莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞增殖抑制及促凋亡作用的研究 被引量：23

1

作者 高艳娥 郭金珠 +2 位作者 惠慧 王咏雪 王桂贤 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第10期1836-1839,共4页

目的:探讨莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞体外增殖和凋亡的影响。方法:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml不同浓度莪术醇作用于人宫颈癌CASKI细胞后,MTT法检测CASKI细胞的增殖抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡率变化;... 目的:探讨莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞体外增殖和凋亡的影响。方法:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml不同浓度莪术醇作用于人宫颈癌CASKI细胞后,MTT法检测CASKI细胞的增殖抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡率变化;电镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学特征。结果:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml的莪术醇对宫颈癌CASKI细胞均有不同程度的增殖抑制作用,在一定范围内,具有浓度-时间依赖性。流式细胞仪分析结果显示:50μg/ml、100μg/ml莪术醇作用于宫颈癌CASKI细胞24h,可阻滞细胞周期于G2/M期,并诱导部分细胞凋亡。电镜下可见凋亡细胞及凋亡小体,且100μg/ml组细胞凋亡改变较50μg/ml组更明显。结论:莪术醇能明显抑制CASKI细胞的体外增殖,且可阻滞CASKI细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 莪术醇 宫颈癌 caski细胞 细胞周期 凋亡

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姜黄素在宫颈癌治疗中对MIF、VEGF-C、P53表达及肿瘤生长的影响 被引量：11

2

作者 方瑜 陈光伟 +1 位作者 杨洋 姜伊娜 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期4148-4154,共7页

为了揭示姜黄素治疗宫颈癌的实验效果及其作用机制。选取成功建立的宫颈癌Caski细胞移植瘤裸鼠48只,随机分为空白组（等量生理盐水灌胃）、顺铂组（顺铂3 mg·g^-1·d^-1）、高剂量组（100 mg·kg^-1·d^-1）、低剂量组... 为了揭示姜黄素治疗宫颈癌的实验效果及其作用机制。选取成功建立的宫颈癌Caski细胞移植瘤裸鼠48只,随机分为空白组（等量生理盐水灌胃）、顺铂组（顺铂3 mg·g^-1·d^-1）、高剂量组（100 mg·kg^-1·d^-1）、低剂量组（50 mg·kg^-1·d^-1）,每组12只,连续处理15 d后,对比各组小鼠肿瘤体积、瘤体重量、抑瘤率,采用流式细胞仪技术检测各组小鼠肿瘤组织中Caski细胞周期分布情况、采用RT-PCR技术和Western-blotting技术检测各组小鼠瘤组织中巨噬细胞移动抑制因子（MIF）、血管内皮细胞生长因子-C（VEGF-C）、p53mRNA及蛋白的表达情况。结果显示,顺铂组、高剂量组、低剂量组的小鼠肿瘤体积、肿瘤重量均显著低于空白组（p〈0.05）,顺铂组、高剂量组的小鼠肿瘤体积、肿瘤重量显著低于低剂量组（p〈0.05）,顺铂组、高剂量组的抑瘤率显著高于低剂量组（p〈0.05）;顺铂组、高剂量组、低剂量组的G1期细胞比例低于空白组（p〈0.05）;顺铂组、高剂量组的G1期细胞比例低于低剂量组（p〈0.05）,而S期及G2/M期细胞比例高于低剂量组（p〈0.05）;顺铂组、高剂量的MIF、VEGF-C mRNA表达低于低剂量组（p〈0.05）,顺铂组、高剂量的p53mRNA表达高于低剂量组（p〈0.05）;顺铂组、高剂量组、低剂量组的MIF、VEGF-C蛋白低于空白组（p〈0.05）;顺铂组、高剂量组的MIF、VEGF-C蛋白低于低剂量组（p〈0.05）,而p53蛋白高于低剂量组（p〈0.05）。姜黄素能有效抑制宫颈癌Caski细胞移植瘤裸鼠肿瘤细胞的生长,可能与下调MIF、VEGF-C及上调p53 mRNA及蛋白有关。 展开更多

关键词 姜黄素 宫颈癌 caski细胞

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吉祥草中甾体皂苷RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量：11

3

作者 杨小姣 白彩虹 +5 位作者 邹坤 贺海波 尉小琴 覃慧林 张永峰 汪鋆植 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期476-482,共7页

