益气化瘀补肾方对脊髓型颈椎病患者退变椎间盘细胞ColⅠ与ColⅡ mRNA表达的影响 被引量：11

1

作者 李具宝 周泉 +9 位作者 赵永见 赵红云 李宁 莫文 张霆 侯炜 梁倩倩 许鹏 施杞 王拥军 《上海中医药大学学报》 CAS 2011年第5期61-65,共5页

目的:观察益气化瘀补肾方含药血清对脊髓型颈椎病患者退变椎间盘细胞ColⅠ、ColⅡmRNA表达的影响。方法:选择脊髓型颈椎病患者经手术摘除的椎间盘组织,采用组织块法培养原代细胞;以SPF级雄性SD大鼠制备药物血清。将传代第1代的退变椎间... 目的:观察益气化瘀补肾方含药血清对脊髓型颈椎病患者退变椎间盘细胞ColⅠ、ColⅡmRNA表达的影响。方法:选择脊髓型颈椎病患者经手术摘除的椎间盘组织,采用组织块法培养原代细胞;以SPF级雄性SD大鼠制备药物血清。将传代第1代的退变椎间盘细胞接种于96孔酶标板中,分为6组,分别予低(5%)、中(10%)、高(20%)浓度的益气化瘀补肾方含药血清及相应浓度生理盐水血清DMEM培养液培养。通过实时荧光定量PCR检测ColⅠ、ColⅡmRNA的表达。结果:不同浓度的益气化瘀补肾方血清对椎间盘细胞增殖有明显的促进作用;与生理盐水组比较,益气化瘀补肾方不同浓度含药血清干预后椎间盘细胞ColⅡmRNA表达水平上调、ColⅠmRNA表达水平下调,尤以中浓度更为明显(P<0.01)。结论:益气化瘀补肾方可能通过影响椎间盘组织胶原的变化而发挥防治脊髓型颈椎病椎间盘退变的作用。 展开更多

关键词 益气化瘀补肾方 脊髓型颈椎病 退变椎间盘细胞 colⅠ colⅱ

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益气活血方对非破裂型腰椎间盘突出退变髓核细胞ColⅡ、Aggrecan及TIMP-1 mRNA的影响 被引量：11

2

作者 周红海 姜宏 俞振翰 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期368-371,共4页

目的探讨益气活血方对人体非破裂型腰椎间盘突出退变髓核细胞中Ⅱ型胶原(ColⅡ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)及金属基质蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA的表达的影响。方法选择非破裂型腰椎间盘突出症(LDH)的住院患者经手术摘除的腰椎间盘组织... 目的探讨益气活血方对人体非破裂型腰椎间盘突出退变髓核细胞中Ⅱ型胶原(ColⅡ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)及金属基质蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)mRNA的表达的影响。方法选择非破裂型腰椎间盘突出症(LDH)的住院患者经手术摘除的腰椎间盘组织,采用组织块法培养原代细胞;以SPF级雄性SD大鼠制备药物血清。将传代第1代的退变髓核细胞分为3组,实验组分别予体积比为5%、10%的益气活血方血清DMEM培养液;对照组加入生理盐水血清DMEM培养液。通过Realtime PCR检测ColⅡ、Aggrecan、TIMP-1mRNA的表达。结果与生理盐水组比较,益气活血方血清可上调非破裂型腰椎间盘突出退变髓核细胞中ColⅡ、Aggrecan mRNA的表达(P<0.05),未检测出TIMP-1mRNA的变化。结论益气活血方可能通过影响非破裂型腰椎间盘突出髓核细胞中ColⅡ、Aggrecan含量,进而发挥防治非破裂型腰椎间盘突出髓核细胞的退变作用。 展开更多

关键词 益气活血方 非破裂型腰椎间盘突出症 退变髓核细胞 colⅱ AGGRECAN TIMP-1 mRNA

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山羊原代软骨细胞的分离培养与鉴定研究

3

作者 陈子同 徐小丽 +4 位作者 徐亮 陈欢 李利 张红平 曹家雪 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期197-201,206,共6页

为探究山羊原代软骨细胞的体外分离培养和鉴定方法,本实验采用胰蛋白酶与Ⅱ型胶原酶相结合的消化方法分离山羊原代软骨细胞。使用倒置显微镜观察并拍摄1、3、5、7 d共4个时期的细胞形态;利用血球计数板对细胞计数并绘制生长曲线;RT-qPC... 为探究山羊原代软骨细胞的体外分离培养和鉴定方法,本实验采用胰蛋白酶与Ⅱ型胶原酶相结合的消化方法分离山羊原代软骨细胞。使用倒置显微镜观察并拍摄1、3、5、7 d共4个时期的细胞形态;利用血球计数板对细胞计数并绘制生长曲线;RT-qPCR法检测山羊软骨细胞标志性基因;通过甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原免疫荧光染色法对软骨细胞进行鉴定。结果显示:细胞形态由透亮的圆点逐渐变为三角形、短梭形等形态,最终转变为体积较大,形态圆润的多边形;细胞计数结果显示,1~7 d细胞数量逐渐增加,7 d达到峰值,7~11d细胞数量逐渐减少。Acan和Col Ⅱ基因mRNA相对表达量随细胞培养时间的延长而降低,MMP13基因mRNA相对表达量逐渐升高。甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色结果均为阳性。由以上结果可知,本实验成功获得大量活力良好的山羊软骨细胞,并建立山羊软骨细胞体外分离及培养的方法,为进一步研究山羊软骨相关体外试验提供参考。 展开更多

