艳 宁东红 梁煦 《广东医学》 CAS 2024年第8期951-958,共8页
目的研究黄芪总黄酮(TFA)对子宫内膜异位症(EMs)子宫内膜细胞增殖和迁移的影响,并基于ERα/STAT3信号通路探讨其潜在分子机制。方法分离人EMs患者子宫内膜细胞。(1)为初步探究不同剂量TFA对EMs子宫内膜细胞增殖和迁移的影响,将实验分为5... 目的研究黄芪总黄酮(TFA)对子宫内膜异位症(EMs)子宫内膜细胞增殖和迁移的影响,并基于ERα/STAT3信号通路探讨其潜在分子机制。方法分离人EMs患者子宫内膜细胞。(1)为初步探究不同剂量TFA对EMs子宫内膜细胞增殖和迁移的影响,将实验分为5组:对照(NC)组、EMs组、TFA高剂量组(TFA-H,TFA2mg/mL干预异位子宫内膜细胞)、TFA中剂量组(TFA-M,TFA1mg/mL干预异位子宫内膜细胞)、TFA低剂量组(TFA-L,TFA0.5mg/mL干预异位子宫内膜细胞)。采用平板克隆形成实验、CCK-8检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Westernblotting、RT-qPCR检测细胞ERα、STAT3蛋白和mRNA表达水平。(2)为探究ERα/STAT3信号通路对EMs子宫内膜细胞的影响,使用ERα诱导剂Feruti-nin干预EMs子宫内膜细胞,将实验分为两组:NC组,ERα诱导剂(Ferutinin)组。Westernblot、RT-qPCR检测细胞ERα、STAT3蛋白和mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力。(3)为进一步探究TFA及ERα/STAT3信号通路在EMs子宫内膜细胞的作用机制,将实验分为4组:NC组、EMs组、TFA-M组、TFA-M+Ferutinin组。Westernblot、RT-qPCR检测细胞ERα、STAT3蛋白和mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力。结果(1)与NC组相比,EMs组细胞克隆增殖能力增加(P<0.01);与EMs组相比,TFA-L组(P<0.05)、TFA-M组(P<0.05)和TFA-H组(P<0.01)细胞的克隆增殖能力降低。与NC组相比,EMs组细胞活力增加(P<0.01);与EMs组相比,TFA-L组、TFA-M组和TFA-H组细胞活力降低(P<0.05)。与NC组相比,EMs组细胞相对迁移距离增加(P<0.01);与EMs组相比,TFA-L组(P<0.05)、TFA-M组(P<0.05)和TFA-H组(P<0.01)细胞相对迁移距离减少。与NC组相比,EMs组细胞ERα和STAT3蛋白及mRNA表达水平增加(P<0.01);与EMs组相比,TFA-L组(P<0.05)、TFA-M组(P<0.01)和TFA-H组(P<0.01)细胞的ERα和STAT3蛋白及mRNA表达水平降低。根据以上实验结果,选择TFA-M进 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 子宫内膜细胞 黄芪总黄酮 ERΑ STAT3 增殖和迁移
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犬子宫内膜上皮细胞和基质细胞的分离培养与鉴定 被引量:6
7
作者 宗振平 朱琪 +3 位作者 钱婉莹 钟友刚 许剑琴 刘凤华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期20-23,I0001,共5页
为了探究犬子宫内膜细胞的培养方法,采用组织块培养法和酶消化培养法进行细胞培养并使用倒置显微镜观察细胞的形态结构和生长状态,对细胞进行免疫组化鉴定。结果表明,组织块培养法需要1周左右培养出犬子宫内膜上皮细胞,且细胞不易纯化;... 为了探究犬子宫内膜细胞的培养方法,采用组织块培养法和酶消化培养法进行细胞培养并使用倒置显微镜观察细胞的形态结构和生长状态,对细胞进行免疫组化鉴定。结果表明,组织块培养法需要1周左右培养出犬子宫内膜上皮细胞,且细胞不易纯化;酶消化培养法节省时间,获得的细胞活力强、纯度高。综上所述酶消化培养法更适于培养犬子宫内膜细胞,为后期细胞水平研究奠定基础。 展开更多
关键词 子宫内膜细胞 组织块培养法 酶消化培养法
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输卵管通液术与子宫内膜异位症和盆腔感染关系 被引量:3
