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乳酸菌对肠上皮细胞侵袭性大肠杆菌损伤的保护作用 被引量：17
1
作者 杨俊 张中伟 秦环龙 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第30期3394-3399,共6页
目的:研究肠上皮细胞(Caco-2)在侵袭性大肠杆菌(enteroinvasive Escherichia coli,EIEC)感染后,紧密连接(TJ)相关蛋白表达的改变及乳酸菌对Caco-2细胞的保护作用机制.方法:将Caco-2感染模型分为正常组、感染组、乳酸菌处理组和庆大霉素... 目的:研究肠上皮细胞(Caco-2)在侵袭性大肠杆菌(enteroinvasive Escherichia coli,EIEC)感染后,紧密连接(TJ)相关蛋白表达的改变及乳酸菌对Caco-2细胞的保护作用机制.方法:将Caco-2感染模型分为正常组、感染组、乳酸菌处理组和庆大霉素处理组.采用免疫金标记及电镜观察上皮细胞间TJ的位置和超微结构.免疫荧光观察TJ相关蛋白(Claudin-1,Occludin,JAM-1,ZO-1)及F-actin的表达分布和超微结构变化.结果:紧密连接结构位于相邻上皮细胞间的顶端,间隙大小约25-38nm.EIEC感染后,免疫胶体金定位不清,细胞骨架F-actin遭到破坏,相邻Caco-2细胞间TJ结构遭到破坏,TJ相关蛋白(Claudin-1蛋白,Occludin蛋白,JAM-1蛋白,ZO-1蛋白)的表达亦减少,而乳酸菌处理后F-actin的表达明显增多,可减轻EIEC引起的TJ结构受损,TJ相关蛋白的表达增多.结论:EIEC感染导致Caco-2细胞细胞骨架F-actin、TJ相关蛋白的表达和分布发生改变.乳酸菌可以明显抑制EIEC引起的单层细胞TJ结构和相关蛋白的破坏,并改善细胞骨架的分布表达. 展开更多
关键词 乳酸菌 紧密连接 claudin-1蛋白 OCCLUDIN蛋白 JAM-1蛋白 ZO-1蛋白
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乳酸菌对感染肠上皮细胞通透性及紧密连接蛋白表达的影响 被引量：15
2
作者 张中伟 秦环龙 《肠外与肠内营养》 CAS 2007年第4期193-196,200,共5页
目的:研究乳酸菌对侵袭性大肠杆菌(EIEC)感染肠上皮细胞(Caco-2)后,对其通透性和紧密连接(TJ)蛋白表达的影响。方法:建立Caco-2单层细胞感染模型。实验分为正常组、感染组、乳酸菌组和庆大霉素组。用电阻仪测定单层细胞的跨膜电阻值(TE... 目的:研究乳酸菌对侵袭性大肠杆菌(EIEC)感染肠上皮细胞(Caco-2)后,对其通透性和紧密连接(TJ)蛋白表达的影响。方法:建立Caco-2单层细胞感染模型。实验分为正常组、感染组、乳酸菌组和庆大霉素组。用电阻仪测定单层细胞的跨膜电阻值(TER),用高效液相法(HPLC)测定甘露醇透过率的变化,采用免疫组化法观察TJ相关蛋白,如Claudin-1蛋白,Occludin蛋白,JAM-1蛋白,ZO-1蛋白的分布和结构变化。结果:EIEC感染Ca-co-2细胞后,单层细胞的TER值和甘露醇的透过率随时间延长而升高,而经乳酸菌处理后,TER值升高趋缓(P<0.05),甘露醇的透过率降低(P<0.05);EIEC感染后,相邻Caco-2细胞间TJ结构遭到破坏,TJ相关蛋白的表达亦减少,而乳酸菌处理后可使EIEC引起的TJ结构受损减轻、相关蛋白的表达增多。结论:乳酸菌黏附于肠上皮细胞Caco-2后,可抑制EIEC破坏单层细胞的完整性,并改善TJ的结构变化和相关蛋白的表达分布。 展开更多
关键词 乳酸菌 紧密连接 claudin-1蛋白 OCCLUDIN蛋白
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黄芪三七合剂改善结肠机械屏障紊乱治疗慢性肾病大鼠的初探 被引量：8
3
作者 王露 王丽 +2 位作者 刘晓燕 季星利 樊均明 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期779-785,共7页