目的观察吉祥草中甾体皂苷RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法采用传统方法分离鉴定RCE-4。将0.3 m L Caski(4×107/m L)细胞悬液接种于裸鼠右侧后腿背部皮下,建立宫颈癌移植瘤模型,然后按瘤体积大小随机分为模型组、紫杉醇(1... 目的观察吉祥草中甾体皂苷RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法采用传统方法分离鉴定RCE-4。将0.3 m L Caski(4×107/m L)细胞悬液接种于裸鼠右侧后腿背部皮下,建立宫颈癌移植瘤模型,然后按瘤体积大小随机分为模型组、紫杉醇(10 mg/kg)和RCE-4(25、50、100 mg/kg)组,1次/d给药,连续4周,末次给药的次日处死裸鼠,称量裸鼠体质量、瘤质量,测量肿瘤体积,计算抑瘤率。光镜下观察移植瘤组织形态学变化,TUNEL染色测定细胞凋亡率,免疫组化检测肿瘤组织中COX-2表达,荧光定量PCR测定移植瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA表达,计算Bcl-2/Bax值,Western blot检测移植瘤组织中Survivin蛋白表达。结果 RCE-4(25、50、100 mg/kg)可明显降低宫颈癌裸鼠移植瘤的体积和瘤质量(P<0.05,P<0.01),上调Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和COX-2、Survivin蛋白表达及Bcl-2/Bax值(P<0.05,P<0.01)。结论RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的生长具有显著抑制作用,其机制可能与其上调Bax、Caspase-9、Caspase-3的表达和下调Survivin、Bcl-2、COX-2的表达有关。 展开更多

关键词 甾体皂苷RCE-4 吉祥草 宫颈癌 caski细胞 裸鼠 细胞凋亡

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常春藤皂苷元(hederagenin)通过抑制STAT3通路降低CaSki宫颈癌细胞增殖能力并促进其凋亡 被引量：10

4

作者 方丽文 刘明明 蔡琳玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期140-145,共6页

目的探讨常春藤皂苷元(hederagenin)对宫颈癌细胞活性及凋亡的影响及机制。方法培养CaSki宫颈癌细胞,采用(0、 10、 20、 40、 80)μg/mL常春藤皂苷元处理,噻唑蓝(MTT)法测定细胞活性,确定其半数抑制剂量约40μg/mL。采用40μg/mL常春... 目的探讨常春藤皂苷元(hederagenin)对宫颈癌细胞活性及凋亡的影响及机制。方法培养CaSki宫颈癌细胞,采用(0、 10、 20、 40、 80)μg/mL常春藤皂苷元处理,噻唑蓝(MTT)法测定细胞活性,确定其半数抑制剂量约40μg/mL。采用40μg/mL常春藤皂苷元处理宫颈癌细胞,流式细胞术测定宫颈癌细胞凋亡、 Western blot法测定宫颈癌细胞裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 c-caspase-9、信号转导子和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)蛋白水平。用STAT3信号通路抑制剂AG490和常春藤皂苷元共同处理宫颈癌细胞,用上述方法检测细胞活性和凋亡水平。结果与对照组细胞相比, 40μg/mL常春藤皂苷元处理后的宫颈癌细胞增殖活性降低,细胞凋亡水平升高, c-caspase-3和c-caspase-9水平增加, p-STAT3蛋白水平降低。与常春藤皂苷元处理细胞相比, AG490和常春藤皂苷元共同处理的宫颈癌细胞活性进一步降低,细胞凋亡率增加,细胞中c-caspase-3和c-caspase-9的蛋白水平升高。结论常春藤皂苷元抑制宫颈癌细胞的增殖并诱导其凋亡,与抑制STAT3信号通路有关。 展开更多

关键词 常春藤皂苷元(hederagenin) 宫颈癌 细胞凋亡 STAT3 caski细胞

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树突状细胞疫苗的制备及其体外诱导细胞毒性T淋巴细胞对宫颈癌CaSki细胞的杀伤作用 被引量：8

5

作者 焦庆昉 易发平 +5 位作者 陈全 兰欢 艾青 符少月 俞垚 宋方洲 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期106-110,共5页

