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2001年中国食源性致病菌及其耐药性主动监测研究 被引量：125
1
作者 王茂起 冉陆 +6 位作者 王竹天 李志刚 姚景惠 付萍 杨宝兰 徐进 李迎惠 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期49-54,共6页
目的　旨在监测中国食源性致病菌及其耐药性。方法　中国疾病预防控制中心营养与食品安全所建立的全国食品污染物监测网的食源性致病菌监测部分 ,2 0 0 1年在全国 11个省市设点采样并检测了七大类 (生肉、熟肉、生奶、冰激淋、酸奶、水... 目的　旨在监测中国食源性致病菌及其耐药性。方法　中国疾病预防控制中心营养与食品安全所建立的全国食品污染物监测网的食源性致病菌监测部分 ,2 0 0 1年在全国 11个省市设点采样并检测了七大类 (生肉、熟肉、生奶、冰激淋、酸奶、水产品和蔬菜 )共 4 0 34份样品。结果　沙门氏菌、大肠杆菌O15 7∶H7和单核细胞增生李斯特氏菌 ,总阳性率 5 5 0 %。其中沙门氏菌 3 32 % ,单核细胞增生李斯特氏菌 1 2 9% ,大肠杆菌O15 7∶H70 82 %。生肉的污染情况最为严重 ,阳性率 12 96 %。共分离出沙门氏菌 137株 ,德比沙门氏菌、阿贡纳沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、里定沙门氏菌、鸭沙门氏菌、明斯特沙门氏菌及鼠伤寒沙门氏菌 7种血清型占 80 %。结论　沙门氏菌的血清型分布和耐药性各个省不同。自生、熟肉中分离到O15 7∶H7的强毒株。对分离的沙门氏菌、大肠杆菌检测了 14种抗生素的耐药性 ,结果表明沙门氏菌和大肠杆菌中都有多重耐药株。 展开更多
关键词 主动监测 沙门氏菌 大肠杆菌o157:h7 单核细胞增生李斯特氏菌 耐药性
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江苏省淮北地区肠出血性大肠埃希菌O157:H7感染性腹泻并发急性肾衰的研究 被引量：45
2
作者 汪华 景怀琦 +8 位作者 李红卫 倪大新 赵广法 顾玲 杨晋川 史智扬 刘光中 胡晓抒 徐建国 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期938-940,共3页
目的 了解1999～2000年江苏省淮北部分地区发生肠出血性大肠埃希菌O157:H7感染性腹泻并发急性肾衰病例的病因与流行特点。方法 运用流行病学、微生物学、分子生物学等方法,对传染源、传播途径、流行因素进行调查和分析。结果 1999年共在... 目的 了解1999～2000年江苏省淮北部分地区发生肠出血性大肠埃希菌O157:H7感染性腹泻并发急性肾衰病例的病因与流行特点。方法 运用流行病学、微生物学、分子生物学等方法,对传染源、传播途径、流行因素进行调查和分析。结果 1999年共在9个县(区)报告肠出血性大肠埃希菌O157:H7感染性腹泻并发急性肾衰病例95例,死亡83例,病死率87.37％。6月中、下旬为发病高峰,男女之比为1:1.44,年龄以50岁以上为主,占88.42％。2000年发生38例,死亡34例,病死率89.47％。引起爆发的主要危险因素有不饮自来水、吃剩饭菜、厨房卫生差、生食瓜果和饭前便后不洗手。从2例重症患者及3例腹泻患者粪便标本分离到O157:H7;宿主动物O157:H7携带率为9.62％(170/1767),菌株毒力基因阳性率达99.41％(169/170)。从患者粪便标本分离的菌株与家禽家畜分离的菌株属同一克隆群。结论 这是中国首次发现由O157:H7引起的爆发疫情,其发生与宿主动物带菌率高且菌株毒力基因阳性率高有密切关系,引起疫情的具体传播途径复杂多样,主要的感染危险因素与个人卫生、家庭卫生不良有关。 展开更多
关键词 肠出血性大肠埃希菌 o157:h7感染 急性肾衰 腹泻 粪便标本 宿主动物 病死率 淮北地区 并发 菌株
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用免疫胶体金快速诊断卡初筛粪便中的O157∶H7大肠杆菌 被引量：13
3
作者 杨晋川 景怀琦 +5 位作者 李洪卫 逄波 赵广法 权太淑 范天锐 徐建国 《疾病监测》 CAS 2001年第9期327-329,共3页