关键词 软骨细胞 Acan colⅱ MMP13 体外培养

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益气逐瘀利水方对破裂型腰椎间盘突出退变髓核细胞Col Ⅱ及Aggrecan mRNA的影响 被引量：3

4

作者 俞振翰 姜宏 +4 位作者 刘建文 周红海 刘锦涛 李晓春 钱祥 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2014年第2期1-3,7,共4页

目的:探讨益气逐瘀利水方对人体破裂型腰椎间盘突出退变髓核细胞中Ⅱ型胶原(ColⅡ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA的表达的影响。方法:选择破裂型LDH的住院患者经手术摘除的腰椎间盘组织,采用组织块法培养原代细胞;以SPF级雄性SD大鼠制... 目的:探讨益气逐瘀利水方对人体破裂型腰椎间盘突出退变髓核细胞中Ⅱ型胶原(ColⅡ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA的表达的影响。方法:选择破裂型LDH的住院患者经手术摘除的腰椎间盘组织,采用组织块法培养原代细胞;以SPF级雄性SD大鼠制备药物血清。将传代第1代的退变髓核细胞分为3组,实验组分别予体积比为5%、10%的益气逐瘀利水方血清DMEM培养液;对照组加入生理盐水血清DMEM培养液。通过Realtime PCR检测ColⅡ、Aggrecan mRNA的表达。结果:与生理盐水组比较,体积比为10%的益气逐瘀利水方血清可上调破裂型腰椎间盘突出退变髓核细胞中ColⅡ、Aggrecan mRNA的表达。(P<0.05)结论:益气逐瘀利水方可能通过影响破裂型腰椎间盘突出髓核细胞中ColⅡ、Aggrecan含量,进而发挥防治破裂型腰椎间盘突出髓核细胞的退变作用。 展开更多

关键词 益气逐瘀利水方 破裂型腰椎间盘突出症 退变髓核细胞 colⅱ AGGRECAN MRNA

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阿仑膦酸钠体外对软骨细胞的影响及对兔前交叉韧带切断后关节软骨和软骨下骨的作用 被引量：2

5

作者 胡宏宇 张柳 +5 位作者 李彬 张尹娜 刘晓宁 田发明 程潭 王哲彦 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1474-1481,共8页

目的探讨阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)对受IL-1β干预后软骨细胞的影响,以及对前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transection,ACLT)后兔骨性关节炎模型关节软骨和软骨下骨的保护作用。方法取3月龄雄性日本大耳白兔关节软骨... 目的探讨阿仑膦酸钠(alendronate,ALN)对受IL-1β干预后软骨细胞的影响,以及对前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transection,ACLT)后兔骨性关节炎模型关节软骨和软骨下骨的保护作用。方法取3月龄雄性日本大耳白兔关节软骨采用酶消化法分离软骨细胞,并进行体外培养。取第3代软骨细胞随机分为3组:ALN组(A1组)及IL-1β组(B1组),采用含10ng/mL人重组IL-1β的DMEM完全培养液培养2d后,分别更换含或不含1×10-6mol/L ALN的DMEM完全培养液培养3d;空白组(C1组)细胞以DMEM完全培养液培养5d。取各组细胞行ColⅡ及MMP-13免疫细胞化学染色观察及实时RT-PCR检测。另取24只3月龄雄性日本大耳白兔,随机分为3组(n=8)。ACLT+ALN组(A2组)及ACLT组(B2组)制备ACLT模型,假手术组(C2组)以同法显露前交叉韧带后缝合切口。术后4d A2组以10μg/(kg·d)皮下注射浓度为25μg/mL的ALN,B2组和C2组予等量生理盐水。8周后处死动物行膝关节大体观察,取股骨内侧髁行组织学观察及ColⅡ及MMP-13免疫组织化学染色观察,对胫骨进行软骨下骨组织形态学分析。结果C1组软骨细胞胞浆中见ColⅡ免疫细胞化学染色表达呈强阳性,A1组呈阳性表达,B1组少见阳性显色。A1组积分吸光度(IA)值高于B1组(P<0.05),与C1组差异无统计学(P>0.05)。C1组软骨细胞胞浆中未见MMP-13免疫细胞化学染色阳性表达,A1组呈阳性表达,B1组呈强阳性表达。A1组IA值低于B1组(P<0.05),但高于C1组(P<0.05)。实时RT-PCR检测示A1组ColⅡmRNA表达高于B1组(P<0.05),与C1组差异无统计学意义(P>0.05);MMP-13mRNA表达低于B1组(P<0.05),但高于C1组(P<0.05)。体内实验8周后C2组膝关节面无溃疡,A2组膝关节面有少量溃疡,B2组关节面溃疡较多并有全层溃疡。A2组Mankin评分低于B2组(P<0.05),但高于C2组(P<0.05)。免疫组织化学染色见C2组关节软骨中ColⅡ蛋白表达呈强阳性,A2组呈阳性表达,B2组少见阳性显色;A2组IA值� 展开更多

