成人及家兔阴茎海绵体平滑肌细胞培养和鉴定 被引量：18

1

作者 陈斌 黄旭元 +3 位作者 童菊芳 陈海戈 王益鑫 黄翼然 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2004年第4期282-286,共5页

目的 :探索阴茎海绵体平滑肌细胞 (CCSM)体外培养及鉴定方法。　方法 :采用勃起功能正常的成年男子及新西兰家兔的新鲜阴茎标本 ,经处理后采用原代细胞培养法 ,对阴茎海绵体组织块进行培养 ,获得CCSM后用光镜、透射电镜和免疫组化等多... 目的 :探索阴茎海绵体平滑肌细胞 (CCSM)体外培养及鉴定方法。　方法 :采用勃起功能正常的成年男子及新西兰家兔的新鲜阴茎标本 ,经处理后采用原代细胞培养法 ,对阴茎海绵体组织块进行培养 ,获得CCSM后用光镜、透射电镜和免疫组化等多种方法从细胞形态学及CCSM生长特性等不同侧面对培养的人及新西兰家兔的CCSM进行鉴定 ,并测定CCSM在体外培养时的细胞增殖情况。　结果 :经 2 4h潜伏期 ,体外培养的CCSM进入指数增长期 ,维持约 96h后进入平台期 ;从接种组织块至长成单层细胞约需 15～ 2 0d ,传代后约 4～ 7d后长成单层 ;传代后的细胞增殖旺盛 ,成束状生长 ,并呈现层叠排列及“峰 谷”现象 ;CCSM在体外可稳定传 7～ 12代 ,传代期间其形态及增殖活性变化不明显 ;各种检测鉴定均证实所获细胞为CCSM。　结论 :CCSM原代细胞培养法简便、稳定、可靠 ,对研究阴茎的勃起机制及勃起功能障碍的发生、发展、调控及其治疗药物筛选有重要理论及现实意义。 展开更多

关键词 阴茎海绵体 平滑肌细胞 勃起功能障碍 细胞培养 人 家兔

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高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化 被引量：14

2

作者 韦安阳 吴威武 +2 位作者 吴浩彬 叶挺宇 万波 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期925-928,共4页

目的探讨高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌是否存在表型转化及对勃起功能的影响。方法16周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)及其同系正常血压大鼠(WKY),测量尾动脉收缩压,颈部皮下注射阿朴吗啡后检测阴茎勃起功能,然后将大鼠分为高血压勃起功能... 目的探讨高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌是否存在表型转化及对勃起功能的影响。方法16周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)及其同系正常血压大鼠(WKY),测量尾动脉收缩压,颈部皮下注射阿朴吗啡后检测阴茎勃起功能,然后将大鼠分为高血压勃起功能障碍组(HBP&ED)、高血压组(HBP)和正常对照组(Control)。免疫组化染色和彩色图文分析系统分析各组大鼠阴茎海绵体中平滑肌细胞碱性调宁蛋白(calponin1)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达,实时荧光定量RT-PCR分析各组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞calponin1mRNA和OPN mRNA的相对表达量。结果在大鼠阴茎海绵体中calponin1和calponin1mRNA表达情况:HBP&ED组低于HBP组(P=0.021,P=0.006)和control组(P=0.000,P=0.001),HBP组低于control组(P=0.000,P=0.015);OPN和OPN mRNA表达情况:HBP&ED组高于HBP组(P=0.000,P=0.000)及control组(P=0.000,P=0.000),HBP组高于control组(PP=0.013,P=0.000)。结论高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞存在表型由收缩型向合成型转化,这种转化达到一定程度最终可能导致大鼠勃起功能障碍。 展开更多

关键词 自发性高血压 勃起功能障碍 阴茎海绵体 平滑肌细胞 表型转化 碱性调宁蛋白 骨桥蛋白

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应用RNA干扰技术抑制PDE_5A_3基因在人阴茎海绵体平滑肌细胞表达 被引量：12

3

作者 张朝晖 刘继红 +6 位作者 封江南 肖恒军 詹鹰 王涛 王少刚 曹正国 叶章群 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期579-581,共3页

