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牦牛CYGB基因CDS区克隆与生物信息学分析 被引量:27
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作者 孙雪婧 杜晓华 +2 位作者 杨孝朴 罗玉柱 刘霞 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第13期2690-2698,共9页
【目的】丰富牦牛CYGB基因研究的基础数据,对牦牛CYGB基因的CDS区进行克隆和生物信息学分析。【方法】提取牦牛大脑海马区组织的总RNA并运用RT-PCR技术反转录为cDNA,并根据GenBank中普通牛CYGB基因cDNA序列(GenBank登录号:DV874786.1),... 【目的】丰富牦牛CYGB基因研究的基础数据,对牦牛CYGB基因的CDS区进行克隆和生物信息学分析。【方法】提取牦牛大脑海马区组织的总RNA并运用RT-PCR技术反转录为cDNA,并根据GenBank中普通牛CYGB基因cDNA序列(GenBank登录号:DV874786.1),使用Primer3.0在线软件设计特异性引物,运用PCR扩增技术、TA克隆技术和核酸测序技术获得CYGB基因的完整CDS区序列及部分5′端和3′端UTR区,并使用ProtParam、PredictProtein、SWISS-MODEL等在线分析软件与Lasergene7.1软件包分析CYGB的一级结构、二级结构、三级结构与理化性质,并进行同源性分析及构建系统进化树;利用PyMol软件修饰并输出三维结构;使用在线亚细胞定位工具PSORT II Prediction预测蛋白质的亚细胞定位;使用Protfun软件对蛋白质的功能进行预测分析。【结果】克隆获得牦牛CYGB基因650 bp,包括CDS区573 bp(GenBank登录号:KF669898),碱基组成为A 20.59%、T 16.40%、G 33.33%、C 29.67%,编码190个氨基酸残基组成的蛋白质。与普通牛比对,牦牛CYGB基因在CDS区存在4个碱基突变,同源性为99.3%,这个突变未导致氨基酸序列的改变,4个突变均属同义突变。牦牛CYGB基因编码蛋白的分子式为C964H1513N263O278S7,分子量约为21.5 kD,理论等电点(pI)为6.32,消光系数为24075,不稳定系数为48.43,疏水指数为83.63,平均亲水性为-0.301,属不稳定可溶性酸性蛋白质,在哺乳动物网织红细胞内的半衰期为30 h。二级结构以α-螺旋和无规卷曲为主,其中α-螺旋占64.21%,无规卷曲占35.79%,属全α类蛋白质。三级结构是一个呈"three-over-three"三明治夹心型的α-螺旋折叠结构。亚细胞定位CYGB分布在细胞质(65.2%)、细胞核(17.4%)、线粒体(13.0%)、分泌系统的囊泡(4.3%)中,主要在细胞质,推测可能在能量代谢和辅因子的生物合成过程中发挥信号转导和转录因子调控的作用。牦牛CYGB氨基酸序列与普通牛、绵羊、家犬、小� 展开更多
关键词 牦牛 胞红蛋白 基因克隆 生物信息学
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珠蛋白研究进展及其在法医学中的应用 被引量:6
2
作者 秦豪杰 武娜 +1 位作者 张录顺 官鹏 《中国法医学杂志》 CSCD 2008年第4期250-252,共3页
珠蛋白是一类能够通过铁卟啉环可逆性结合氧的呼吸性蛋白质,目前在脊椎动物体内已有4种类型的珠蛋白被鉴定和正式命名:血红蛋白(haemoglobin,Hb),肌红蛋白(myoglobin,Mb),脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)和细胞珠蛋白(cytoglobin,Cygb),它们... 珠蛋白是一类能够通过铁卟啉环可逆性结合氧的呼吸性蛋白质,目前在脊椎动物体内已有4种类型的珠蛋白被鉴定和正式命名:血红蛋白(haemoglobin,Hb),肌红蛋白(myoglobin,Mb),脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)和细胞珠蛋白(cytoglobin,Cygb),它们共同组成珠蛋白超家族(globin superfamily)。本文就珠蛋白的组织分布、结构特征、生物学功能及其在法医学中的应用等作一综述。 展开更多
关键词 法医病理学 珠蛋白 脑红蛋白 细胞珠蛋白
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重组胞红蛋白调控肝星状细胞LX2铁死亡作用的研究
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作者 段训威 肖桂清 +4 位作者 陈怀宇 张勇 吴文林 高壹 刁勇 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期2237-2244,共8页