关键词 骨性关节炎 阿仑膦酸钠 colⅱ MMP-13 兔

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沙苑子多糖促进兔半月板纤维软骨细胞增殖的作用机制研究 被引量：2

6

作者 沈骅睿 敖亮 +3 位作者 王立胜 汪国友 郝琦 李婷 《中国药房》 CAS 北大核心 2020年第9期1097-1102,共6页

目的:研究沙苑子多糖促进兔半月板纤维软骨细胞(以下简称"软骨细胞")增殖的作用机制。方法:分离1月龄新西兰大白兔软骨细胞。将软骨细胞分为正常对照组(PBS)、阳性对照组(硫酸氨基葡萄糖,10 mg/mL)和沙苑子多糖高、中、低(40... 目的:研究沙苑子多糖促进兔半月板纤维软骨细胞(以下简称"软骨细胞")增殖的作用机制。方法:分离1月龄新西兰大白兔软骨细胞。将软骨细胞分为正常对照组(PBS)、阳性对照组(硫酸氨基葡萄糖,10 mg/mL)和沙苑子多糖高、中、低(40、20、10mg/mL)剂量组,分组给药干预。采用光学显微镜观察软骨细胞的形态学特征;采用MTT法检测软骨细胞增殖抑制率,并用流式细胞术观察细胞周期;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测软骨细胞中Ⅱ型胶原蛋白(ColⅡ)、碱性磷酸酶蛋白(ALP)的表达水平;采用逆转录-聚合酶链式反应和Western blotting法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白2(BMP-2)mRNA及蛋白的表达水平。结果:软骨细胞培养72 h后,细胞融合成单层,多数呈现细长梭型外观。与正常对照组比较,阳性对照组和沙苑子多糖高、中、低剂量组软骨细胞的增殖抑制率、G1/G0期细胞百分比均显著降低(P<0.05),S期细胞百分比和ColⅡ、ALP蛋白表达水平及TGF-β1、BMP-2 mRNA及蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05)。与阳性对照组比较,沙苑子多糖高剂量组软骨细胞的增殖抑制率、G1/G0期细胞百分比均显著降低(P<0.05),S期细胞百分比和ColⅡ、ALP蛋白表达水平及TGF-β1、BMP-2 mRNA及蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05);沙苑子多糖低剂量组软骨细胞的增殖抑制率、G1/G0期细胞百分比均显著升高(P<0.05),S期细胞百分比和ColⅡ、ALP蛋白及TGF-β1、BMP-2 m RNA和蛋白的相对表达水平均显著降低(P<0.05);沙苑子多糖中剂量组上述指标差异均无统计学意义。结论:沙苑子多糖可促进软骨细胞增殖,降低G1/G0期细胞百分比,促进细胞向S期转化;其作用机制可能与上调TGF-β1、BMP-2 mRNA及蛋白表达,促进ColⅡ、ALP蛋白表达水平升高有关。 展开更多

关键词 沙苑子多糖 半月板 纤维软骨细胞 增殖 ⅱ型胶原蛋白 碱性磷酸酶蛋白 转化生长因子Β1 骨形态发生蛋白2 机制

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不同氟浓度对大鼠原代软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响 被引量：1