8
作者 李海燕 梁占光 +1 位作者 陆静 彭英 《华西医学》 CAS 2001年第3期284-285,共2页
目的 :探讨输卵管通液术可能出现的不良影响。方法 :直视下行输卵管通液术 ,收集输卵管流出液作巴氏染色、需氧菌及厌氧菌培养 ,进行宫内膜细胞及细菌学的检查。结果 :检出宫内膜细胞 6 0 6 7% (6 3/ 10 4) ,对月经周期中不同时间通液... 目的 :探讨输卵管通液术可能出现的不良影响。方法 :直视下行输卵管通液术 ,收集输卵管流出液作巴氏染色、需氧菌及厌氧菌培养 ,进行宫内膜细胞及细菌学的检查。结果 :检出宫内膜细胞 6 0 6 7% (6 3/ 10 4) ,对月经周期中不同时间通液进行比较 ,发现各时间段宫内膜细胞的检出率之间差异无显著性意义。检出细菌31 73% (33/ 10 4) ,但 2 7例需氧菌及厌氧菌培养均为阴性。结论 :通液术将宫内膜细胞带入盆腔可能是造成子宫内膜异位症的原因 。 展开更多
关键词 输卵管通液术 宫内膜细胞 细菌 子宫内膜异位症 盆腔感染
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PGE_2促进培养的人子宫内膜细胞VEGF的表达 被引量:4
9
作者 辛志敏 徐滨 +4 位作者 孙莹璞 谢青贞 曹路敏 苏迎春 郭艺红 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第10期938-943,共6页
目的探讨炎性介质前列腺素E2(PGE2)对体外培养的人子宫内膜细胞VEGF的分泌、VEGF mRNA影响和调控的信号通路的作用。方法收集子宫内膜异位症(EMs)患者的子宫内膜组织进行体外培养、纯化,采用免疫组化方法对细胞进行鉴定。子宫内膜细胞培... 目的探讨炎性介质前列腺素E2(PGE2)对体外培养的人子宫内膜细胞VEGF的分泌、VEGF mRNA影响和调控的信号通路的作用。方法收集子宫内膜异位症(EMs)患者的子宫内膜组织进行体外培养、纯化,采用免疫组化方法对细胞进行鉴定。子宫内膜细胞培养24 h后,用酶免法测定细胞培养液上清VEGF蛋白的含量,RT-PCR法测定不同浓度PGE2对体外培养的子宫内膜细胞VEGF mRNA表达的影响。酶免法测定不同浓度的Forskolin、SQ 22536及PGE2+SQ 22536等对子宫内膜细胞培养液上清VEGF分泌的影响。结果加入不同浓度的PGE224 h后,VEGFmRNA及其蛋白的表达呈剂量依赖性增加。不同浓度的Forskolin可剂量依赖性地增加VEGF的表达,而SQ 22536明显抑制PGE2所诱导的VEGF浓度升高。PGE2可促进子宫内膜细胞VEGF的表达,促进效应呈剂量依赖性,该效应可能部分通过cAMP介导。结论PGE2作为一种炎性介质可能通过增加子宫内膜细胞VEGF的表达参与内异症血管形成的发生。 展开更多
关键词 前列腺素E2 子宫内膜细胞 环磷酸腺苷 子宫内膜异位症
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LPS诱导牛子宫内膜细胞miRNA差异表达分析 被引量:4
10
作者 王军 燕晓晓 +2 位作者 丁赫 王静芳 吕文发 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第10期10-12,16,I0002,I0003,共6页
MicroRNA(miRNA)在炎症反应中起重要作用,本试验用miRNA测序技术研究了细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的牛子宫内膜细胞miRNA差异表达。用1μg/mL的LPS处理牛子宫内膜细胞24 h,测定细胞上清液IL-6和IL-8分泌量,对细胞进行miRN... MicroRNA(miRNA)在炎症反应中起重要作用,本试验用miRNA测序技术研究了细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的牛子宫内膜细胞miRNA差异表达。用1μg/mL的LPS处理牛子宫内膜细胞24 h,测定细胞上清液IL-6和IL-8分泌量,对细胞进行miRNA测序,并用荧光定量PCR验证测序结果。结果表明,LPS可诱导牛子宫内膜细胞11个miRNA表达上调、9个miRNA表达下调。差异表达miRNA的靶基因注释到生物过程的GO term共20个,注释到细胞组分的GO term共12个,注释到分子功能的GO term共20个;差异表达miRNA靶基因主要富集于PI3K-Akt和MAPK等信号通路。结果提示,miRNA在LPS诱导的牛子宫内膜细胞炎症反应中起重要作用,其作用与PI3K-Akt和MAPK等信号通路激活有关。 展开更多
