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龙鳖胶囊含药血清对YAP抑制剂诱导人软骨细胞凋亡的保护作用及机制研究 被引量：6
1
作者 梁桂洪 黄和涛 +8 位作者 潘建科 曾令烽 杨伟毅 罗明辉 杨园 陈红云 韩燕鸿 赵金龙 刘军 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第12期1442-1448,共7页
目的:探索龙鳖胶囊含药血清(后文简写为"LBJN")对Yes结构结合蛋白(YAP)抑制剂维替泊芬(verteporfin)诱导软骨细胞凋亡的保护作用及机制。方法:通过两步酶消化法提取原代人膝骨性关节炎软骨细胞,利用甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原... 目的:探索龙鳖胶囊含药血清(后文简写为"LBJN")对Yes结构结合蛋白(YAP)抑制剂维替泊芬(verteporfin)诱导软骨细胞凋亡的保护作用及机制。方法:通过两步酶消化法提取原代人膝骨性关节炎软骨细胞,利用甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光染色法对细胞进行鉴定。采用流式细胞术检测2、5μmol/L verteporfin单用和分别与5%LBJN联用48 h后对细胞凋亡的影响,并设置溶剂对照[0.1%二甲基亚砜(DMSO)]和5%LBJN对照。采用Western blot法检测0.1%DMSO(溶剂对照)、2μmol/L verteporfin、2μmol/L verteporfin+5%LBJN和0(空白对照)、2.5%LBJN、5%LBJN处理48 h后细胞中凋亡相关蛋白[YAP、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、活化胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)]的表达水平;采用Western blot法检测0(空白对照)、2.5%、5%LBJN处理48h后细胞中自噬相关蛋白[哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、Beclin-1、LC3A/B]的表达水平。结果:分离出的细胞符合软骨细胞的特征。与0.1%DMSO比较,2、5μmol/L verteporfin作用后细胞的凋亡率均显著升高(P<0.05),且两个浓度的作用效果相当(P>0.05);与单用verteporfin比较,2、5μmol/L verteporfin与5%LBJN联用后细胞的凋亡率均显著降低(P<0.05)。与0.1%DMSO比较,2μmol/L verteporfin作用后细胞中YAP、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而cleaved-caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与2μmol/L verteporfin比较,2μmol/L verteporfin+5%LBJN作用后细胞中YAP、Bcl-2蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05),而cleaved-caspase-3蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。与空白对照比较,2.5%、5%LBJN作用后细胞中YAP、Bcl-2、Beclin-1蛋白的表达水平和LC3A/B-Ⅱ/LC3A/B-Ⅰ比值均显著升高(P<0.05),而cleaved-caspase-3、mTOR蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:LBJN具有阻断YAP抑制剂verteporfin诱导的软骨细胞凋亡的作用,其机制可能与调节软骨细胞中凋亡相关蛋白的表达和增强软骨细胞的自噬有� 展开更多
关键词 龙鳖胶囊 含药血清 骨性关节炎 软骨细胞 Yes结构结合蛋白抑制剂 凋亡 自噬
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益气活血复方对Toll样受体4信号转导通路及下游炎症因子的影响 被引量：22
2
作者 姜华 姜玉姬 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期219-223,共5页