目的:制备树突状细胞(dendritic cells,DCs)疫苗并观察其在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)对宫颈癌CaSki细胞的杀伤效应。方法:分离培养小鼠未成熟DCs,FCM检测小鼠未成熟DCs表面标志物CD40、CD86、主要组织... 目的:制备树突状细胞(dendritic cells,DCs)疫苗并观察其在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)对宫颈癌CaSki细胞的杀伤效应。方法:分离培养小鼠未成熟DCs,FCM检测小鼠未成熟DCs表面标志物CD40、CD86、主要组织相容性复合体-Ⅱ(major histocompatibility complex-Ⅱ,MHC-Ⅱ)和CD11c;将已成功构建的携带人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16E6E7基因的重组腺病毒pAd-E6E7感染体外培养的小鼠未成熟DCs,提取CaSki细胞裂解物负载DCs,制备DC疫苗,激光共聚焦显微镜下观察pAd-E6E7感染的小鼠未成熟DCs绿色荧光蛋白表达,Western印迹法检测E6蛋白的表达;DCs疫苗诱导产生CTLs后与CaSki细胞共培养,CCK8(cell countingkit8)法检测其对CaSki细胞的杀伤效应。结果:成功分离培养了小鼠未成熟DCs,并制备获得了HPV16E6E7特异性DCs疫苗。DCs疫苗诱导产生的CTLs对CaSki细胞具有杀伤作用,pAd-E6E7感染组对CaSki的杀伤效应明显高于CaSki细胞裂解物负载组及未处理DCs组(P<0.05)。结论:以携带HPV16E6E7基因的重组腺病毒感染DCs制备基因修饰的DCs疫苗,具有诱导CTLs体外杀伤子宫颈癌CaSki细胞的作用。 展开更多

关键词 宫颈癌 疫苗 合成 人乳头瘤病毒 T淋巴细胞 细胞毒性 树突状细胞 caski细胞

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钙结合蛋白S100A8/A9对宫颈癌细胞系CasKi细胞F-肌动蛋白的影响 被引量：5

6

作者 王希涛 孙全梅 +3 位作者 张幼怡 陈嵘 韩东 耿力 《中国微创外科杂志》 CSCD 2009年第6期556-559,共4页

目的探讨钙结合蛋白S100A8/A9复合物对人宫颈癌上皮细胞癌细胞系CasKi细胞骨架及表面超微结构的影响。方法应用20μg/ml S100A8/A9复合物作用于CasKi细胞,对细胞骨架F-肌动蛋白进行染色,应用快速共聚焦荧光显微镜观察细胞骨架的改变。... 目的探讨钙结合蛋白S100A8/A9复合物对人宫颈癌上皮细胞癌细胞系CasKi细胞骨架及表面超微结构的影响。方法应用20μg/ml S100A8/A9复合物作用于CasKi细胞,对细胞骨架F-肌动蛋白进行染色,应用快速共聚焦荧光显微镜观察细胞骨架的改变。在生理条件下,应用原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)对活体细胞进行高分辨成像,观察细胞表面超微结构及应力纤维。结果S100A8/A9复合物作用24 h后宫颈癌细胞系CasKi细胞的F-肌动蛋白排列出现紊乱,主要分布于细胞的周边,细胞中央F-肌动蛋白含量明显减少。CasKi细胞经过20μg/ml S100A8/A9蛋白复合物处理前细胞核部位F-肌动蛋白光密度为92.42±5.16,经过S100A8/A9 72 h处理后,F-肌动蛋白的光密度降为57.67±3.70,两者相比较差异具有显著的统计学意义(t=5.268,P=0.000)。AFM成像显示S100A8/A9复合物作用后细胞边缘卷曲,高度增加,伪足减少,细胞膜下应力纤维结构遭到破坏。结论S100A8/A9蛋白复合物可以对宫颈癌细胞系CasKi细胞表面的超微结构及应力纤维产生影响,并且这种影响主要是通过肌动蛋白的重新分布实现的。 展开更多

关键词 原子力显微镜 钙结合蛋白S100A8/A9 caski细胞 宫颈癌 F-肌动蛋白

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南赤瓟醇提物通过PI3K/Akt/mTOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡 被引量：7

7

作者 周琴 杨小姣 +5 位作者 石孟琼 刘英 覃慧林 冯天艳 张永峰 尉小琴 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第1期42-49,共8页

目的:研究南赤瓟醇提物影响PI3K/Akt/m TOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡的作用机制。方法:用南赤瓟醇提物(0.062 5、0.125、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/m L)作用Caski细胞24 h后,检测其对细胞增殖的影响;然后用南赤瓟醇提物(0.25... 目的:研究南赤瓟醇提物影响PI3K/Akt/m TOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡的作用机制。方法:用南赤瓟醇提物(0.062 5、0.125、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/m L)作用Caski细胞24 h后,检测其对细胞增殖的影响;然后用南赤瓟醇提物(0.25、0.50和1.00 mg/m L)作用Caski细胞24 h后,流式细胞术测定细胞周期DNA含量及亚G_1凋亡峰,ELISA试剂盒检测Caski细胞中Caspase-9和Caspase-3活性及线粒体和胞浆中细胞色素C(Cyt C)含量,Real-time PCR测定P53、Bcl-2和Bax m RNA表达,并计算Bcl-2/Bax比值,Western blot测定PI3K、Akt、m TOR磷酸化水平(p-PI3K、p-Akt、p-m TOR),并计算p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-m TOR/m TOR比值。结果:南赤瓟醇提物对Caski细胞生长抑制作用呈明显的剂量依赖性;南赤瓟醇提物(0.25、0.50和1.00 mg/m L)能显著抑制Caski细胞增殖,并将其阻滞于G_2/M期;可抑制pPI3K、p-Akt和p-m TOR蛋白表达水平,降低pPI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-m TOR/m TOR比值;上调P53和Bax m RNA表达,下调Bcl-2 m RNA及Bcl-2与Bax比值;降低线粒体中Cyt C含量,升高胞浆中Cyt C含量;增强Caspase-9和Caspase-3活性(P<0.05,P<0.01)。结论:南赤瓟醇提物诱导Caski细胞凋亡的作用机制与抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路磷酸化有关。 展开更多