目的应用RNA干扰(RNAi)技术抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDEsA3基因的表达,探讨应用该技术治疗勃起功能障碍(ED)的可行性。方法构建6个靶向人PDEsA3基因的短发夹RNA(shRNA)重组质粒,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞48 h后,逆转录-聚合酶链反... 目的应用RNA干扰(RNAi)技术抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDEsA3基因的表达,探讨应用该技术治疗勃起功能障碍(ED)的可行性。方法构建6个靶向人PDEsA3基因的短发夹RNA(shRNA)重组质粒,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞48 h后,逆转录-聚合酶链反应(RT- PCR)及Western blot检测PDE5A3基因的表达抑制效果。结果抑制率最高的1、2、4号重组质粒使PDE5A3基因表达在mRNA水平分别抑制(66．26±4．02)％,(54．90±3．06)％,(23．83± 3．61)％;在蛋白质水平分别抑制(64．14±3．32)％,(49．21±2．96)％,(29．85±4．91)％。结论 RNAi能明显抑制人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5A3基因的表达,且抑制率具有序列相关性,是潜在的ED基因治疗新方法。 展开更多

关键词 RNA干扰 阴茎海绵体 平滑肌细胞 基因表达

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家兔阴茎海绵体平滑肌细胞体外培养方法对比研究 被引量：10

4

作者 段永芳 刘继红 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期197-200,共4页

目的　探索更好、更方便的家兔阴茎海绵体平滑肌细胞体外培养方法。方法　分别采用组织块法、酶消化法、组织块 +酶消化法对家兔阴茎海绵体平滑肌细胞进行培养 ,在倒置显微镜下对培养过程的细胞分别作了生长情况及形态学观察。用HE染色... 目的　探索更好、更方便的家兔阴茎海绵体平滑肌细胞体外培养方法。方法　分别采用组织块法、酶消化法、组织块 +酶消化法对家兔阴茎海绵体平滑肌细胞进行培养 ,在倒置显微镜下对培养过程的细胞分别作了生长情况及形态学观察。用HE染色、MTT法分别描绘原代培养细胞的生长曲线、细胞分裂指数曲线 ;用倒置显微镜观察活细胞的贴壁过程 ,计数法测定细胞贴壁率。结果　组织块法及酶消化法培养的细胞其生长状况和形态学各有自己的特点。组织块法的细胞生长慢 ,培养时间相对较长 ,纯度相对较高 ,原代培养细胞生长速度快 ,但由于该法消化时间不易掌握 ,常影响其成功率 ,多数细胞呈梭形 ,细胞的密度高 ,原代培养时间为 7～ 10d。结论　每种培养方法都有各自的优缺点。 展开更多

关键词 对比研究 阴茎海绵体 平滑肌细胞 细胞培养 兔

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miR-145在糖尿病性勃起功能障碍大鼠发病机制中的作用 被引量：8

5

作者 韦安阳 杨勇 +3 位作者 何书华 罗新贵 张涛 刘洋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1051-1054,共4页

目的探讨miR-145基因在糖尿病性勃起功能障碍(ED)大鼠发病过程中的作用。方法建立糖尿病性ED大鼠动物模型,取阴茎海绵体组织,提取总RNA,qRT-PCR法检验miR-145在糖尿病性ED大鼠、糖尿病性勃起功能正常大鼠及正常大鼠阴茎海绵体组织中表... 目的探讨miR-145基因在糖尿病性勃起功能障碍(ED)大鼠发病过程中的作用。方法建立糖尿病性ED大鼠动物模型,取阴茎海绵体组织,提取总RNA,qRT-PCR法检验miR-145在糖尿病性ED大鼠、糖尿病性勃起功能正常大鼠及正常大鼠阴茎海绵体组织中表达差异。结果 miR-145在糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体组织中的表达量下降。结论糖尿病可导致大鼠阴茎ED,miR-145基因表达下调可能与ED发生有关。 展开更多

关键词 MIR-145 勃起功能障碍 糖尿病 阴茎海绵体平滑肌组织 疾病模型

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外源性硫化氢通过抑制阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡改善海绵体神经损伤大鼠勃起功能障碍 被引量：8

6

作者 曾琴宇 何书华 +5 位作者 钟立仁 王力 陈逢志 张海波 惠佳亮 韦安阳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1329-1336,共8页