7

作者 朱志坚 于燕妮 陶欣 《贵州医药》 CAS 2015年第7期577-579,F0003,共4页

目的观察不同氟浓度对大鼠原代软骨细胞Ⅱ型胶原(ColⅡ)表达的影响,探明ColⅡ在染氟软骨细胞的表达意义。方法取1周龄健康SD大鼠,用机械-酶消化法分离膝关节软骨细胞,经甲苯胺蓝鉴定后,取第三代细胞将实验分为对照组和染氟组(5mg/L、10m... 目的观察不同氟浓度对大鼠原代软骨细胞Ⅱ型胶原(ColⅡ)表达的影响,探明ColⅡ在染氟软骨细胞的表达意义。方法取1周龄健康SD大鼠,用机械-酶消化法分离膝关节软骨细胞,经甲苯胺蓝鉴定后,取第三代细胞将实验分为对照组和染氟组(5mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L)五组,培养3d后,经MTT检测各组细胞活力,并采用Western blot、免疫组化检测各组细胞ColⅡ蛋白表达。结果NaF培养3d后,细胞活力在5mg/L、10mg/L组较正常组高,在40mg/L组较正常组低,ColⅡ蛋白的表达在10mg/L组较正常组高,在40mg/L组较正常组低,差异有有统计学意义(P<0.05)。结论低浓度的氟对大鼠原代软骨细胞具有促进增殖作用,而高浓度具有抑制增殖作用,其机制可能与ColⅡ的分泌有关。 展开更多

关键词 原代软骨细胞 氟化钠 ⅱ型胶原 细胞活力

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Ⅱ型胶原-透明质酸-软骨脱细胞基质制备组织工程软骨支架的实验研究 被引量：5

8

作者 蒋婷 杨泽龙 +2 位作者 李凌云 白倩 李瑞华 《西部医学》 2013年第8期1132-1135,共4页

目的探索Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,COLⅡ)-透明质酸(Hyaluronic acid,HA)-软骨脱细胞基质(Cartilageacellular extracellular matrix,CAEM)通过低温冷冻法制备组织工程软骨支架的可行性。方法将COLⅡ和HA及CAEM按15∶3∶45的比例混合,通过... 目的探索Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,COLⅡ)-透明质酸(Hyaluronic acid,HA)-软骨脱细胞基质(Cartilageacellular extracellular matrix,CAEM)通过低温冷冻法制备组织工程软骨支架的可行性。方法将COLⅡ和HA及CAEM按15∶3∶45的比例混合,通过低温冷冻干燥的方法制备组织工程软骨支架,测定其孔隙率、吸水率、降解率,检测支架的理化性能,并行HE染色及甲苯胺蓝染色观察支架结构情况。用CCK8法评价其细胞毒性及粘附性情况。结果 COLⅡ-HA-CAEM复合支架孔隙率为87.3%±3.7%,吸水率为1522.0%±29.3%,21天降解率为29.2%±2.4%,CCK8法检测结果显示,COLⅡ-HA-CAEM复合支架对细胞具有良好的粘附性,其生物学性能良好。结论 COLⅡ-HA-CAEM复合支架能为软骨细胞的生长和增殖提供优良的微环境,在组织工程软骨重建中具有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 组织工程支架 ⅱ型胶原 透明质酸 软骨脱细胞基质 低温冷冻干燥

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条件性敲除软骨组织中FGF9基因小鼠模型的建立 被引量：2

9

作者 翁梦佳 章筱悦 陈振琦 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2019年第5期412-417,共6页

目的:利用Cre-LoxP系统建立可调控的软骨组织条件性敲除成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)小鼠模型。方法:构建针对小鼠Fgf9基因2号外显子的重组载体,电穿孔转染胚胎干细胞(ES细胞)。选择药物G418和Ganc,筛选阳性ES... 目的:利用Cre-LoxP系统建立可调控的软骨组织条件性敲除成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor,FGF9)小鼠模型。方法:构建针对小鼠Fgf9基因2号外显子的重组载体,电穿孔转染胚胎干细胞(ES细胞)。选择药物G418和Ganc,筛选阳性ES细胞并进行PCR鉴定。利用显微注射将ES细胞注入C57BL/6J小鼠囊胚,移入假孕小鼠子宫,获得含Neo的flox杂合小鼠。该小鼠去Neo后,与ColⅡ-Cre转基因小鼠杂交,并以他莫昔芬诱导,其后代软骨细胞内flox纯合、Cre阳性小鼠的flox区域被敲除。结果:Fgf9基因flox杂合子小鼠无明显异常,可稳定繁殖。该flox小鼠与ColⅡ-Cre转基因小鼠交配后,成功建立条件性敲除软骨组织中Fgf9基因小鼠模型。结论:利用Cre-LoxP系统,可成功建立Fgf9基因条件性敲除小鼠模型,为后续研究FGF9在骨软骨发育及骨关节稳态维持中的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 FGF9 条件性基因敲除 colⅱ-Cre转基因小鼠