关键词 南赤瓟 宫颈癌 caski细胞 PI3K/Akt/mTOR信号通路

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吉祥草中甾体皂苷RCE-4对人宫颈癌Caski细胞Ras/Erk和p16/cyclinD1/CDK4通路的影响 被引量：6

8

作者 颜为红 邹坤 +6 位作者 贺海波 张永峰 李小妹 李小琴 杨小姣 汪鋆植 邓张双 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第3期247-254,共8页

目的:研究吉祥草中甾体皂苷RCE-4影响Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路促进Caski细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Caski细胞株,用RCE-4作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Real-time PCR检测... 目的:研究吉祥草中甾体皂苷RCE-4影响Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路促进Caski细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Caski细胞株,用RCE-4作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Real-time PCR检测p16、cyclin D1和CDK4m RNA表达水平;Western blot检测Ras/Erk信号通路总蛋白和磷酸化蛋白表达水平。结果:RCE-4呈剂量依赖性抑制Caski细胞增殖,其作用24 h的IC50值为12.33μmol/L;升高G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例;抑制Ras、p-Raf、p-Mek1/2和p-Erk1/2蛋白表达,降低p-Raf/Raf、p-Mek1/2/Mek1/2和p-Erk1/2/Erk1/2比值,上调p16的m RNA表达,下调cyclin D1和CDK4的m RNA表达。结论:RCE-4可抑制Caski细胞的增殖,诱导细胞在G0/G1期阻滞,其诱导作用与其抑制Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路激活有关。 展开更多

关键词 RCE-4 细胞周期 caski细胞 Ras/Erk信号通路 p16/cyclinD1/CDK4信号通路

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吉祥草乙酸乙酯部位对人宫颈癌Caski细胞抑制作用及COX-2基因表达与BCl-2蛋白家族关系的研究 被引量：6

9

作者 白彩虹 邹坤 +3 位作者 贺海波 王玉婷 汪鋆植 杨进 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期45-50,共6页

目的：研究吉祥草乙酸乙酯部位对人宫颈癌Caski细胞抑制作用及可能的作用机制。方法：用不同浓度的吉祥草乙酸乙酯部位（3．125、4．6875、6．25、9．375、12．5、18．75、25．0、50．0μg／ml）处理宫颈癌Caski细胞24h后，采用MTT法检... 目的：研究吉祥草乙酸乙酯部位对人宫颈癌Caski细胞抑制作用及可能的作用机制。方法：用不同浓度的吉祥草乙酸乙酯部位（3．125、4．6875、6．25、9．375、12．5、18．75、25．0、50．0μg／ml）处理宫颈癌Caski细胞24h后，采用MTT法检测不同浓度的吉祥草乙酸乙酯部位在不同作用时间下对Caski细胞增殖率的影响；用12．5、25．0和50．0μg/ml的吉祥草乙酸乙酯部位处JEA．宫颈癌Caski细胞不同作用时间（4、8、12、24、48h）后，MTT法检测其对细胞活力的影响，Hoechst33258染色检测其对细胞凋亡的影响，RT—PCR测定COX-2、BCl-2和BaxmRNA表达，并计算BCl-2与Bax的比值。结果：吉祥草乙酸乙酯部位在3．125—50．0μg/ml浓度范围内对Caski细胞的生长抑制作用呈明显的时间．剂量依赖性，当药物浓度达到50．0μg／ml时，抑制率达到最大到58．4％，并且经IC50分析软件进行计算其IC50值为35．29μg/ml；吉祥草乙酸乙酯部位（12．5、25．0和50．0μg／ml）处理能显著抑制Caski细胞增殖，促进其凋亡（P〈0．05或P〈0．01），当药物浓度为50．0μg/ml，作用时间48h时，其抑制率高达98．9％；上调BaxmRNA表达，下调COX-2、BCl-2mRNA表达和BCI。2与Bax的比值。结论：吉祥草乙酸乙酯部位有显著的抑制Caski细胞增殖和诱导凋亡作用，其作用机制可能与其上调Caski细胞BaxmRNA表达，下调COX-2、BCl-2mRNA表达和BCl-2与Bax的比值有关。 展开更多