目的观察外源性硫化氢对双侧海绵体神经损伤(BCNI)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)凋亡及勃起功能障碍的影响。方法将24只SD雄性大鼠随机分为3组(n=8只/组):假手术组、双侧海绵体神经损伤组(BCNI组)、硫化氢干预组(BCNI+NaHS组)。通过... 目的观察外源性硫化氢对双侧海绵体神经损伤(BCNI)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)凋亡及勃起功能障碍的影响。方法将24只SD雄性大鼠随机分为3组(n=8只/组):假手术组、双侧海绵体神经损伤组(BCNI组)、硫化氢干预组(BCNI+NaHS组)。通过钳夹损伤双侧海绵体神经构建BCNI模型。BCNI+NaHS组每天腹腔注射100μmol/kg的NaHS溶液;BCNI组每日腹腔注射等量生理盐水。治疗4周后检测海绵体内压(ICP)和平均动脉压(MAP),并通过Western blot检测胱硫醚-β-合成酶(CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE),α-SMA,Collagen-Ⅰ,Caspase-3、Bax、Bcl-2表达水平,通过免疫组化检测CBS、CSE表达情况,Masson’s Trichrome染色检测海绵体平滑肌/胶原比值,以及TUNEL+α-SMA组织免疫荧光双染检测CCSMC凋亡水平。结果治疗4周后,BCNI+NaHS组ICP/MAP比值高于BCNI组(P<0.05);Masson’s Trichrome染色结果显示,BCNI+NaHS组海绵体平滑肌/胶原比值较BCNI组显著升高(P<0.05);Western blot结果显示BCNI+NaHS组α-SMA蛋白表达高于BCNI组(P<0.05),同时Collagen-Ⅰ蛋白表达低于BCNI组(P<0.05);TUNEL+α-SMA组织免疫荧光双染结果显示,BCNI+NaHS组CCSMC凋亡数较BCNI组降低(P<0.05)。与BCNI组相比,BCNI+NaHS组Caspase-3、Bax蛋白表达降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05)。BCNI组CBS、CSE表达较其余两组显著降低(P<0.05)。结论外源性硫化氢可提高经典的抗凋亡蛋白Bcl-2及抑制CCSMC凋亡,进而改善BCNI大鼠勃起功能。 展开更多

关键词 勃起功能障碍 硫化氢 阴茎海绵体平滑肌细胞 凋亡 双侧海绵体神经损伤

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内皮素-1在糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化中作用 被引量：6

7

作者 杨勇 胡存利 邱海峰 《中华实用诊断与治疗杂志》 2014年第6期559-561,共3页

目的探讨内皮素-1(endothelin-1,ET-1)在糖尿病性勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(corpus cavernosum smooth muscle cells,CCSM)表型转化中的作用。方法采用链脲佐菌素建立糖尿病性ED大鼠模型,采用改... 目的探讨内皮素-1(endothelin-1,ET-1)在糖尿病性勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(corpus cavernosum smooth muscle cells,CCSM)表型转化中的作用。方法采用链脲佐菌素建立糖尿病性ED大鼠模型,采用改良组织块贴壁法体外培养正常大鼠及糖尿病性ED大鼠CCSM,将CCSM分为对照组、糖尿病性ED组、对照+ET-1组和糖尿病性ED+ET-1组,其中对照+ET-1组与糖尿病性ED+ET-1组加入10-7 mol/L ET-1,对照组与糖尿病性ED组加入PBS缓冲液。采用RT-PCR法检测4组碱性调宁蛋白(calponin 1,Cnn1)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)mRNA表达情况。结果糖尿病性ED+ET-1组Cnn1mRNA表达水平(3.51±0.15)低于对照组(10.21±1.52)和糖尿病性ED组(4.79±0.56),糖尿病性ED组和对照+ET-1组(5.04±0.64)低于对照组(P<0.01);糖尿病性ED+ET-1组OPN mRNA表达水平(6.97±0.74)高于对照组(1.22±0.21)和糖尿病ED组(5.35±0.62),糖尿病性ED组和对照+ET-1组(4.98±0.46)高于对照组(P<0.01)。结论 ET-1不仅对收缩型CCMS有促表型转化作用,对合成型CCMS也有促表型转化作用,且ET-1对CCSM的作用是不可逆的。 展开更多

关键词 勃起功能障碍 内皮素-1 阴茎海绵体平滑肌细胞 表型转化 碱性调宁蛋白 骨桥蛋白

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自发性高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞培养及鉴定 被引量：4