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Ⅱ型胶原微图案化对猪关节软骨细胞行为的影响

10

作者 李裕民 龚逸鸿 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2273-2280,共8页

【目的】明确调控生物材料表面拓扑结构对猪关节软骨细胞基础生长行为和功能的影响,为关节软骨组织缺损修复提供理论依据。【方法】利用食人鱼溶液(Piranha,H_2O_2∶H_2SO_4)对普通玻片进行氧化,以紫外光刻法制备具有不同尺度条带微图案... 【目的】明确调控生物材料表面拓扑结构对猪关节软骨细胞基础生长行为和功能的影响,为关节软骨组织缺损修复提供理论依据。【方法】利用食人鱼溶液(Piranha,H_2O_2∶H_2SO_4)对普通玻片进行氧化,以紫外光刻法制备具有不同尺度条带微图案的Si印模,经氧气等离子体处理和Ⅱ型胶原(COLⅡ)浸润后,通过微接触印刷(μCP技术)将COLⅡ固定在氧化玻片材料表面,将猪关节腔软骨细胞接种于微图案化的支架材料上,经37℃、5%CO_2培养箱培养后采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法和二乙酸荧光素(FDA)荧光染色法分别观察软骨细胞的增殖生长情况。【结果】经食人鱼溶液处理后玻片表面羟基化程度提高,亲水性明显增强。通过μCP技术能成功将COLⅡ印刷在羟基化玻片表面上,且条带均匀、整齐。将猪软骨细胞接种到构建的取向性COLⅡ微图案材料上进行培养,发现COLⅡ能为猪软骨细胞提供黏附位点,且取向性COLⅡ微图案对软骨细胞的增殖生长有促进作用,但不同尺度(100、200和300μm)线宽对软骨细胞的增殖生长存在明显差异,表现为线宽越宽,软骨细胞的增殖生长能力越弱。猪软骨细胞在COLⅡ微图案材料上生长状况良好,随着培养时间的延长,软骨细胞多呈多边形;其软骨细胞培养效果优于无规则的涂覆COLⅡ微图案材料。【结论】利用μCP技术成功构建的规整COLⅡ微米级拓扑结构对猪关节软骨细胞的黏附铺展、增殖行为有促进作用,且线宽尺度与软骨细胞增殖生长能力呈反比趋势。即通过人为调控生物材料的表面活性拓扑结构,在一定程度上能有效调控或影响关节软骨细胞的生长行为。 展开更多

关键词 猪 关节软骨细胞 ⅱ型胶原(colⅱ) 微图案 微接触印刷(μCP技术)

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白芍木瓜汤对碘乙酸所致大鼠骨性关节炎药效作用的实验研究 被引量：7

11

作者 俞光平 邓九零 +1 位作者 金王东 袁强 《中国中医药科技》 CAS 2018年第1期33-37,共5页

目的:观察白芍木瓜汤对碘乙酸诱导的大鼠骨性关节炎的药效作用,并初步探讨其可能机制。方法:取雄性SD大鼠50只,按体质量随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、白芍木瓜汤高、低剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠双... 目的:观察白芍木瓜汤对碘乙酸诱导的大鼠骨性关节炎的药效作用,并初步探讨其可能机制。方法:取雄性SD大鼠50只,按体质量随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、白芍木瓜汤高、低剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组大鼠双侧膝关节腔注射碘乙酸建立骨性关节炎模型。术后第2 d各组大鼠开始给予药物干预,连续6周,每周称量大鼠体质量,检测大鼠抓力。第6周末,各组大鼠麻醉,进行X-ray活体成像观察;心脏取血,分离血清,酶联免疫法检测各组大鼠血清中基质金属蛋白酶13(MMP-13)、软骨蛋白聚糖(Aggrecan)、II型胶原(Col II)的含量;截取膝关节,剔除皮肤与肌肉,EDTA脱钙后分别进行HE染色与SO染色,光镜下观察各组大鼠膝关节病理变化。结果:造模后6周,相比于正常对照组,模型组大鼠体质量、血清MMP-13、Col-II、Aggrean含量均出现显著性差异(P<0.01),膝关节影像学上表现出明显损伤,光镜下观察到明显的病理改变;给药6周后,高、低剂量的白芍木瓜汤对OA大鼠体质量、抓力的影响不明显,但相比于模型对照组,白芍木瓜高、低剂量组大鼠血清MMP-13含量均显著降低(P<0.01),Col-II、Aggrean含量均显著升高(P<0.01),膝关节影像学损伤与光镜下病理改变均得到明显改善。结论:白芍木瓜汤对碘乙酸诱导的大鼠骨性关节炎有良好的药效作用,其作用机制可能与抑制MMP-13产生,促进Aggrecan、Col-II合成有关,从而达到修复软骨有关。 展开更多

关键词 白芍木瓜汤 骨性关节炎 基质金属蛋白酶13 软骨蛋白聚糖 ⅱ型胶原 大鼠

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血清软骨代谢标志物水平与膝关节骨性关节炎患者病情严重程度的关系 被引量：3

