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大肠杆菌O157胶体金免疫层析快速筛查方法的建立 被引量:30
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作者 王静 陈维娜 +5 位作者 胡孔新 李伟 闫中强 周蕾 姚李四 牛春莉 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期439-441,共3页
目的建立一种大肠杆菌O157的胶体金免疫层析快速筛查方法。方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测大肠杆菌O157,对该法进行敏感性、特异性和食品样品的适用性分析。结果该法能在15分钟内完成检测,检测不同的肠杆菌科细菌(非O... 目的建立一种大肠杆菌O157的胶体金免疫层析快速筛查方法。方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测大肠杆菌O157,对该法进行敏感性、特异性和食品样品的适用性分析。结果该法能在15分钟内完成检测,检测不同的肠杆菌科细菌(非O157型大肠杆菌、沙门菌、志贺菌、变形杆菌、柠檬酸杆菌、肠杆菌、沙雷菌、耶尔森菌)、葡萄球菌、李斯特菌、气单胞菌、弧菌等共24种30株常见细菌,未发现有交叉反应,显示该法特异性良好。检测大肠杆菌O157的最低检出浓度为1×105cfu/ml。方法适用于奶粉、面粉、淀粉、咖啡粉、饼干、蛋糕、果冻、燕窝和果汁等食品样品的检测。结论新建立的大肠杆菌O157胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157 胶体金 免疫层析试验 快速筛查
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3种病原菌多重IMS-荧光RPA检测体系的建立及初步应用 被引量:8
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作者 李轲 郭华麟 +5 位作者 禹建鹰 张淑霞 连素梅 徐超 韩国全 郭会清 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第3期106-112,共7页
建立一种同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和布氏杆菌的快速、灵敏、高通量的检测方法。利用特异性免疫磁珠,在37℃条件下从200 mL样液体系中循环捕获目标致病菌。磁珠液提取DNA后,对3种病原菌进行多重IMS-荧光RPA检测。结果表明:针... 建立一种同时检测沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和布氏杆菌的快速、灵敏、高通量的检测方法。利用特异性免疫磁珠,在37℃条件下从200 mL样液体系中循环捕获目标致病菌。磁珠液提取DNA后,对3种病原菌进行多重IMS-荧光RPA检测。结果表明:针对沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7和布氏杆菌的检测限分别达到3.0、4.5和8.7 CFU/mL。使用新建多重IMS-荧光RPA方法对人工感染60份皮张、毛皮纺织品DNA样本进行扩增,结果显示与预期结果一致;对60份公共场所收集的皮张、毛皮、纺织品DNA样本进行扩增,结果显示有2个样本沙门氏菌阳性、1个样本大肠杆菌O157:H7阳性,3份阳性样品送测序,测序结果与GenBank检索沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7 DNA序列一致。得出结论:建立的多重IMS-荧光RPA检测体系灵敏度、特异性、准确度符合要求,能够在2 h内完成对3种病原菌检测,可以作为快速应对此三类病原菌安全突发事件的检测手段。 展开更多
关键词 免疫磁珠分离 荧光RPA 沙门氏菌 大肠杆菌o157:h7 布氏杆菌
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大肠杆菌O157∶H7新蛋白Ecs4563的基因克隆、表达及纯化 被引量:1
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作者 毛赟赟 李玉霞 +5 位作者 高原 凌焱 胡伟 张部昌 周围 梁龙 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2008年第1期1-4,共4页
目的:克隆、表达并纯化肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7新预测分子伴侣蛋白Ecs4563,以进一步开展其结构与功能的研究。方法:利用PCR方法从EHEC O157∶H7基因组中扩增出分子伴侣基因ecs4563,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现... 目的:克隆、表达并纯化肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7新预测分子伴侣蛋白Ecs4563,以进一步开展其结构与功能的研究。方法:利用PCR方法从EHEC O157∶H7基因组中扩增出分子伴侣基因ecs4563,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现诱导表达,采用Western印迹法进行鉴定,通过Ni2+螯合柱纯化获得目的蛋白。结果:构建了pET-24a-ecs4563重组质粒,实现了目的蛋白的融合表达,Ni2+金属螯合法纯化了目的蛋白,通过Western印迹法验证了融合蛋白的特异性。结论:得到了新预测分子伴侣Ecs4563,为下一步研究蛋白功能,进一步研究EHEC O157∶H7的致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157h7 ecs4563基因 克隆 基因表达 Ⅲ型分泌系统
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复合探针实时荧光PCR检测大肠杆菌O157:H7 被引量:16
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作者 陈苏红 张敏丽 +4 位作者 张政 朱水荣 杨宁敏 姚军 王升启 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2005年第6期403-405,共3页
