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大肠杆菌中dctA基因敲除及其苹果酸摄取功能鉴定 被引量:4
1
作者 姜巨全 张正来 +1 位作者 徐桐 孟琳 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期45-52,共8页
大肠杆菌(Escherichia coli)K12基因组中,仅dctA基因编码1个在有氧条件下负责摄取四碳-二羧酸的转运蛋白。为鉴定Dct A能否摄取四碳-2-羟基羧酸(如苹果酸),首先以p KD3为模版PCR扩增含有氯霉素抗性dctA基因同源臂,电转入E.coli K12/p K... 大肠杆菌(Escherichia coli)K12基因组中,仅dctA基因编码1个在有氧条件下负责摄取四碳-二羧酸的转运蛋白。为鉴定Dct A能否摄取四碳-2-羟基羧酸(如苹果酸),首先以p KD3为模版PCR扩增含有氯霉素抗性dctA基因同源臂,电转入E.coli K12/p KD46感受态细胞,筛选具有氯霉素抗性的基因敲除突变株E.coliΔdctA/p KD46。通过消除质粒p KD46构建大肠杆菌dctA基因敲除突变株E.coliΔdctA。构建dctA基因表达载体p Easy T3-dctA。通过苹果酸摄取功能互补试验,证实基因敲除菌株E.coliΔdctA丧失摄取苹果酸功能,四碳-二羧酸摄取蛋白Dct A具有摄取苹果酸功能。研究首次报道Dct A具有摄取苹果酸功能,该基因敲除突变株的构建可为其他菌株来源2-HCT转运蛋白的基因克隆与功能分析奠定基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌K12 dcta λRed重组 基因敲除 四碳-2-羟基羧酸
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导入detABD和nifA基因对苜蓿中华根瘤菌共生固氮效率的影响 被引量:6
2
作者 宫世勇 孙淑荣 周俊初 《湖北农业科学》 北大核心 2006年第5期538-541,共4页
将克隆有四碳二羧酸转移酶基因dctABD、nifA基因和发光酶基因luxAB的重组质粒pHN307经三亲本杂交分别导入苜蓿根瘤菌HNM1、HNM2、HNM4和1021中得到HNM1(pHN307)等4个转移接合子,进一步比较研究了pHN307在自生培养条件下传代的稳定性,并... 将克隆有四碳二羧酸转移酶基因dctABD、nifA基因和发光酶基因luxAB的重组质粒pHN307经三亲本杂交分别导入苜蓿根瘤菌HNM1、HNM2、HNM4和1021中得到HNM1(pHN307)等4个转移接合子,进一步比较研究了pHN307在自生培养条件下传代的稳定性,并采用本室改进的双层钵无菌砂培盆栽法,分别将4个转移接合子和出发菌接种到苜蓿品种草原1号,公农1号和图牧2号。结果表明,只有用转移接合子HNM4(pHN307)和1021(pHN307)接种到草原1号和图牧2号的植株鲜重和干重明显优于出发菌。 展开更多
关键词 dcta BD NIFA luxAB 苜蓿中华根瘤菌 共生固氮效率
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Ba-DCTA修饰的基于Keggin型多酸基晶体材料的合成与表征 被引量:2
3
作者 张春华 陈亚光 《东北师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期82-84,共3页
以Keggin型硅钨酸为主要基本建筑单元,以Ba^(2+)为金属离子、1,2-二胺基环己烷四乙酸(DCTA)为配体,合成了具有新颖结构的无机-有机杂化化合物(NH_4)_6[Ba(H_2O)_2(H_2DCTA)_2(SiW_(12)O_(40))]·5H_2O.采用单晶X射线衍射、红外光谱... 以Keggin型硅钨酸为主要基本建筑单元,以Ba^(2+)为金属离子、1,2-二胺基环己烷四乙酸(DCTA)为配体,合成了具有新颖结构的无机-有机杂化化合物(NH_4)_6[Ba(H_2O)_2(H_2DCTA)_2(SiW_(12)O_(40))]·5H_2O.采用单晶X射线衍射、红外光谱对其进行了表征.结果表明:标题化合物属于三斜晶系,P-1空间群;晶胞参数a=1.538 90(16)nm,b=1.563 40(15)nm,c=1.717 60(17)nm,α=81.878 0(10)°,β=79.049 0(10)°,γ=89.832(2)°,V=4.015 2(7)nm^3,R_1=0.069 7,wR^2=0.146 5[I>2σ(I)],S=1.137.该化合物中存在沿晶胞主对角线方向的一维链状结构. 展开更多
关键词 dcta KEGGIN 无机-有机杂化化合物
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Application of monodispersive anion exchangers in sorption and separation of Y^3+ from Nd^3+ and Sm^3+ complexes with dcta 被引量:1
4