胞红蛋白(cytoglobin, Cygb)过表达已被证实能减少细胞外基质沉积促进肝纤维化恢复,但其机制尚未明确。本研究构建表达细胞穿膜肽TAT与Cygb的融合蛋白(TAT-Cygb),探究其调控活化型肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)铁死亡作用... 胞红蛋白(cytoglobin, Cygb)过表达已被证实能减少细胞外基质沉积促进肝纤维化恢复,但其机制尚未明确。本研究构建表达细胞穿膜肽TAT与Cygb的融合蛋白(TAT-Cygb),探究其调控活化型肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)铁死亡作用。体外培养肝星状细胞系LX2,分别给予不同浓度的TAT-Cygb及铁死亡诱导剂(erastin)处理,台盼蓝染色、透射电镜、普鲁士蓝染色、试剂盒检测等考察TAT-Cygb对铁死亡表型包括细胞活力、细胞形态特征、铁离子含量、脂质过氧化产物水平及抗氧化系统指标的影响;同时采用铁死亡抑制剂(ferrostain-1, Fer-1)进行反向验证,给予TAT-Cygb和Fer-1共同处理,试剂盒法测定Fe^(2+)、活性氧自由基(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADPH)和还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)的水平,蛋白印迹法检测HSCs活化指标α平滑肌肌动蛋白(alpha smooth actin, α-SMA)、I型胶原蛋白(collagen I)、纤连蛋白(fibronectin)的表达水平,免疫荧光观察促纤维化关键指标表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)、肌间线蛋白(desmin)的表达情况。结果显示, TAT-Cygb能显著降低LX2细胞活力,并触发了细胞铁死亡相关事件,包括促进胞内Fe^(2+)堆积并诱导线粒体形态改变,加剧脂质过氧化产物堆积,降低抗氧化指标水平,与erastin发挥相似的作用;而Fer-1显著削弱了TAT-Cygb诱导的Fe^(2+)、ROS、MDA、4-HNE水平的升高以及NADPH和GSH水平的降低,同时还减轻了TAT-Cygb诱导高表达的α-SMA、collagen I和fibronectin水平,下调了TAT-Cygb对EGFR、desmin的表达抑制作用。这一细胞水平研究表明, TAT-Cygb能诱发活化型HSCs铁死亡事件。本研究揭示了TAT-Cygb抗肝纤维化潜在的作用机制,为深入研究TAT-Cygb通过调控铁死亡途径发挥其生� 展开更多
关键词 胞红蛋白 细胞穿膜肽 铁死亡 肝纤维化 肝星状细胞
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猪METTL3基因生物信息学分析及靶基因预测
4
作者 秦睿 王文强 +5 位作者 韦梦姜 杨耀 焦润 王心如 杨伟炳 张娟丽 《生物技术》 CAS 2024年第4期431-438,共8页
[目的]获得猪METTL3蛋白理化性质、二、三级结构、蛋白保守性、甲基化位点及靶基因等信息,为进一步了解猪METTL3基因的功能提供了理论依据。[方法]利用生物信息学软件对猪METTL3蛋白质的理化性质、二、三级结构及保守结构域、甲基化位... [目的]获得猪METTL3蛋白理化性质、二、三级结构、蛋白保守性、甲基化位点及靶基因等信息,为进一步了解猪METTL3基因的功能提供了理论依据。[方法]利用生物信息学软件对猪METTL3蛋白质的理化性质、二、三级结构及保守结构域、甲基化位点、蛋白互作和靶基因等进行预测分析。[结果]猪METTL3为亲水性不稳定蛋白,主要由无规卷曲和α-螺旋、β-转角构成,主要存在于细胞核中,与METTL14、WTAP和POLR2B等蛋白具有互作关系。METTL3有4个高可信度m^(6)A位点,经M6A2 Target软件预测该基因与CASP1、PYCR1、RANBP2、LIRB4、APOBEC3A、ADAM19等134个基因存在靶向关系。[结论]猪METTL3是一种主要存在于细胞核中的亲水性不稳定蛋白,主要通过m^(6)A甲基化修饰作用于靶基因而发挥作用。 展开更多
关键词 METTL3基因 蛋白理化性质 保守性 亚细胞定位 甲基化位点 MOTIF 靶基因预测
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哺乳动物细胞表达人细胞珠蛋白
5
作者 李来庆 梁焕坤 +3 位作者 陈翠翠 钟树海 陆嫣红 董文其 《生物技术》 CAS 2024年第4期403-406,438,共5页