目的研究益气活血复方含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)信号转导通路及下游炎症因子血凝素样氧化低密度脂蛋白... 目的研究益气活血复方含药血清对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)信号转导通路及下游炎症因子血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响,从基因和蛋白水平研究益气活血复方防治动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的机制。方法含药血清的制备:选择新西兰大耳白兔20只,随机分为4组,即空白对照组、中药高浓度组、中药中浓度组、中药低浓度组,每组5只。正常组以生理盐水灌胃;中药高浓度组、中药中浓度组、中药低浓度组分别以高、中、低浓度益气活血复方灌胃,连续灌胃7天。在末次灌胃给药2h后,心脏取血,离心后分离血清。体外培养HUVECs,随机分为6组,即空白对照组、模型组、西药对照组、中药高、中、低浓度组,用LPS刺激2h后,分别加入高、中、低浓度益气活血复方含药血清干预,24h后收集细胞,用荧光定量PCR方法测定TLR4、骨髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、Toll样受体相关分子(TRAM)、Toll样受体相关的干扰素活化因子(TRIF)、核转录因子-κB(NF-κB)、LOX-1、TNF-α及ICAM-1的基因表达,用Western blot法分别测定TLR4、MyD88、TRAF-6、LOX-1的蛋白表达。结果用LPS刺激HUVECs后,引起TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM、TRIF、NF-κB、LOX-1、TNF-α及ICAM-1的高表达,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),而用益气活血复方含药血清干预以后显著抑制TLR4、MyD88、TRAF-6、NF-κB、LOX-1、TNF-α及ICAM-1的高表达,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);对TRAM和TRIF无抑制作用。结论益气活血复方可抑制TLR4信号转导通路及LOX-1、TNF-α及ICAM-1的表达,这可能是其治疗各种免疫炎症性疾病及防治动脉粥样硬化作用的机制之一。 展开更多
关键词 中药含药血清 内皮细胞 TOLL样受体4 髓样分化因子88 血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1 动脉粥样硬化
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当归补血汤及其服药后血清对小鼠造血祖细胞的影响 被引量：13
3
作者 张英华 武桂兰 姜廷良 《中国实验方剂学杂志》 CAS 1999年第6期30-32,共3页
当归补血汤煎液()对小鼠粒系—巨系造血祖细胞(CFU-GM)的生长有抑制作用,剂量越大,抑制作用越强。当归补血汤口饲小鼠后的含药血清()对CFU-GM的生长有明显的激活作用,剂量越大,CFU-GM集落生长的越多。药在相同含药血清浓度下,从时—效... 当归补血汤煎液()对小鼠粒系—巨系造血祖细胞(CFU-GM)的生长有抑制作用,剂量越大,抑制作用越强。当归补血汤口饲小鼠后的含药血清()对CFU-GM的生长有明显的激活作用,剂量越大,CFU-GM集落生长的越多。药在相同含药血清浓度下,从时—效关系求出当归补血汤的药效动力学参数,Ke=0.3961/h,T1/2(Ke)=2.1602h,Ka=1.3422/h,T1/2(Ka)=1.6057h,Tp=1.5978h,Td=14.8019h。 展开更多
关键词 当归补血汤 含药血清 药效动力学 CFU-GM
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脑络欣通和左归丸药物血清对体外培养的大鼠神经干细胞增殖分化的作用 被引量：17
4
作者 唐巍 王键 +7 位作者 王又闻 倪朝民 陈业农 唐照亮 管叶明 俞丽华 李晓民 胡建鹏 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期182-187,共6页
目的探讨脑络欣通药物血清和左归丸药物血清对体外培养的大鼠胚胎神经干细胞(neural stem cell,NSC)增殖分化的作用。方法分别采用含10%脑络欣通药物血清和含10%左归丸药物血清的培养基培养大鼠胚胎NSC,观察其促增殖效应和诱导分化效应... 目的探讨脑络欣通药物血清和左归丸药物血清对体外培养的大鼠胚胎神经干细胞(neural stem cell,NSC)增殖分化的作用。方法分别采用含10%脑络欣通药物血清和含10%左归丸药物血清的培养基培养大鼠胚胎NSC,观察其促增殖效应和诱导分化效应,应用相差显微镜和免疫荧光染色对其进行比较观察。结果脑络欣通药物血清和左归丸药物血清均可诱导绝大多数NSC分化成神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。此外,两者还能在一定程度上促进培养的NSC生长。前者诱导NSC分化的进程虽比后者要慢,但诱导NSC向神经元方向分化的比率较高,其分化的神经元在细胞形态学上与发育成熟的神经元更为接近;后者促进NSC生长的效应较为显著。结论脑络欣通和左归丸均能促进体外培养的NSC生长和分化,两者作用有一定差异;益气活血治法和补肾生髓治法对NSC进行诱导分化具有一定的可行性。 展开更多
关键词 神经干细胞 药物血清 增殖 脑络欣通 左归丸