作者 Halina Hubicka Dorota Kolodynska 《Journal of Rare Earths》 SCIE EI CAS CSCD 2008年第5期619-625,共7页
Rare earth complexes with trans-1,2-diaminocyclohexane-N,N,N ,N -tetraacetic acid (DCTA) of the Ln(dcta) type exhibited an unusual sequence of affinity on the polystyrene anion exchangers: pm^3+〉Nd^3+〉Sm^3+... Rare earth complexes with trans-1,2-diaminocyclohexane-N,N,N ,N -tetraacetic acid (DCTA) of the Ln(dcta) type exhibited an unusual sequence of affinity on the polystyrene anion exchangers: pm^3+〉Nd^3+〉Sm^3+〉Pr^3+〉Ce^3+〉Eu^3+〉Gd^3+〉La^3+〉Sc^3+〉Tb^3+〉Dy^3+〉 Ho^3+〉Y^3+〉Er^3+〉Tm^3+〉Yb3+〉Lu^3+[1]. Taking into account the position of Y^3+, Sm^3+, and Nd^3+ in this affinity series, for the monodispersive polystyrene anion exchangers, Lewatit MonoPlus M 500, Lewatit MonoPlus M 600, Lewatit MonoPlus MP 500, Lewatit MonoPlus MP 64, and for the heterodispersive anion exchanger, Lewatit MP 62, the weight (Dg) and bed (Dv) distribution coefficients of these complexes and working ion exchange capacities (Cw) were determined. Based on these values, purifications of Y^3+ from Nd^3+ and Y^3+ from Sm^3+ in the macro-micro component system on these anion exchangers were studied. The application potential of this method was highlighted for the separation of Y^3+ in the presence of Nd^3+ and Sm^3+. With 1 L of monodispersive and strongly basic polystyrene gel anion exchanger Lewatit MonoPlus M 500 in the acetate form, it is possible to obtain approximately 79 g Y2O3 purified from Nd2O3 and 70 g Y2O3 purified from Sm2O3 in the same process condition. 展开更多
关键词 dcta rare earth complexes anion exchange
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温度诱导Targetron系统用于大肠杆菌高效基因失活 被引量:2
5
作者 赵行行 程玉梅 +6 位作者 吴昌学 任玮 饶凤琴 周倩 崔古贞 齐晓岚 洪伟 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1659-1671,共13页
构建基于Te I3c/4c嗜热二型内含子的温度诱导Targetron基因失活系统(Thermotargetron),并应用于中温微生物基因编辑。在大肠杆菌HMS174(DE3)基因组中,选择Subunitofflagellum基因(fliC)和C4dicarboxylate orotate:H+symporter基因(dctA... 构建基于Te I3c/4c嗜热二型内含子的温度诱导Targetron基因失活系统(Thermotargetron),并应用于中温微生物基因编辑。在大肠杆菌HMS174(DE3)基因组中,选择Subunitofflagellum基因(fliC)和C4dicarboxylate orotate:H+symporter基因(dctA)为靶基因。根据Te I3c/4c DNA识别规则,在fliC和dctA基因中选择fliC489a、fliC828s、fliC1038s和dctA2a位点为基因打靶位点。使用重叠延伸PCR方法,基于pHK-TT1A质粒构建打靶载体。打靶载体转化HMS174菌株,对数期转化子培养液48℃热激1h后涂布于氯霉素抗性LB平板上。使用菌落PCR和DNA测序检测突变株并计算基因失活效率。获得突变株后,通过琼脂穿刺和碳源代谢实验,鉴定ΔfliC、ΔdctA突变株表型变化。菌落PCR测序结果表明,Te I3c/4c插入到fliC和dctA基因设计位点,且打靶效率高达100%。突变株表型验证实验表明,ΔfliC突变株运动能力显著下降,ΔdctA突变株苹果酸代谢能力缺失。综上所述,文中建立了一套适用于嗜中温微生物的温度诱导型、高效基因失活系统,该系统可通过控制宿主菌在48℃保温时间实现高效、靶向、精准基因失活。 展开更多