我们用O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡 ,对腹泻患者粪便标本中的E .coliO15 7∶H7进行初筛 ,然后再用免疫磁珠捕获集菌及病原菌的分离和鉴定。结果发现 ,该诊断卡可检测到每卡 70个菌细胞。诊断卡强阳性的粪便标本 ,91 18%可以... 我们用O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡 ,对腹泻患者粪便标本中的E .coliO15 7∶H7进行初筛 ,然后再用免疫磁珠捕获集菌及病原菌的分离和鉴定。结果发现 ,该诊断卡可检测到每卡 70个菌细胞。诊断卡强阳性的粪便标本 ,91 18%可以分离到O15 7∶H7大肠杆菌 (31/34 ) ;诊断卡弱阳性的粪便标本 ,5 47% (7/12 8)可以分离到O15 7∶H7大肠杆菌 ;诊断卡阴性的粪便标本 ,没有分离到病原菌。O15 7∶H7大肠杆菌免疫胶体金快速诊断卡是一种快速、灵敏、简便的技术 ,可用于对疑似病例的早期诊断和对粪便标本进行初筛 ,减少了工作量 ,值得推广。 展开更多
关键词 o157:h7大肠杆菌 免疫胶体金快速诊断卡 免疫磁珠捕获法
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免疫磁分离技术在E.coli O157∶H7检测中的应用 被引量：17
4
作者 唐倩倩 王剑平 +2 位作者 叶尊忠 盖玲 应义斌 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第10期2614-2618,共5页
免疫磁分离(i mmunomagnetic separation)技术因其具有选择性好、特异性强、能起到浓缩的作用,已与其他快速检测方法如电化学、光学等方法连用,应用于食品、环境卫生检测等领域。免疫磁分离技术是目前最有推广价值的技术之一。文章通过... 免疫磁分离(i mmunomagnetic separation)技术因其具有选择性好、特异性强、能起到浓缩的作用,已与其他快速检测方法如电化学、光学等方法连用,应用于食品、环境卫生检测等领域。免疫磁分离技术是目前最有推广价值的技术之一。文章通过比较不同的E.coli O157∶H7-免疫磁珠(immunomagnetic beads,I MB)浓度配比、E.coli O157∶H7与Bacillus subtilis不同的体积比下的免疫磁分离的捕获率,得出当E.coli O157∶H7-I MB浓度配比为1∶30时,捕获率近100%,即所有的目标菌均可被捕获到;在总体积不变、IMB的加入量一定的情况下,随着Bacillus subtilis比例的增加,捕获率出现先下降后上升的情况。同时,将IMS与ATP生物发光法结合起来,对不同浓度的E.coliO157∶H7进行了检测,得出该方法与传统的平板培养法具有很好的线性相关性,则R2=0.9882,检测限可低达102CFU.mL-1。 展开更多
关键词 e.colio157∶h7 免疫磁分离 ATP生物发光 捕获率 菌落计数
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食品样品中大肠杆菌O157:H7复合PCR检测方法的研究 被引量：13
5
作者 赵志晶 刘秀梅 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期716-719,共4页
根据大肠杆菌O15 7:H7特异性基因fliC ,rfbE ,SLTI与SLTII设计四对引物 ,建立了复合PCR方法 ,扩增产物长度分别为为 5 6 0bp ,6 78bp ,2 10bp与 4 84bp。该方法可以一步检测出O15 7与H7特异性抗原基因 ,并可同时检测该菌产生SLT毒素的类... 根据大肠杆菌O15 7:H7特异性基因fliC ,rfbE ,SLTI与SLTII设计四对引物 ,建立了复合PCR方法 ,扩增产物长度分别为为 5 6 0bp ,6 78bp ,2 10bp与 4 84bp。该方法可以一步检测出O15 7与H7特异性抗原基因 ,并可同时检测该菌产生SLT毒素的类型 ,与 71株试验菌株的基因型完全配合 ,是一种特异、高效的检测方法。该方法适用于牛奶样品中大肠杆菌O15 7:H7的检测 ,经过增菌步骤检测限可达 0 1cfu 展开更多
关键词 e.coli 0157:h7 复合PCR 食品样品
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大肠杆菌O157特异基因的PCR检测方法 被引量：14
6
作者 郑桂丽 廖绍安 +2 位作者 李钏华 龚玉娇 莫自耀 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第10期1183-1185,共3页