关键词 细菌脂多糖 子宫内膜细胞 miRNA测序 差异表达
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虾青素对牛子宫内膜细胞炎症损伤的保护作用 被引量:4
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作者 张辰 谭秀文 +5 位作者 魏晨 张相伦 靳青 刘桂芬 刘晓牧 万发春 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期3049-3058,共10页
【目的】利用虾青素较强的抗氧化特性,通过探讨黏膜屏障重塑对脂多糖(LPS)诱导的牛子宫内膜细胞炎症的影响,为牛子宫内膜细胞炎的预防和治疗提供理论基础。【方法】培养液中添加1μg·mL^-1 LPS,培养子宫内膜细胞6 h,检测培养液中... 【目的】利用虾青素较强的抗氧化特性,通过探讨黏膜屏障重塑对脂多糖(LPS)诱导的牛子宫内膜细胞炎症的影响,为牛子宫内膜细胞炎的预防和治疗提供理论基础。【方法】培养液中添加1μg·mL^-1 LPS,培养子宫内膜细胞6 h,检测培养液中炎症因子TNF-α和IL-6含量,建立细胞的体外炎症模型。在此基础上去掉培养液,重新加入含1×10^-6 mol·L^-1虾青素的新鲜培养液,继续培养细胞24 h。对照组为不添加LPS或AST,LPS组为仅添加LPS,AST组为添加LPS和AST。采用ELISA法检测培养液中TNF-α和IL-6炎症因子分泌量以及细胞SOD和CAT酶活性,利用流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,利用免疫荧光染色检测细胞紧密连接蛋白Claudin、CDH1、TJP1的分布情况,利用荧光定量RT-PCR法和Western Blot法分别检测Claudin、CDH1、TJP1基因的mRNA表达水平和蛋白表达水平。【结果】利用1μg·mL^-1 LPS培养子宫内膜细胞6 h,检测发现培养液中炎症因子IL-6和TNF-α分泌水平显著高于对照组(P<0.05),说明LPS诱导子宫内膜细胞产生炎症反应。与对照组相比,细胞内ROS水平显著增加(P<0.05),SOD和CAT酶活性都显著降低(P<0.05),说明LPS诱导的子宫内膜细胞炎症造成了氧化损伤。加入1×10^-6 mol·L^-1虾青素培养细胞24 h后,发现培养液中IL-6和TNF-α因子的分泌水平显著低于LPS组(P<0.05),同时ROS阳性细胞比率显著下降(P<0.05),SOD和CAT酶活性都显著升高(P<0.05)。LPS组与对照组相比,细胞膜处Claudin、CDH1、TJP1蛋白的荧光信号减弱,这3种紧密连接蛋白的mRNA和蛋白表达水平也都显著降低(P<0.05)。加入1×10^-6 mol·L^-1虾青素培养24 h后,与LPS组相比,在细胞边缘和细胞核内可以检测到荧光信号很强的Claudin、CDH1、TJP1蛋白,而且这3种紧密连接蛋白的mRNA和蛋白表达水平也都显著升高(P<0.05)。【结论】虾青素通过降低子宫内膜细胞因炎症反应产生的氧化损伤,减轻� 展开更多
关键词 虾青素 子宫内膜细胞 炎症因子 紧密连接蛋白
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膨宫压力对宫腔镜手术下子宫内膜细胞腹腔播散的影响 被引量:4
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作者 宋学兰 彭桂华 《中国内镜杂志》 CSCD 北大核心 2010年第4期348-350,共3页
