中华眼镜蛇毒诱导HL-60细胞凋亡及其机制探讨 被引量：14

1

作者 叶春玲 张海伟 +4 位作者 罗英儒 任先达 郑佩娥 刘建军 李红良 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期177-180,共4页

目的　观察中华眼镜蛇毒体外对白血病细胞凋亡的影响 ,并探讨其可能的作用机制。方法　本研究采用血清药理学方法 ,以人白血病细胞HL 60细胞为靶细胞 ,通过流式细胞仪分析、DNA片段凝胶电泳、免疫组织化学 (S P法 )观察中华眼镜蛇毒兔... 目的　观察中华眼镜蛇毒体外对白血病细胞凋亡的影响 ,并探讨其可能的作用机制。方法　本研究采用血清药理学方法 ,以人白血病细胞HL 60细胞为靶细胞 ,通过流式细胞仪分析、DNA片段凝胶电泳、免疫组织化学 (S P法 )观察中华眼镜蛇毒兔血清体外对细胞凋亡的诱导作用及癌基因表达的影响。结果　经DNA电泳、流式细胞仪分析显示 :中华眼镜蛇毒兔血清与HL 60细胞共同培养 48h可诱导其细胞凋亡增加 ,bcl 2、c myc基因蛋白表达下调。结论　中华眼镜蛇毒兔血清体外抑制HL 60细胞增殖可能与其诱导细胞凋亡及使细胞bcl 2、c 展开更多

关键词 中华眼镜蛇毒 白血病 细胞凋亡 HL-60细胞

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中华眼镜蛇毒口服血清制剂对HepG2细胞凋亡的影响 被引量：11

2

作者 李红良 任先达 +2 位作者 罗英儒 叶春玲 张海伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期199-200,共2页

目的 :观察中华眼镜蛇毒口服血清制剂对人肝癌细胞凋亡的影响。方法 :HE染色、TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、免疫组化。结果 :中华眼镜蛇毒口服血清制剂以剂量依赖方式显著诱导HepG2细胞的凋亡。可见 :细胞核浓缩 ,细胞体积缩小 ... 目的 :观察中华眼镜蛇毒口服血清制剂对人肝癌细胞凋亡的影响。方法 :HE染色、TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、免疫组化。结果 :中华眼镜蛇毒口服血清制剂以剂量依赖方式显著诱导HepG2细胞的凋亡。可见 :细胞核浓缩 ,细胞体积缩小 ;TUNEL阳性细胞明显增多 ;DNA呈现典型“梯形”变化 ;c -jun ,c-myc基因表达明显升高。结论 :中华眼镜蛇毒口服血清制剂诱导人肝癌细胞的凋亡 ,可能与c -jun ,c-myc基因的表达上调有关。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒液类 免疫组织化学 细胞凋亡 肝癌 化疗

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中华眼镜蛇毒血清抑制HL60细胞增殖及诱导凋亡的实验研究 被引量：10

3

作者 罗英儒 叶春玲 +2 位作者 任先达 李红良 钟玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期291-293,共3页

目的　探讨中华眼镜蛇毒血清体外对白血病细胞系(HL6 0 )的抑制作用及其机制。方法　以人粒细胞白血病细胞系 (HL6 0 )为靶细胞 ,观察口服中华眼镜蛇毒血清对肿瘤细胞增殖的影响 ,并采用DNA片断凝胶电泳、流式细胞仪分析药物体外诱导细... 目的　探讨中华眼镜蛇毒血清体外对白血病细胞系(HL6 0 )的抑制作用及其机制。方法　以人粒细胞白血病细胞系 (HL6 0 )为靶细胞 ,观察口服中华眼镜蛇毒血清对肿瘤细胞增殖的影响 ,并采用DNA片断凝胶电泳、流式细胞仪分析药物体外诱导细胞凋亡情况。结果　中华眼镜蛇毒血清在体外显著抑制HL6 0细胞的生长 ,其抑制作用随着剂量的加大而增强 ,高剂量 (7 5g·L-1)的抑制效果相近于阿霉素(5mg·L-1) ,和空白对照组比较差异有显著性。经DNA电泳、流式细胞仪分析显示中华眼镜蛇毒血清与HL6 0细胞共同培养可诱导其发生细胞凋亡。结论　中华眼镜蛇毒血清体外能显著抑制HL6 0细胞的生长 ,此作用可能与诱导白血病细胞发生凋亡有密切关系。 展开更多

关键词 中华眼镜蛇毒 白血病 细胞凋亡

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眼镜蛇毒因子清除补体对大鼠异种心脏移植超急性排斥反应的影响 被引量：8