12

作者 蒋淑娟 《临床医学研究与实践》 2019年第31期103-104,共2页

目的探讨血清Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)与Ⅹ型胶原α1链(COL10A1)水平与膝关节骨性关节炎(KOA)严重程度的关系。方法选取我院收治的96例KOA患者为KOA组,并按照双膝关节负重位X线平片KL分级分组,另选取同期健康体检者25例作为对照组。比较KOA各... 目的探讨血清Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)与Ⅹ型胶原α1链(COL10A1)水平与膝关节骨性关节炎(KOA)严重程度的关系。方法选取我院收治的96例KOA患者为KOA组,并按照双膝关节负重位X线平片KL分级分组,另选取同期健康体检者25例作为对照组。比较KOA各亚组患者入院时的关节炎状况;比较KOA各亚组患者及对照组的血清COL-Ⅱ、COL10A1水平。结果WOMAC骨关节炎指数评分随KL等级升高而升高(P<0.05);KOA组患者的血清COL-Ⅱ、COL10A1水平高于对照组(P<0.05);KL-2、KL-3级组血清COL-Ⅱ、COL10A1水平高于KL-1、KL-4级组及对照组,KL-4级组明显高于对照组(P<0.05)。结论血清COL-Ⅱ和COL10A1水平作为软骨代谢标志物,在KOA的早期检测中具有一定的诊断意义,结合影像学KL分级能对疾病进展作出更精准的预测。 展开更多

关键词 膝关节骨性关节炎 col-ⅱ col10A1

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益气养血方抗兔膝骨关节炎模型软骨退变的作用及机制研究 被引量：3

13

作者 陈永健 吴晶金 +2 位作者 钱富艳 赵杼沛 李兆福 《湖北中医药大学学报》 2017年第4期5-9,共5页

目的探讨益气养血方对兔膝骨关节炎(KOA)模型软骨细胞凋亡及血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Ⅱ型胶原蛋白(COL-Ⅱ)、人基质金属蛋白酶-13(MMP13)表达的影响,揭示其抗骨关节炎软骨退变的作用及机制。方法 40只日... 目的探讨益气养血方对兔膝骨关节炎(KOA)模型软骨细胞凋亡及血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、Ⅱ型胶原蛋白(COL-Ⅱ)、人基质金属蛋白酶-13(MMP13)表达的影响,揭示其抗骨关节炎软骨退变的作用及机制。方法 40只日本大耳白兔随机分为4组,即假手术组、KOA模型组、阳性药(双醋瑞因)组、益气养血方组各10只。石蜡切片HE染色观察软骨退变情况,TUNEL法检测软骨细胞凋亡,免疫组化检测COL-Ⅱ、MMP13的表达。结果益气养血方对KOA模型兔膝关节软骨退变具有一定抑制作用,能下调血清促炎细胞因子TNF-α产生水平(P<0.05),抑制软骨细胞凋亡;能下调软骨组织MMP-13蛋白的表达(P<0.01),上调软骨组织COL-Ⅱ胶原的表达(P<0.05),抑制软骨基质降解。结论益气养血方通过下调TNF-α、MMP-13蛋白表达,同时上调COL-Ⅱ胶原表达,抑制软骨细胞凋亡及细胞外基质降解,可能是益气养血方治疗骨关节炎的作用机制之一。 展开更多

关键词 骨关节炎 软骨退变 益气养血方 细胞凋亡 白细胞介素-1Β 肿瘤坏死因子-Α ⅱ型胶原蛋白 人基质金属蛋白酶-13

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维药买朱尼对犬种植体周围龈沟液中MMP-13及COL-Ⅱ水平影响的实验研究 被引量：1

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作者 姑则丽努尔.阿布都克力木 古丽再努.依不拉音 尼加提.吐尔逊 《西北国防医学杂志》 CAS 2019年第1期8-13,共6页

目的:探讨维药买朱尼对犬种植体周围龈沟液中Ⅱ型胶原酶(typeⅡcollagen,COL-Ⅱ)、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloprotease-13,MMP-13)的表达以及牙周指数变化的影响,为临床治疗种植体周围炎提供新的治疗方法。方法:选择9只健康雄性... 目的:探讨维药买朱尼对犬种植体周围龈沟液中Ⅱ型胶原酶(typeⅡcollagen,COL-Ⅱ)、基质金属蛋白酶-13(matrix metalloprotease-13,MMP-13)的表达以及牙周指数变化的影响,为临床治疗种植体周围炎提供新的治疗方法。方法:选择9只健康雄性比格犬建立比格犬种植体周围炎动物模型,建模成功后,随机分为3组:买朱尼组、抗生素组及对照组,每组3只。抗生素组喂服抗生素(阿莫西林胶囊和甲硝唑片),买朱尼组根据动物体质量灌服买朱尼,对照组灌服等量生理盐水,3组犬均给予上述干预措施1个月。并于即刻种植术后、诱导炎症后1个月、药物治疗后1个月监测种植体的改良菌斑指数(modified plaque index,mPLI)、改良龈沟出血指数(modified sulcus bleeding index,mSBI)、探诊深度(probing depth,PD)、种植体龈沟液(peri-implant crevicular fluid,PICF)的量等牙周指标及COL-Ⅱ、MMP-13的变化情况,进一步分析买朱尼对种植体周围炎的疗效。结果:与对照组相比,给予干预治疗后,抗生素组和买朱尼组mSBI、mPLI、PD、PICF、COL-Ⅱ、MMP-13等指标均明显改善(P<0.01),但抗生素组和买朱尼组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:维药买朱尼对犬种植体周围龈沟液中COL-Ⅱ、MMP-13有抑制作用,此药治疗种植体周围炎效果较好。 展开更多