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淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨密度的影响 被引量：13
5
作者 李晶 宋敏 +1 位作者 罗晓 谢兴文 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1661-1664,共4页
目的:探讨淫羊藿总黄酮(TFE)对去势大鼠骨密度的影响及其机制。方法:采用卵巢切除的方法建立大鼠骨质疏松模型,将大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,TFE低、中、高剂量组,β-雌二醇组6组,每组10只,分别予相应药物灌胃90d。采用双能X线... 目的:探讨淫羊藿总黄酮(TFE)对去势大鼠骨密度的影响及其机制。方法:采用卵巢切除的方法建立大鼠骨质疏松模型,将大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,TFE低、中、高剂量组,β-雌二醇组6组,每组10只,分别予相应药物灌胃90d。采用双能X线骨密度仪检测TFE对去势大鼠骨密度的影响、MTT法分析TFE含药血清对体外培养的成骨细胞(OB)增殖的影响。结果:与正常对照组相比,模型对照组各项骨密度均降低且有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型对照组相比,各给药组骨密度均上升,除TFE低、中、高剂量组的全身骨密度,TFE低剂量组的腰椎、颅骨骨密度外,股骨、第2腰椎及第2腰椎椎体骨密度均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);2.5%和5%TFE含药血清可刺激OB增殖。结论:TFE可提高去势大鼠的骨密度,其机制可能是刺激OB的增殖。 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 骨形成 骨密度 含药血清 成骨细胞
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犀黄丸对大肠癌LoVo细胞基质金属蛋白酶2,9蛋白表达的影响 被引量：13
6
作者 孙莉娜 孟静岩 +4 位作者 王威 应森林 李丹 马佐英 贾彦焘 《天津中医药》 CAS 2012年第4期378-380,共3页
[目的]研究犀黄丸含药血清对大肠癌LoVo细胞中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,MMP-9)表达的影响及意义。[方法]应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测犀黄丸含药血清作用下LoVo细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。[结果]在犀黄丸... [目的]研究犀黄丸含药血清对大肠癌LoVo细胞中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,MMP-9)表达的影响及意义。[方法]应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测犀黄丸含药血清作用下LoVo细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。[结果]在犀黄丸含药血清的干预下,LoVo细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白分泌水平与空白对照组比较明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]犀黄丸可能通过抑制MMP-2和MMP-9的蛋白表达,达到抑制大肠癌转移的作用。 展开更多
关键词 LOVO细胞 犀黄丸 含药血清 基质金属蛋白酶-2 9
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半夏泻心汤对H_2O_2诱导的RIN-m5F细胞凋亡和胰岛素分泌的影响 被引量：12
7
作者 倪青 孟祥 杜立娟 《北京中医药》 2017年第12期1117-1120,1129,共5页
目的探讨半夏泻心汤对胰岛β细胞凋亡及胰岛素分泌的影响。方法 33只雄性SD大鼠随机分组灌胃,取血收集含药血清,H2O2处理RIN-m5F细胞建立氧化应激细胞凋亡模型,造模成功后探索半夏泻心汤最佳浓度并随机分组,流式细胞术检测各组细胞凋亡... 目的探讨半夏泻心汤对胰岛β细胞凋亡及胰岛素分泌的影响。方法 33只雄性SD大鼠随机分组灌胃,取血收集含药血清,H2O2处理RIN-m5F细胞建立氧化应激细胞凋亡模型,造模成功后探索半夏泻心汤最佳浓度并随机分组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率、放免法检测胰岛素分泌浓度。结果 H2O2半数致死浓度为300 mmol/L,半夏泻心汤最佳浓度为10%(P<0.01);半夏泻心汤可显著增强胰岛细胞活力,降低胰岛细胞凋亡率,增加胰岛素分泌(P<0.05)。结论半夏泻心汤可抑制胰岛细胞凋亡,促进胰岛素分泌,其机制有待进一步探讨。 展开更多
关键词 半夏泻心汤 含药血清 细胞凋亡 胰岛素分泌