目的探讨膨宫压力对宫腔镜手术下子宫内膜细胞(PFC)腹腔播散的影响,并分析其影响因素。方法以2008年1月~2009年6月入该院采用宫腹腔镜联合治疗的患者141例为研究对象,随机分为常压膨宫组和低压膨宫组,分别为71例和70例。在术前术后分... 目的探讨膨宫压力对宫腔镜手术下子宫内膜细胞(PFC)腹腔播散的影响,并分析其影响因素。方法以2008年1月~2009年6月入该院采用宫腹腔镜联合治疗的患者141例为研究对象,随机分为常压膨宫组和低压膨宫组,分别为71例和70例。在术前术后分别收集腹腔液,检测PFC的播散。结果术后常压膨宫组PFC阳性率50.7%,较术前阳性率14.1%明显增高(χ2=21.740,P=0.000),OR值为6.274,95%CI为2.622~15.774。而术后常压膨宫组PFC阳性率也高于低压膨宫组阳性率的30.0%(χ2=6.270,P=0.012),OR值为2.400,95%CI为1.139~5.092。PFC阳性组的手术时间高于PFC阴性组(t=6.102,P=0.000),增殖期人数比例也高于PFC阴性组(χ2=5.207,P=0.022)。Logistic回归调整后的OR值分别为1.127和2.664。结论宫腔镜手术能造成子宫内膜细胞腹腔播散,并且常压膨宫较低压膨宫更为明显;其影响因素还包括手术时间和子宫内膜状态等。 展开更多
关键词 宫腔镜 子宫内膜细胞 危险因素 LOGISTIC回归
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Pten基因沉默可抑制子宫内膜细胞增殖 被引量:4
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作者 李晓云 曹广超 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期966-970,共5页
本研究将Pten-siRNA转染至子宫内膜细胞,通过蛋白免疫印迹检测子宫内膜细胞中Pten蛋白的表达情况;通过MTT法检测Pten-siRNA转染组和空质粒转染组(对照组)细胞增殖状态;通过蛋白免疫印迹检测Pten-siRNA转染组和对照组子宫内膜细胞中PCNA... 本研究将Pten-siRNA转染至子宫内膜细胞,通过蛋白免疫印迹检测子宫内膜细胞中Pten蛋白的表达情况;通过MTT法检测Pten-siRNA转染组和空质粒转染组(对照组)细胞增殖状态;通过蛋白免疫印迹检测Pten-siRNA转染组和对照组子宫内膜细胞中PCNA、Ki67蛋白表达情况;通过流式细胞仪检测子宫内膜细胞Pten-siRNA转染组和对照组中ROS的水平,以探究Pten基因对子宫内膜癌发生发展的影响。研究表明,Pten-siRNA转染后,子宫内膜细胞中Pten蛋白明显低于对照组;Pten-siRNA转染后,子宫内膜细胞增殖率显著高于对照组(p<0.05);Pten-siRNA转染后,细胞增殖相关蛋白PCNA和Ki67明显高于对照组(p<0.05);Pten-siRNA转染后,子宫内膜细胞中ROS水平明显低于对照组(p<0.05)。本研究初步结论显示Pten-siRNA可降低子宫内膜细胞中Pten蛋白表达,抑制子宫内膜细胞的增殖并增加子宫内膜细胞中ROS水平。 展开更多
关键词 PTEN基因 子宫内膜细胞 活性氧簇(ROS) 基因沉默
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白细胞抑制因子(LIF)对离体小鼠子宫内膜岩藻糖基转移酶(FuT7)表达的影响 被引量:4
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作者 张琦 燕秋 +1 位作者 刘帅 陈建泉 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期135-138,176,共5页
目的:探讨白血病抑制因子(LIF)对小鼠子宫内膜细胞岩藻糖基转移酶(FuT7)因子表达的影响。方法:分别用含LIF和抗LIF-抗体(LIF-Ab)培养液孵育子宫内膜细胞10h,通过PCR、免疫荧光和免疫印迹方法分析各组培养液中FuT7因子的表达。结果:PCR... 目的:探讨白血病抑制因子(LIF)对小鼠子宫内膜细胞岩藻糖基转移酶(FuT7)因子表达的影响。方法:分别用含LIF和抗LIF-抗体(LIF-Ab)培养液孵育子宫内膜细胞10h,通过PCR、免疫荧光和免疫印迹方法分析各组培养液中FuT7因子的表达。结果:PCR结果显示:与空白对照组比,LIF对离体子宫内膜细胞FuT7基因表达有上调作用(0.26±0.02vs0.18±0.01),而LIF-Ab可抑制子宫内膜细胞FuT7的表达(0.14±0.04vs0.18±0.01)。免疫荧光和免疫印迹结果同样显示经LIF孵育后,子宫内膜细胞FuT7蛋白量有所增加。结论:LIF在体外可调控子宫内膜细胞FuT7表达,并有可能借此来调控着床阶段特异表达的sLeX寡糖抗原量,继而影响整个着床调控网络。 展开更多