[目的]构建带His标签的人细胞珠蛋白(cytoglobin,CYGB)哺乳细胞表达载体,转染CHO细胞和HEK293细胞表达CYGB。[方法]采用全基因合成并通过双酶切法将CYGB基因插入到表达载体pcDNA3.4中,经双酶切和测序验证后转染大肠埃希菌DH5α菌株,提... [目的]构建带His标签的人细胞珠蛋白(cytoglobin,CYGB)哺乳细胞表达载体,转染CHO细胞和HEK293细胞表达CYGB。[方法]采用全基因合成并通过双酶切法将CYGB基因插入到表达载体pcDNA3.4中,经双酶切和测序验证后转染大肠埃希菌DH5α菌株,提取转染级质粒并转染哺乳动物细胞CHO和HEK293,进行瞬时表达,镍柱亲和层析纯化CYGB蛋白。纯化的CYGB蛋白采用Western Blotting法和ELISA法检测蛋白活性。[结果]双酶切和琼脂糖凝胶分析结果表明,pcDNA3.4-His-CYGB真核表达质粒构建成功。CHO细胞瞬时转染pcDNA3.4-His-CYGB真核表达质粒后CYGB表达量较低,HEK293细胞表达量较高,最终采用HEK293细胞进行CYGB表达。SDS-PAGE法检测结果表明CYGB蛋白的分子量约为22 kDa,分子量符合预期。镍柱亲和层析纯化的CYGB的Western Blotting和ELISA检测结果表明HEK293细胞表达的CYGB与抗CYGB单克隆抗体具有生物学结合活性。[结论]HEK293细胞比CHO细胞更适合用于CYGB的哺乳动物细胞表达,其表达的CYGB具有Western Blotting和ELISA生物学活性。 展开更多
关键词 细胞珠蛋白 哺乳动物细胞表达 CHO细胞 HEK293细胞 His标签 质粒 pcDNA3.4载体 瞬时转染 蛋白活性
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Overexpression of cytoglobin gene inhibits hypoxic injury to SH-SY5Y neuroblastoma cells 被引量:3
6
作者 Xiuling Yu Dianwen Gao 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第23期2198-2203,共6页
A plasmid for cytoglobin expression, pAcGFP1-Cl-cytoglobin, was transfected into SH-SY5Y cells. Cobalt chloride was used to establish a model of hypoxia. Western blotting indicated that cytoglobin was overexpressed an... A plasmid for cytoglobin expression, pAcGFP1-Cl-cytoglobin, was transfected into SH-SY5Y cells. Cobalt chloride was used to establish a model of hypoxia. Western blotting indicated that cytoglobin was overexpressed and there was low expression of hypoxia-inducible factor-la in SH-SY5Y cells after transfection. Following cobalt chloride-induced hypoxia, cytoglobin and hypoxia-inducible fac- tor-la expression gradually increased in SH-SY5Y cells. Flow cytometry showed that with increas- ing duration of hypoxia, the proportion of normal cells significantly diminished in the transfected and non-transfected groups. The proportion of cells in the early stages of apoptosis increased. However, the proportion of apoptotic cells was significantly lower in the transfected group compared with the non-transfected group. These results demonstrate that cytoglobin and hypoxia-inducible factor-la are strongly up-regulated by hypoxia, and that there is a strong relationship between hy- poxia-inducible factor-la and cytoglobin during hypoxic injury. 展开更多
关键词 neural regeneration cytoglobin hypoxia green fluorescent protein TRANSFECTION SH-SY5Y cells cobalt chloride recombinant plasmid NEUROPROTECTION NEUROREGENERATION