关键词 嗜热targetron Ⅱ型内含子 温度诱导 基因失活 大肠杆菌 FLIC dcta
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钒(V)-溴邻苯三酚红-溴化十六烷基吡啶-环己二胺四乙酸新显色体系的研究 被引量:1
6
作者 蔡耀中 钟力军 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 1990年第6期332-334,共3页
研究了 V(Ⅴ)-BPR-DCTA-CPB 新显色体系。在 pH8.0~9.0的 NH_3·H_2O~NH_4Cl 缓冲体系中,有 DCTA 存在下,V(Ⅴ)形成一种多元络合物,其最大吸收波长位于640nm 处,相应的摩尔吸光系数为1.0×10~5l·mol^(-1)·cm^(-1)... 研究了 V(Ⅴ)-BPR-DCTA-CPB 新显色体系。在 pH8.0~9.0的 NH_3·H_2O~NH_4Cl 缓冲体系中,有 DCTA 存在下,V(Ⅴ)形成一种多元络合物,其最大吸收波长位于640nm 处,相应的摩尔吸光系数为1.0×10~5l·mol^(-1)·cm^(-1)。钒量在0~12μg V(Ⅴ)/25ml 范围内服从比尔定律。方法简单、快速,灵敏。用于地质试样中微量钒的测定结果满意。 展开更多
关键词 BPR dcta CPB 银钒矿
全文增补中
钛白粉及金红石中TiO_2的置换配位滴定
7
作者 彭大龙 徐宏亚 《云南化工》 CAS 1995年第3期32-33,共2页
本文提出了测定钛白粉和金红石中二氧化钛的简易置换配位滴定法。向含有钛离子和其它阳离子的溶液中加入过量的环己烷二胺四乙酸(DCTA),以二甲酚橙(XO)为指示剂,用乙酸锌标准溶液返滴定过量的DCTA。然后以氟化物分解T... 本文提出了测定钛白粉和金红石中二氧化钛的简易置换配位滴定法。向含有钛离子和其它阳离子的溶液中加入过量的环己烷二胺四乙酸(DCTA),以二甲酚橙(XO)为指示剂,用乙酸锌标准溶液返滴定过量的DCTA。然后以氟化物分解Ti(IV)-DCTA配合物,释放出的DCTA,用乙酸锌标准溶液滴定。本法终点变化敏锐,具有很好的精密度和准确度。 展开更多
关键词 置换配位滴定 二氧化钛 钛白 金红石 滴定法
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用阴离子交换树脂分离DCTA的稀土元素配合物
8
作者 陈隆玉 《铀矿冶》 CAS 2004年第3期167-168,共2页
关键词 阴离子 离子交换 dcta 稀土元素
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3D CTA与3D DSA在颅内动脉瘤诊断中的对比观察 被引量:7
9
作者 苏安华 李淼 《中国实验诊断学》 2012年第12期2295-2296,共2页
数字减影全脑血管造影术(Digital Subtraction Angiography,DSA),一直被认为是临床诊断颅内动脉瘤的金标准。近年来,DSA检查已从二维DSA发展为三维DSA(3DDSA)[1],同时,作为无创检查的三维CT血管造影(3DCTA)也越来越多的应用于颅... 数字减影全脑血管造影术(Digital Subtraction Angiography,DSA),一直被认为是临床诊断颅内动脉瘤的金标准。近年来,DSA检查已从二维DSA发展为三维DSA(3DDSA)[1],同时,作为无创检查的三维CT血管造影(3DCTA)也越来越多的应用于颅内动脉瘤的早期诊断[2]。本文对28例疑为颅内动脉瘤的患者应用3DCTA和3DDSA检查,探讨这两种检查方法在颅内动脉瘤诊断中的应用价值。 展开更多
关键词 颅内动脉瘤 DSA检查 3dcta 临床诊断 数字减影全脑血管造影术 三维CT血管造影 早期诊断 无创检查
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MRI联合3DCTA诊断鞍上脑膜瘤合并颅内多发动脉瘤1例 被引量:3
10
作者 张永豪 杜思凝 +2 位作者 高佳堆 李苏宇 杜超 《中国实验诊断学》 2021年第4期597-598,共2页
脑膜瘤和颅内动脉瘤均是神经外科较为常见的疾病,但两者同时出现则十分罕见[1-2]。脑膜瘤合并颅内动脉瘤约占脑膜瘤病例的0.3%~7.7%[1]。脑膜瘤合并颅内动脉瘤往往为偶然发现,在术前做出明确诊断是具有挑战性的[1-4]。本研究应用MRI联合... 脑膜瘤和颅内动脉瘤均是神经外科较为常见的疾病,但两者同时出现则十分罕见[1-2]。脑膜瘤合并颅内动脉瘤约占脑膜瘤病例的0.3%~7.7%[1]。脑膜瘤合并颅内动脉瘤往往为偶然发现,在术前做出明确诊断是具有挑战性的[1-4]。本研究应用MRI联合3D CTA诊断鞍上脑膜瘤合并颅内多发动脉瘤1例,报道如下。 展开更多