关键词 岩藻糖基转移酶(FuT7) 白血病抑制因子(LIF) 子宫内膜细胞 小鼠 体外培养
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牦牛子宫内膜细胞的分离培养及性激素对其增殖的影响 被引量:4
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作者 阿依木古丽 蔡勇 +2 位作者 马忠仁 乔自林 崔燕 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1187-1192,共6页
为了分离培养牦牛子宫内膜细胞,并探讨不同浓度雌激素和孕激素对上皮细胞和基质细胞增殖的影响,采用Ⅰ型胶原酶消化、离心分离和差速消化纯化的方法分离纯化上皮细胞和基质细胞,对其进行免疫细胞化学染色鉴定,绘制生长曲线,最后用MTT法... 为了分离培养牦牛子宫内膜细胞,并探讨不同浓度雌激素和孕激素对上皮细胞和基质细胞增殖的影响,采用Ⅰ型胶原酶消化、离心分离和差速消化纯化的方法分离纯化上皮细胞和基质细胞,对其进行免疫细胞化学染色鉴定,绘制生长曲线,最后用MTT法测定不同浓度的17β-雌二醇和孕酮对细胞增殖的影响。结果显示,1g/L胶原酶消化1h,500r/min离心10min,经2代差速消化纯化获得的上皮细胞的纯度为96%,基质细胞的纯度为93%;不同浓度的17β-雌二醇均能促进上皮细胞和基质细胞的增殖,孕酮可促进基质细胞的增殖,但对上皮细胞的增殖有抑制作用,不同浓度的17β-雌二醇和孕酮共同作用均能显著促进基质细胞增殖,而对上皮细胞增殖的影响随混合液中孕酮浓度的增加由促进转为抑制。本研究获得了高纯度的牦牛子宫内膜上皮细胞和基质细胞,证实雌激素能促进2种细胞的增殖,孕激素能促进基质细胞的增殖但抑制上皮细胞的增殖。 展开更多
关键词 牦牛 子宫内膜细胞 性激素 细胞增殖
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子宫内膜异位症子宫内膜及输卵管细胞对鼠胚胎发育的影响 被引量:2
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作者 高颖 李红发 +3 位作者 毛跟红 程汉琴 梁莹 王雁林 《生殖医学杂志》 CAS 2006年第4期257-260,共4页
目的 探讨子宫内膜异位症(内异症)子宫内膜及输卵管上皮细胞对小鼠胚胎体外发育的影响。方法 小鼠2细胞期胚胎202个与卵巢巧克力囊肿患者术中切除的子宫内膜及输卵管上皮细胞共培养(实验组),314个与非卵巢巧克力囊肿患者子宫内膜... 目的 探讨子宫内膜异位症(内异症)子宫内膜及输卵管上皮细胞对小鼠胚胎体外发育的影响。方法 小鼠2细胞期胚胎202个与卵巢巧克力囊肿患者术中切除的子宫内膜及输卵管上皮细胞共培养(实验组),314个与非卵巢巧克力囊肿患者子宫内膜及输卵管上皮细胞共培养作为对照。结果 体外培养72~96h后,与对照组输卵管上皮细胞及子宫内膜共培养时有25.7%和26.2%的2细胞期胚胎发育到扩张期囊胚,与实验组输卵管上皮细胞共培养有25.9%发育到扩张期囊胚,二者无显著差异(P〉0.05),而子宫内膜仅为11.1%,二者有显著差异(P〈0.05)。结论 内异症患者的输卵管上皮细胞对鼠早期胚胎体外发育无影响;子宫内膜对胚胎发育有明显的抑制作用,这可能与内异症的生育率降低有关。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 子宫内膜细胞 输卵管上皮细胞 共培养 胚胎 小鼠
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氧化应激通过Fas/FasL信号通路调控奶牛子宫内膜细胞凋亡 被引量:2
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作者 靳青 张相伦 +4 位作者 魏晨 刘桂芬 刘晓牧 张冬梅 谭秀文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1819-1828,共10页