目的:建立一种灵敏、特异的检测肠出血性大肠杆菌O157的PCR方法。方法:针对大肠杆菌O157特异性基因rfbO157设计引物,扩增一497 bp的O157标识序列。结果:应用该PCR反应体系,对4株O157菌株和14株非O157菌株扩增结果表明,O157菌株均扩增出... 目的:建立一种灵敏、特异的检测肠出血性大肠杆菌O157的PCR方法。方法:针对大肠杆菌O157特异性基因rfbO157设计引物,扩增一497 bp的O157标识序列。结果:应用该PCR反应体系,对4株O157菌株和14株非O157菌株扩增结果表明,O157菌株均扩增出预期的497 bp片段,14株非O157菌株则为阴性。纯菌液检测灵敏度为60 cfu/PCR反应,模拟混合菌液检测灵敏度为400 cfu/PCR反应。结论:该方法用于肠出血性大肠杆菌O157的检测鉴定简便、快捷,具有很高的特异性和灵敏度,为O157的临床辅助诊断提供了有力手段。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157 PCR rfbo157
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基于实时荧光环介导等温扩增快速检测鸡肉中的大肠杆菌O157:H 被引量：15
7
作者 赵远洋 王瑾 +2 位作者 林丽萍 郜彦彦 吴国平 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期281-288,共8页
以大肠杆菌O157:H7的VT2基因序列设计特异性引物,利用Midori Green新型核酸荧光染料,建立鸡肉中大肠杆菌O157:H7实时荧光定量环介导等温扩增(Rti-LAMP)检测方法。纯培养大肠杆菌O157:H7检测灵敏度达3.5 CFU/反应,需时45 min。模拟大肠杆... 以大肠杆菌O157:H7的VT2基因序列设计特异性引物,利用Midori Green新型核酸荧光染料,建立鸡肉中大肠杆菌O157:H7实时荧光定量环介导等温扩增(Rti-LAMP)检测方法。纯培养大肠杆菌O157:H7检测灵敏度达3.5 CFU/反应,需时45 min。模拟大肠杆菌O157:H7污染鸡肉样品,经37℃增菌4 h,用Whirl-pak无菌袋过滤离心得沉淀,提取样品DNA模板用于Rti-LAMP反应,检测大肠杆菌O157:H7灵敏度达140 CFU/g,整个检测流程约7 h。采用蒙脱石封闭的活性炭前处理污染鸡肉样品,不经增菌过程,结果表明:该Rti-LAMP检测方法灵敏度达12 CFU/g,整个检测耗时约4.5 h。市购鸡肉样品51份,以大肠杆菌国标检测法为对照,研究基于Rti-LAMP联合增菌或封闭活性炭预处理而不经增菌的两种方法,对比检测临床鸡肉样品大肠杆菌O157:H7污染率。结果:国标法和增菌的Rti-LAMP两种方法均检测到同一鸡肉样品为大肠杆菌O157:H7阳性,经封闭活性炭预处理而未经增菌的Rti-LAMP则检测到8份鸡肉样品大肠杆菌O157:H7阳性。研究表明,封闭活性炭预处理的Rti-LAMP检测方法较国标法更灵敏、快速、简便、特异地检测鸡肉中大肠杆菌O157:H7污染。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:h7 鸡肉 实时环介导等温扩增 增菌 封闭的活性炭
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基于纳米金固定大肠杆菌O157:H7酶免疫传感器的研究 被引量：13
8
作者 马静 张伟尉 +3 位作者 李闻 陈晓春 刘红艳 黄正 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第12期2156-2158,2173,共4页
目的：建立一种快速检测大肠杆菌O157：H7的新型酶免疫传感器。方法：用静电吸附作用和抗原抗体特异性反应将大肠杆菌O157：H7单克隆鼠抗固定在辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG／纳米金修饰的玻碳电极表面，制备用于检测大肠杆菌O157：H... 目的：建立一种快速检测大肠杆菌O157：H7的新型酶免疫传感器。方法：用静电吸附作用和抗原抗体特异性反应将大肠杆菌O157：H7单克隆鼠抗固定在辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG／纳米金修饰的玻碳电极表面，制备用于检测大肠杆菌O157：H7的酶免疫传感器。通过循环伏安法和恒电位法测定大肠杆菌O157：H7被固定在电极表面引起的电信号改变进行定量分析。结果：在含0．1mol／L PBS（pH7．4），1 mmol／L二甲氨基甲基二茂铁，0．2mmol／L H2O2，30℃的底液中该酶免疫传感器的检出限为1×10^2cfu／ml，检测线性范围为1×10^3～1×10^5 cfu／ml，相关系数为r=0．997。结论：该传感器制备方法简单，具有灵敏度高、检测时间短、操作简单等优点，在临床医学和环境监测中具有较好的应用价值。 展开更多