4

作者 陈刚 陈实 +2 位作者 孙黔云 王婉瑜 熊郁良 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期263-265,共3页

目的　探讨眼睛蛇毒因子 (CVF)对血清总补体活性及对豚鼠到大鼠异种心脏移植超急性排斥反应的影响。方法　 1 5只正常大鼠随机分成 3组 ,按组分别一次性静脉给予 2 0、50、1 0 0 μg/kg的CVF ,检测不同时间点的补体活性 ;在豚鼠到大鼠... 目的　探讨眼睛蛇毒因子 (CVF)对血清总补体活性及对豚鼠到大鼠异种心脏移植超急性排斥反应的影响。方法　 1 5只正常大鼠随机分成 3组 ,按组分别一次性静脉给予 2 0、50、1 0 0 μg/kg的CVF ,检测不同时间点的补体活性 ;在豚鼠到大鼠异位心脏移植前 2 4h静脉给予CVF50 μg/kg,观察CVF对异种心脏移植超急性排斥反应的影响。结果　在给予CVF后 6h ,3个剂量组的血清总补体活性均显著降低 ,3个组用药后均未见明显毒副反应。使用CVF的实验组 ,移植的异种心脏存活时间显著延长 ,平均达 56 .1 3h ,对照组仅为 0 .1 9h(P <0 .0 0 1 ) ,病理检查结果证实实验组均未发生超急性排斥反应 ,仅见延迟性异种排斥反应 (DXR)的病理特征 ,对照组均见超急性排斥反应的病理特征 ,且总补体活性较术前有明显下降。结论　眼镜蛇毒因子有良好的降低大鼠补体活性的作用 ,且副作用不明显 ;使用眼镜蛇毒因子可克服豚鼠到大鼠的异种心脏移植超急性排斥反应的发生。 展开更多

关键词 异种移植 心脏移植 眼镜蛇毒液类 移植物排斥 补体灭活剂

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福建产舟山眼镜蛇毒细胞毒素的快速分离纯化及鉴定 被引量：9

5

作者 张明芳 许云禄 刘广芬 《福建医科大学学报》 2004年第1期1-4,共4页

目的　从舟山眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素 (CTX) ,并鉴定其理化性质。　方法　采用 SP- SephadexC- 2 5阳离子交换色谱及 Sephasil Peptide C1 8反相高效液相色谱法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化 CTX,SDS- PAGE(Tris- Tricine系统 )鉴定纯度... 目的　从舟山眼镜蛇毒中分离纯化细胞毒素 (CTX) ,并鉴定其理化性质。　方法　采用 SP- SephadexC- 2 5阳离子交换色谱及 Sephasil Peptide C1 8反相高效液相色谱法从舟山眼镜蛇毒中分离纯化 CTX,SDS- PAGE(Tris- Tricine系统 )鉴定纯度 ,Edman降解法测定 N端氨基酸序列。　结果　粗毒经阳离子交换色谱 ,得到 1 4个蛋白峰 ,其中第 ～ 峰具 CTX活性 ;再分别经反相色谱纯化 ,得到 4个 CTX,总得率为 32 .4 8% ;SDS- PAGE显示为均一蛋白 ,分子量依次为 :7.2 8,7.33,7.2 4和 7.38k D;测定它们 N端 2 0个氨基酸序列。　结论　采用阳离子交换和反相高效液相色谱可快速、高效地从眼镜蛇毒中获得 4个 展开更多

关键词 眼镜蛇毒液类 细胞毒素类 色谱法 高压液相 色谱法 离子交换 氨基酸序列 阳离子

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中华眼镜蛇毒组分C与传统TACE化疗药体外抑制人肝癌细胞株作用的差异 被引量：6