关键词 吉祥草乙酸乙酯部位 宫颈癌 caski细胞 凋亡 COX-2

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阿司匹林诱导人宫颈癌Caski细胞凋亡及其分子机制 被引量：5

10

作者 杨建林 韩钰 +1 位作者 周永芹 张伟 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第15期7-9,共3页

目的探讨阿司匹林对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及机制,为其用于宫颈癌的临床治疗提供依据。方法体外培养Caski细胞,分别以1.0、2.5、5.0、7.5、10.0 mmol/L阿司匹林干预。采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪测定... 目的探讨阿司匹林对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及机制,为其用于宫颈癌的临床治疗提供依据。方法体外培养Caski细胞,分别以1.0、2.5、5.0、7.5、10.0 mmol/L阿司匹林干预。采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder现象;Western blot法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3等凋亡相关基因表达。结果阿司匹林干预后Caski细胞增殖明显受抑,且呈时间和剂量依赖性;Caski细胞G0/G1期和G2/M期比例明显下降,S期比例升高;细胞凋亡率明显升高;Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase-3活化。结论阿司匹林在体外可抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,其机制可能为抑制肿瘤细胞DNA合成,改变其细胞周期时相分布,诱导其凋亡。 展开更多

关键词 阿司匹林 caski细胞 细胞凋亡 分子机制

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DEK基因沉默对宫颈癌CaSki细胞增殖和凋亡影响的研究 被引量：5

11

作者 刘岿然 赵敏 张淑兰 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2011年第10期758-761,共4页

目的:通过观察DEK基因沉默后对CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡影响,探讨DEK原癌基因siRNA对宫颈癌细胞的影响和机制。方法:将DEK siRNA真核表达载体转入CaSki细胞,转染48 h后,采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期... 目的:通过观察DEK基因沉默后对CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡影响,探讨DEK原癌基因siRNA对宫颈癌细胞的影响和机制。方法:将DEK siRNA真核表达载体转入CaSki细胞,转染48 h后,采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期改变情况。结果:与对照组和未转染组相比,转染psiRNA-hHDEK组CaSki细胞增殖的抑制率和凋亡率均增高,分别为53.2%和(13.84±3.19)%,P值分别为0.038和0.002;psiRNA-hHDEK转染组G0/G1期细胞比率(82.65±5.23)较对照组(74.36±7.49)和未转染组(70.25±5.11)增多,差异有统计学意义,P=0.003;psiRNA-hH-DEK转染组细胞增殖指数(17.35%)明显低于未转染组(29.75%)和对照组细胞(25.64%),差异有统计学意义,P=0.02。结论:DEK基因抑制可能诱导CaSki细胞凋亡,并能影响肿瘤细胞内DNA的复制和合成,抑制细胞的正常分裂,从而抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 caski细胞 基因 DEK 细胞凋亡 细胞增殖 比色法 流式细胞术

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雷公藤内酯醇对人宫颈癌CaSki细胞株的体外作用研究 被引量：4

12

作者 宁维翾 周英 +1 位作者 顾江红 王联欢 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期225-227,共3页

目的探讨雷公藤内酯醇(TPL)对人宫颈癌CaSki细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT比色法检测不同浓度(0、5、10、20ng/ml)TPL作用24、48、72h后对CaSki细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,细胞免疫化学法检测Ki... 目的探讨雷公藤内酯醇(TPL)对人宫颈癌CaSki细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT比色法检测不同浓度(0、5、10、20ng/ml)TPL作用24、48、72h后对CaSki细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,细胞免疫化学法检测Ki-67及p53蛋白表达的改变。结果倒置相差显微镜观察可见TPL处理后细胞皱缩变圆变粗糙,体积缩小,且不断地脱落悬浮于培养液中,数量减少,细胞间隙增大,且随药物浓度增加及作用时间延长,这种变化趋于明显。5、10、20ng/ml TPL在体外对CaSki细胞的生长具有抑制作用,且呈剂量、时间依赖方式(P<0.01)。免疫细胞化学检测显示TPL作用后CaSki细胞Ki-67及p53蛋白表达下调,且呈剂量、时间依赖方式(P<0.01)。结论 TPL可抑制CaSki细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制癌细胞Ki-67及p53蛋白表达有关。 展开更多