胚胎早期死亡及流产严重影响母牛的繁殖性能,造成极大的经济损失。本研究利用不同浓度双氧水(H_(2)O_(2))处理子宫内膜细胞6 h,通过流式细胞仪、酶标仪分别进行细胞内活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及还... 胚胎早期死亡及流产严重影响母牛的繁殖性能,造成极大的经济损失。本研究利用不同浓度双氧水(H_(2)O_(2))处理子宫内膜细胞6 h,通过流式细胞仪、酶标仪分别进行细胞内活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值检测,建立子宫内膜细胞氧化应激模型。在此基础上,利用流式细胞仪检测细胞凋亡和生长周期,利用荧光定量RT-PCR和Western blot检测Fas/FasL信号通路关键基因的mRNA和蛋白表达水平,并利用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)抑制子宫内膜细胞中Fas基因表达,进一步验证Fas/FasL凋亡通路是否参与氧化应激诱导的子宫内膜细胞凋亡。所有试验都重复3次以上。结果发现,利用200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)处理子宫内膜细胞6 h,细胞内ROS阳性水平急剧增加(P<0.05),SOD和CAT活性以及GSH与GSSG比值都显著降低(P<0.05),说明H_(2)O_(2)处理对子宫内膜细胞造成氧化应激损伤。在此处理条件下,生长周期中S期比例显著降低(P<0.05),凋亡比例显著提高(P<0.05);Fas/FasL凋亡通路中关键基因Fas、Caspase 8和Caspase 3的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);培养液中FasL浓度以及Fas、Caspase 8和Caspase 3蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。进一步研究发现,抑制Fas基因表达在一定程度上降低了氧化应激诱导的细胞凋亡比例以及Fas/FasL凋亡通路中关键基因的表达水平。总之,本研究结果表明,氧化应激通过激活Fas/FasL信号通路促进奶牛子宫内膜细胞凋亡,这为解释氧化应激对子宫内膜细胞的不利影响提供了新的见解。 展开更多
关键词 氧化应激 Fas/FasL信号通路 细胞凋亡 子宫内膜细胞
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槲皮素对Aroclor 1254致孕鼠子宫内膜细胞损伤的保护作用 被引量:3
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作者 徐丽娜 孙立云 +3 位作者 路丽芹 秦建华 钟秀会 马玉忠 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期444-449,455,共7页
为了研究槲皮素对Aroclor 1254损伤的孕鼠子宫内膜细胞是否具有保护作用,试验通过分离、培养怀孕大鼠的子宫内膜细胞,以Aroclor 1254诱导子宫内膜细胞损伤模型,用不同剂量的槲皮素分别处理损伤的子宫内膜细胞24~72h,MTT法测细胞的活力,R... 为了研究槲皮素对Aroclor 1254损伤的孕鼠子宫内膜细胞是否具有保护作用,试验通过分离、培养怀孕大鼠的子宫内膜细胞,以Aroclor 1254诱导子宫内膜细胞损伤模型,用不同剂量的槲皮素分别处理损伤的子宫内膜细胞24~72h,MTT法测细胞的活力,RT-PCR及Western blot法检测细胞中CYP450的表达,并通过ELISA法检测细胞培养基中TNF-α、IL-6、雌二醇(estradiol,E2)和孕酮(progesterone,P4)的含量,来确定槲皮素是否对损伤的细胞具有保护作用。结果显示,处理24h后,随着槲皮素浓度的升高,子宫内膜细胞的成活率也随之增高,其中50μmol/L槲皮素时成活率最高。CYP1A1、CYP2B1和CYP2E1在子宫内膜细胞mRNA中的表达随槲皮素浓度的升高呈上升的趋势。CYP1A1和CYP2E1在细胞的蛋白中不表达,CYP2B1的表达随槲皮素浓度的增加而呈升高的趋势。50μmol/L槲皮素作用24h对损伤的怀孕大鼠子宫内膜细胞CYP1A1、CYP2B1和CYP2E1的表达效果最明显。Aroclor 1254损伤的子宫内膜细胞中TNF-α和IL-6的含量比对照组显著升高(P<0.05),E2和P4的含量则比对照组显著降低(P<0.05)。50μmol/L槲皮素处理后TNF-α和IL-6的含量比Aroclor 1254损伤组显著降低(P<0.05),E2和P4则显著升高(P<0.05)。这表明槲皮素对损伤的怀孕大鼠子宫内膜细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 槲皮素 AROCLOR 1254 大鼠 子宫内膜细胞 细胞色素P450