6

作者 刘慰 王敏 +4 位作者 管锦霞 余清声 林振桃 曾耀英 胡以则 《广州医学院学报》 2000年第2期1-6,共6页

目的 :研究中华眼镜蛇毒组分C(FractionCfromNajaNajaActraVenom ,FC)体外对人肝癌细胞株的细胞毒作用和机理 ,并与传统肝动脉插管栓塞 灌注化疗 (TranscatheterArterialChemoembolization ,TACE)药进行比较。方法 :应用MTT法、流式细... 目的 :研究中华眼镜蛇毒组分C(FractionCfromNajaNajaActraVenom ,FC)体外对人肝癌细胞株的细胞毒作用和机理 ,并与传统肝动脉插管栓塞 灌注化疗 (TranscatheterArterialChemoembolization ,TACE)药进行比较。方法 :应用MTT法、流式细胞仪等方法 ,观察FC对人肝癌细胞株 (Bel 74 0 2 )、人支气管上皮细胞株 (HBE16 )及人羊膜细胞株 (HAM )的细胞毒作用、量效关系、凋亡率等 ,并与 5 氟尿嘧啶 (5 Fu)、丝裂霉素 (MMC)、阿霉素 (ADM )等对上述细胞的细胞毒作用进行比较。结果 :FC对人肝癌细胞有明显的抑制作用 ,其 2 4及 4 8h的IC50 分别为 4 .34和 3.96 μg ml,且呈良好的量效关系 ,而正常人支气管上皮细胞 (HBE16 )的IC50 则分别高达10 4 6和 11.82 μg ml,两细胞株间存在差异显著性 (P <0 .0 1)。FC还能诱导肝癌细胞凋亡 ,凋亡率随浓度升高而增加。结论 :在本实验中 ,FC能有效抑制肝癌细胞株的生长 ,抑制作用与浓度呈正相关 ,且能诱导肝癌细胞凋亡 ,与传统TACE化疗药相比较 ,FC是有效的、能选择性抑制肝癌细胞生长的新型抗癌药物。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒 肝肿瘤 组份C 细胞毒 化疗

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眼镜蛇毒因子对大鼠油酸型肺损伤的保护作用 被引量：4

7

作者 叶春玲 黄守坚 +1 位作者 孙家钧 吴楚坤 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期50-51,共2页

采用大鼠油酸型呼吸窘迫综合征的病理模型（ｉｖ油酸０．１ｍＬｋｇ－１）．实验前２４ｈｉｐ眼镜蛇毒因子（ＣＶＦ）１．０ｍｇｋｇ－１耗竭体内补体，能显著对抗油酸引起的肺损伤：使支气管肺泡灌洗液中的细胞计数从（１５±１１... 采用大鼠油酸型呼吸窘迫综合征的病理模型（ｉｖ油酸０．１ｍＬｋｇ－１）．实验前２４ｈｉｐ眼镜蛇毒因子（ＣＶＦ）１．０ｍｇｋｇ－１耗竭体内补体，能显著对抗油酸引起的肺损伤：使支气管肺泡灌洗液中的细胞计数从（１５±１１）×１０１０Ｌ－１下降至（６±４）×１０１０Ｌ－１，蛋白质含量从５．２±１．９ｇＬ－１降至２．４±１．３ｇＬ－１；减少氧自由基的产生，血清超氧化物歧化酶活性下降和丙二醛含量升高明显受到抑制；降低溶酶体酶的释放，表现为血清β－葡萄糖醛酸酶活性降低；肺病理形态学的改变减轻，其中肺水肿程度，透明膜和肺动脉血栓形成均明显减轻．结果表明补体可能在油酸性肺损伤中起着重要作用，ＣＶＦ耗竭补体能显著减轻肺损伤． 展开更多

关键词 眼镜蛇毒液 蛇毒因子 油酸 肺水肿

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分离纯化眼镜蛇蛇毒因子的一种经济方法 被引量：6

8

作者 任先达 黄守坚 +1 位作者 吴楚坤 孙家钧 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期271-275,共5页

将较大批量的眼镜蛇粗毒依次通过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５，ＤＥＡＥ－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅＤＥ５２和Ｂｉｏ－ＧｅｌＰ２００柱层析可高效地分离纯化眼镜蛇蛇毒因子（ＣＶＦ），５０ｇ粗毒可制备电泳纯ＣＶＦ９６０ｍｇ，产率大大高于既... 将较大批量的眼镜蛇粗毒依次通过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５，ＤＥＡＥ－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅＤＥ５２和Ｂｉｏ－ＧｅｌＰ２００柱层析可高效地分离纯化眼镜蛇蛇毒因子（ＣＶＦ），５０ｇ粗毒可制备电泳纯ＣＶＦ９６０ｍｇ，产率大大高于既往文献报道，整个制备过程仅需时数日。通过ＳＤＳ聚内烯酰胺凝胶电泳测得其分子量为２２６０００，其溶血活性从抗补体活性均与文献报道相近。所以，本实为一种经济，高效的实验室大量制备ＣＶＦ的方法。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒液类 中华眼镜蛇 补体 色谱法

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清除补体避免猪到猕猴异种心脏移植超急性排斥反应的实验研究 被引量：4

9

作者 陈刚 王西墨 +9 位作者 孙黔云 沈世乾 郭晖 王虹 陈利君 吴瑛 朱建国 王婉瑜 熊郁良 陈实 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期157-159,共3页