关键词 雷公藤内酯caski细胞 细胞增殖 细胞凋亡 KI-67抗原 肿瘤抑制蛋白质P53

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二甲双胍通过激活腺苷酸活化蛋白激酶/p53轴介导的线粒体功能诱导肿瘤细胞凋亡

13

作者 胡晓乐 束媛媛 付瑛 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期2287-2291,共5页

目的:探讨二甲双胍(2型糖尿病的一线治疗药物)干预宫颈癌的疗效。方法:体外培养Caski细胞,不同浓度二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预Caski细胞,设立对照(CON)组,二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预组。分别采用细胞... 目的:探讨二甲双胍(2型糖尿病的一线治疗药物)干预宫颈癌的疗效。方法:体外培养Caski细胞,不同浓度二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预Caski细胞,设立对照(CON)组,二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预组。分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、克隆形成实验、流式细胞术、DCFH-DA探针检测二甲双胍对Caski细胞增殖、凋亡、ROS产生的影响。应用蛋白质印迹法(Western blot)检测线粒体功能障碍的特异性蛋白以及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/p53途径表达。结果:细胞学实验结果显示,CON组和二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预组的A450值分别为0.98±0.10、0.85±0.10、0.58±0.08、0.46±0.04、0.38±0.03,组间差异有统计学意义(F=42.36,P<0.01);CON组和二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预组的细胞凋亡率依次为(3.85±0.35)%、(8.55±0.62)%、(12.50±1.02)%、(20.56±2.36)%、(25.76±2.45)%,组间差异有统计学意义(F=56.74,P<0.01);CON组B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)/B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)(1.00±0.05),细胞色素C(Cyt C)(1.00±0.04),裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)(1.00±0.03),Cyto Cyt C(1.00±0.03)和Mito Cyt C(1.00±0.05)浓度,与二甲双胍(2.5、5.0、10.0、20.0 nmol/L)干预组比较(2.5 nmol/L组:bax/bcl-2:1.95±0.09,Cyt C:1.45±0.06,cleaved Caspase-3:1.65±0.05,Cyto Cyt C:1.46±0.06,Mito Cyt C:0.72±0.04;5.0 nmol/L组:bax/bcl-2:3.26±0.25,Cyt C:1.86±0.18,cleaved Caspase-3:1.92±0.24,Cyto Cyt C:1.84±0.21,Mito Cyt C:0.65±0.03;10.0 nmol/L组:bax/bcl-2:4.14±0.28,Cyt C:2.25±0.25,cleaved Caspase-3:2.38±0.28,Cyto Cyt C:2.26±0.25,Mito Cyt C:0.53±0.03;20.0 nmol/L组:bax/bcl-2:6.18±0.36,Cyt C:3.65±0.42,cleaved Caspase-3:3.42±0.36,Cyto Cyt C:2.98±0.32,Mito Cyt C:0.42±0.02),组间差异有统计学意义(P<0.05);与CON组比较[磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK:1.00±0.06,p-p53/p53:1.00±0.05],二甲双胍治疗后p-AMPK/AMPK(2.5 nmol/L组:1.65±0.12;5.0 nmol/L组 展开更多

关键词 宫颈癌 caski细胞 线粒体功能障碍 腺苷酸活化蛋白激酶/p53

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过表达β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT)促进人宫颈癌Caski细胞的增殖和迁移 被引量：4

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作者 姜亚运 王婷 +4 位作者 王晋蜀 夏菁 苟理尧 刘梦瑶 张彦 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1499-1502,共4页

目的探讨β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT)的高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖和迁移的影响。方法含ICAT基因腺病毒(Ad ICAT)感染Caski细胞,采用实时定量PCR检测ICAT mRNA水平,Western blot法检测ICAT蛋白水平;MTT法检测各组细胞增殖能力... 目的探讨β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT)的高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖和迁移的影响。方法含ICAT基因腺病毒(Ad ICAT)感染Caski细胞,采用实时定量PCR检测ICAT mRNA水平,Western blot法检测ICAT蛋白水平;MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,TranswellTM小室迁移实验检测细胞迁移能力。结果 Ad ICAT感染后,Caski细胞的ICAT mRNA和蛋白水平均显著增加;过表达ICAT后,促进Caski细胞的增殖,S期细胞比例明显增加,细胞迁移能力增强。结论 Caski细胞过表达ICAT后,促进其增殖和迁移。 展开更多