关键词 颅内动脉瘤 颅内多发动脉瘤 鞍上脑膜瘤 3dcta 神经外科 明确诊断 MRI 偶然发现
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1,2—环己二胺四乙酸的合成及其性能研究
11
作者 徐颖 曹军 金俏 《石油化工高等学校学报》 EI CAS 2001年第3期36-39,共4页
介绍了以 1 ,2 -环己二胺为原料制备 1 ,2 -环己二胺四乙酸的合成方法 ,通过正交设计实验考查了DCTA合成中原料摩尔比、反应时间、反应温度等因素对合成反应的影响 ,并获得了最优化的反应条件 :n( 1 ,2 -环己二胺 ) /n(氯乙酸 ) =1∶6;... 介绍了以 1 ,2 -环己二胺为原料制备 1 ,2 -环己二胺四乙酸的合成方法 ,通过正交设计实验考查了DCTA合成中原料摩尔比、反应时间、反应温度等因素对合成反应的影响 ,并获得了最优化的反应条件 :n( 1 ,2 -环己二胺 ) /n(氯乙酸 ) =1∶6;反应温度为 5 0℃ ;反应时间为 7h。该工艺具有成本低、反应条件温和等特点 ,也为 1 ,2 -环己二胺的深加工提供了新的方法。同时将该法生产的DCTA与进口同类产品进行了比较 ,产品质量指标达到或超过进口试剂的质量标准。又通过应用试验对DCTA与EDTA的化学性质进行了对比 ,结果表明 ,采用此工艺生产的DCTA产品质量可靠、稳定性好、性能优越 。 展开更多
关键词 环己二胺 环己二胺四乙酸 合成 性能
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导入额外拷贝dctA基因的根瘤菌工程菌株的构建
12
作者 蒙明明 于冰 +1 位作者 李珊珊 李海英 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2012年第3期391-394,400,共5页
为进一步提高大豆根瘤菌的固氮能力,以费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)15067基因组的DNA作为模板,采用PCR扩增技术,克隆四碳二羧酸转移酶结构基因dctA的全长序列;将其连入lac启动子下游,构建带有LuxAB基因标记的pTR-Plac-dctA重... 为进一步提高大豆根瘤菌的固氮能力,以费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)15067基因组的DNA作为模板,采用PCR扩增技术,克隆四碳二羧酸转移酶结构基因dctA的全长序列;将其连入lac启动子下游,构建带有LuxAB基因标记的pTR-Plac-dctA重组表达载体。利用三亲本杂交技术将表达载体转入费氏中华根瘤菌中,构建大豆根瘤菌工程菌株。研究表明,转基因工程菌株侵染大豆幼苗后与出发菌相比,固氮酶活性有了显著提高,为提高大豆产量的研究提供一定参考。 展开更多
关键词 如以基因 转基因工程菌株 三亲本接合转移
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DCTA络合滴定法测定镍钛记忆合金中镍 被引量:4
13
作者 金伟 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 1989年第5期61-61,共1页
镍钛合金中镍的络合滴定测定方法,通常是用酒石酸掩蔽钛。过量的EDTA络合镍,在pH12-13的碱性介质中,以钙黄绿素为指示剂,用钙返滴定。但该法终点的敏锐、清晰性差。本文用氟化铵掩蔽钛、过量的DCTA络合镍,在pH5。7的六次甲基四胺存在下,... 镍钛合金中镍的络合滴定测定方法,通常是用酒石酸掩蔽钛。过量的EDTA络合镍,在pH12-13的碱性介质中,以钙黄绿素为指示剂,用钙返滴定。但该法终点的敏锐、清晰性差。本文用氟化铵掩蔽钛、过量的DCTA络合镍,在pH5。7的六次甲基四胺存在下,以5-Br-PADAP为指示剂,用铜返滴定。方法操作简便、终点敏锐。主要试剂环己二胺四乙酸标准溶液(0.02mol/L);铜标准溶液(0.02mol/L):准确称取 1。 展开更多
关键词 镍钛合金 络合滴定法 dcta 测定
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3DCT血管造影对脑动脉瘤术前评估的价值 被引量:3
14
作者 李延亮 孙文阁 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期283-283,共1页
对 5 5例因蛛网膜下腔出血临床疑为脑动脉瘤破裂的患者分别行DSA和 3DCTA检查 ,结果表明两者对动脉瘤颈的显示有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,3DCTA对瘤颈显示明显优于DSA ,能提供更多信息。
关键词 3dcta DSA 脑动脉瘤
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