目的　观察纯化的眼镜蛇毒因子 (CVF)对猪到猕猴异种心脏移植超急性排斥反应的影响。方法　以幼猪为供者 ,施行猪到猕猴腹腔内异位心脏移植 ,实验组 (n =4 )使用CVF完全清除受者体内补体 ,对照组 (n =5 )不使用CVF ,两个组术后均采用环... 目的　观察纯化的眼镜蛇毒因子 (CVF)对猪到猕猴异种心脏移植超急性排斥反应的影响。方法　以幼猪为供者 ,施行猪到猕猴腹腔内异位心脏移植 ,实验组 (n =4 )使用CVF完全清除受者体内补体 ,对照组 (n =5 )不使用CVF ,两个组术后均采用环孢素A、甲泼尼龙和环磷酰胺抑制排斥反应 ,通过检测血清C3、C4水平及总补体活性验证CVF的效果 ,移植心停跳时切取移植心进行病理检查。结果　在使用CVF后 ,实验组血清C3降为 0 ,总补体活性CH5 0值也几乎为 0 ,未发现明显毒副反应 ,移植猪心存活时间平均为 11d ,最长达 13d ,病理学提示均发生了延迟性异种排斥反应 ;对照组 3个移植心在移植后 6 0min内发生超急性排斥反应 ,另 2个分别存活 2 2h及 6d。结论　纯化的CVF有良好的清除补体的作用 ,且未见明显副作用 ; 展开更多

关键词 异种心脏移植术 排斥反应 眼镜蛇毒因子 猪心脏 补体

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徐长卿对舟山眼镜蛇毒心脏毒素和神经毒素毒性的影响 被引量：6

10

作者 林丽珊 许云禄 +2 位作者 刘广芬 王长溪 王晴川 《福建医科大学学报》 2003年第3期301-303,306,共4页

目的　探讨徐长卿提取液对眼镜蛇毒心脏毒素 (cardiotoxin,CTX)和神经毒素 (neurotoxin,NT)毒性作用的影响。　方法　用心电监测方法观察徐长卿提取液腹腔注射对 CTX致小鼠心脏毒性的影响 ;以小鼠死亡率和存活时间为指标 ,观察徐长卿提... 目的　探讨徐长卿提取液对眼镜蛇毒心脏毒素 (cardiotoxin,CTX)和神经毒素 (neurotoxin,NT)毒性作用的影响。　方法　用心电监测方法观察徐长卿提取液腹腔注射对 CTX致小鼠心脏毒性的影响 ;以小鼠死亡率和存活时间为指标 ,观察徐长卿提取液对 NT所致小鼠急性毒性的影响。　结果　徐长卿提取液 10 g/ kg腹腔注射对 CTX致小鼠心脏的毒性有明显的减毒作用 ,它抑制 CTX致小鼠 ECG(胸导联 ) ST段偏移 (抬高 ) (P<0 .0 5 ) ,降低 CTX致小鼠心脏停搏 (CA )的发生率 ,延长房室传导阻滞发生的潜伏期 (P<0 .0 5 ) ;徐长卿提取液对 NT所致小鼠的急性毒性无明显影响 ,既不能降低死亡率 ,也不能明显延长小鼠存活时间。　结论　徐长卿提取液腹腔注射有对抗眼镜蛇毒 CTX的毒性的作用 ,而对眼镜蛇毒 展开更多

关键词 徐长卿 服镜蛇毒液类 神经毒素类 毒性试验 直接溶解因子

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中华眼镜蛇毒对荷人鼻咽癌裸鼠血过氧化氢酶和GSH-PX活性的影响 被引量：5