关键词 酶免疫传感器 大肠杆菌o157:h7 纳米金 电沉积
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黄连素和6种抗生素对大肠杆菌O157∶H7中国分离株产生志贺毒素的影响 被引量：12
9
作者 范光伟 徐建国 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期218-221,共4页
目的　研究黄连素和 6种常用抗生素对大肠杆菌O15 7∶H7中国分离株产生志贺样毒素的影响。方法　利用志贺毒素对Vero细胞具有细胞毒性 ,并可使其释放乳酸脱氢酶 (LDH)的原理 ,使用Vero细胞的细胞毒性检测试剂盒 ,检测培养基中的LDH的含... 目的　研究黄连素和 6种常用抗生素对大肠杆菌O15 7∶H7中国分离株产生志贺样毒素的影响。方法　利用志贺毒素对Vero细胞具有细胞毒性 ,并可使其释放乳酸脱氢酶 (LDH)的原理 ,使用Vero细胞的细胞毒性检测试剂盒 ,检测培养基中的LDH的含量。结果　将大肠杆菌O15 7∶H7在环丙沙星、氨苄西林、庆大霉素、链霉素、青霉素、红霉素的亚抑制浓度中培养后 ,可增加大肠杆菌O15 7∶H7对Vero细胞的毒性 ,但不同菌株有差异。环丙沙星对大肠杆菌O15 7∶H7的最小抑制浓度很低 ,但其对Vero细胞毒性作用 ,随着药浓度的降低而增高。黄连素在试管内对大肠杆菌O15 7∶H7没有抑制作用。和抗生素相比 ,黄连素对大肠杆菌O15 7∶H7产生和释放志贺毒素比较小。结论　黄连素在试管内对大肠杆菌O15 7∶H7的生长抑制作用不明显 ,其刺激大肠杆菌O15 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:h7 志贺毒素 抗生素 黄连素 出血性肠炎
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出血性大肠杆菌单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：10
10
作者 赵志晶 刘秀梅 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期108-111,共4页
以肠出血性大肠埃希氏菌 (EnterohaemorrhagicE .coli,EHEC)O15 7∶H7免疫Balb c小鼠 ,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2 0融合、筛选 ,经 3次亚克隆建立了一个稳定分泌抗大肠杆菌O15 7单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,命名为 3A5。分泌抗体属... 以肠出血性大肠埃希氏菌 (EnterohaemorrhagicE .coli,EHEC)O15 7∶H7免疫Balb c小鼠 ,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2 0融合、筛选 ,经 3次亚克隆建立了一个稳定分泌抗大肠杆菌O15 7单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,命名为 3A5。分泌抗体属IgM亚型 ,腹水的抗体效价达 1∶1× 10 6 。以辛酸 饱和硫酸铵法纯化后抗体的工作浓度为 1∶2× 10 4 ,检出限为 10 5～ 10 6 cfu ml。该抗体对大肠杆菌O15 7有较高特异性 ,同时抗出血性大肠杆菌O113∶H2 展开更多
关键词 单克隆抗体 eheC 大肠杆菌o157:h7 制备 鉴定
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水产品中4种食源性致病菌多重PCR检测方法的建立 被引量：11
11
作者 童桂香 黎小正 +5 位作者 韦信贤 吴祥庆 黄国秋 谢宗升 黄光华 兰柳春 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2217-2222,共6页