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滋补肝肾方含药血清对B16黑素细胞活性黑素含量及cAMP水平的影响 被引量：10
8
作者 张蕾 赵京霞 +2 位作者 李萍 刘卫红 王莒生 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2009年第3期467-469,共3页
目的:通过对含滋补肝肾中药大鼠血清对黑素细胞(B16)活性、黑素含量和cAMP水平影响的研究,探讨滋补肝肾方治疗白癜风的机制。方法:体外培养小鼠B16细胞,于对数生长期加不同浓度含滋补肝肾中药的大鼠血清培养后,分别采用MTT法、NaOH法和... 目的:通过对含滋补肝肾中药大鼠血清对黑素细胞(B16)活性、黑素含量和cAMP水平影响的研究,探讨滋补肝肾方治疗白癜风的机制。方法:体外培养小鼠B16细胞,于对数生长期加不同浓度含滋补肝肾中药的大鼠血清培养后,分别采用MTT法、NaOH法和放免法检测细胞活性、黑素含量和cAMP水平。结果:与空白对照组比较,滋补肝肾方含药血清各剂量组对B16增殖均没有明显促增殖活性;但20%含药血清可明显促进B16合成黑素量(P<0.05),并提高细胞内cAMP水平(P<0.05)。结论:滋补肝肾方可能通过提高黑素细胞cAMP的水平,从而促进B16细胞合成黑素的功能。 展开更多
关键词 滋补肝肾方 含药血清 黑素合成 CAMP
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小续命汤含药血清对氧糖剥夺模型大鼠星形胶质细胞的保护作用研究 被引量：10
9
作者 向军 徐莉莉 +2 位作者 杨峰 朱雯 蔡定芳 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第1期34-39,共6页
目的:探讨小续命汤含药血清对氧糖剥夺(OGD)模型大鼠星形胶质细胞的保护作用及其机制。方法:将体外培养的大鼠星形胶质细胞随机分为对照组、模型组和小续命汤含药血清低、中、高浓度组,其中对照组细胞不作任何处理,模型组和小续命汤含... 目的:探讨小续命汤含药血清对氧糖剥夺(OGD)模型大鼠星形胶质细胞的保护作用及其机制。方法:将体外培养的大鼠星形胶质细胞随机分为对照组、模型组和小续命汤含药血清低、中、高浓度组,其中对照组细胞不作任何处理,模型组和小续命汤含药血清低、中、高浓度组细胞经OGD 2.5 h后分别在0(即模型组不加药)、2.5%、5%、10%的小续命汤含药血清中复氧0、3、6、12 h,采用比色法检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)含量。取OGD后复氧12 h时的对照组、模型组和小续命汤含药血清高浓度组大鼠细胞,采用荧光探针法检测其活性氧(ROS)水平,采用免疫荧光双染法检测其锰超氧化物岐化酶(MnSOD)水平。结果:对照组细胞中LDH含量始终保持在较低水平;模型组细胞分别在OGD后复氧0~12 h时,其LDH含量从(110.99±17.06)U/L逐渐上升至(436.64±55.29)U/L,均显著高于对照组(P<0.05);与OGD后复氧相同时间点的模型组比较,小续命汤含药血清低、中、高浓度组细胞中LDH含量均不同程度地降低,并表现出时间和剂量依赖趋势,其中小续命汤含药血清各浓度组细胞在OGD后复氧6、12 h时其LDH含量均较模型组显著降低(P<0.05)。OGD后复氧12 h时,模型组细胞中ROS水平显著高于对照组,MnSOD水平显著低于对照组(P<0.05);小续命汤含药血清高浓度组细胞中ROS水平显著低于模型组,MnSOD水平显著高于模型组(P<0.05)。结论:小续命汤含药血清可能通过上调MnSOD的水平,清除过量的ROS,从而减轻OGD导致的大鼠星形胶质细胞损伤,发挥其保护作用。 展开更多
关键词 小续命汤 含药血清 星形胶质细胞 氧糖剥夺 保护作用 机制
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补骨脂对A375人黑素瘤细胞增殖及黑素合成的影响 被引量：9
10
作者 唐晓琴 闫明 +2 位作者 高莉 彭晓明 胡佳惠 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2010年第3期41-42,共2页
目的探讨含补骨脂大鼠血清对A375细胞增殖及合成黑素功能的影响。方法体外培养A375人黑素瘤细胞,于对数生长期添加不同浓度含补骨脂大鼠血清,分别采用MTT法和NaOH法检测细胞增殖及合成黑素的情况。结果补骨脂高、中、低剂量含药血清组... 目的探讨含补骨脂大鼠血清对A375细胞增殖及合成黑素功能的影响。方法体外培养A375人黑素瘤细胞,于对数生长期添加不同浓度含补骨脂大鼠血清,分别采用MTT法和NaOH法检测细胞增殖及合成黑素的情况。结果补骨脂高、中、低剂量含药血清组较空白血清组有明显促增殖作用,在20%的添加浓度时,高、中、低3个剂量含药血清组随着剂量的增加,黑素含量也明显升高(P<0.01)。结论补骨脂含药血清有促进A375黑素瘤细胞增殖作用,并使A375人黑素瘤细胞合成黑素增加。 展开更多
关键词 补骨脂 含药血清 黑素合成 细胞增殖