11

作者 杨惠玲 杨星 郑芹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期976-978,共3页

目的 :探讨中华眼镜蛇毒 (NNAV)对荷人鼻咽癌 (NPC)裸鼠血中过氧化氢酶 (CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -PX)活性的影响。方法 :采用比色法检测经腹腔注射低、中或高浓度NNAV( 1mg/L、5mg/L或 10mg/L)的荷人NPC裸鼠血中CAT和GSH -PX活... 目的 :探讨中华眼镜蛇毒 (NNAV)对荷人鼻咽癌 (NPC)裸鼠血中过氧化氢酶 (CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -PX)活性的影响。方法 :采用比色法检测经腹腔注射低、中或高浓度NNAV( 1mg/L、5mg/L或 10mg/L)的荷人NPC裸鼠血中CAT和GSH -PX活性。结果 :荷人NPC裸鼠组血中CAT活性 ( 1645 0U/L)低于正常裸鼠组( 2 0 680U/L) (P <0 0 5 ) ,而荷瘤裸鼠组血中GSH -PX活性 ( 2 7670U/L)与正常裸鼠组 ( 2 8790U/L)相比P >0 0 5。低、中和高浓度NNAV治疗后的荷瘤鼠组血中CAT活性 ( 2 0 5 70U/L、2 3 0 90U/L、2 12 80U/L)均高于荷瘤鼠组( 1645 0U/L) (P <0 0 5 ) ,并接近正常水平 ( 2 0 680U/L) (P >0 0 5 )。同时低、中和高浓度用药组血中GSH -PX活性均不同程度地高于荷瘤鼠组 ( 2 7670U/L) (P <0 0 5 ) ,其中高浓度组 ( 3 7810U/L)明显高于低或中浓度组 ( 2 994 0U/L、3 0 610U/L) (P <0 0 5 ) ,其血中GSH -PX活性明显高于正常裸鼠组 ( 2 8790U/L) (P <0 0 5 )。结论 :NNAV的抑瘤作用可能与其提高荷瘤鼠血中CAT和GSH -PX活性有关。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒液类 鼻咽肿瘤 过氧化氢酶 谷胱甘肽过氧化物酶 裸小鼠 GSH-PX

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高纯度蛇毒因子抗非协调性大鼠异种肝脏移植超急性排斥反应的机制研究 被引量：5

12

作者 李正东 石长清 +4 位作者 张群华 熊郁良 周兴丁 王婉瑜 宋宁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第23期2007-2010,共4页

目的　探讨高纯度眼镜蛇毒因子 (CVF)对非协调性异种大鼠肝脏移植超急性排斥反应(HAR)和存活时间的影响及其机制。方法　实验分为CVF治疗组和对照组 ,每组各 2 0对。在豚鼠到大鼠肝脏移植前 2 4h实验组大鼠静脉注射CVF(5 0 μg/kg) ,异... 目的　探讨高纯度眼镜蛇毒因子 (CVF)对非协调性异种大鼠肝脏移植超急性排斥反应(HAR)和存活时间的影响及其机制。方法　实验分为CVF治疗组和对照组 ,每组各 2 0对。在豚鼠到大鼠肝脏移植前 2 4h实验组大鼠静脉注射CVF(5 0 μg/kg) ,异种肝脏移植后记录受体生存时间 ,并观察移植肝的病理变化 ,免疫荧光法检测肝脏血管C3沉积情况 ,用大鼠TNF αELISA试剂盒检测异种肝脏移植术后 1h血清中细胞因子TNF α水平。结果　肝脏移植后 ,对照组均发生了HAR ,肝内小血管血栓形成 ,间质出血 ,肝窦和中央静脉可见C3沉积 ,肠系膜淤血明显。实验组均无HAR发生 ,可见延迟性异种排斥反应 (DXR)的病理特征 ,血管内皮细胞 (EC)肿胀 ,单核细胞和中性粒细胞浸润 ,肝窦和中央静脉无C3沉积 ,肠道淤血不明显 ,血清TNF α水平下调 ,受体平均存活时间显著延长 (1 8±0 6与 7 4± 2 1h ,P <0 0 1)。结论　高纯度CVF清除补体可克服非协调性异种肝脏移植的HAR ,延长受体存活时间。 展开更多