【目的】建立能同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR,为水产品质量安全检测工作提供技术支持。【方法】以LB肉汤培养基为共增菌培养基,根据沙门氏菌inv A基因、大肠杆菌O157∶H7 rfb E基因、志贺氏... 【目的】建立能同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR,为水产品质量安全检测工作提供技术支持。【方法】以LB肉汤培养基为共增菌培养基,根据沙门氏菌inv A基因、大肠杆菌O157∶H7 rfb E基因、志贺氏菌ipa H基因和金黄色葡萄球菌fem A基因的保守序列设计引物,对引物浓度配比、退火温度及反应体系等进行优化,并对建立的多重PCR进行特异性、敏感性及临床样品检验试验。【结果】4种目标致病菌在LB肉汤培养基中36℃培养18 h后,均表现出良好的生长趋势,增菌数量级均在108 CFU/m L以上。优化后的多重PCR能对4种目标菌的单一或混合基因组DNA进行特异性扩增,而对单增李斯特氏菌、肺炎克雷伯菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌等其他菌株的基因组DNA均未扩增出任何条带;对沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7和金黄色葡萄球菌的最低检出限为102 CFU/m L,对志贺氏菌最低检出限为10 CFU/m L。应用该多重PCR对56份水产品进行检测,其结果与按照GB/T 4789-2003、GB/T 4789-2010检测的结果一致。【结论】针对同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157∶H7、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌的多重PCR具有快速、便捷、灵敏、准确等优点,可为水产品食源性致病菌检测及其安全控制行业提供一种快速、准确、高效、经济的检测手段。 展开更多
关键词 水产品 沙门氏菌 大肠杆菌o157:h7 志贺氏菌 金黄色葡萄球菌 多重PCR
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猪源大肠杆菌O157∶H7耐药表型和消毒剂抗性调查 被引量：11
12
作者 李军 谢宇舟 +8 位作者 冯世文 彭昊 陈泽祥 禤雄标 胡帅 马春霞 谢永平 杨威 曾芸 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期203-206,共4页
为了调查广西猪源大肠杆菌O157∶H7分离株的耐药表型和消毒剂抗性情况,本研究测定5株猪源大肠杆菌O157∶H7广西分离株的药物敏感性和消毒剂抗性,并应用PCR对5株细菌的耐氨基糖苷类抗生素基因:氨基糖苷磷酸转移酶基因aph(3)-Iia、乙酰转... 为了调查广西猪源大肠杆菌O157∶H7分离株的耐药表型和消毒剂抗性情况,本研究测定5株猪源大肠杆菌O157∶H7广西分离株的药物敏感性和消毒剂抗性,并应用PCR对5株细菌的耐氨基糖苷类抗生素基因:氨基糖苷磷酸转移酶基因aph(3)-Iia、乙酰转移酶基因aadA和aadB进行扩增。27种抗菌药物的敏感结果表明,5株菌株只对氟苯尼考、头孢曲松、头孢西丁和头孢噻肟敏感;对罗红霉素、多黏菌素B、利福平、林可霉素、阿莫西林、氨苄西林和头孢噻吩的耐药率为100%;对壮观霉素、链霉素、头孢拉定等药物的耐药率在20%～60%之间。在5株大肠杆菌O157∶H7广西分离株中,分别有1株、1株和3株菌株对23种、11种和9种抗菌药产生耐药性。PCR结果证实,5株细菌携带有耐氨基糖苷类抗生素基因,耐药基因的存在与其耐药表型有一定的相关性。消毒剂抗性结果显示,5株细菌对聚维酮碘溶液、新洁尔灭消毒液、稀戊二醛溶液、双季铵盐—碘消毒液、复方过氧乙酸具有抗性,只对二氯异氰尿酸钠粉敏感。研究结果对预防和控制广西大肠杆菌O157∶H7提供了数据。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157∶h7 耐药性 消毒剂抗性
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河北省肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染监测 被引量：10
13
作者 张亚利 郭逸秀 +4 位作者 李桂银 李月平 甄素娟 马洪生 陈素良 《疾病监测》 CAS 2001年第6期207-209,共3页