目的探讨黄芪三七合剂是否可通过改善结肠机械屏障结构紊乱而发挥治疗慢性肾病大鼠的作用。方法雄性SD大鼠30只随机分为5组:假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、黄芪三七合剂低剂量组(L-HSM组)和高剂量组(H-HSM组)、尿毒清组(NDQ组),采... 目的探讨黄芪三七合剂是否可通过改善结肠机械屏障结构紊乱而发挥治疗慢性肾病大鼠的作用。方法雄性SD大鼠30只随机分为5组:假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、黄芪三七合剂低剂量组(L-HSM组)和高剂量组(H-HSM组)、尿毒清组(NDQ组),采用右肾切除左肾缺血再灌注法建立慢性肾病(CKD)模型,分别于2周、4周、8周取血液测肌酐、尿素氮值,于第4周按照分组给予不同的灌胃处理,其中L-HSM组和H-HSM组分别给予黄芪三七合剂生药量18 g/(kg·d)和36 g/(kg·d),NDQ组给予尿毒清颗粒1.56 g/(kg·d),Sham组和I/R组给予等体积的蒸馏水,于第8周处死大鼠,取肾和结肠组织;检测肾功(血肌酐和尿素氮)、肾纤维化指标蛋白的表达(TGF-β1和α-SMA)、结肠组织炎症因子IFN-γ和IL-6的表达和结肠上皮紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1的表达。结果与模型组相比,高剂量黄芪三七合剂可有效恢复受损的肾功能,并能降低TGF-β1和α-SMA的蛋白表达,减轻肾纤维化;各组结肠炎症因子表达检测结果显示,模型组结肠组织中高表达的炎症因子IFN-γ和IL-6,在低剂量和高剂量黄芪三七合剂作用下均可有效降低;结肠上皮紧密连接蛋白的免疫组化和Western blot检测结果显示,与对照组相比,模型组中紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达均明显降低,表明黄芪三七合剂可在一定程度上恢复结肠机械屏障结构。结论黄芪三七合剂可能通过改善结肠机械屏障结构紊乱、减少炎症因子表达而起到防治慢性肾病大鼠的作用。 展开更多
关键词 慢性肾病 ZO1蛋白 OCCLUDIN蛋白 claudin-1蛋白
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claudin-1在胆囊癌中的表达及意义 被引量：5
4
作者 金浩 刘会春 +1 位作者 周少波 于东红 《蚌埠医学院学报》 CAS 2012年第1期22-24,共3页
目的:检测claudin-1蛋白在原发性胆囊癌中的表达情况,并分析其与临床病理参数的可能关系。方法:收集胆囊癌标本47例、胆囊腺瘤18例、慢性胆囊炎15例。应用免疫组织化学方法检测claudin-1蛋白的表达情况,同时收集胆囊癌患者的临床病理资... 目的:检测claudin-1蛋白在原发性胆囊癌中的表达情况,并分析其与临床病理参数的可能关系。方法:收集胆囊癌标本47例、胆囊腺瘤18例、慢性胆囊炎15例。应用免疫组织化学方法检测claudin-1蛋白的表达情况,同时收集胆囊癌患者的临床病理资料,并分析结果。结果:在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组织中claudin-1的阳性表达率分别为89.4%、27.8%和26.7%,差异有统计学意义(P<0.01),胆囊腺瘤组与胆囊炎组差异无统计学意义(P>0.05)。胆囊癌患者的年龄、性别、肿瘤的组织学类型间claudin-1表达差异均无明显不同(P>0.05)。病理Ⅱ～Ⅲ级标本中claudin-1表达高于Ⅰ级(P<0.01),Nevin分期Ⅳ～Ⅴ期中表达高于Ⅰ～Ⅲ期(P<0.05),有转移者高于无转移者(P<0.05)。结论:claudin-1在胆囊癌的发生、侵袭及转移机制中发挥重要作用。 展开更多
关键词 胆囊肿瘤 claudin-1蛋白 免疫组织化学
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MMP-3与乳腺癌上皮间质转化的关系及其意义 被引量：4
5
作者 朱之坤 刘志容 吴诚义 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期63-67,共5页
为了探讨MMP-3在乳腺癌中表达与乳腺癌上皮间质转化的关系及其在乳腺癌浸润转移中的作用.采用免疫组织化学检测正常乳腺组织、乳腺癌癌旁组织、乳腺癌组织中MMP-3、Claudin-1、Vimentin的表达情况.研究发现:1)MMP-3在乳腺癌组织的阳性... 为了探讨MMP-3在乳腺癌中表达与乳腺癌上皮间质转化的关系及其在乳腺癌浸润转移中的作用.采用免疫组织化学检测正常乳腺组织、乳腺癌癌旁组织、乳腺癌组织中MMP-3、Claudin-1、Vimentin的表达情况.