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Apocynin通过TGF-β1/Smad信号通路对脂多糖心肌纤维化小鼠的作用及其对ColⅠa1、ColⅢa1的影响 被引量：4
1
作者 张忠锋 刘鹏 原建华 《中国循证心血管医学杂志》 2019年第2期234-238,共5页
目的探讨Apocynin通过TGF-β1/Smad信号通路对脂多糖(LPS)心肌纤维化(MF)小鼠的作用及其对ColⅠa1、ColⅢa1的影响。方法将40只C57BL/6雄性小鼠随机分成正常对照组、Apocynin对照组、MF模型组和Apocynin干预组(n=10)。连续4周,每周一次... 目的探讨Apocynin通过TGF-β1/Smad信号通路对脂多糖(LPS)心肌纤维化(MF)小鼠的作用及其对ColⅠa1、ColⅢa1的影响。方法将40只C57BL/6雄性小鼠随机分成正常对照组、Apocynin对照组、MF模型组和Apocynin干预组(n=10)。连续4周,每周一次腹腔注射LPS(10 mg/kg)的方法建立心肌纤维化模型。Apocynin干预组则于LPS(10 mg/kg)处理前0.5 h连续4周每周一次腹腔注射Apocynin(10 mg/kg)。各组小鼠于4周末颈椎脱臼处死后,心肌组织天狼星红染色检测心肌纤维化程度,采用免疫组织化学法检测各组小鼠心肌组织中TGF-β1,Smad2/3,p-Smad 2/3蛋白相对表达量;采用蛋白印记法检测小鼠心肌组织中ColⅠa1、ColⅢa1蛋白的表达量。结果 Apocynin对照组较正常对照组心肌组织胶原面积分数以及TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达量和纤维化因子ColⅠa1、ColⅢa1表达量差异无统计学意义(P>0.05);MF模型组较正常对照组心肌组织胶原面积分数以及TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达量和纤维化因子ColⅠa1、ColⅢa1表达量增加(P<0.01);Apocynin干预组较MF模型组心肌组织胶原面积分数以及TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达量和纤维化因子ColⅠa1、ColⅢa1表达量降低(P<0.01)。结论 Apocynin通过TGF-β1/Smad信号通路介导了纤维化因子ColⅠa1、ColⅢa1蛋白的下调,从而减轻了LPS诱导的小鼠心肌纤维化。 展开更多
关键词 APOCYNIN 心肌纤维化 TGF-Β1/SMAD信号通路 colⅰa1 colⅢa1
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沙利度胺对组胺活化后人真皮成纤维细胞胶原蛋白表达及其调节因子的影响
2
作者 白艳芝 王卿 +5 位作者 郭兵申 王爱学 张丽华 薛菲 李素月 李玉平 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1251-1256,共6页
目的 研究沙利度胺对组胺活化后正常人真皮成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白A1 (COLⅠA1)表达及调节因子TGF-β1、MMP-1、TIMP-1 mRNA表达的影响,初步探讨沙利度胺对细胞外相关基质蛋白的抑制作用,以了解其抗真皮纤维化的潜在作用。方法 使用第4... 目的 研究沙利度胺对组胺活化后正常人真皮成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白A1 (COLⅠA1)表达及调节因子TGF-β1、MMP-1、TIMP-1 mRNA表达的影响,初步探讨沙利度胺对细胞外相关基质蛋白的抑制作用,以了解其抗真皮纤维化的潜在作用。方法 使用第4代正常人真皮成纤维细胞用于试验。细胞分为空白对照组、沙利度胺组、组胺组及组胺+沙利度胺组,分别用DMEM培养基、10μmol/L沙利度胺、100μmol/L组胺及100μmol/L组胺+10μmol/L沙利度胺处理成纤维细胞,提取各组细胞RNA,荧光定量PCR法检测COLⅠA1及TGF-β1、MMP-1、TIMP-1 mRNA表达,Western-blotting分析COLⅠA1蛋白水平表达。提取各组细胞上清液,用羟脯氨酸比色法检测细胞羟脯氨酸含量。结果 组胺刺激正常人真皮成纤维细胞后,COLⅠA1 mRNA及蛋白表达和羟脯氨酸分泌量较空白对照均升高(P<0.05);沙利度胺单独作用于成纤维细胞后,COLⅠA1 mRNA表达较空白对照降低(P<0.05),而羟脯氨酸分泌量差异无统计学意义(P>0.05);沙利度胺作用于组胺刺激后的成纤维细胞、COLⅠA1 mRNA的表达及羟脯氨酸分泌量较前者(未经组胺处理组)显著降低,且沙利度胺对组胺刺激后的成纤维细胞COLⅠA1mRNA表达抑制率(85.55±3.07)%高于未用组胺处理的抑制率(35.25±2.01)%。