8

作者 马福年 姜睿 《泸州医学院学报》 2013年第1期10-14,共5页

目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞体外培养的方法、生物学性状及与WKY大鼠CCSM细胞培养的区别。方法:采用组织块培养法并应用差速贴壁法进行纯化,倒置相差显微镜观察其形态,免疫荧光与流式细胞仪法进行鉴定。... 目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞体外培养的方法、生物学性状及与WKY大鼠CCSM细胞培养的区别。方法:采用组织块培养法并应用差速贴壁法进行纯化,倒置相差显微镜观察其形态,免疫荧光与流式细胞仪法进行鉴定。结果:镜下可见平滑肌细胞呈梭形生长、平行排列及部分区域峰-谷现象,免疫荧光显示胞浆α-肌动蛋白染色呈阳性。WKY大鼠CCSM细胞第4d开始从组织块边缘游离出,SHR大鼠CCSM细胞第8 d开始游离出。WKY与SHR大鼠CCSM细胞经纯化一次后纯度(%):WKY=97.00±1.03,SHR=84.90±5.99,差异具有统计学意义(P<0.01);WKY与SHR大鼠CCSM细胞经两次纯化后纯度(%):WKY=98.24±1.05,SHR=96.92±1.06,其差异无统计学意义(P>0.05)。结论:SHR与WKY大鼠CCSM细胞的原代培养在生长时间及纯化上存在显著差异,但可通过适当方式缩小其差异并在短期内获得大量高纯度SHR大鼠CCSM细胞,为高血压性勃起功能障碍的研究奠定基础。 展开更多

关键词 阴茎海绵体 平滑肌细胞 细胞培养 大鼠

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低氧环境对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化及MAPK信号通路相关蛋白表达的影响 被引量：4

9

作者 陈思翔 赵凡 +3 位作者 叶妙勇 朱晨锋 赵剑锋 黄晓军 《浙江医学》 CAS 2019年第7期624-628,共5页

目的探讨低氧环境对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化及MAPK信号通路相关蛋白表达的影响。方法体外培养SD大鼠CCSMC,采用细胞免疫荧光法对原代CCSMC进行鉴定。设常氧组(21%O_2)与低氧组(1%O_2)分别培养48h,在倒置显微镜下观察两... 目的探讨低氧环境对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化及MAPK信号通路相关蛋白表达的影响。方法体外培养SD大鼠CCSMC,采用细胞免疫荧光法对原代CCSMC进行鉴定。设常氧组(21%O_2)与低氧组(1%O_2)分别培养48h,在倒置显微镜下观察两组CCSMC形态学变化;采用Western blot法检测表型转化及MAPK信号通路相关蛋白表达。结果体外培养的CCSMC生长良好,抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和抗肌间线蛋白(Desmin)抗体免疫荧光均为阳性,融合后可观察到大部分细胞,且细胞核与细胞质重合在一起,证实分离培养的细胞是同种细胞,即CCSMC。常氧组CCSMC多呈长梭形,而低氧干预48h后CCSMC胞体趋向肥大。与常氧组比较,低氧组缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)相对表达量均明显升高(均P<0.05),α-SMA、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)蛋白相对表达量明显降低(P<0.05),而磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论低氧可造成CCSMC发生表型转化及p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达下降。 展开更多

关键词 阴茎海绵体平滑肌细胞 低氧 勃起功能障碍 表型转化 P38丝裂原活化蛋白激酶 细胞外信号调节激酶 C-JUN氨基末端激酶

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糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞体外培养模型的建立 被引量：3

10

作者 叶挺宇 韦安阳 +2 位作者 万波 杨勇 罗新贵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期351-354,共4页

目的探讨糖尿病性勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)的体外培养方法,建立糖尿病性ED大鼠CCSM体外培养模型,为糖尿病性ED的研究奠定基础。方法建立糖尿病性ED大鼠动物模型,用改良组织块贴壁法体外培养CCSM并行免疫组织化... 目的探讨糖尿病性勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)的体外培养方法,建立糖尿病性ED大鼠CCSM体外培养模型,为糖尿病性ED的研究奠定基础。方法建立糖尿病性ED大鼠动物模型,用改良组织块贴壁法体外培养CCSM并行免疫组织化学染色鉴定,观察细胞形态和生长情况。结果糖尿病性ED大鼠造模成功;用改良组织块法培养糖尿病ED大鼠CCSM,3d后可见细胞游出,16～18d细胞长成单层,传代后细胞增殖旺盛,呈"峰-谷"样生长。培养的细胞经α-SM-actin和结蛋白免疫组化染色鉴定为平滑肌细胞,糖尿病性ED大鼠CCSM体外培养模型建立成功。结论改良组织块贴壁法建立糖尿病ED大鼠CCSM体外培养模型简便、稳定;糖尿病ED大鼠CCSM较正常CCSM增殖速度快,在光镜下形态与正常CCSM差别不明显。 展开更多