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圆二色光谱法研究环境因素对细胞红蛋白二级结构的影响 被引量:4
7
作者 田素燕 李连之 +3 位作者 高磊 穆建帅 刘晓燕 谭相石 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1097-1101,共5页
采用远紫外圆二色光谱法系统地研究了细胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)的浓度、环境温度、溶液的pH值和溶剂性质对细胞红蛋白二级结构的影响。结果表明:当Cygb浓度<1μmol/L时,它主要以α-螺旋形式存在,其α-螺旋含量>60%;当Cygb浓度... 采用远紫外圆二色光谱法系统地研究了细胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)的浓度、环境温度、溶液的pH值和溶剂性质对细胞红蛋白二级结构的影响。结果表明:当Cygb浓度<1μmol/L时,它主要以α-螺旋形式存在,其α-螺旋含量>60%;当Cygb浓度从0.3μmol/L增大到2.0μmol/L时,其α-螺旋含量迅速降低;当Cygb浓度>2.0μmol/L时,其α-螺旋含量随浓度的增大变化很小(约30%)。随着温度的升高,Cygb的α-螺旋含量逐渐减小,但既使温度达到368K,它仍保持有20%的α-螺旋结构,说明该蛋白具有较高的热稳定性。在弱酸性和弱碱性溶液中,Cygb的二级结构都会有不同程度的破坏。在甲醇和乙醇中,Cygb的α-螺旋含量明显增加,这说明醇类可以诱导其α-螺旋的生成。 展开更多
关键词 细胞红蛋白 圆二色光谱 二级结构 Α-螺旋
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细胞红蛋白在新生大鼠脑内的分布和定位 被引量:5
8
作者 杨汉华 史雪川 +1 位作者 马廉 李建宏 《临床和实验医学杂志》 2008年第4期5-7,共3页
目的了解细胞红蛋白(Cygb)在新生大鼠脑内的分布情况。方法用免疫组化二步法观测Cygb在新生大鼠脑内的分布和定位。结果Cygb在新生大鼠脑中有非常广泛的分布,分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑和下丘脑、脑干和小脑。Cygb免疫反应阳性... 目的了解细胞红蛋白(Cygb)在新生大鼠脑内的分布情况。方法用免疫组化二步法观测Cygb在新生大鼠脑内的分布和定位。结果Cygb在新生大鼠脑中有非常广泛的分布,分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑和下丘脑、脑干和小脑。Cygb免疫反应阳性物质定位于神经细胞胞浆或胞核中。结论Cygb在新生大鼠脑内有非常广泛的表达,提示Cygb在新生大鼠脑的功能活动中可能起重要作用。 展开更多
关键词 细胞红蛋白 中枢神经系统 免疫组化 新生大鼠
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保留蒂部筋膜对大鼠肋间后动脉穿支蒂皮瓣成活的影响 被引量:1
9
作者 王雪 董炎菲 +1 位作者 李心怡 李小静 《中华整形外科杂志》 CSCD 2023年第1期81-89,共9页
目的:探讨保留蒂部筋膜对大鼠肋间后动脉穿支蒂皮瓣成活的影响。方法:50只SD大鼠,雌雄不限,采用随机数字表法分为A、B 2组,每组25只。于每只SD大鼠右侧背部设计并切取以肋间后动脉穿支为蒂的皮瓣,大小为10.0 cm×2.5 cm,A组保留穿... 目的:探讨保留蒂部筋膜对大鼠肋间后动脉穿支蒂皮瓣成活的影响。方法:50只SD大鼠,雌雄不限,采用随机数字表法分为A、B 2组,每组25只。于每只SD大鼠右侧背部设计并切取以肋间后动脉穿支为蒂的皮瓣,大小为10.0 cm×2.5 cm,A组保留穿支及其周围2.5 cm×1.0 cm的筋膜组织,B组仅保留穿支,尽可能剔除穿支周围的筋膜组织,最后均将皮瓣原位缝合。观察术后2组皮瓣成活情况,并计算皮瓣成活面积百分比;切取2组皮瓣组织行HE染色,于光镜下观察标本血管生成情况,并应用Image-Pro Plus 6.0软件统计术后第7天HE染色切片中的血管密度,测量并计算血管直径及血管壁厚度;应用免疫组织化学检测2组皮瓣组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和细胞珠蛋白(CYGB)表达的情况;蛋白质印迹法检测2组皮瓣组织中HIF-1α和CYGB的蛋白相对表达量,并比较2组间的差异。计量资料以±s表示,2组间数据比较采用双侧t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:A组皮瓣术后成活良好,B组术后7 d皮瓣远端缺血坏死,A组皮瓣成活面积百分比为96.19%±0.65%,高于B组的88.97%±3.24%,差异有统计学意义(P<0.01)。HE染色结果显示,2组皮瓣组织均可见新生血管,A组新生血管多于B组;A组血管密度、血管直径、血管壁厚度分别为(7.77±0.92)条/mm 2、(65.23±14.62)μm、(10.49±1.99)μm,均高于B组的(5.82±0.85)条/mm 2、(40.61±7.78)μm、(6.27±2.63)μm,差异均有统计学意义(P均<0.05)。免疫组织化学结果显示,术后第1天A组HIF-1α表达高于B组,并逐渐趋于稳定;A组和B组CYGB表达于术后第7天达到高峰。蛋白质印迹结果显示,术后第1、3天A组中HIF-1α表达量高于B组(P均<0.01),于术后第5天达到峰值后逐渐下降,并趋于稳定;术后第5、7、9天B组中HIF-1α表达量高于A组(P<0.01),直至第9天出现缓慢下降的趋势。术后第3、5、9天A组中CYGB表达量均高于B组(P<0.01),A组和B组CYGB表达量均 展开更多