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荷瘤小鼠扶正抑瘤颗粒含药血清对H_(22)细胞的凋亡、自由基含量和线粒体膜电位的影响 被引量：9
11
作者 王学习 赵健雄 +1 位作者 陈茹 白德成 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期343-346,共4页
目的观察荷瘤小鼠扶正抑瘤颗粒(FYG)含药血清对H22细胞的凋亡、自由基含量和线粒体膜电位的影响。方法应用流式细胞仪检测FYG含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用激光共聚焦显微镜检测H22细胞DNA RNA、自由基含量和线粒体膜电位的变... 目的观察荷瘤小鼠扶正抑瘤颗粒(FYG)含药血清对H22细胞的凋亡、自由基含量和线粒体膜电位的影响。方法应用流式细胞仪检测FYG含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用激光共聚焦显微镜检测H22细胞DNA RNA、自由基含量和线粒体膜电位的变化。结果FYG含药血清可引起H22细胞的凋亡,细胞DNA RNA和线粒体膜电位降低,自由基含量升高。结论FYK含药血清引起H22细胞的凋亡可能与其影响H22细胞自由基含量和线粒体膜电位变化有关。 展开更多
关键词 扶正抑瘤颗粒 中药血清 自由基 线粒体膜电位
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半夏泻心汤对H_2O_2诱导的RIN-m5F细胞凋亡的影响及其机制研究 被引量：8
12
作者 杜立娟 孟祥 倪青 《北京中医药》 2017年第6期494-499,共6页
目的探讨半夏泻心汤对H_2O_2诱导的RIN-m5F细胞凋亡的影响及其机制。方法大鼠随机分组灌胃,取血收集含药血清,300μM H_2O_2干预RIN-m5F细胞,测定半夏泻心汤最佳浓度,后随机分组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率、Western blot检测各组蛋... 目的探讨半夏泻心汤对H_2O_2诱导的RIN-m5F细胞凋亡的影响及其机制。方法大鼠随机分组灌胃,取血收集含药血清,300μM H_2O_2干预RIN-m5F细胞,测定半夏泻心汤最佳浓度,后随机分组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率、Western blot检测各组蛋白表达。结果半夏泻心汤含药血清最佳浓度为10%(P<0.05);与模型组比较,半夏泻心汤含药血清可显著降低RIN-m5F细胞凋亡率(P<0.05),下调Caspase-3、Bax的表达(P<0.05),上调Bcl-2、PAKT的表达(P<0.05)。结论半夏泻心汤含药血清可抑制RIN-m5F细胞凋亡,其机制可能与PI3K/AKT通路的活化有关。 展开更多
关键词 半夏泻心汤 含药血清 细胞凋亡 PI3K/AKT 大鼠
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黄芩汤含药血清对TNF-α诱导的Caco-2细胞炎症模型的影响 被引量：3
13
作者 冯雪 刘雅清 +3 位作者 刘滨 马旭冉 王敦方 杨伟鹏 《中医药学报》 CAS 2023年第1期16-19,共4页
目的:观察黄芩汤不同时间点的含药血清对TNF-α诱导的Caco-2细胞炎症模型的影响。方法:参照《伤寒论》组方及课题组的前期研究,煎煮、过滤、浓缩制成黄芩汤提取物,按照20 g/kg的剂量一次性给予大鼠黄芩汤,分别于给药后0、0.5、1、2、3、... 目的:观察黄芩汤不同时间点的含药血清对TNF-α诱导的Caco-2细胞炎症模型的影响。方法:参照《伤寒论》组方及课题组的前期研究,煎煮、过滤、浓缩制成黄芩汤提取物,按照20 g/kg的剂量一次性给予大鼠黄芩汤,分别于给药后0、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、24 h眼眶取血,分离血清,MTT法观察不同浓度的黄芩汤含药血清对Caco-2细胞增殖的影响;并用TNF-α诱导细胞炎症损伤模型,10%的含药血清给药18 h后,采用Griess法观察黄芩汤含药血清对其NO的影响,采用Elisa法测定IL-1β、PGE_(2)和TNF-α的变化。结果:与正常组相比,5%、10%、20%的黄芩汤含药血清作用Caco-2后,均有促进其增殖的作用,尤以10%黄芩汤含药血清的效果最佳;10 ng/mL的TNF-α致炎效果最佳;不同时间点的10%黄芩汤含药血清可降低炎症细胞内NO的含量,降低细胞内IL-1β、TNF-α和PGE_(2)的浓度。结论:黄芩汤不同时间点的含药血清对TNF-α诱导的Caco-2细胞炎症具有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制NO、IL-1β、TNF-α等炎性因子有关。 展开更多
关键词 黄芩汤 含药血清 TNF-Α CACO-2细胞 炎症
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独活寄生汤对白介素1β诱导髓核细胞凋亡和内质网应激的影响