TGF-β1、MMP-1、TIMP-1 mRNA表达的结果显示:与空白对照组比较,组胺处理组TGF-β1、MMP-1 mRNA表达升高(P<0.05),但TIMP-1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);沙利度胺组较空白对照组比较TGF-β1、TIMP-1 mRNA表达降低,MMP-1 mRNA表达升高(P<0.05);而沙利度胺作用于经组胺刺激后的成纤维细胞TGF-β1、TIMP-1 mRNA较组胺组降低,MMP-1 mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论 10μmol/L沙利度胺能抑制经组胺活化后COLⅠA1 mRNA及蛋白水平的表达和羟脯氨酸的分泌量,同时抑制胶原蛋白产生的正向调节因子TGF-β1、TIMP-1 mRNA表达、促进负向调节因子MMP-1表达。 展开更多
关键词 沙利度胺 组胺 成纤维细胞 羟脯氨酸 ⅰ型胶原蛋白A1 TGF-β1 基质金属蛋白酶-1(MMP-1) 基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)
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稳定转染COL1 A1-EGFP基因的ROS17/2.8细胞株的建立 被引量：2
3
作者 戴钟铨 丁柏 +2 位作者 李莹辉 张玉国 刘芃芃 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期107-110,共4页
目的构建稳定表达由COL1A1启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的ROS1 7/2 .8细胞株。方法用PCR方法从大鼠基因组DNA中扩增出长为 3.6Kb的COL1A1 (Ⅰ型胶原α1链基因 )启动子 ,并克隆到T载体 ;然后将COL1A1启动子分段酶切 ,获得不同... 目的构建稳定表达由COL1A1启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的ROS1 7/2 .8细胞株。方法用PCR方法从大鼠基因组DNA中扩增出长为 3.6Kb的COL1A1 (Ⅰ型胶原α1链基因 )启动子 ,并克隆到T载体 ;然后将COL1A1启动子分段酶切 ,获得不同长度的启动子片段 ;与报告基因EGFP相连接 ,构建成真核表达载体 ;随后转染ROS1 7/2 .8细胞系 ,再用G41 8筛选。结果得到了稳定转染COL1A1 EGFP基因的ROS1 7/2 .8细胞株。结论　这些细胞株的建立为研究微重力对COL1A1启动子活性及成骨相关基因表达的影响奠定基础。 展开更多
关键词 失重模拟 启动子 成骨细胞 col ⅰα1 ROS17/2.8 细胞株 基因表达
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模拟失重条件下骨形态发生蛋白-2对大鼠骨肉瘤成骨样细胞基因表达的影响 被引量：9
4
作者 王冰 张舒 吴兴裕 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期176-179,共4页
目的观察回转器模拟失重条件下骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )对大鼠骨肉瘤成骨样细胞 (ROS1 7/ 2 .8)基因表达的影响。方法在 1G和回转器模拟失重条件下对ROS1 7/ 2 .8细胞进行培养 ,培养液中含5 0 0ng/ml的BMP 2。在实验的 2 4、48和 72h... 目的观察回转器模拟失重条件下骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )对大鼠骨肉瘤成骨样细胞 (ROS1 7/ 2 .8)基因表达的影响。方法在 1G和回转器模拟失重条件下对ROS1 7/ 2 .8细胞进行培养 ,培养液中含5 0 0ng/ml的BMP 2。在实验的 2 4、48和 72h提取细胞总RNA ,进行反转录PCR ,检测Ⅰ型胶原α1链(COL Ⅰα1 )及碱性磷酸酶 (ALP)mRNA的表达 ,并计算与内参照 β -肌动蛋白 ( β actin)mRNA水平的比值。结果BMP 2诱导组的COL Ⅰα1mRNA表达在 2 4h和 48h显著高于无BMP 2组 (P <0 .0 1 ) ,ALPmRNA水平在 48h和 72h显著高于无BMP 2组 (分别为P <0 .0 1 ,P <0 .0 5 ) ;BMP 2诱导 48h后模拟失重组的COL Ⅰα1mRNA水平显著低于 1G对照组 (P <0 .0 1 ) ,模拟失重 48h和 72h后ALPmRNA表达显著低于 1G对照组 (P <0 .0 1 )。结论BMP 2可促进大鼠骨肉瘤成骨样细胞的分化相关基因的表达 ,在模拟失重条件下细胞对BMP 2的促分化作用的反应性下降。 展开更多
关键词 失重模拟 骨肉瘤成骨样细胞 ⅰ型胶原α1链 碱性磷树酸酶 基因表达
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