关键词 糖尿病 勃起功能障碍 阴茎海绵体平滑肌 细胞培养 疾病模型 动物

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SD大鼠阴茎平滑肌细胞的获取和体外培养 被引量：3

11

作者 黄晓军 年建华 吕伯东 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2009年第9期21-24,共4页

目的研究SD大鼠阴茎平滑肌细胞体外培养方法和生物学特性。方法采用贴壁组织块培养法和酶消化培养法,对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞进行活细胞观察。结果 (1)SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞为梭形,呈长轴平行排列,具有明显的方向性;体外贴... 目的研究SD大鼠阴茎平滑肌细胞体外培养方法和生物学特性。方法采用贴壁组织块培养法和酶消化培养法,对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞进行活细胞观察。结果 (1)SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞为梭形,呈长轴平行排列,具有明显的方向性;体外贴壁快,生长迅速,体外培养的阴茎海绵体平滑肌细胞在合适的传代条件和比例下能够生存并保持其稳定的生物学特性。(2)酶消化培养法获得细胞的纯度高,接种后细胞生长快。贴壁组织块培养法操作简单易于掌握。结论贴壁组织块培养法和酶消化培养法均可以获得平滑肌细胞,方法均方便可行。我们可根据实验的需要选择不同的方法。 展开更多

关键词 阴茎海绵体 平滑肌细胞 体外培养 SD大鼠

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兔阴茎海绵体平滑肌细胞的体外培养及其生物学特性

12

作者 段永芳 刘继红 +1 位作者 曹正国 章咏棠 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期178-180,共3页

目的 :研究体外培养的新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌细胞的生物学特性。　方法 :采用组织块培养法 ,对兔阴茎海绵体平滑肌细胞进行活细胞观察 ,并测定其细胞生长曲线、贴壁率、细胞分裂指数。　结果 :①兔阴茎海绵体平滑肌细胞为梭形 ,呈... 目的 :研究体外培养的新西兰白兔阴茎海绵体平滑肌细胞的生物学特性。　方法 :采用组织块培养法 ,对兔阴茎海绵体平滑肌细胞进行活细胞观察 ,并测定其细胞生长曲线、贴壁率、细胞分裂指数。　结果 :①兔阴茎海绵体平滑肌细胞为梭形 ,呈长轴平行排列 ,具有明显的方向性 ;②体外贴壁快 ,生长迅速 ,体外培养的阴茎海绵体平滑肌细胞在合适的传代条件和比例下能够生存并保持其稳定的生物学特性。　结论 :体外培养的兔阴茎海绵体平滑肌细胞模型可用于检测某些药物对阴茎勃起的影响。 展开更多

关键词 阴茎海绵体 平滑肌细胞 细胞培养 体外 兔

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降钙素基因相关肽对高血压性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖及表型转化的影响 被引量：3

13

作者 叶挺宇 卢湧湧 +3 位作者 潘悦 黄锡玺 杨宇 蔡健 《浙江医学》 CAS 2018年第22期2431-2434,2440,共5页

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高血压性勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)增殖及表型转化的影响。方法选取20只自发性高血压Wistar大鼠(SHR)及10只同系正常血压健康大鼠(WKY),测量大鼠尾部动脉收缩压,通过颈部皮下注... 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高血压性勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)增殖及表型转化的影响。方法选取20只自发性高血压Wistar大鼠(SHR)及10只同系正常血压健康大鼠(WKY),测量大鼠尾部动脉收缩压,通过颈部皮下注射阿朴吗啡后观察大鼠阴茎勃起情况,SHR大鼠中无阴茎勃起的归为高血压勃起功能障碍(HBP-ED)组,出现阴茎勃起的归为高血压(HBP)组,WKY大鼠归为对照组。取各组大鼠阴茎海绵体平滑肌组织行细胞原代培养。不同浓度(1、10和100nmol/L)CGRP作用于培养的细胞后,采用MTT法检测细胞增殖情况,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞碱性调宁蛋白(Cnn1)和骨桥蛋白(OPN)mRNA表达水平。结果不同浓度CGRP均可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,且抑制程度随CGRP浓度增加而加剧。当CGRP作用的终浓度为100nmol/L时,HBP组和HBP-ED组Cnnl m RNA表达水平较组内0nmol/L浓度均上调(均P<0.05),OPN mRNA表达水平较组内0nmol/L浓度均下调(均P<0.05)。结论 CGRP可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,可使高血压性ED大鼠CCSM表型发生逆转化,即由合成型向收缩型转化。 展开更多