为调查河北省既往是否曾发生肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7感染疑似病例 ,了解动物带菌和市售食品、饮水的污染情况。选取市级以上医院 ,查阅 1998年 1月 1日至 1999年 12月 31日的住院病案 ,对有腹泻史的急性肾功能衰竭患者填写个案调查... 为调查河北省既往是否曾发生肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7感染疑似病例 ,了解动物带菌和市售食品、饮水的污染情况。选取市级以上医院 ,查阅 1998年 1月 1日至 1999年 12月 31日的住院病案 ,对有腹泻史的急性肾功能衰竭患者填写个案调查表。采集各种动物粪便、市售食品和饮水标本 ,接种山梨醇 -麦康凯培养基 ,可疑菌落转种三糖铁培养基 ,之后进行生化鉴定和血清学鉴定。结果表明 ,全省共发现 41例肠出血性大肠杆菌O15 7∶H7感染疑似病例 ,分布于 8个市 ,发病时间无严格季节性。男性 2 9例 ,女性 12例 ;年龄最小者 8天 ,最大者 78岁 ;农民所占比例最大 ,占 6 8 3%。全省采集十几种动物粪便标本共计 2 0 6 0份 ,从牛粪 (75 1份 )中分离到 2株O15 7∶H7;采集五类市售食品共 35 2 3份 ,从生猪肉 (36 6份 )中分离到 2株O15 7∶H7;采集的饮水标本未分离到O15 7∶H7。因此证实河北省存在发生肠出血性大肠杆菌O15 展开更多
关键词 肠出血性大肠杆菌 o157:h7 监测 河北
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双抗夹心ELISA法定量检测食品中大肠杆菌O157:H7初探 被引量：9
14
作者 宋宏新 马冬 +1 位作者 薛海燕 李红心 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期528-530,共3页
以鸡抗O157:H7特异性脂多糖(LPS)抗体(IgY)为捕获抗体,酶标抗体(HRP-IgY)为检测抗体建立双抗夹心ELISA法检测食品中大肠杆菌O157:H7的方法,确定了抗原浓度对数与OD450值的高度线性相关性,根据检测OD450值可从拟合回归曲线确定样品中的... 以鸡抗O157:H7特异性脂多糖(LPS)抗体(IgY)为捕获抗体,酶标抗体(HRP-IgY)为检测抗体建立双抗夹心ELISA法检测食品中大肠杆菌O157:H7的方法,确定了抗原浓度对数与OD450值的高度线性相关性,根据检测OD450值可从拟合回归曲线确定样品中的含菌量,含菌量≥104CFU/ml的食品样品可直接用双抗夹心法进行检测,含菌量≤104CFU/ml的食品样品可增菌14h后检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:h7 食源性病原菌定量检测 双抗夹心eLISA
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基于表面增强拉曼技术快速检测5种食源性致病菌 被引量：10
15
作者 高玮村 李博 +4 位作者 王习文 李乾学 李楠 李志萍 夏志平 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期733-737,共5页
为快速检测布鲁氏菌S2株、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7和福氏志贺氏菌,利用表面增强拉曼(SERS)光谱技术,以原位包覆纳米银为基底,获得5种细菌的SERS谱。结果表明:在400~2 000 cm^(-1)光谱内,布鲁氏菌S2株有10处明... 为快速检测布鲁氏菌S2株、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7和福氏志贺氏菌,利用表面增强拉曼(SERS)光谱技术,以原位包覆纳米银为基底,获得5种细菌的SERS谱。结果表明:在400~2 000 cm^(-1)光谱内,布鲁氏菌S2株有10处明显的拉曼谱峰,鼠伤寒沙门氏菌有9处明显的拉曼谱峰,金黄色葡萄球菌有5处明显的拉曼谱峰,大肠杆菌O157:H7有9处明显的拉曼谱峰,福氏志贺氏菌有7处明显的拉曼谱峰。5种食源性致病菌的拉曼谱峰位置以及强度区别明显。利用SERS技术可以实现在10 min内识别5种食源性致病菌,达到增强细菌拉曼信号、快速检测食源性致病菌的目的。 展开更多
关键词 表面增强拉曼 食源性致病菌 布鲁氏菌S2株 鼠伤寒沙门氏菌 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌o157:h7 福氏志贺氏菌