关键词 外科皮瓣 穿支蒂皮瓣 筋膜 低氧诱导因子-1Α 细胞珠蛋白 SD大鼠
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细胞珠蛋白对肝星状细胞氧化损伤的保护作用 被引量:4
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作者 吕颖慧 王启钊 +2 位作者 李招发 刁勇 许瑞安 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1174-1182,共9页
为揭示细胞珠蛋白对肝星状细胞氧化损伤的保护作用及相关机制,通过siRNA干扰内源性细胞珠蛋白基因,利用重组细胞珠蛋白作用于完全活化的人肝星状细胞系LX-2及大鼠原代肝星状细胞,并在LX-2细胞内过表达细胞珠蛋白,考察在过氧化氢及铁过... 为揭示细胞珠蛋白对肝星状细胞氧化损伤的保护作用及相关机制,通过siRNA干扰内源性细胞珠蛋白基因,利用重组细胞珠蛋白作用于完全活化的人肝星状细胞系LX-2及大鼠原代肝星状细胞,并在LX-2细胞内过表达细胞珠蛋白,考察在过氧化氢及铁过载两种不同作用机制的氧化反应模型中细胞的增殖性及细胞内超氧化物水平。结果表明内源性细胞珠蛋白对于两种氧化反应导致的肝星状细胞损伤都具有显著性的保护作用,证明其在活化肝星状细胞内的表达上调是其应对氧化应激的保护性措施;重组细胞珠蛋白不仅能保护完全活化的LX-2细胞免受氧化应激损伤,并且能抑制未完全活化的原代肝星状细胞过度增殖以及保护其被过度损伤;重组细胞珠蛋白对细胞内的活性氧清除效果不理想,可能与其进出细胞缺乏相应的主动运输机制有关。进一步在LX-2细胞内过表达细胞珠蛋白对无论是铁过载或是过氧化氢引起的氧化反应均能发挥较好的保护性作用。本研究为加速肝纤维化药物新靶点开发提供了理论依据。 展开更多
关键词 细胞珠蛋白 肝星状细胞 过氧化氢 铁过载 肝纤维化
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脑红蛋白和细胞红蛋白:携氧蛋白质家族2个新成员 被引量:2
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作者 杨立涛 刘爽 于常海 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期267-271,共5页
脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)和细胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)是新发现的2个携氧蛋白家族的成员.脑红蛋白主要存在于脑中,而细胞红蛋白在全身各个组织都含有,它们和另外2个携氧蛋白———血红蛋白和肌红蛋白的同源性<25%,但它们在种属... 脑红蛋白(neuroglobin,Ngb)和细胞红蛋白(cytoglobin,Cygb)是新发现的2个携氧蛋白家族的成员.脑红蛋白主要存在于脑中,而细胞红蛋白在全身各个组织都含有,它们和另外2个携氧蛋白———血红蛋白和肌红蛋白的同源性<25%,但它们在种属之间的同源性很高(>95%).脊椎动物脑红蛋白基因定位于14q24,细胞红蛋白基因定位于17q25,都含有4个外显子和3个内含子.2种蛋白在生理条件下含有6个配位键,不同于血红蛋白和肌红蛋白的5个配位键结构.这2种新蛋白和氧都具有很高的亲和力,在缺氧条件下其基因及蛋白表达都有明显的提升,对细胞的存活有一定保护作用.对于脑红蛋白和细胞红蛋白的功能研究,有助于更好地了解机体氧代谢和氧利用过程,并为临床在缺氧损伤时的治疗提供新的观点和途径. 展开更多
关键词 脑红蛋白 细胞红蛋白 缺氧
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胞红蛋白的结构功能与药理学活性研究进展 被引量:3
12
作者 贾晓健 张玉彬 吴梧桐 《药物生物技术》 CAS CSCD 2010年第3期268-272,共5页
胞红蛋白是珠蛋白家族的新成员,能够调节O2及NO的代谢、清除胞内活性氧自由基,在组织缺氧或氧化应激发生时能够维持细胞氧化还原平衡,起到良好的细胞保护作用,其在抗纤维化、抗肿瘤及其他疾病治疗方面已经显示出一定成药性。该文综合近... 胞红蛋白是珠蛋白家族的新成员,能够调节O2及NO的代谢、清除胞内活性氧自由基,在组织缺氧或氧化应激发生时能够维持细胞氧化还原平衡,起到良好的细胞保护作用,其在抗纤维化、抗肿瘤及其他疾病治疗方面已经显示出一定成药性。该文综合近年研究成果,总结了胞红蛋白结构、组织分布、表达调节、生理功能及其药理学活性等方面的研究进展。 展开更多