关键词 降钙素基因相关肽 高血压 勃起功能障碍 阴茎海绵体平滑肌细胞 表型转化

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津力达对高糖环境下大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响 被引量：2

14

作者 乐岭 王永 +2 位作者 向光大 叶丽姿 朱梓依 《华南国防医学杂志》 CAS 2018年第12期817-821,837,共6页

目的探讨津力达颗粒对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(corpus cavernosum smooth muscle cells,CCSMCs)表型转化的影响及机制。方法将原代SD大鼠CCSMCc进行传代培养,实验分为正糖组(NG组),高糖组(HG组),高渗组(HC组),高糖+PD98059组(HG+PD组)... 目的探讨津力达颗粒对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(corpus cavernosum smooth muscle cells,CCSMCs)表型转化的影响及机制。方法将原代SD大鼠CCSMCc进行传代培养,实验分为正糖组(NG组),高糖组(HG组),高渗组(HC组),高糖+PD98059组(HG+PD组),高糖+低、中、高浓度津力达组(HG+LJLD组、HG+MJLD组、HG+HJLD组),分别于0、24、48 h在高倍镜下观察细胞形态变化。Western blot检测各组α细胞平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)、碱性调宁蛋白1(calponin 1)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)以及信号通路蛋白细胞外信号调节激酶1/2 (extracellular signal-regulated kinases 1/2,ERK1/2),磷酸化细胞外信号调节激酶1/2 (phosphorylated extracellular signaling regulates kinases 1/2,p-ERK1/2)的表达。结果与NG组比较,HG组α-SMA、calponin 1表达均显著减少(P <0. 05); OPN表达显著增多(P <0. 05),p-ERK1/2表达增多(P <0. 01),HC组无上述改变。加入ERK抑制剂后p-ERK1/2表达减低(P <0. 05),α-SMA、calponin 1表达回升(P <0. 05); OPN表达减少(P <0. 05)。高糖加入津力达干预后,与HG组比较,HG+LJLD组、HG+MJLD组、HG+HJLD组calponin 1表达增多,p-ERK1/2表达减少(P均<0. 05),津力达浓度越大,逆转越明显; HG+HJLD组OPN表达显著减少(P <0. 05)。结论高糖可能通过上调ERK1/2的磷酸化进而诱导CCSMCs从收缩型向合成型转化;津力达可能通过抑制ERK1/2的磷酸化,改善高糖诱导的上述变化。 展开更多

关键词 高糖 津力达 表型转化 海绵体平滑肌细胞

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缺氧对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响 被引量：10

15

作者 刘山山 吕伯东 +1 位作者 赵剑锋 傅惠英 《浙江中医药大学学报》 CAS 2013年第7期897-901,共5页

[目的]研究缺氧对阴茎海绵体平滑肌细胞(cavernosum smooth muscle cells,CCSM)表型转化的影响。[方法]用酶消化法获取SD大鼠的原代CCSM,并用细胞免疫荧光法进行鉴定。将原代CCSM置于缺氧小室中(37℃,5%CO2,1%O2,94%N2)培养,按缺氧时间... [目的]研究缺氧对阴茎海绵体平滑肌细胞(cavernosum smooth muscle cells,CCSM)表型转化的影响。[方法]用酶消化法获取SD大鼠的原代CCSM,并用细胞免疫荧光法进行鉴定。将原代CCSM置于缺氧小室中(37℃,5%CO2,1%O2,94%N2)培养,按缺氧时间分为0h组、24h组、48h组、72h组,用western-blot法检测四组的α-SMA、OPN蛋白表达量。[结果]低氧可以诱导CCSMα-SMA蛋白表达下降,且在72h内随着缺氧时间延长差异显著性增加。低氧24h组细胞OPN蛋白表达增加(P<0.05);低氧48h组细胞OPN蛋白表达显著增加(P<0.01);48h后随着时间延长差异可能会减小(P>0.05)。[结论]缺氧可以诱导CCSM由收缩型向合成型转化。 展开更多