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基于核酸适配体SERS技术快速检测大肠埃希菌O157：H7的研究 被引量：10
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作者 王宇田 曲晗 +8 位作者 郝良玉 田栢会 高玮村 李楠 王习文 李志萍 易乐 李乾学 夏志平 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期16-21,共6页
目的基于核酸适配体表面增强拉曼技术(SERS),建立一种快速检测大肠埃希菌O157:H7的方法。方法将大肠埃希菌O157:H7与其特异性适配体共孵育,采用原位还原纳米银方法在大肠埃希菌O157:H7-适配体表面原位还原纳米银颗粒,形成纳米银壳,通过S... 目的基于核酸适配体表面增强拉曼技术(SERS),建立一种快速检测大肠埃希菌O157:H7的方法。方法将大肠埃希菌O157:H7与其特异性适配体共孵育,采用原位还原纳米银方法在大肠埃希菌O157:H7-适配体表面原位还原纳米银颗粒,形成纳米银壳,通过SERS技术特异性检测目标细菌。结果在500~1 900cm-1范围内采集拉曼信号,在735cm-1、1 331cm-1、1 578cm-1处发现拉曼特征峰。对检测到的拉曼信号峰进行归属分析,735cm-1来自胞嘧啶与尿嘧啶的代谢产物,1 331cm-1归属于鸟嘌呤代谢产物,1 578cm-1归属于蛋白质中酰胺Ⅰ和酰胺Ⅲ。将大肠埃希菌O157:H7、单增李斯特氏菌、肠炎沙门氏菌、福氏志贺氏菌、大肠埃希菌DH5α混合,通过SERS可快速检出目标细菌大肠埃希菌O157:H7。试验的重复性良好,最低检测限为10cfu/ml。结论基于核酸适配体SERS技术,建立的大肠埃希菌O157:H7快速检测方法的特异性和灵敏性高、操作简单、省时,费用低,可用于临床大肠埃希菌O157:H7感染的快速检测。 展开更多
关键词 核酸适配体 原位还原纳米银 表面增强拉曼光谱 大肠埃希菌o157:h7
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肉制品中的肠出血性大肠杆菌O157:H7快速检测方法的建立 被引量：9
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作者 刘培 张海滨 +1 位作者 张霞 髙旗利 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2009年第3期139-140,共2页
传统检验大肠杆菌O157的方法存在培养时间长,操作繁杂的问题。因此建立胶体金免疫层析快速筛选法。灵敏度试验结果显示O157胶体金免疫层析试纸条的灵敏度能够达到105CFU/mL。
关键词 大肠杆菌o157:h7 快速方法 胶体金免疫层析
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大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制 被引量：9
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作者 夏兴霞 王永山 +3 位作者 孟祥升 朱国强 张雪寒 何孔旺 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第4期47-53,共7页
用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效... 用E.coliO157∶H7菌体免疫BALB/c鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体（mAb）的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为O157∶H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMκ、IgG2bκ和IgG2bκ,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用纯化的单克隆抗体2E7标记胶体金,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜（NC）上;组装成双抗夹心法O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测O157∶H7,敏感度为106CFU/mL,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的O157∶H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1~5 min内可得出检测结果,便于O157∶H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157∶h7 单克隆抗体 胶体金 免疫层析试纸条 人兽共患病