关键词 胞红蛋白 肝星状细胞激活相关蛋白 抗氧化 抗纤维化 抗肿瘤
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胞红蛋白对巨噬细胞氧化损伤的保护作用 被引量:2
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作者 屈顺林 朱宇凝 +5 位作者 潘文军 李维 王宇菲 谢黎明 姜志胜 范文静 《中南医学科学杂志》 CAS 2016年第5期486-489,共4页
目的探讨CYGB在巨噬细胞氧化损伤过程中的表达及作用。方法构建CYGB高表达/低表达巨噬细胞模型,Western blot检测不同浓度H_2O_2刺激RAW264.7 12 h后CYGB的蛋白表达水平;用分光光度计观察RAW264.7在氧化损伤过程中乳酸脱氢酶(LDH)活性... 目的探讨CYGB在巨噬细胞氧化损伤过程中的表达及作用。方法构建CYGB高表达/低表达巨噬细胞模型,Western blot检测不同浓度H_2O_2刺激RAW264.7 12 h后CYGB的蛋白表达水平;用分光光度计观察RAW264.7在氧化损伤过程中乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量的变化情况。结果 0.5 mmol/L H_2O_2处理巨噬细胞12 h后CYGB表达水平明显高于空白对照组(P<0.05);与0.5 mmol/L H_2O_2处理组相比,0.5 mmol/L H_2O_2对CYGB高表达组的CYGB表达升高(P<0.05),而0.5 mmol/L H_2O_2对CYGB低表达组的CYGB表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);0.5 mmol/L H_2O_2+CYGB高表达组中LDH活性和MDA含量下降;0.5 mmol/L H_2O_2+CYGB低表达组中LDH活性和MDA含量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论巨噬细胞氧化损伤时CYGB表达水平增加;CYGB在巨噬细胞氧化损伤过程中具有拮抗作用。 展开更多
关键词 巨噬细胞 氧化应激 胞红蛋白 过氧化氢
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细胞红蛋白基因在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时的表达 被引量:2
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作者 杨汉华 田树凤 +1 位作者 史雪川 肖丹萍 《国际儿科学杂志》 2013年第2期208-210,共3页
目的探讨缺氧缺血性脑损伤时脑中细胞红蛋白基因的表达及变化。方法将出生7d的SD大鼠50只分成5组,其中实验组在手术后制成脑损伤模型,并且在血流阻断4、12、24、48h取脑;对照组为假手术组,术后即取脑。设计细胞红蛋白基因引物,提... 目的探讨缺氧缺血性脑损伤时脑中细胞红蛋白基因的表达及变化。方法将出生7d的SD大鼠50只分成5组,其中实验组在手术后制成脑损伤模型,并且在血流阻断4、12、24、48h取脑;对照组为假手术组,术后即取脑。设计细胞红蛋白基因引物,提取脑组织总RNA,进行PCR。以GraphPadPrism统计软件包的One-way单因素方差分析进行数据统计分析。结果设计的新生大鼠细胞红蛋白cDNA序列引物可靠,扩增产物与设计相符。实验组细胞红蛋白mRNA的表达在缺血4h开始升高,24h达到高峰,48h开始下降,与对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后细胞红蛋白mRNA表达增强,提示细胞红蛋白可能在脑缺氧的适应性调节过程中起重要作用。 展开更多
关键词 细胞红蛋白 新生大鼠 基因表达 缺氧缺血性脑损伤
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光谱法研究人胞红蛋白与铜(Ⅱ)离子的相互作用(英文) 被引量:2
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作者 李景红 边琳 +2 位作者 田素燕 孔金明 李连之 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第1期321-326,共6页