研究发现:1)MMP-3在乳腺癌组织的阳性表达率较癌旁组织及正常乳腺组织高且具有统计学意义(P<0.05).Claudin-1在乳腺癌中的阳性表达率明显低于癌旁组织及正常乳腺组织具有统计学意义(P<0.05).Vimentin在乳腺癌组织阳性表达率高于癌旁组织及正常乳腺组织具有统计学意义(P<0.05);2)随着乳腺癌病理分期的增加MMP-3表达逐渐增加,同时出现Claudin-1蛋白表达降低及Vimentin蛋白表达升高.相关分析表明MMP-3与Claudin-1的表达呈负相关(r=-0.301,P=0.019),与Vimentin的表达呈正相关(r=0.378,P=0.03),Claudin-1与Vimentin的表达呈负相关(r=-0.278,P=0.031).结果提示,MMP-3可能是通过介导乳腺癌细胞发生上皮间质转化来参与乳腺癌的浸润转移. 展开更多
关键词 MMP-3 claudin-1蛋白 Vimentin蛋白 乳腺癌 上皮-间质转化
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猪圆环病毒2型感染对猪小肠上皮细胞Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1基因mRNA表达的影响 被引量：3
6
作者 杨昕坦 阮峥 李焕荣 《北京农学院学报》 2019年第1期56-60,共5页
紧密连接在维持肠道黏膜完整性和免疫系统正常发挥功能中作用重大。【目的】旨在探讨猪圆环病毒2型(PCV2)感染对猪小肠上皮细胞(IPEC)紧密连接的影响。【方法】利用基因克隆获得Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1 (ZO-1)基因的重组质粒并... 紧密连接在维持肠道黏膜完整性和免疫系统正常发挥功能中作用重大。【目的】旨在探讨猪圆环病毒2型(PCV2)感染对猪小肠上皮细胞(IPEC)紧密连接的影响。【方法】利用基因克隆获得Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1 (ZO-1)基因的重组质粒并建立荧光定量RT-PCR标准曲线;利用所建立的方法检测PCV2感染的IPEC中Claudin-1蛋白和闭锁小带蛋白-1mRNA的动态变化。【结果】构建的两种紧密连接蛋白基因的重组质粒荧光定量RT-PCR标准曲线线性关系良好,相关系数均达0.99以上。PCV2感染的IPEC中Claudin-1蛋白和ZO-1mRNA表达在4、12、24、48、72h均显著下降。【结论】PCV2感染可抑制猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白相关基因的表达,破坏细胞间的紧密连接,增加肠道通透性。 展开更多
关键词 PCV2 猪小肠上皮细胞 claudin-1蛋白 闭锁小带蛋白-1 荧光定量RT-PCR
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山羊Claudin-1基因编码蛋白的生物信息学分析 被引量：3
7
作者 王梦雅 赵学亮 +4 位作者 胡红莲 宋利文 李洋 徐明 高民 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第7期18-23,共6页
为研究山羊紧密连接相关蛋白Claudin-1基因编码蛋白的组成结构及生物学特性,本试验综合运用多种生物信息学软件对山羊Claudin-1蛋白的理化性质、亲/疏水性、信号肽、跨膜结构域、磷酸化位点、亚细胞定位、蛋白质二级结构及三级结构进行... 为研究山羊紧密连接相关蛋白Claudin-1基因编码蛋白的组成结构及生物学特性,本试验综合运用多种生物信息学软件对山羊Claudin-1蛋白的理化性质、亲/疏水性、信号肽、跨膜结构域、磷酸化位点、亚细胞定位、蛋白质二级结构及三级结构进行生物信息学分析,并推测与其他物种的生物进化关系。结果表明：山羊Claudin-1基因全长636 bp,共编码211个氨基酸,蛋白质理论大小值为22.865 ku,理论等电点为8.40,呈碱性;不稳定指数为43.82,其编码蛋白属于不稳定的疏水性蛋白;二级结构以α-螺旋为主要结构,比例为54.50%,主要存在于内质网,其次为质膜,在细胞外（包括细胞壁）和空泡中也有少量分布。Claudin-1蛋白具有15个潜在的磷酸化位点,存在信号肽和4个跨膜区。通过进化树分析发现,山羊Claudin-1基因与绵羊和牛的亲缘关系最为密切,这与动物学分类结果相一致,提示Claudin-1基因与胃肠道黏膜上皮选择性屏障存在联系。通过不同的在线预测软件对山羊Claudin-1基因编码蛋白的组成结构及生物学特性进行分析,为深入探讨Claudin-1基因编码蛋白提供理论指导。 展开更多