关键词 种植体周围炎 买朱尼 ⅱ型胶原酶 基质金属蛋白酶-13 牙周指数

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跌打通痹膏对兔膝骨关节软骨细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达的影响 被引量：10

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作者 龚志贤 卢敏 +3 位作者 罗凌威 范杰 邝高艳 银丝丝 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2016年第9期1-4,10,共5页

目的:研究跌打通痹膏对兔膝骨关节炎关节软骨细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达的影响,探讨跌打通痹膏干预软骨基质降解的作用机制。方法:新西兰兔60只随机分成空白组、假手术组、模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组,每组12只。空... 目的:研究跌打通痹膏对兔膝骨关节炎关节软骨细胞MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达的影响,探讨跌打通痹膏干预软骨基质降解的作用机制。方法:新西兰兔60只随机分成空白组、假手术组、模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组,每组12只。空白组不做任何处理,模型组、跌打通痹膏组、骨通贴组采用改良Hulth造模法,假手术组打开关节腔后不做处理,直接缝合。正常组、假手术组不予处理,模型组、跌打通痹膏组、骨痛贴组分别用胶带、跌打通痹膏、骨痛贴膏贴敷治疗4周。术后第5周各组随机选择1只兔处死验证造模,进行膝关节软骨形态肉眼观察和切片光镜观察,检测关节软骨中MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达。结果:1)膝关节软骨形态肉眼观察和切片光镜观察:模型组与空白组有差异,跌打通痹膏组、骨通贴组与模型组比较有差异,跌打通痹膏组与骨通贴组比较无差异。2)MMP-1,MMP-3,MMP-13和COL-Ⅱ的mRNA表达检测:模型组与空白组比较,MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达显著提高,差异有统计学意义(P<0.01),COL-ⅡmRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);跌打通痹膏组、骨通贴组与模型组比较,MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),COL-ⅡmRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);跌打通痹膏组与骨通贴组比较,MMP-1,MMP-3,MMP-13及COL-Ⅱ的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1)跌打通痹膏和骨通贴对KOA均有治疗作用,可延缓KOA的病程,且两者间差异无统计学意义。2)跌打通痹膏通过抑制MMP-1,MMP-3及MMP-13的mRNA表达,减缓COL-Ⅱ降解,从而有效保护膝骨关节炎模型兔关节软骨,延缓关节软骨退变。 展开更多

关键词 膝骨性关节炎 跌打通痹膏 基质金属蛋白酶 ⅱ型胶原

原文传递

正常与退变髓核细胞形态学及Ⅱ型胶原蛋白的定量分析 被引量：5

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作者 王祺 任龙韬 +1 位作者 卫成刚 何君仁 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第15期2363-2368,共6页

背景:椎间盘退变导致椎间隙狭窄的主要变化是髓核细胞表达软骨特异性基因产物蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的减少。目的:对成人的正常与退变椎间盘髓核细胞Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光染色及番红O染色进行定量观察比较。方法:取成人脊柱侧弯患者与椎间... 背景:椎间盘退变导致椎间隙狭窄的主要变化是髓核细胞表达软骨特异性基因产物蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的减少。目的:对成人的正常与退变椎间盘髓核细胞Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光染色及番红O染色进行定量观察比较。方法:取成人脊柱侧弯患者与椎间盘突出症患者自愿者术中取出的废弃髓核组织各3例,经培养后每个患者各测量26个细胞,正常组和退变组分别测量78个细胞。对正常与退变椎间盘髓核细胞进行番红"O"染色并行灰度及测定细胞内Ⅱ型胶原蛋白行免疫荧光染色定量测定。结果与结论:免疫荧光染色显示:退变椎间盘髓核细胞仅轻度染色,染色模糊,其呈类圆形,纺锤形,梭形及不规则形,其内仅有极少量荧光颗粒;Ⅱ型胶原表达较正常髓核细胞降低显著(P<0.05)。番红O染色显示:退变的髓核细胞肿胀,细胞核肿胀染色略淡,细胞突起延长,胞浆染色不匀伴有空泡,部分细胞崩解,细胞分布零散,混乱,可见成片坏死区。与正常髓核细胞图像灰度值相比差异无显著性意义(P>0.05)。结果表明退变的椎间盘髓核细胞减少、部分凋亡,其细胞内Ⅱ型胶原蛋白含量较正常髓核细胞显著减少。 展开更多