胞红蛋白(Cygb)是近期在脊椎动物中发现的一种球蛋白家族成员,具有典型珠蛋白的"3+3"式的α-螺旋三明治折叠结构。利用紫外可见吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及圆二色(CD)光谱法研究了Cu^(2+)离子与Cygb的相互作用。结果... 胞红蛋白(Cygb)是近期在脊椎动物中发现的一种球蛋白家族成员,具有典型珠蛋白的"3+3"式的α-螺旋三明治折叠结构。利用紫外可见吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱及圆二色(CD)光谱法研究了Cu^(2+)离子与Cygb的相互作用。结果表明,当Cu^(2+)离子加入到Cygb溶液中后,Cygb在280nm处的紫外吸收强度增大,说明Cu^(2+)与Cygb发生了相互作用;Cu^(2+)使Cygb的内源性荧光发生猝灭,其猝灭方式为静态猝灭。同步荧光光谱研究表明,Cu^(2+)可使色氨酸和酪氨酸的微环境发生较小的改变,与酪氨酸相比Cu^(2+)对Cygb的键合部位更接近于色氨酸。圆二色光谱研究表明,Cu^(2+)对Cygb的二级结构未引起明显变化。 展开更多
关键词 胞红蛋白 铜(Ⅱ)离子 荧光光谱 荧光猝灭
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胞红蛋白在缺氧下的表达 被引量:2
16
作者 郑淮武 史雪川 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第3期580-582,共3页
胞红蛋白(cytoglobin,CYGB)是新发现的第4种携氧球蛋白,具有典型的"three-over-three"-螺旋三明治折叠结构。CYGB体内分布广泛,主要以单倍体形式存在于成纤维细胞及神经元细胞中。CYGB在缺氧下表达明显增强并具有保护组织细... 胞红蛋白(cytoglobin,CYGB)是新发现的第4种携氧球蛋白,具有典型的"three-over-three"-螺旋三明治折叠结构。CYGB体内分布广泛,主要以单倍体形式存在于成纤维细胞及神经元细胞中。CYGB在缺氧下表达明显增强并具有保护组织细胞免遭缺血损伤的作用,其机制与其蛋白结构及基因表达有关。本文综述了胞红蛋白在缺氧下的表达以及内在机理。 展开更多
关键词 胞红蛋白 缺氧 蛋白结构 基因表达
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抑制细胞红蛋白表达对脑胶质瘤细胞增殖的影响及其作用机制 被引量:2
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作者 许宏武 杨文鹏 +4 位作者 庄泽锐 周文 黄月君 顾嘉杰 陈剑 《中华神经医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期445-451,共7页
目的探讨抑制细胞红蛋白(CYGB)表达对脑胶质瘤细胞增殖的影响及其作用机制。方法从汕头大学医学院第二附属医院神经外科自2012年6月至2015年12月行脑胶质瘤切除手术的患者中获取新鲜胶质瘤标本,提取、培养出原代脑胶质瘤细胞并进行... 目的探讨抑制细胞红蛋白(CYGB)表达对脑胶质瘤细胞增殖的影响及其作用机制。方法从汕头大学医学院第二附属医院神经外科自2012年6月至2015年12月行脑胶质瘤切除手术的患者中获取新鲜胶质瘤标本,提取、培养出原代脑胶质瘤细胞并进行纯度鉴定。将实验细胞分为4组:转染24h组、转染48h组、转染72h组及阴性对照组,前3组应用基因转染技术将shRNA-CYGB质粒转染至脑胶质瘤细胞24h、48h、72h以抑制CYGB表达。采用CCK-8法观察各组脑胶质瘤细胞在培养第0、1、2、3、4、5天的增殖情况,采用Western blotting检测各组脑胶质瘤细胞CYGB、磷脂酰3羟激酶(P13K)、总丙氨酸氨基转移酶(Akt)和磷酸化Akt(p—Akt)蛋白表达,采用ELISA法检测各组脑胶质瘤细胞白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)、血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果(1)随检测时间点推移,各组脑胶质瘤细胞的增殖能力均逐渐增强,各时间点间细胞吸光度值差异均有统计学意义(P〈0.05)。在不同检测时间点,与阴性对照组比较,转染24h、48h、72h组细胞的增殖能力明显增强,细胞吸光度值差异均有统计学意义(氏0.05)。(2)与阴性对照组比较,转染24h、48h、72h组CYGB蛋白表达依次降低,P13K、P—Akt蛋白表达依次升高,差异均有统计学意义(P〈0.05);各组脑胶质瘤细胞总Akt蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05)。(3)与阴性对照组比较,转染24h、48h、72h组IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β和VEGF含量依次升高,差异均有统计学意义(P〈0.05)。(4)Spearman相关性分析显示:脑胶质瘤细胞CYGB蛋白表达与P13K、P—Akt蛋白表达及IL-6、IL-10、TNF—α、TGF-β、VEGF含量呈负相关关系(P〈0.05)。结论CYGB可能是通过P13K-Akt信号通路影响脑胶质瘤细胞的� 展开更多
关键词 细胞红蛋白 神经胶质瘤 细胞增殖 磷脂酰3羟激酶 丙氨酸氨基转移酶