关键词 山羊 claudin-1蛋白 生物信息学分析 蛋白质特性
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四神丸对IBS-D大鼠肠道屏障影响的实验研究 被引量：19
8
作者 刘佳星 王彦礼 +1 位作者 杨伟鹏 王海南 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期24-28,共5页
目的:通过研究四神丸及其拆方二神丸和五味子散对腹泻型肠易激综合征(Diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)大鼠相关细胞因子的含量和肠黏膜屏障标志性蛋白表达情况的影响,探讨其治疗腹泻型肠易激综合征的作用机制。方... 目的:通过研究四神丸及其拆方二神丸和五味子散对腹泻型肠易激综合征(Diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)大鼠相关细胞因子的含量和肠黏膜屏障标志性蛋白表达情况的影响,探讨其治疗腹泻型肠易激综合征的作用机制。方法:选取SPF级雄性SD大鼠54只,随机分为正常组、模型组、阳性对照培菲康0.28 g/kg组、四神丸4.2 g/kg组、二神丸3.23 g/kg组和五味子散0.97 g/kg组。以复合因素制备脾肾阳虚型IBS-D大鼠模型,给药治疗14天后检测大鼠血清中相关炎症因子IL-10、TNF-α、IL-6和IL-1β,GAS和MTL,5-HT和CRF的含量,同时观察结肠组织病理变化,并运用Western Blot法检测肠黏膜屏障标志性蛋白Occludin、Claudin1表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中的IL-10、GAS和MTL的浓度和肠细胞中Occludin、Claudin1的表达均显著降低,TNF-α、IL-6、IL-1β、5-HT和CRF的含量显著升高。结肠组织未见病理学变化。培菲康0.28 g/kg组、四神丸4.2 g/kg组、二神丸3.23 g/kg组和五味子散0.97 g/kg组药后均能有效减小IBS-D大鼠腹泻指数及降低肠道高敏感性且以四神丸全方组效果优于其拆方组。结论:四神丸可能通过保护肠道黏膜屏障、抑制炎症反应、改善胃肠道运动、消化系统的分泌功能紊乱和肠道内在敏感性来达到治疗腹泻型肠易激综合征的作用,且二神丸和五味子散有协同作用。 展开更多
关键词 四神丸 拆方 腹泻型肠易激综合征 相关炎症因子 MTL和GAS Occludin和claudin-1蛋白
原文传递
不同年龄人群曝光部位皮肤claudin 1蛋白表达及其与经皮水分丢失的关联 被引量：1
9
作者 张好 王波 +1 位作者 陈鸿超 王懿娜 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期340-343,共4页
目的：观察不同年龄阶段健康人群曝光皮肤组织中紧密连接蛋白claudin1分子的表达情况，探讨其与表皮屏障功能之间的关联性，并分析慢性紫外线照射对皮肤组织中claudin1蛋白的表达及表皮屏障功能的影响。方法：收集不同年龄共39人曝光部... 目的：观察不同年龄阶段健康人群曝光皮肤组织中紧密连接蛋白claudin1分子的表达情况，探讨其与表皮屏障功能之间的关联性，并分析慢性紫外线照射对皮肤组织中claudin1蛋白的表达及表皮屏障功能的影响。方法：收集不同年龄共39人曝光部位皮肤组织（包括颈项部、手背部或额面部），其中〈20岁组9例，20～50岁组14例，〉50岁组16例。分别以RT—PCR检测皮肤组织中的claudin1分子转录情况，以免疫组化法检测claudin1蛋白的表达，并检测不同皮肤组织的经皮水分丢失（TEWL）值。结果：RT—PCR检测显示cluadin 1分子的转录水平均随年龄增大而下调，〉50岁组claudin1分子的mRNA表达较〈20岁组明显降低（P=0．0370）。免疫组化结果显示曝光部位皮肤组织中claudin1蛋白的表达强度随年龄增长而减弱，与年龄呈负相关，与RT—PCR结果一致。老年组（〉50岁组）曝光部位皮肤的TEWL值较中年组（20—50岁组）及青年组（〈20岁组）均升高，TEWL值与claudin1蛋白的表达呈负相关（P=0．0475）。结论：慢性紫外线照射可引发人曝光部位皮肤的屏障功能损伤，而这种屏障功能受损可能与claudin1蛋白的下调表达有关。 展开更多
关键词 claudin1蛋白 经皮水分丢失 皮肤屏障功能 紫外线
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