14
作者 周鹃 李艳丽 +4 位作者 杜世阳 杨若鹏 夏平 刘伟 冯晶 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2024年第4期1-7,共7页
目的:探讨独活寄生汤含药血清对白介素1β诱导髓核细胞凋亡和内质网应激及其关键途径PERK/elF2α通路的影响,探究独活寄生汤对椎间盘退变的作用和分子机制。方法:将40只10周龄的SD大鼠以独活寄生汤灌胃,连续灌胃2周后经腹主动脉取血,获... 目的:探讨独活寄生汤含药血清对白介素1β诱导髓核细胞凋亡和内质网应激及其关键途径PERK/elF2α通路的影响,探究独活寄生汤对椎间盘退变的作用和分子机制。方法:将40只10周龄的SD大鼠以独活寄生汤灌胃,连续灌胃2周后经腹主动脉取血,获取含药血清。采用不同浓度独活寄生汤对髓核细胞进行不同时间的处理,细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测髓核细胞的活性。将髓核细胞随机分成3组:对照组(未经IL-1β和独活寄生汤含药血清处理)、IL-1β组(加入10 ng/mL IL-1β溶液干预24 h)和独活寄生汤组(加入10 ng/mL IL-1β溶液和独活寄生汤含药血清干预24 h)。TUNEL法检测分析髓核细胞凋亡率;免疫荧光法检测各组CHOP、GRP78的表达水平;qRT-PCR法检测各组CHOP、GRP78、Cleaved-caspase3、Bax、BCL-2和PERK、elF2α、ATF4通路mRNA的表达;Western Blot法检测CHOP、GRP78、Cleaved-caspase3、Bax、BCL-2、PERK、elF2α、p-PERK、p-elF2α、ATF4通路蛋白的表达。结果:独活寄生汤能够显著提高髓核细胞的活力,改善髓核细胞凋亡。与对照组相比,IL-1β组CHOP、GRP78、Cleaved-caspase3、Bax和PERK、elF2α、ATF4基因表达显著上升,BCL-2基因表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);与IL-1β组相比,独活寄生汤组CHOP、GRP78、Cleaved-caspase3、Bax和PERK、elF2α、ATF4基因表达显著下降,BCL-2基因表达显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,IL-1β组CHOP、GRP78、Cleaved-caspase3、Bax和PERK、elF2α、ATF4、p-PERK、p-elF2α蛋白表达显著上升,BCL-2蛋白显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);与IL-1β组相比,独活寄生汤组CHOP、GRP78、Cleaved-caspase3、Bax和PERK、elF2α、ATF4、p-PERK、p-elF2α蛋白表达显著下降,BCL-2蛋白显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:独活寄生汤含药血清能够抑制退变髓核细胞的内质网应激和凋亡,进而延缓椎间盘退变,作用途径可能与抑制PERK/elF2α通 展开更多
关键词 独活寄生汤 含药血清 椎间盘退变 内质网应激
原文传递
木犀草素含药血清对高糖诱导肾小球系膜细胞AMPK/SIRT-1/PGC-1α信号通路及凋亡的影响 被引量：6
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作者 王超超 姜益 赵润英 《中国中医药科技》 CAS 2021年第3期378-382,共5页
目的:探讨木犀草素(Luteolin)含药血清对高糖诱导下肾小球系膜细胞(GMCs)凋亡及单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)信号通路的影响。方法:将健康SPF级SD雄性大... 目的:探讨木犀草素(Luteolin)含药血清对高糖诱导下肾小球系膜细胞(GMCs)凋亡及单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)信号通路的影响。方法:将健康SPF级SD雄性大鼠分为正常组、Luteolin低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组、罗格列酮阳性组(0.36 mg/kg),每组10只,均灌胃给予相应剂量药物,1次/d,连续7 d后,经腹主动脉取血制备含药血清。取SV40 MES13型小鼠GMCs将其分为正常组、高糖模型组、Luteolin含药血清低、中、高剂量组、阳性含药血清组,各组细胞按相应剂量药物处理并培养24 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及流式细胞仪检测各组GMCs存活率及凋亡率;以蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组细胞通路蛋白AMPK/SIRT-1/PGC-1α及凋亡相关蛋白脂肪酸合酶(Fas)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)表达。