关键词 蛇毒因子 大鼠 异种肝脏移植 超急性排斥反应 补体灭活剂

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舟山眼镜蛇毒细胞毒素-Ⅻ的抗肿瘤作用 被引量：5

13

作者 吴国土 张明芳 许云禄 《福建医科大学学报》 2005年第1期35-37,共3页

目的　了解舟山眼镜蛇毒细胞毒素 - (CTX- )的抗肿瘤作用。　方法　应用磺胺邻二甲氧嘧啶(SRB)法观察不同浓度 CTX- 对人肝癌 Bel74 0 4细胞和人早幼粒白血病 HL - 6 0细胞的生长抑制作用。观察CTX- 0 .4 ,0 .2 ,0 .1mg/ kg腹... 目的　了解舟山眼镜蛇毒细胞毒素 - (CTX- )的抗肿瘤作用。　方法　应用磺胺邻二甲氧嘧啶(SRB)法观察不同浓度 CTX- 对人肝癌 Bel74 0 4细胞和人早幼粒白血病 HL - 6 0细胞的生长抑制作用。观察CTX- 0 .4 ,0 .2 ,0 .1mg/ kg腹腔注射对 U 14荷瘤小鼠瘤块质量的影响并计算抑瘤率 ;CTX- 0 .4和 0 .2 m g/kg静脉注射对艾氏腹水癌 (EAC)小鼠腹水形成的影响并计算腹水减少率。　结果　 CTX- 可明显抑制人肝癌Bel74 0 4细胞和人早幼粒白血病 HL - 6 0细胞的生长 ,其 IC50 分别为 (1.12± 0 .13)和 (1.6 1± 0 .18)μg/ m L。 CTX- 0 .4 ,0 .2和 0 .1m g/ kg腹腔注射× 10 d,对宫颈癌 U14抑瘤率分别为 30 .5 0 % (P<0 .0 1) ,19.0 2 % (P<0 .0 5 )和12 .0 8% (P>0 .0 5 ) ;CTX- 0 .4和 0 .2 mg/ kg静脉注射× 3d对 EAC小鼠腹水形成减少率分别为 2 5 .5 % (P<0 .0 5 )和 14 .5 % (P>0 .0 5 )。　结论　舟山眼镜蛇毒细胞毒素 - 具有明显的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒液类 细胞毒素类 肿瘤细胞 培养的 凋亡

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眼镜蛇毒细胞毒素对人肝癌细胞增殖抑制活性及作用机制的研究 被引量：6

14

作者 王艳 林礼务 +3 位作者 陈志奎 薛恩生 杨菁 俞丽云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1426-1429,共4页

目的研究眼镜蛇毒细胞毒素(CTX)在体外诱导人肝癌BEL-7404细胞凋亡作用及其可能机制。方法不同浓度CTX作用于人肝癌BEL-7404细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测肿瘤细胞增殖情况;TUNEL法和透射电镜观察检测肿瘤细胞凋亡;并对caspase-3、-9... 目的研究眼镜蛇毒细胞毒素(CTX)在体外诱导人肝癌BEL-7404细胞凋亡作用及其可能机制。方法不同浓度CTX作用于人肝癌BEL-7404细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测肿瘤细胞增殖情况;TUNEL法和透射电镜观察检测肿瘤细胞凋亡;并对caspase-3、-9活性、细胞色素C分布变化进行检测。结果眼镜蛇毒细胞毒素对人肝癌BEL-7404细胞具有明显的抑制增殖作用,12、24和48 h的IC50分别为2.56、1.94和1.35 mg·L-1,TUNEL法和透射电镜均观察到肿瘤细胞的凋亡;caspase-3,-9酶活性增高,Western blot检测到caspase-3,-9酶的表达增强,线粒体内Cytochrome C表达减少,而细胞质内Cytochrome C表达增强。结论 CTX首先通过线粒体细胞色素C释放到细胞质内,进一步诱导效应性caspase-3,-9酶激活,可能是其诱导人肝癌细胞凋亡而产生抗肿瘤作用的机制之一。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒细胞毒素 人肝癌细胞 凋亡 线粒体 细胞色素C CASPASE

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福建产眼镜王蛇毒神经毒素的分离及活性测定 被引量：3

15

作者 黄立峰 许云禄 《福建医科大学学报》 2004年第2期125-128,共4页

目的　从眼镜王蛇蛇毒中分离神经毒素 ,测定其活性和毒性。　方法　应用 CM- Sephadex C- 5 0离子交换色谱 ,阶段梯度洗脱分离粗毒 ;用 Sephadex G- 5 0凝胶过滤纯化组分 ;用大鼠体外膈神经 -膈肌标本鉴定分离组分对神经 -肌肉接头的作... 目的　从眼镜王蛇蛇毒中分离神经毒素 ,测定其活性和毒性。　方法　应用 CM- Sephadex C- 5 0离子交换色谱 ,阶段梯度洗脱分离粗毒 ;用 Sephadex G- 5 0凝胶过滤纯化组分 ;用大鼠体外膈神经 -膈肌标本鉴定分离组分对神经 -肌肉接头的作用性质 ;观察神经毒素对乙酰胆碱 (Ach)引起蛙体外腹直肌收缩的量效曲线的影响 ;以Meier法测定神经毒素对小鼠的半数致死量 (L D50 )。　结果　眼镜王蛇粗毒经阳离子交换色谱后获得 A～ N共 1 4个蛋白峰 ,经鉴定 E、F、G、H、I、K等 6个蛋白峰具有阻断神经 -肌肉接头传导的作用 ,被鉴定为神经毒素 ,约占粗毒的 4 8.3% ;通过凝胶过滤对 E、G和 K组分进行初步纯化 ;E、G和 K组分可使 Ach引起的蛙腹直肌收缩的量效曲线平行右移 ,它们与 N2 -胆碱受体 (N2 - Ach R)的解离常数 (KD)分别为 :1 4 5 .87,73.5 3和 2 0 .0 4 ng/ m L;E、G和 K组分小鼠静脉注射的 L D50 分别为 :0 .884 ,0 .74 9和 1 .5 8mg/ kg。　结论　眼镜王蛇粗毒经离子交换色谱获得 6个神经毒素组分 ,经鉴定 E、G和 K组分为 N2 - Ach 展开更多