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蚯蚓粪中乳酸菌的分离及其在大肠杆菌O157:H7中的抗菌活性 被引量：9
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作者 刘雪连 张宁 +2 位作者 崔东良 王冲 孙振钧 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期1-6,共6页
本研究利用SL培养基从蚯蚓粪中分离到54株具有产酸性能的菌株,并以E.coli O157:H7(EDL933株)作为指示菌株,采用点种法检测分离菌株的抑菌活性。结果表明其中6个菌株对指示菌具有拮抗作用,通过形态特征,结合16S rDNA序列分析,初步鉴定该... 本研究利用SL培养基从蚯蚓粪中分离到54株具有产酸性能的菌株,并以E.coli O157:H7(EDL933株)作为指示菌株,采用点种法检测分离菌株的抑菌活性。结果表明其中6个菌株对指示菌具有拮抗作用,通过形态特征,结合16S rDNA序列分析,初步鉴定该6个菌株分别为食物魏斯特菌(Listeria welshimeri)、乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)和格氏乳球菌(Lactococcus garvieae)。分离到的乳酸菌对E.coli O157:H7(EDL933株)具有显著的抑制作用,发酵温度和初始pH值影响发酵液的抑菌作用,优化环境因子可以促进拮抗菌对E.coli O157:H7的抑制作用。本研究为进一步分离抗菌产物用于人畜共患病的预防和治疗提供了理论依据。 展开更多
关键词 蚯蚓粪 乳酸菌 分离 e.colio157:h7 抗菌特性
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肠出血性大肠杆菌O157∶H7脂多糖抗原的提取鉴定及间接ELISA法的建立 被引量：8
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作者 刘红亮 陈学忠 +6 位作者 李克生 杜惠芬 陈应泰 连晓雯 鲁学萍 袁明 叶文华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期637-640,644,共5页
目的提取并纯化具有强免疫反应性和高特异性的肠出血性大肠杆菌O157∶H7(E.coliO157∶H7)脂多糖(LPS)抗原,并研究其在E.coliO157∶H7 LPS抗体检测中的应用。方法应用热酚水法提取E.coliO157∶H7 LPS抗原,同时收集水相和酚相LPS,并对其... 目的提取并纯化具有强免疫反应性和高特异性的肠出血性大肠杆菌O157∶H7(E.coliO157∶H7)脂多糖(LPS)抗原,并研究其在E.coliO157∶H7 LPS抗体检测中的应用。方法应用热酚水法提取E.coliO157∶H7 LPS抗原,同时收集水相和酚相LPS,并对其产率、纯度及免疫反应性进行分析比较,用酸解法制备O-特异性多糖(O-SP),并以不同的LPS为包被抗原,建立间接ELISA法检测E.coliO157∶H7 LPS抗体。结果大分子量的E.coliO157∶H7 LPS优先溶于酚相,而水相中含有更多的小分子量LPS,与水相LPS相比酚相LPS具有更高的免疫反应性和纯度,酚相LPS经酸解去脂得到的O-SP具有更高的反应特异性。结论酚相LPS和O-SP都可用于E.coliO157∶H7 LPS抗体的ELISA检测,O-SP具有更高的特异性,是检测E.coliO157∶H7 LPS特异性抗体的理想材料。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157∶h7 热酚水法 脂多糖 o-SP 间接eLISA
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