关键词 caski细胞 β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT) 增殖 迁移 细胞周期

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维生素C诱导人宫颈癌Caski细胞凋亡及其分子机制的研究 被引量：4

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作者 杨建林 韩钰 +1 位作者 周永芹 张伟 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期143-147,共5页

为了研究维生素C对人宫颈癌Caski细胞体外抑制、诱导凋亡的作用及其分子机制,使用不同剂量维生素C处理人宫颈癌Caski细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测Cas-ki细胞周期变化;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DN... 为了研究维生素C对人宫颈癌Caski细胞体外抑制、诱导凋亡的作用及其分子机制,使用不同剂量维生素C处理人宫颈癌Caski细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测Cas-ki细胞周期变化;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder现象;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和E6的表达以及Caspase 3的激活;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变.分析发现,维生素C可显著抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,呈现明显的时间和剂量依赖性;将细胞阻滞于S期;诱导细胞凋亡,下调Bcl-2和E6、上调Bax蛋白表达,促进Caspase3活化,降低线粒体膜电位.表明维生素C在体外可有效抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,诱导细胞凋亡. 展开更多

关键词 维生素C caski细胞 凋亡机制

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南赤瓟醇提物对裸鼠宫颈癌Caski移植瘤的抑制作用 被引量：3

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作者 王爱玲 王海燕 +5 位作者 覃慧林 冯天艳 贺海波 杨小姣 邓为 汪鋆植 《三峡大学学报（自然科学版）》 CAS 2015年第3期108-112,共5页

探讨了南赤瓟醇提物对裸鼠宫颈癌Caski移植瘤的抑制作用,并在此基础上探寻其可能的机制.将0.3mL Caski(4×107个/mL)细胞悬液接种于裸鼠右侧后腿背部皮下,接种2次,间隔时间1周,建立裸鼠宫颈癌Caski移植瘤模型.将移植瘤裸鼠随机分为... 探讨了南赤瓟醇提物对裸鼠宫颈癌Caski移植瘤的抑制作用,并在此基础上探寻其可能的机制.将0.3mL Caski(4×107个/mL)细胞悬液接种于裸鼠右侧后腿背部皮下,接种2次,间隔时间1周,建立裸鼠宫颈癌Caski移植瘤模型.将移植瘤裸鼠随机分为模型组、南赤瓟醇提物组(200和400mg/kg)组,每组5只,每天给药1次,连续给药4周,停药次日处死裸鼠,测量裸鼠体重、移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率;光镜下观察移植瘤组织形态学变化;Annexin V-FITC/PI染色测定细胞凋亡率,荧光定量PCR测定Bcl-2、Bax和Caspase-3、Caspase-9mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax比值.结果表明南赤瓟醇提物可显著降低移植瘤体积和抑瘤率,上调Bax和Caspase-3、Caspase-9mRNA表达,下调Bcl-2mRNA表达和Bcl-2与Bax比值,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05或P<0.01).南赤瓟醇提取物对人宫颈癌Caski细胞移植瘤生长具有明显抑制作用,其作用机制与调节Bcl-2、Bax和Caspase-3、Caspase-9基因表达有关. 展开更多

关键词 南赤瓟醇提物 caski细胞 裸鼠 移植瘤 凋亡

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HPV16E6真核表达载体的构建及其在CaSki细胞中的表达及定位 被引量：2

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作者 王青元 周颖 +4 位作者 杨霞 李兵 陶峰 朱圆圆 凌斌 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2011年第31期4904-4906,共3页

目的:构建pEGFP-C2-HPV16E6真核表达载体,转染CaSki细胞,检测其在CaSki细胞中的表达。方法:用RT-PCR法从CaSki细胞中扩增出带有HindⅢ、XbaⅠ酶切位点的HPV16E6基因片段,将HPV16E6基因全长片段克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核... 目的:构建pEGFP-C2-HPV16E6真核表达载体,转染CaSki细胞,检测其在CaSki细胞中的表达。方法:用RT-PCR法从CaSki细胞中扩增出带有HindⅢ、XbaⅠ酶切位点的HPV16E6基因片段,将HPV16E6基因全长片段克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核表达载体pEGFP-C2上,通过脂质体将pEGFP-C2-HPV16E6转染入CaSki细胞。结果:pEGFP-C2-HPV16E6真核表达载体构建成功,转染CaSki细胞48h后经RT-PCR及Western-blot检测可见HPV16E6蛋白的高表达,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白主要在CaSki细胞核内表达。结论:成功构建了pEGFP-C2-HPV16E6真核表达载体,为进一步对HPV16E6的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 caski细胞 HPV16E6 真核表达载体