关键词 眼镜蛇毒液类 色谱法 离子交换 神经毒素类 半数致死量

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中国眼镜蛇毒蛋白酶(natrahagin)的抗凝作用 被引量：4

16

作者 郭丹 吴曙光 陈娜娜 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第3期190-191,共2页

目的观察具有纤维蛋白原水解活性的中国眼镜蛇毒蛋白酶（ｎａｔｒａｈａｇｉｎ）在动物体内的抗凝作用。方法将不同浓 度的ｎａｔｒａｈａｇｉｎ分别静脉注射入大鼠体内，观察其在动物体内的抗凝作用并与生理盐水对照。凝血仪上直接测... 目的观察具有纤维蛋白原水解活性的中国眼镜蛇毒蛋白酶（ｎａｔｒａｈａｇｉｎ）在动物体内的抗凝作用。方法将不同浓 度的ｎａｔｒａｈａｇｉｎ分别静脉注射入大鼠体内，观察其在动物体内的抗凝作用并与生理盐水对照。凝血仪上直接测定血浆 凝血酶原时间（ＰＴ）、凝血酶时间（ＴＴ）和活化部分凝血活酶时间（ＡＰＴＴ），双缩脲法测定血浆纤维蛋白原水平。结果与对照 组比较，不同剂量ｎａｔｒａｈａｇｉｎ静脉注射给药后，大鼠ＰＴ、ＴＴ和ＡＰＴＴ显著延长，效应呈浓度依赖性。剂量为０．１ｍｇ．ｋｇ·ｂｗ． 时，ＰＴ、ＴＴ和ＡＰＴＴ分别为对照组的１．５、１．５和１．９倍；兔血浆纤维蛋白原水平也显著降低，血浆纤维蛋白原水平降至 对照组的３３．３％。结论Ｎａｔｒａｈａｇｉｎ在体内具有抗凝活性。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒液类 蛋白酶 抗凝血酶类 血凝集抑制试验

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^(131)IBAC_5和CT-BAC_5联合应用对鼻咽癌CNE-2细胞微球的作用 被引量：4

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作者 赵永胜 杨惠玲 +4 位作者 樊卫 肖锡宾 张昌卿 余清声 刘长征 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期33-35,共3页

目的　观察中华眼镜蛇膜毒素 (CT)和131I与抗鼻咽癌 (NPC)单克隆抗体BAC5的偶联物 ,对NPCCNE 2细胞微球的抑制或破坏作用。方法　采用氯胺 T法制备131I BAC5,并用异型双功能交联剂 (SPDP)偶联CT BAC5,分别或联合应用于NPCCNE 2细胞微球 ... 目的　观察中华眼镜蛇膜毒素 (CT)和131I与抗鼻咽癌 (NPC)单克隆抗体BAC5的偶联物 ,对NPCCNE 2细胞微球的抑制或破坏作用。方法　采用氯胺 T法制备131I BAC5,并用异型双功能交联剂 (SPDP)偶联CT BAC5,分别或联合应用于NPCCNE 2细胞微球 ,观察微球生长的体积变化率和评价其受抑制或受破坏的情况。结果　CT和BAC5的偶联率为 32 .4% ,与对照组比较 ,CT对微球的生长无明显抑制作用 (P >0 .0 5 ) ,CT BAC5有明显的的抑制作用 (P <0 .0 5 ) ,131I BAC5、131I BAC5+CT BAC5有非常明显的破坏作用 (P <0 .0 1)。结论　肿瘤多细胞微球是一种用于体外研究肿瘤治疗效果的理想模型之一。CT BAC5和131I BAC5联合免疫导向治疗NPC比单项治疗效果更好。 展开更多

关键词 鼻咽癌 碘131 131I-BAC5 CT-BAC5 CNE-2 细胞微球

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眼镜蛇毒蛋白酶natrahagin水解纤维蛋白原的特性及对人血小板聚集的影响(英文) 被引量：4