关键词 缺氧 低氧 阴茎海绵体平滑肌细胞 表型转化 α-SMA蛋白 OPN蛋白

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地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

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作者 冀小卫 辛学燕 +4 位作者 舒译 张爱平 刘黎明 杨佳树 邢喜平 《中国性科学》 2024年第5期1-6,共6页

目的探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化的影响,以明确地龙蛋白改善DMED大鼠勃起功能的机制。方法于2021年7月选取60只SPF级雄性SD大鼠作为研究对象,随机选取50只腹腔注射链脲佐菌素(ST... 目的探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化的影响,以明确地龙蛋白改善DMED大鼠勃起功能的机制。方法于2021年7月选取60只SPF级雄性SD大鼠作为研究对象,随机选取50只腹腔注射链脲佐菌素(STZ),构建糖尿病(DM)大鼠模型,余下10只作为正常组。8周后大鼠颈部皮下注射阿朴吗啡(APO),并筛选出DMED大鼠。将DMED大鼠随机分为模型组、西地那非组及地龙蛋白低、中、高剂量组(45、90、180 mg/kg),各6只,并随机选取正常组6只作为空白组。给药4周后,检测大鼠血糖、体重、阴茎海绵体内压(ICP)和颈动脉内压(MAP)水平,计算ICP/MAP评估大鼠勃起功能。采用免疫组织化学法检测大鼠阴茎海绵体中收缩型标志物碱性调宁蛋白(Caiponin)、肌间线蛋白(Desmin)表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测阴茎海绵体中Desmin、骨桥蛋白(OPN)mRNA表达水平;采用Western blotting法检测阴茎海绵体中Caiponin、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠体重、ICP/MAP显著下降,血糖显著升高(P<0.01);各给药组大鼠阴茎海绵体中Caiponin、Desmin表达显著下降(P<0.01);Desmin mRNA表达下降,OPN mRNA表达显著上升(P<0.01);Caiponin、SMMHC蛋白表达显著下降(P<0.01)。与模型组比较,西地那非组及地龙蛋白低、中、高剂量组大鼠ICP/MAP水平显著升高(P<0.01),但西地那非组及地龙蛋白低、中、高剂量组大鼠的体重及血糖水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);各给药组大鼠阴茎海绵体中Caiponin、Desmin表达显著上升(P<0.01);Desmin mRNA表达显著上升,OPN mRNA表达显著下降(P<0.01);Caiponin、SMMHC蛋白表达显著上升(P<0.01)。结论地龙蛋白可通过上调阴茎海绵体组织中合成型(增殖型)标志蛋白或下调收缩型标志蛋白影响CCSMC转化,进而改善DMED大鼠的勃起功能。 展开更多

关键词 地龙蛋白 勃起功能障碍 糖尿病 阴茎海绵体平滑肌细胞 表型转化

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地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化及其勃起功能的影响

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作者 冀小卫 张爱平 +2 位作者 刘黎明 杨佳树 邢喜平 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期325-333,共9页

目的探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化及其勃起功能的影响。方法将60只勃起功能正常的雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、西地拉非组(5 mg·kg^(-1))及地龙蛋白低、中、高剂量组... 目的探讨地龙蛋白对糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化及其勃起功能的影响。方法将60只勃起功能正常的雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、西地拉非组(5 mg·kg^(-1))及地龙蛋白低、中、高剂量组(45、90、180 mg·kg^(-1)),每组10只。采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ,50 mg·kg^(-1))结合高脂饲料喂养建立糖尿病大鼠模型;8周后,颈部注射阿朴吗啡(APO,100μg·kg^(-1)),制备DMED大鼠模型。造模成功后,按剂量灌胃给药,每日1次,连续4周。测定各组大鼠造模前、造模第3天、给药4周后的血糖水平及体质量。采用多导生理记录仪测定大鼠阴茎海绵体内压(ICP)、颈动脉内压(MAP),计算ICP/MAP比值;免疫组织化学法检测阴茎海绵体中收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)和合成型标志物Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、骨桥蛋白(OPN)表达情况;RT-PCR法检测阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC、CollagenⅠm RNA表达水平;Western Blot法检测阴茎海绵体中α-SMA、肌间线蛋白(Desmin)、CollagenⅠ、OPN蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠在造模第3天和给药4周后的血糖值均显著升高(P<0.01),给药4周后的体质量显著降低(P<0.01);ICP及ICP/MAP比值显著降低(P<0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC、Desmin蛋白表达水平显著降低(P<0.01),CollagenⅠ、OPN蛋白表达水平显著升高(P<0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC m RNA表达水平显著降低(P<0.01),CollagenⅠm RNA表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,给药组大鼠的血糖值及体质量均无明显变化(P>0.05);ICP及ICP/MAP比值均显著升高(P<0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC、Desmin蛋白表达水平显著升高(P<0.01),CollagenⅠ、OPN蛋白表达水平显著降低(P<0.01);阴茎海绵体中α-SMA、SMMHC m RNA表达水平显著升高(P<0.01),CollagenⅠmRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论地龙蛋 展开更多