结果:与正常组相比,模型组GMCs细胞密度、胞质微丝样结构、胞核颗粒沉积等HE染色病理形态、存活率、Bcl-2蛋白表达均升高(P<0.05),凋亡率、pAMPK/AMPK、SIRT-1、PGC-1α、Fas蛋白表达均降低(P<0.05)。与模型组相比,Luteolin含药血清低、中、高剂量组及阳性对照组细胞密度、胞质微丝样结构、胞核颗粒沉积等HE染色病理形态、存活率、Bcl-2蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率、pAMPK/AMPK、SIRT-1、PGC-1α、Fas蛋白表达均升高(P<0.05),且Luteolin各剂量组呈剂量依赖性。阳性对照组与Luteolin含药血清高剂量组相比,上述指标无差异(P>0.05)。结论:Luteolin血清可能通过激活AMPK/SIRT-1/PGC-1α蛋白表达,抑制高糖诱导下GMCs过度增生,促进其凋亡。 展开更多
关键词 木犀草素 肾小球系膜细胞 单磷酸腺苷活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1/过氧化物酶增殖物激活受体γ共激活因子1α信号通路 凋亡 体外实验
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基于UPLC-Q-TOF-MS的左归降糖解郁方体内外成分分析 被引量：2
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作者 张驰 周思倩 +5 位作者 李金来 邵乐 刘检 赵洪庆 王宇红 龙红萍 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期228-240,共13页
目的 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对左归降糖解郁方(左归丸化裁)的体外及体内血清化学成分进行快速分析鉴别。方法 采用Agilent ZORB AX Eclipse Plus C_(18)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,质... 目的 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对左归降糖解郁方(左归丸化裁)的体外及体内血清化学成分进行快速分析鉴别。方法 采用Agilent ZORB AX Eclipse Plus C_(18)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,质谱扫描采用正负离子模式,对左归降糖解郁方的提取液、空白血清和含药血清进行分析,结合精确相对分子质量、保留时间、碎片离子、中性丢失等信息鉴定其体内外化学成分。结果 使用Agilent Masshunter Qualitative Analysis工作站结合复方成分数据库,从复方提取物中共鉴别出化合物57个,其中从提取物中首次发现Glycine。从血清样本中共鉴定出入血成分15个。结论 运用UPLC-Q-TOF-MS技术,可对左归降糖解郁方化学成分进行快速且系统地分析鉴定,为左归降糖解郁方的质量控制、临床应用以及更深入的药效作用研究提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 左归丸 左归降糖解郁方 高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱 成分分析 含药血清 裂解规律
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血热出血模型大鼠血清中鲜地黄高效液相色谱分析 被引量：5
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作者 郜新莲 段红福 +2 位作者 崔瑛 冯静 杨云 《中医学报》 CAS 2011年第9期1067-1069,共3页
目的:对阴虚血热出血大鼠含鲜地黄血清进行分析,探索鲜地黄清热凉血药效的物质基础。方法:给予血热出血症模型大鼠鲜地黄,采集血清,用高效液相色谱法分析大鼠含药血清、正常血清以及鲜地黄药材的色谱,研究鲜地黄在血中移行成分以及鲜地... 目的:对阴虚血热出血大鼠含鲜地黄血清进行分析,探索鲜地黄清热凉血药效的物质基础。方法:给予血热出血症模型大鼠鲜地黄,采集血清,用高效液相色谱法分析大鼠含药血清、正常血清以及鲜地黄药材的色谱,研究鲜地黄在血中移行成分以及鲜地黄对大鼠血清中固有成分的影响。结果:在血热出血症模型大鼠含药血清中检测到了鲜地黄的有效成分——梓醇的色谱峰;且发现血清中和药材中有3种相同的共有成分;鲜地黄对模型大鼠血清中1种固有成分的升高有抑制作用。结论:鲜地黄中梓醇及3种未明成分可能是其清热凉血物质基础;鲜地黄对动物血清中固有成分代谢的影响可能是鲜地黄清热凉血药效的机制。 展开更多
关键词 鲜地黄 高效液相色谱法 血热出血证 含药血清
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中药对镍暴露氧化损伤抑制作用 被引量：5
