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抗细粒棘球绦虫疫苗候选抗原免疫犬IgG抗体水平监测及免疫组化定位研究 被引量：2
1
作者 赵莉 阿帕克孜.麦麦提 +8 位作者 王俊伟 张壮志 官亚婷 王冰洁 刘志强 穆尼拉.特列吾汗 刘明远 吕凤军 丁伟强 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期538-542,共5页
为探究细粒棘球绦虫(E.granulosus,Eg)成熟虫体(MAW)特异性蛋白(EgM)(EgM9、EgM123)的抗Eg感染保护效果,本研究利用Eg疫苗候选抗原EgM9和EgM123重组蛋白,分别3次免疫实验犬,利用ELISA法检测免疫犬血清中IgG、IFN-γ和IL-10的变化情况,... 为探究细粒棘球绦虫(E.granulosus,Eg)成熟虫体(MAW)特异性蛋白(EgM)(EgM9、EgM123)的抗Eg感染保护效果,本研究利用Eg疫苗候选抗原EgM9和EgM123重组蛋白,分别3次免疫实验犬,利用ELISA法检测免疫犬血清中IgG、IFN-γ和IL-10的变化情况,采用免疫组化法检测免疫犬肠系膜淋巴结和小肠中的特异性IgG抗体。结果显示,在第3次免疫后一周即免疫组犬抗体水平均最高时对其进行原头蚴攻击,攻毒后免疫组的抗体水平随之下降,且持续至第3次免疫后19周,免疫组均与对照组呈显著性差异(p<0.05);第3次免疫后一周免疫组犬血清中IFN-γ和IL-10水平均呈升高趋势,且至第3次免疫后23周剖检,免疫组犬的肠系膜淋巴结和小肠组织经免疫组化法均检测出特异性IgG抗体。表明用EgM重组蛋白免疫犬,可诱导其产生IgG抗体而发挥抗Eg感染保护效果,为终末宿主犬包虫病的免疫机理探究和疫苗及相关检测试剂的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 犬 egm重组蛋白 抗体反应 免疫组织化学
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细粒棘球绦虫EgM123蛋白融合霍乱毒素B亚单位疫苗的构建表达及免疫原性研究 被引量：4
2
作者 齐文静 何黎 +5 位作者 王甜 郑雪婷 郭宝平 张文宝 况玲 李军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期647-654,共8页
目的构建和表达细粒棘球绦虫成虫特异表达EgM123基因与霍乱毒素B的融合蛋白(CTB-EgM123);并确定CTB-EgM123蛋白的抗原性。方法将合成EgM123基因序列连接到pET28a/CTB原核表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21中。利用IPTG诱导目的基因的表达... 目的构建和表达细粒棘球绦虫成虫特异表达EgM123基因与霍乱毒素B的融合蛋白(CTB-EgM123);并确定CTB-EgM123蛋白的抗原性。方法将合成EgM123基因序列连接到pET28a/CTB原核表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21中。利用IPTG诱导目的基因的表达;用SDS-PAGE及Western-Blotting对表达蛋白进行分析和鉴定;用纯化蛋白免疫小鼠及犬,用ELISA方法对小鼠及犬的血清抗体效价和肠黏液的抗体亚类进行分析。结果PCR和测序确定CTB-EgM123基因片段长度为804bp,pET28a/CTB-EgM123原核表达阅读框序列正确。在37℃条件下,经IPTG0.4mmol/L诱导5h,获得CTB-EgM123高表达的包涵体蛋白,分子质量为37kDa。免疫小鼠结果表明复性CTB-EgM123蛋白具较好免疫原性,抗体效价>320000;以IgG2a为主。检测免疫犬血清效价,结果发现用融合蛋白免疫后的犬血清抗体效价>64000,效价高于EgM123免疫组(t=0.0064,P<0.05);且在4周时,抗体呈上升趋势,并能较长时间维持抗体水平。结论原核表达载体pET28a/CTB-EgM123在大肠杆菌中成功表达,纯化蛋白接种小鼠和犬表明具有高的抗原性。表明CTB可以增强蛋白的免疫原性,并刺激小鼠和犬体内产生高水平的体液和黏膜免疫。本研究为研发犬用包虫病疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 CTB-egm123 重组蛋白 疫苗 犬
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EgM123免疫犬血清抗体监测 被引量：4
3
作者 赵莉 张壮志 +7 位作者 石保新 古努尔.吐尔逊 米晓云 吐尔洪.依米提 王进成 马正海 张文宝 李国庆 《草食家畜》 2011年第4期72-75,共4页
【目的】探索EgM家族重组蛋白(EgM 123)与弗氏佐剂结合免疫犬后血清抗体变化规律。【方法】利用间接ELISA法检测免疫组与对照组血清特异性抗体(IgG)的变化规律,并以Western-blotting方法进行验证。【结果】ELISA实验结果经统计学方法分... 【目的】探索EgM家族重组蛋白(EgM 123)与弗氏佐剂结合免疫犬后血清抗体变化规律。【方法】利用间接ELISA法检测免疫组与对照组血清特异性抗体(IgG)的变化规律,并以Western-blotting方法进行验证。【结果】ELISA实验结果经统计学方法分析显示,不中和免疫组与对照组血清抗体时,特异性抗体IgG差异不显著(P>0.05),但中和血清抗体时,差异显著(P<0.05)。【结论】中和血清抗体,能够更明显的看到EgM家族重组蛋白(EgM 123)引起的犬特异性免疫应答。 展开更多
关键词 重组蛋白egm 123 特异性抗体 犬 ELISA Western—blotting
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监测重组蛋白EgM9免疫犬的特异性抗体变化 被引量：2
4
作者 赵莉 张壮志 +6 位作者 石保新 古努尔.吐尔逊 米晓云 吐尔洪.依米提 王进成 马正海 张文宝 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1115-1119,共5页
【目的】探索EgM家族重组蛋白(EgM9)与Iscom为佐剂结合免疫犬后血清抗体变化规律。【方法】利用间接ELISA法检测免疫组与对照组血清特异性抗体(IgGI、gG1I、gG2、IgA、IgM和IgE)的变化规律,并以Western-blotting方法进行验证。【结果】... 【目的】探索EgM家族重组蛋白(EgM9)与Iscom为佐剂结合免疫犬后血清抗体变化规律。【方法】利用间接ELISA法检测免疫组与对照组血清特异性抗体(IgGI、gG1I、gG2、IgA、IgM和IgE)的变化规律,并以Western-blotting方法进行验证。【结果】经统计学方法分析显示,免疫组与对照组特异性抗体IgG及其亚类IgG1I、gG2,差异极显著(P<0.01),而特异性抗体IgAI、gM和IgE差异不显著(P>0.05)。【结论】证实EgM家族重组蛋白(EgM9)与Iscom为佐剂结合能引起犬特异性免疫应答。 展开更多
关键词 重组蛋白egm9 特异性抗体 犬
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