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二噁英对子宫内膜异位症患者子宫内膜细胞TNF-α表达的影响 被引量:3
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作者 方庆仙 张信美 林俊 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期449-454,共6页
目的:探讨二噁英(TCDD)在子宫内膜异位症(EMs)发病中的作用。方法:通过预实验,加入一定浓度的TCDD分别作用于11例EMs患者离体在位子宫内膜细胞和12例离体对照组子宫内膜细胞24 h,应用Real-time RT-PCR和ELISA法检测TCDD处理前后子宫内... 目的:探讨二噁英(TCDD)在子宫内膜异位症(EMs)发病中的作用。方法:通过预实验,加入一定浓度的TCDD分别作用于11例EMs患者离体在位子宫内膜细胞和12例离体对照组子宫内膜细胞24 h,应用Real-time RT-PCR和ELISA法检测TCDD处理前后子宫内膜细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和蛋白的表达。结果:TCDD未处理前,EMs组子宫内膜细胞分泌TNF-α蛋白和mRNA水平均显著高于对照组(P<0.05)。TCDD呈剂量依赖方式促进子宫内膜细胞TNF-α蛋白的分泌,以10 nmol/L TCDD作用最明显(P<0.01),但TCDD对子宫内膜细胞TNF-αmRNA表达均无明显影响(P>0.05)。结论:二噁英可能通过影响子宫内膜细胞TNF-α蛋白水平的表达而参与EMs的发病过程,其主要机制可能不是通过调节其转录途径。 展开更多
关键词 二噁英(TCDD) 子宫内膜异位症(EMs) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 子宫内膜细胞 发病机制 离体
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孕酮、干扰素τ对牛子宫内膜上细胞外基质及其相关配体表达的影响 被引量:3
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作者 张明 郑洁 +4 位作者 甘潇 陈仕毅 曾长军 周光彬 赖松家 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期309-315,共7页
为探索干扰素τ(IFN-τ)、孕酮对牛子宫内膜上细胞外基质(ECM)及其配基基因表达的影响,本研究在体外培养的牛子宫内膜细胞(bECs)培养液中,分别添加孕酮、bIFN-τ、孕酮和bIFN-τ混合物培养24h后,通过荧光定量PCR技术,检测bECs上Collagen... 为探索干扰素τ(IFN-τ)、孕酮对牛子宫内膜上细胞外基质(ECM)及其配基基因表达的影响,本研究在体外培养的牛子宫内膜细胞(bECs)培养液中,分别添加孕酮、bIFN-τ、孕酮和bIFN-τ混合物培养24h后,通过荧光定量PCR技术,检测bECs上Collagen、Laminin、Fibronectin、THBS和Tenascin等ECM基因和ECM配基基因Syndecan、CD44、CD47和RHAMM的表达。结果表明:在体外培养的牛子宫内膜细胞上,bIFN-τ显著地诱导了Tenascin、Collagen、RHAMM和Laminin基因的表达,孕酮显著地诱导了CD44、Fibronectin、RHAMM和Laminin基因的表达,但当bIFN-τ和孕酮联合作用时,CD44、THBS基因的转录水平受到抑制,Tenascin、Fibonectin、Colla-gen基因的转录水平恢复到对照组转录水平。研究结果显示,在胚胎植入过程中,IFN-τ和孕酮可能对牛子宫内膜上ECM及其配基基因表达具有调控作用。 展开更多
关键词 孕酮 干扰素τ 细胞外基质 子宫内膜细胞
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