关键词 地龙蛋白 糖尿病性勃起功能障碍 阴茎海绵体平滑肌细胞 表型转化 大鼠

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活血化瘀法对低氧所致阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响 被引量：1

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作者 朱晨锋 陈思翔 +3 位作者 吴则南 周鑫杰 黄佳玲 黄晓军 《中国性科学》 2019年第11期122-126,共5页

目的探讨活血化瘀法对低氧所致阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMCs)表型转化的影响。方法选择10只雄性SD大鼠为研究对象,动物实验设血府逐瘀汤灌胃组和空白对照组。血府逐瘀汤含药血清的制备;体外培养SD大鼠CCSMCs,分别采用常氧(21%O 2)、低氧... 目的探讨活血化瘀法对低氧所致阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMCs)表型转化的影响。方法选择10只雄性SD大鼠为研究对象,动物实验设血府逐瘀汤灌胃组和空白对照组。血府逐瘀汤含药血清的制备;体外培养SD大鼠CCSMCs,分别采用常氧(21%O 2)、低氧(1%O 2)、低氧及含药血清干预处理,即为常氧组、低氧组和血府逐瘀汤干预组,分别培养48h;免疫组化法鉴定细胞;Western印迹测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原蛋白(Collagen I)相对表达。结果体外培养CCSMC生长良好,抗α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和抗Desmin抗体免疫组化染色阳性,CCSMC所占比例达90%以上。MTT法结果显示,血府逐瘀汤含药血清浓度<40%时,对CCSMC无明显毒性;而50%血府逐瘀汤含药血清对CCSMC有一定的抑制作用。未加含药血清干预时,与常氧组相比,低氧组Collagen I表达显著增加,α-SMA表达显著下降;与低氧不加含药血清组相比,40%含药血清组Collagen I表达相对下降,α-SMA表达显著增加。结论低氧促使大鼠CCSMCs表达α-SMA增加和Collagen I下降,40%血府逐瘀汤含药血清则使α-SMA表达下降和Collagen I表达下降,推测血府逐瘀汤在低氧所致CCSMCs发生表型转化的过程中起到抑制作用。 展开更多

关键词 阴茎海绵体平滑肌细胞 低氧 勃起功能障碍 表型转化 活血化瘀法 血府逐瘀汤

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阴茎海绵体平滑肌细胞在勃起功能障碍中关键作用的研究进展

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作者 管延杰 王勇 +1 位作者 赵福军 夏术阶 《临床泌尿外科杂志》 CAS 2024年第7期632-635,共4页

近年来,勃起功能障碍的发病率呈上升趋势,已成为泌尿系统的常见疾病。阴茎海绵体平滑肌细胞(corpus cavernosum smooth muscle cell,CCSMC)作为阴茎勃起结构的重要组成部分,其完整的舒张-收缩机制是阴茎勃起的重要基础,勃起功能障碍患者... 近年来,勃起功能障碍的发病率呈上升趋势,已成为泌尿系统的常见疾病。阴茎海绵体平滑肌细胞(corpus cavernosum smooth muscle cell,CCSMC)作为阴茎勃起结构的重要组成部分,其完整的舒张-收缩机制是阴茎勃起的重要基础,勃起功能障碍患者CCSMC表现出多种病理变化,如凋亡增加、焦亡及铁死亡水平升高、自噬水平下降、氧化应激水平升高和表型转化等。本文旨在汇总聚焦于CCSMC的勃起功能障碍研究进展,阐明CCSMC在勃起功能障碍中的关键致病作用及其可能的治疗靶点。 展开更多

关键词 勃起功能障碍 海绵体平滑肌细胞 病理变化

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