目的建立一种快速、准确、特异的肠出血性大肠杆菌O157:H7的定量检测方法。方法以rfbE基因作为待检靶基因,根据复合探针荧光定量分析原理设计检测引物和探针,建立检测大肠杆菌O157:H7的实时荧光定量PCR方法。并对本方法检测的特异性、... 目的建立一种快速、准确、特异的肠出血性大肠杆菌O157:H7的定量检测方法。方法以rfbE基因作为待检靶基因,根据复合探针荧光定量分析原理设计检测引物和探针,建立检测大肠杆菌O157:H7的实时荧光定量PCR方法。并对本方法检测的特异性、灵敏度、重复性等进行评价。结果所有O157:H7的检测结果均为阳性,而所有其它菌株检测结果均为阴性;该方法检测的灵敏度可达10 cfu.mL-1,定量检测的批间和批内差异均小于5%。在模拟污染牛奶中,可检出1×101cfu.μL-1的细菌。结论本文建立的复合探针实时荧光定量PCR技术能快速准确、特异、敏感地对大肠杆菌O157:H7进行定量分析,为大肠杆菌O157:H7的检测提供了新的方法。 展开更多
关键词 大肠杆菌o157:h7 实时荧光PCR 复合探针法
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大肠埃希菌O157:H7致病因素的研究进展 被引量:4
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作者 蒋小平 邓思敏 +6 位作者 钟巍 李豫皖 胡孝洪 罗海莲 肖海英 扈凤平 高劲松 《安徽农业科学》 CAS 2012年第11期6531-6533,6536,共4页
大肠埃希菌O157:H7可使人发生腹泻、出血性结肠炎,引发溶血性尿毒综合征及血栓形成性血小板减少性紫癜等严重并发症。通过对其主要致病因素包括毒力岛、粘附因子、志贺毒素Stx等研究进展进行综述,探讨大肠埃希菌O157:H7的致病机制。
关键词 大肠埃希菌o157:h7 致病因素 致病机制 研究进展
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杀灭鲜切洋葱上食源性致病菌消毒剂的筛选及杀菌条件的优化 被引量:3
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作者 牛玉洁 王庆国 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期327-331,共5页
研究了几种消毒剂对鲜切洋葱表面食源性致病菌的杀灭效果,为提高洋葱等鲜切蔬菜的食用安全提供依据。用清水、次氯酸钠(200mg/L)、二氧化氯(10mg/L)、过氧化氢(20.0g/L)、酸化亚氯酸钠(1.0g/L)、过氧乙酸(80mg/L)、柠檬酸(10.0g/L)、乳... 研究了几种消毒剂对鲜切洋葱表面食源性致病菌的杀灭效果,为提高洋葱等鲜切蔬菜的食用安全提供依据。用清水、次氯酸钠(200mg/L)、二氧化氯(10mg/L)、过氧化氢(20.0g/L)、酸化亚氯酸钠(1.0g/L)、过氧乙酸(80mg/L)、柠檬酸(10.0g/L)、乳酸(10.0g/L)以及乳酸(10.0g/L)结合55℃处理染菌的鲜切洋葱3min,以酸化亚氯酸钠效果最好,可分别减少3.19log CFU/g大肠杆菌O157∶H7,3.11log CFU/g单增李斯特菌和2.60logCFU/g鼠伤寒沙门氏菌。以李斯特菌为研究对象应用响应面优化酸化亚氯酸钠杀菌参数,优化结果为1.0g/L,处理2min。对酸化亚氯酸钠产生的药伤进行评价,发现处理后再经清水漂洗可避免药伤,保持理想的感官品质。 展开更多
关键词 消毒剂 鲜切洋葱 大肠杆菌o157h7 单增李斯特菌 鼠伤寒沙门氏菌
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凉拌菜中检出2株非脱羧勒克菌的鉴定与分析
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作者 李晓路 张巍 +5 位作者 廖文 遇婷 祝琳 韩丽娟 张晓倩 程刚萍 《预防医学论坛》 2019年第10期785-787,790,共4页
目的通过对凉拌菜样品进行大肠埃希氏菌O157:H7的检测,了解该菌对凉拌菜类食品的污染状况。方法于2017年10月依照GB 4789.36-2016对采集的样品进行大肠埃希氏菌O157:H7的分离与鉴定。结果从凉拌菜中检出2株与大肠埃希氏菌O157:H7高度相... 目的通过对凉拌菜样品进行大肠埃希氏菌O157:H7的检测,了解该菌对凉拌菜类食品的污染状况。方法于2017年10月依照GB 4789.36-2016对采集的样品进行大肠埃希氏菌O157:H7的分离与鉴定。结果从凉拌菜中检出2株与大肠埃希氏菌O157:H7高度相似的细菌,结果鉴定为非脱羧勒克菌,属于阿氏肠杆菌。结论从凉拌菜中检出2株基因型不相同的非脱羧勒克菌。 展开更多
关键词 非脱羧勒克菌 大肠埃希氏菌o157:h7 凉拌菜
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E.ColiO_(157):H_7的“VT”测定及致病性实验感染的研究
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作者 权太淑 李虎 郭兆林 《中国卫生检验杂志》 CAS 1993年第4期198-200,207,共4页
采用改良无铁酪蛋白水解物——酵母浸膏液作为产毒培养基,以多粘菌素 B(0.1mg/ml)处理菌体,再提取细菌滤液进行 vero 细胞毒素的测定;结果13株 E.ColiO_(157):H_7均能产生使 vero 细胞溶解、变性和死亡的 vero—toxin(VT)。运用实验小鼠... 采用改良无铁酪蛋白水解物——酵母浸膏液作为产毒培养基,以多粘菌素 B(0.1mg/ml)处理菌体,再提取细菌滤液进行 vero 细胞毒素的测定;结果13株 E.ColiO_(157):H_7均能产生使 vero 细胞溶解、变性和死亡的 vero—toxin(VT)。运用实验小鼠,于腹部皮下注射1.2×10~8CFU/ml 活菌(0.3ml/只),于4~6h,小鼠即开始发病,其出现的症状及发病后各脏器的组织学改变,酷似人体发病后的表现,基本再现了出血性结肠炎和溶血性尿毒症综合征的疾病特征。 展开更多
关键词 o157:h7大肠杆菌 VeRo 细胞毒素实验感染 组织学检查
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