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作者 朱正光 吴曙光 《中国药理学报》 CSCD 1999年第10期944-947,共4页

目的:研究natrahagin水解纤维蛋白原的特性及其对血小板聚集的影响。方法:SDS-PAGE,水解纤维蛋白原活性测定,血小板聚集实验。结果:Natrahagin与纤维蛋白原以1:50(w/w)孵育,5min内A_α-链几乎完全降解,γ-链的完全降解则至少需6h;其水... 目的:研究natrahagin水解纤维蛋白原的特性及其对血小板聚集的影响。方法:SDS-PAGE,水解纤维蛋白原活性测定,血小板聚集实验。结果:Natrahagin与纤维蛋白原以1:50(w/w)孵育,5min内A_α-链几乎完全降解,γ-链的完全降解则至少需6h;其水解可凝固纤维蛋白原的活性为0.349±0.044g·min^(-1)·g^(-1)。Natrahagin浓度依赖性地抑制利托菌素对富血小板血浆和凝血酶(80U·L^(-1))对洗涤血小板的聚集反应,IC_(50)(95％可信限)分别为56(40-79)和3.3(1.4-8.0)mg·L^(-1)。但即使natrahagin达200mg·L^(-1),对ADP和胶原诱导的血小板聚集仍无抑制作用。结论:Natrahagin是一种α,γ-纤维蛋白原溶解酶,可选择性抑制血小板膜糖蛋白Ib介导的血小板聚集。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒类 NATRAHAGIN 凝血酶 血小板膜糖蛋白

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眼镜蛇长链神经毒素镇痛效应及可能机制 被引量：2

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作者 彭建明 苏兰娣 +2 位作者 罗雪 叶记林 于有江 《现代医药卫生》 2015年第19期2896-2898,共3页

目的探究眼镜蛇长链神经毒素(CBT)的镇痛作用及可能机制。方法采用在体细胞外记录方法记录慢性炎症痛模型大鼠脊髓背角神经元的痛诱发放电,分别对六组实验大鼠注射生理盐水(5μL)、CBT(20、40、80 ng/kg)、阿托品(2 mg/kg)、阿托品(2 mg... 目的探究眼镜蛇长链神经毒素(CBT)的镇痛作用及可能机制。方法采用在体细胞外记录方法记录慢性炎症痛模型大鼠脊髓背角神经元的痛诱发放电,分别对六组实验大鼠注射生理盐水(5μL)、CBT(20、40、80 ng/kg)、阿托品(2 mg/kg)、阿托品(2 mg/kg)+CBT(40 ng/kg),观察不同含量CBT对脊髓背角神经元痛诱发放电的影响,同时观察胆碱能受体拮抗剂阿托品能否翻转其镇痛效应。结果不同含量CBT均可以显著抑制慢性炎症痛大鼠脊髓背角神经元的痛诱发放电,各含量CBT组放电频率与生理盐水组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),且该效应可被阿托品所阻断,阿托品+CBT组在20、30、40、50、60 min放电频率与CBT(40 ng/kg)组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论CBT具有显著的镇痛效应,该效应有一定的剂量依赖性,胆碱能受体系统参与了其镇痛过程。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒液类 眼镜蛇属 神经毒素类 镇痛

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眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶的纯化、性质鉴定及细胞毒性测定 被引量：3

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作者 张明芳 齐元麟 《海峡药学》 2009年第12期217-220,共4页

目的从眼镜蛇蛇毒中分离L-氨基酸氧化酶(LAAO),测定其理化性质及细胞毒性。方法采用Superdex75凝胶层析、Phenyl-SepharoseFF疏水层析、ResourceS离子交换层析分离纯化LAAO;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及C18反相色谱鉴定纯度并测定相对分子... 目的从眼镜蛇蛇毒中分离L-氨基酸氧化酶(LAAO),测定其理化性质及细胞毒性。方法采用Superdex75凝胶层析、Phenyl-SepharoseFF疏水层析、ResourceS离子交换层析分离纯化LAAO;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及C18反相色谱鉴定纯度并测定相对分子量;CCK8法测定细胞毒性。结果舟山眼镜蛇蛇毒经凝胶层析、疏水层析、离子交换层析及C18反相色谱后获得LAAO(暂定名NA-LAAO),在非还原和还原条件下相对分子质量均为58kD左右;具有明显的抑制人胃癌MGC-803细胞增殖作用。结论从眼镜蛇毒中纯化得到LAAO,其具有明显的细胞毒性。 展开更多

关键词 眼镜蛇毒 L-氨基酸氧化酶 纯化 细胞毒性

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