原文传递

胡桃醌对宫颈癌caski细胞的细胞毒作用的研究 被引量：3

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作者 吴亚猛 张琳娜 +3 位作者 陈思瑶 韩景春 那文婷 张巍 《吉林医药学院学报》 2014年第3期176-178,共3页

目的探讨胡桃醌对宫颈癌caski细胞增殖的影响。方法将宫颈癌caski细胞传代培养至对数生长期,分组加入不同浓度的胡桃醌,并设空白对照组,用MTT比色法观察胡桃醌对体外培养的宫颈癌caski细胞生长的抑制作用,光学显微镜观察细胞形态学变化... 目的探讨胡桃醌对宫颈癌caski细胞增殖的影响。方法将宫颈癌caski细胞传代培养至对数生长期,分组加入不同浓度的胡桃醌,并设空白对照组,用MTT比色法观察胡桃醌对体外培养的宫颈癌caski细胞生长的抑制作用,光学显微镜观察细胞形态学变化。结果 MTT比色法测定显示,胡桃醌作用于宫颈癌caski细胞后可以抑制其增殖且呈剂量依赖性。结论胡桃醌能抑制体外培养的宫颈癌caski细胞的增殖。 展开更多

关键词 胡桃醌 caski细胞 增殖

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大鼠CB1基因真核表达载体的构建及其对CaSki细胞凋亡的影响 被引量：2

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作者 严磊 李晶 +3 位作者 赵婷婷 王会娟 王蕾 赖国旗 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期153-158,共6页

目的构建大鼠CB1(r CB1)基因真核表达载体,检测r CB1基因在细胞中的表达,研究r CB1对人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的影响。方法从大鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增r CB1基因,通过酶切、纯化、连接PCR纯化产物与p CDNA 3.1(+)质粒,构建pc DNA... 目的构建大鼠CB1(r CB1)基因真核表达载体,检测r CB1基因在细胞中的表达,研究r CB1对人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡的影响。方法从大鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增r CB1基因,通过酶切、纯化、连接PCR纯化产物与p CDNA 3.1(+)质粒,构建pc DNA3.1(+)-r CB1。脂质体法将其转染到HEK293和Ca Ski细胞,Western blot及细胞免疫荧光联合激光扫描共聚焦方法检测r CB1的表达及定位,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot与实时荧光定量PCR检测r CB1、Bcl-2、Bax、Bad表达。结果酶切重组质粒获得5300 bp的载体片段和1500 bp的目的片段,测序结果和r CB1基因序列(NM_012784.4)一致。转染HEK293细胞后,r CB1在HEK293细胞细胞膜和细胞质表达。转染Ca Ski细胞后,r CB1使细胞凋亡率增加(P<0.05);r CB1基因上调Bax、Bad的表达,同时抑制Bcl-2的表达,与空白组比较,其差异具有显著性(P<0.05)。结论成功构建了pc DNA3.1(+)-r CB1真核表达载体,r CB1表达于细胞膜和细胞质,r CB1可以明显促进宫颈癌Ca Ski细胞凋亡,其机制是上调Bax、Bad和抑制Bcl-2表达。 展开更多

关键词 CB1基因 HEK293细胞 caski细胞 细胞凋亡 rCB1

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转染HPV16E6基因人树突状细胞疫苗的制备及生物学特性 被引量：2

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作者 任会均 张锦堃 +2 位作者 陈东晓 李军 魏锡云 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1032-1035,1040,共5页

目的制备来源于人外周血并转染HPV16E6基因的树突状细胞(DC)疫苗,检测其细胞形态、分子表型及诱导的免疫效应。方法细胞因子扩增人外周血DC,Lipofectamine转染HPV16E6制备DC疫苗。动态形态学观察,免疫细胞化学及流式细胞术检测分子表达... 目的制备来源于人外周血并转染HPV16E6基因的树突状细胞(DC)疫苗,检测其细胞形态、分子表型及诱导的免疫效应。方法细胞因子扩增人外周血DC,Lipofectamine转染HPV16E6制备DC疫苗。动态形态学观察,免疫细胞化学及流式细胞术检测分子表达,体外诱导并测定CTL活性。结果转染DC呈形态迥异的多突起状,其E6蛋白、CD80、CD86和CD83分子的表达率依次为47.3%、82.5%、79.8%和85.7%,诱导杀伤Caski细胞的活性明显高于对照组(P<0.01)。结论转染DC疫苗保持了功能成熟DC的形态特征,且内源性表达E6蛋白,能诱导高效的特异性抗肿瘤免疫应答。 展开更多

关键词 树突状细胞 E6基因 基因转染 脂质体 caski细胞

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