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细胞珠蛋白抑制NASH向原发性肝癌转化的研究进展 被引量:1
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作者 白瑜 黄峰 晁旭 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2022年第1期112-116,共5页
细胞珠蛋白是一种星状细胞特异性珠蛋白,最近因其与肝纤维化的关联而变成了一个热点蛋白。细胞珠蛋白在抑制非酒精性脂肪性肝炎(NASH)转化原发性肝癌中起着至关重要的作用。对国内外肿瘤研究的最新进展归纳总结发现,非可控性炎症在肿瘤... 细胞珠蛋白是一种星状细胞特异性珠蛋白,最近因其与肝纤维化的关联而变成了一个热点蛋白。细胞珠蛋白在抑制非酒精性脂肪性肝炎(NASH)转化原发性肝癌中起着至关重要的作用。对国内外肿瘤研究的最新进展归纳总结发现,非可控性炎症在肿瘤发生、发展过程中发挥着相当重要的作用,同时“炎‑癌”转化的机制研究已成为肿瘤基础领域研究已成为新的前沿,以及有关“炎‑癌”转化的调控网络、分子机制及其信号通路已逐渐成为肿瘤预防和治疗的主要靶点。本篇综述主要概述了细胞珠蛋白的在肝脏中发挥潜在的功能包括氧化应激和信号通路传导,同时深入探讨了细胞珠蛋白抑制NASH向原发性肝癌转化主要体现在灭活肝星状细胞、增加脂肪转运和抵抗氧化应激三个方面,通过对“炎‑癌”转化的研究为原发性肝癌的预防、诊断和治疗找到新的突破口。 展开更多
关键词 细胞珠蛋白 肝星状细胞 脂肪转运 抗氧化应激
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重组人细胞红蛋白的表达纯化及谱学表征 被引量:2
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作者 田素燕 李连之 +2 位作者 李海丽 薛泽春 杜为红 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第3期483-488,共6页
以可溶性和包涵体两种形式表达纯化得到了重组人细胞红蛋白,并比较了其谱学特征和热稳定性.可溶性蛋白经硫酸铵分级沉淀,再依次经Hiprep 16/10 Q FF阴离子交换柱、Hiload16/60 Superdex75凝胶过滤柱和CM Sepharose FF阳离子交换柱纯化,... 以可溶性和包涵体两种形式表达纯化得到了重组人细胞红蛋白,并比较了其谱学特征和热稳定性.可溶性蛋白经硫酸铵分级沉淀,再依次经Hiprep 16/10 Q FF阴离子交换柱、Hiload16/60 Superdex75凝胶过滤柱和CM Sepharose FF阳离子交换柱纯化,得到电泳纯的包涵体蛋白;包涵体蛋白经盐酸胍变性溶解、外加血红素重组和柱层析得到了电泳纯的可溶性蛋白.电喷雾质谱表明,以这两种形式得到的蛋白分子量相差153.0,紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和圆二色光谱均表明,这两种形式的蛋白在血红素构象上存在差异,其热稳定性也不相同. 展开更多
关键词 细胞红蛋白 分离纯化 谱学表征 稳定性
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细胞红蛋白在缺氧性脑损伤中的研究进展 被引量:2
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作者 田树凤 杨汉华 +3 位作者 肖丹萍 马海然 夏芳 史雪川 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第13期2578-2580,共3页
细胞红蛋白(CYGB)是2002年德国科学家Burmester在小鼠和人体内发现的第四种携氧球蛋白,与肌红蛋白(MB),血红蛋白(HB),脑红蛋白(NGB)属于同一家族,是血红素蛋白家族的新成员。它广泛分布于各个组织器官,跟其他携氧蛋白一样具有携氧,贮氧... 细胞红蛋白(CYGB)是2002年德国科学家Burmester在小鼠和人体内发现的第四种携氧球蛋白,与肌红蛋白(MB),血红蛋白(HB),脑红蛋白(NGB)属于同一家族,是血红素蛋白家族的新成员。它广泛分布于各个组织器官,跟其他携氧蛋白一样具有携氧,贮氧,氧感受器的功能。研究发现其在脑特定区域神经细胞的细胞质和细胞核都有分布,能够受脑缺氧的诱导,体内、外实验均表明其在缺氧情况下表达上调,能增加脑组织对缺氧的耐受能力,抵抗氧化应激所致损伤。缺氧所导致的脑损伤发生率很高,而且此类脑损伤严重影响了人类的健康和生活。所以,对细胞红蛋白进行深入的研究和探讨对于缺氧缺血性脑病,脑卒中,脑肿瘤等缺氧性脑疾病的预防和治疗有重大意义。此综述,通过概括细胞红蛋白的结构,脑内的分布,对缺氧的反应等说明其对缺氧性脑损伤潜在的保护作用。 展开更多
关键词 细胞红蛋白 缺氧性脑损伤 神经保护作用
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