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作者 吕晓云 蒲晓丽 +3 位作者 陈静 朱玉真 赵健雄 魏虎来 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期569-571,共3页
目的研究灌服中药扶正解毒汤（FJD）后兔血清对硫酸镍（NiSO4）暴露的人支气管上皮细胞（16HBE）自由基含量及8-羟基-2-脱氧鸟苷三磷酸酶（8-oxo-dGTPase）表达的影响。方法体外培养的16HBE细胞分别经NiSO4暴露及NiSO4加扶正解毒汤含药... 目的研究灌服中药扶正解毒汤（FJD）后兔血清对硫酸镍（NiSO4）暴露的人支气管上皮细胞（16HBE）自由基含量及8-羟基-2-脱氧鸟苷三磷酸酶（8-oxo-dGTPase）表达的影响。方法体外培养的16HBE细胞分别经NiSO4暴露及NiSO4加扶正解毒汤含药血清共同处理后,采用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）及实时荧光定量RT-PCR检测自由基含量及8-oxo-dGTPase表达的变化。结果NiSO4（800μmol/L）暴露的16HBE细胞,其自由基含量及8-oxo-dGTPase表达水平均高于NiSO4与扶正解毒汤（10%）共处理组细胞,P〈0.05~0.01,相对标准偏差（RSD）〉2%。结论8-oxo-dGTPase可作为镍暴露氧化应激的标记物;中药扶正解毒汤通过清除自由基,下调8-oxo-dGTPase的表达,对镍暴露氧化损伤具有显著的抑制作用。 展开更多
关键词 扶正解毒汤 含药血清 硫酸镍 8-羟基-2-脱氧鸟苷三磷酸酶 实时荧光定量RT—PCR 氧化应激
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补肾强筋胶囊含药血清对IL-1β刺激的人原代软骨细胞的影响 被引量：5
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作者 姚楠 陈能 +3 位作者 许学猛 黄雪君 蔡大可 刘文刚 《临床医学工程》 2017年第3期327-329,共3页
目的研究补肾强筋胶囊含药血清对IL-1β刺激的人原代软骨细胞的影响。方法采用IL-1β(10 ng/mL)刺激人原代软骨细胞,并且加入不同浓度的补肾强筋胶囊含药血清处理24 h。然后用格式试剂法和酶联免疫法分别检测软骨细胞上清液中NO和PGE2水... 目的研究补肾强筋胶囊含药血清对IL-1β刺激的人原代软骨细胞的影响。方法采用IL-1β(10 ng/mL)刺激人原代软骨细胞,并且加入不同浓度的补肾强筋胶囊含药血清处理24 h。然后用格式试剂法和酶联免疫法分别检测软骨细胞上清液中NO和PGE2水平,采用RT-q PCR检测软骨细胞COX-2、iNOS、MMP-1、MMP-13、TIMP-1 mRNA表达。结果补肾强筋胶囊含药血清可明显降低软骨细胞NO和PGE2水平,并显著降低COX-2、iNOS、MMP-1、MMP-13 mRNA表达,而对TIMP-1 mRNA表达无明显影响。结论补肾强筋胶囊含药血清对IL-1β刺激的人原代软骨细胞有一定保护作用,其作用机制与降低COX-2、iNOS、MMP-1、MMP-13 mRNA表达有关。 展开更多
关键词 补肾强筋胶囊含药血清 白介素-1Β 软骨细胞
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大黄牡丹汤含药血清对LPS刺激的小鼠肺巨噬细胞TLR4和MyD88表达的影响 被引量：4
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作者 孙燕妮 承解静 +3 位作者 杨晓燕 杨洁 王丽敏 刘军 《山东医药》 CAS 2014年第10期10-13,共4页
目的探讨大黄牡丹汤含药血清(以下简称含药血清)对脓毒症的治疗机制。方法体外培养小鼠肺巨噬细胞株RAW264.7并随机分为空白组,模型组,含药血清高、中、低浓度组,每组3个复孔。除空白组外,其余四组均予细菌脂多糖(LPS)5μg/mL刺激24 h,... 目的探讨大黄牡丹汤含药血清(以下简称含药血清)对脓毒症的治疗机制。方法体外培养小鼠肺巨噬细胞株RAW264.7并随机分为空白组,模型组,含药血清高、中、低浓度组,每组3个复孔。除空白组外,其余四组均予细菌脂多糖(LPS)5μg/mL刺激24 h,含药血清高、中、低浓度组分别同时给予高、中、低浓度的含药血清进行干预。干预后于37℃、5%CO2培养箱中培养24 h。分别采用半定量RT-PCR和Western blot法测定Toll样受体4(TLR4)及髓样分化因子88(MyD88)mRNA和蛋白表达。结果模型组TLR4和MyD88 mRNA和蛋白表达均显著高于空白组(P<0.01);含药血清中浓度组与高浓度组TLR4和MyD88表达无显著差异,但均显著低于模型组(P<0.01)。结论含药血清治疗脓毒症的机制可能为抑制TLR4和下游MyD88表达。 展开更多
关键词 大黄牡丹汤 含药血清 肺巨噬细胞 TOLL样受体4 髓样分化因子88
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