关键词 组织构建 骨组织工程 椎间盘 髓核细胞 ⅱ型胶原 番红O染色

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miR-153-3p对于腰退行性病变调节机制的初步探讨

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作者 庾珊 肖林 +5 位作者 龚东平 梁楼峰 梁安伟 许夏懿 林杰 梁华新 《昆明医科大学学报》 CAS 2023年第8期53-58,共6页

目的 初步探讨H_(2)O_(2)对于腰椎髓核细胞的影响及miR-153-3p对于腰退行性病变的调节机制。腰椎间盘退变(Lumbar disc degeneration,LDD)是导致下腰痛的主要因素。髓核(nucleus pulposus,NP)细胞异常增殖或过度凋亡是LDD中最明显的细... 目的 初步探讨H_(2)O_(2)对于腰椎髓核细胞的影响及miR-153-3p对于腰退行性病变的调节机制。腰椎间盘退变(Lumbar disc degeneration,LDD)是导致下腰痛的主要因素。髓核(nucleus pulposus,NP)细胞异常增殖或过度凋亡是LDD中最明显的细胞和生化变化之一。方法 分别采用CCK8检测对照组及H_(2)O_(2)组细胞活力,流式检测两组细胞活性氧及线粒体膜电位,另采用qPCR检测上述两组的基质金属蛋白酶3(MMP3)、Nrf2、miR-153-3p、Ⅱ型胶原(COL-Ⅱ)表达含量。结果 经H_(2)O_(2)处理的腰椎髓核细胞活力下降、线粒体膜电位下降比例较对照组减少;qPCR检测对照组、H_(2)O_(2)组的miR-153-3p、COL-Ⅱ、MMP3、Nrf2表达含量,结果提示对照组、H_(2)O_(2)组Nrf2表达量差异无统计学意义(P> 0.05),H_(2)O_(2)组的miR-153-3p、MMP3表达量较对照组减少,而其COL-Ⅱ表达量较对照组降低且差异有统计学意义(P <0.05)。Westernblot检测对照组、inhibitor-NC组及nhibitor组的Nrf2表达含量,inhibitor组胞质及胞核中的Nrf2表达量升高,分别与对照组、inhibitor-NC组相比,有统计学差异(P <0.05);inhibitor-NC组胞质及胞核中的Nrf2表达量与对照组相比,差异无统计学意义。结论 抑制miR-153-3p表达,可上调腰椎髓核细胞Nrf2表达水平,提示miR-153-3p参与存进LDD进程的过程可能与其调控Nrf2表达、调节线粒体自噬过程有关。 展开更多

关键词 腰椎退行性病变 基质金属蛋白酶3 NRF2 miR-153-3p ⅱ型胶原

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大鼠骨骼肌急性拉伤修复过程中MHC-Ⅱ和COL-Ⅰ、COL-Ⅲ变化的研究 被引量：1

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作者 廖远朋 《成都体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2011年第9期65-68,共4页

目的:通过研究大鼠骨骼肌急性拉伤修复过程中MHC-Ⅱ和COL-Ⅰ、COL-Ⅲ的变化,了解拉伤愈合过程中肌纤维再生过程及纤维化过程。方法:将56只SD大鼠分为对照组、即刻组、第1、2、3、4、5周组,造成腓肠肌急性拉伤模型后对各组进行取材并检测... 目的:通过研究大鼠骨骼肌急性拉伤修复过程中MHC-Ⅱ和COL-Ⅰ、COL-Ⅲ的变化,了解拉伤愈合过程中肌纤维再生过程及纤维化过程。方法:将56只SD大鼠分为对照组、即刻组、第1、2、3、4、5周组,造成腓肠肌急性拉伤模型后对各组进行取材并检测MHC-Ⅱ和COL-Ⅰ、COL-Ⅲ。结果:MHC-Ⅱ水平第1周降到最低,第2周开始增加,第3周恢复正常;Col-Ⅰ水平第1周降到最低,随后逐渐增加,在第3周超过正常,持续到第5周;Col-Ⅲ从第1周开始上升,第3周达到峰值,随后逐渐下降。结论:骨骼肌急性拉伤后,骨骼肌的再生过程约在损伤1周后开始,伤后3周达到高峰,并持续5周以上。纤维化过程在损伤后1周以内开始,并持续到5周以后。其中Col-Ⅲ的水平恢复早;Col-Ⅰ的恢复较晚,但在高水平维持时间更长。 展开更多

关键词 骨骼肌拉伤 MHC-ⅱ col-Ⅰ col-Ⅲ

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